本发明涉及一种以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基的亲和层析介质，属于生物化工领域中的蛋白层析分离技术。
背景技术：
抗体能与相应抗原特异性结合，产生各种免疫效应。随着生物技术的迅猛发展和抗体工程技术不断突破，单克隆抗体、多克隆抗体以及基因工程抗体已经广泛应用于生物学和医学领域。抗体用途主要包括疾病治疗、体外诊断和检测、肿瘤定位显像以及作为亲和配基用于分离纯化等。
抗体产品往往纯度要求较高，同时还必须保持生物活性，因此传统的分离过程往往难以满足要求。蛋白a或蛋白g亲和层析介质能够特异性结合抗体，但蛋白类亲和配基易被料液中蛋白酶降解脱落，污染产品，且重复使用次数低，介质价格昂贵，操作成本极高，限制了其大规模应用。而传统的离子交换层析和疏水相互作用层析等方法虽然能够结合抗体，但是特异性和选择性较差，分离步骤多，纯化效果有限。因此，开发具有抗体选择性的非蛋白类配基成为研究热点。
技术实现要素：
针对上述不足之处，本发明的目的在于提供一种以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基的亲和层析介质。
一种以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基的亲和层析介质，其中，包括层析基质和配基，所述的层析基质为大孔β-环糊精微球，配基为经一缩二乙二醇双缩水甘油醚活化后偶联的4-嘧啶基-2-苯胺。
优选的是，所述的以氨基苯并咪唑为功能配基的层析介质，其中，所述的层析介质的配基密度为30-160μmol/ml。
优选的是，所述的以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基的亲和层析介质的制备方法，其中，包括如下步骤：
1)将层析基质抽干后，加入0.5-2倍层析基质质量的体积百分比为30％的二甲基亚砜、0.8-1.6倍层析基质质量的一缩二乙二醇双缩水甘油醚和0.1-1倍层析基质质量的氢氧化钠，40℃下200rpm摇床中活化5-10小时，抽滤，用去离子水洗涤得到环氧活化层析基质；
2)将环氧活化层析基质和0.4-0.8倍层析基质质量的4-嘧啶基-2-苯胺以及0.5-1m碳酸钠缓冲液混合，50℃下200rpm摇床中反应8-24小时，反应结束后，用去离子水洗涤得到4-嘧啶基-2-苯胺偶联后的介质。
4、如权利要求3所述的以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基的亲和层析介质的制备方法，其特征在于，所述一缩二乙二醇双缩水甘油醚与层析基质的质量比为0.8-1.6:1。
优选的是，所述的以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基的亲和层析介质的制备方法，其中，所述碳酸钠缓冲液的ph为11-13。
本发明的有益效果是：
(1)抗体吸附容量大，饱和吸附容量可达150mg/ml湿介质，处理能力强；
(2)洗脱方便，4-嘧啶基-2-苯胺配基的pka为4.6，通过调节溶液ph至5附近就可实现完全洗脱，避免过酸、过碱或高盐等对蛋白结构产生不良影响或活性损失；
(3)配基密度高，电荷诱导效应强，通过配基上的伯氨基位点偶联配基，偶联效率高，且该氨基位点也可质子化，可提供辅助的静电排斥作用；
(4)介质性质稳定，采用一缩二乙二醇双缩水甘油醚活化并偶联配基，所得介质的配基稳定，清洗再生方便；
(5)本发明所研制的新型层析介质，以4-嘧啶基-2-苯胺为功能配基，具有显著的疏水性电荷诱导层析分离特点，对抗体具有很高的吸附能力，可以用于抗体的规模化制备。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
实施例1
取抽干大孔β-环糊精微球10g，加入5g的体积百分比为30％的二甲基亚砜、8g的一缩二乙二醇双缩水甘油醚和1g的氢氧化钠，40℃下200rpm摇床中活化6小时，抽滤，用去离子水洗涤得到环氧活化层析基质；将环氧活化层析基质和5g的4-嘧啶基-2-苯胺以及0.6m碳酸钠缓冲液混合，碳酸钠缓冲液的ph为12，50℃下200rpm摇床中反应10小时，反应结束后，用去离子水洗涤得到4-嘧啶基-2-苯胺偶联后的介质，层析介质的配基密度为60μmol/ml。
实施例2
取抽干大孔β-环糊精微球10g，加入8g的体积百分比为30％的二甲基亚砜、10g的一缩二乙二醇双缩水甘油醚和3g的氢氧化钠，40℃下200rpm摇床中活化7小时，抽滤，用去离子水洗涤得到环氧活化层析基质；将环氧活化层析基质和7g的4-嘧啶基-2-苯胺以及0.6m碳酸钠缓冲液混合，碳酸钠缓冲液的ph为12，50℃下200rpm摇床中反应12小时，反应结束后，用去离子水洗涤得到4-嘧啶基-2-苯胺偶联后的介质，层析介质的配基密度为100μmol/ml。
实施例3
取抽干大孔β-环糊精微球10g，加入10g的体积百分比为30％的二甲基亚砜、12g的一缩二乙二醇双缩水甘油醚和6g的氢氧化钠，40℃下200rpm摇床中活化10小时，抽滤，用去离子水洗涤得到环氧活化层析基质；将环氧活化层析基质和8g的4-嘧啶基-2-苯胺以及0.6m碳酸钠缓冲液混合，碳酸钠缓冲液的ph为12，50℃下200rpm摇床中反应20小时，反应结束后，用去离子水洗涤得到4-嘧啶基-2-苯胺偶联后的介质，层析介质的配基密度为120μmol/ml。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。