专利名称：揭示传染性海棉状脑病-tse辅助致病因子的实验与方法
技术领域：
本发明涉及了一种揭示揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法。它涉及生命科学领域、及医药领域。
背景技术：
传染性海棉状脑病-TSE是一类可以侵袭多种不同物种动物及人类中枢神经系统的退行性脑病，潜伏期长，具有100％致死率，并可在不同物种哺乳动物间传播。自1730年首次报道羊瘙痒病以来，目前已经在20多种哺乳动物动物及人类中发现了自然发生或感染的TSE，其中包括人类的克-雅氏病-CJD、羊瘙痒病-Scrapie、疯牛病-BSE等。动物及人类传染性海棉状脑病-TSE典型病理学改变表现为，造成动物中枢神经系统脑组织出现海棉状空泡变性，蛋白淀粉样沉积、神经元丢失与反应性胶质增生。自美国科学家Prusiner在1992年，把能够引发动物传染性海棉状脑病-TSE仅对被感染动物中枢神经系统造成严重病理损伤、对外周神经系统及其它器官也有一定损伤的致病传染因子确定为，一种不含核酸、具有自我复制能力的感染性蛋白颗粒——PrPSc-朊病毒以后，现代科学对传染性海棉状脑病-TSE进行了大量的相关科学研究。已经揭示了传染性海棉状脑病-TSE的致病传染因子，是由一种在人的细胞中和许多种哺乳动物的细胞中都存在的PrP基因正常表达的，蛋白分子三维空间构象含有40％α-螺旋没有β折叠的正常PrP朊蛋白——PrPc所转化出的，蛋白分子三维空间构象含有43％β-折叠的不正常PrP朊蛋白感染性蛋白颗粒——PrPSc朊病毒蛋白；因而使其获得了能够与细胞所表达的，蛋白分子三维空间构象含有40％α-螺旋没有β折叠的正常PrP朊蛋白——PrPc相结合，再将PrPc复制为蛋白分子三维空间构象含有43％β-折叠的不正常PrP朊蛋白感染性蛋白颗粒——PrPSc朊病毒蛋白，造成动物中枢神经系统脑细胞组织出现海棉状空泡变性，蛋白淀粉样沉积、神经元丢失与反应性胶质增生的，超出了现代生命科学的传统认识思维的朊病毒蛋白也能够具有自我复制性、传染性、致病性的特殊生物生命性质。但是现代生命科学对感染性蛋白颗粒——PrPSc-朊病毒的致病机制、与相关辅助致病因子、及辅助致病因子的致病机制等许多相关细节问题仍然没有搞清楚。
因而现代生命科学必须在针对传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤感染动物中枢神经系统的综合致病机制中所必不可少的各种相关辅助致病因子、与相关辅助致病因子的综合致病机制的综合基础科学研究方面，及科学认识思维、科学方法取得具有开拓创新重大科学突破；需要从认识揭示传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物及人的中枢神经系统综合致病机制中所必不可少的各种相关辅助致病因子、及相关辅助致病因子的致病机制细节问题入手，进行系统的、深入细致的综合生命科学研究，并取得科学突破，才能够在PrPSc-朊病毒严重损伤动物及人的中枢神经系统的综合致病机制的科学研究方面，取得科学突破。使现代生命科学未来能够通过认识揭示PrPSc-朊病毒需要与某些必不可少的相关辅助致病因子协同、才能严重损伤动物及人的中枢神经系统的综合分子致病机制，及它们的分子生物调控靶位，而寻找出可以有效抑制PrPSc-朊病毒严重损伤中枢神经系统所必不可少的、相关辅助致病因子的分子生物损伤致病机制，进而才会寻找出可以有效抑制传染性海棉状脑病-TSE的治疗方法、及药物！
发明内容
本发明公开了一种揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法通过建立由TSE致病传染因子——PrPSc所造成的，严重损伤脑中枢神经组织、及脑中枢神经元细胞的TSE模型，一定程度损伤脊髓中枢神经组织、及脊髓中枢神经元细胞的TSE模型，与仅轻微损伤或不损伤外周神经组织、及某些种神经元细胞和某些种非神经细胞的对比NTSE模型；由增、减辅助致病因子的外加条件所造成的，能够增强PrPSc损伤缺乏辅助致病因子的神经元细胞和非神经细胞的TSE模型、减轻PrPSc损伤中枢神经元细胞的NTSE模型，与它们相应的那些缺乏辅助致病因子的神经元细胞和非神经细胞、仅会受到PrPSc轻微损伤或不会受到损伤的对比NTSE模型；并制作能够清楚显示表达那些模型的组织形态学、细胞形态学、亚分子形态学的变化与改变，可以通过计算机成象系统显示出它们的高清晰立体成象的，高质量的连续断层切片电镜标本。揭示传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物及人的中枢神经系统综合致病机制中所必不可少的某些种相关辅助致病因子、及相关辅助致病因子的致病机制。
本发明的目的是，提供一种揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法。通过系统的建立由TSE致病传染因子——PrPSc所造成的，严重损伤脑中枢神经组织、及脑中枢神经元细胞的TSE模型，一定程度损伤脊髓中枢神经组织、及脊髓中枢神经元细胞的TSE模型，与仅轻微损伤或不损伤缺乏辅助致病因子的外周神经组织、及某些种神经元细胞和某些种非神经细胞的对比NTSE模型；由增、减辅助致病因子的外加条件所造成的，能够增强PrPSc损伤缺乏辅助致病因子的神经元细胞和非神经细胞的TSE模型、减轻PrPSc损伤中枢神经元细胞的NTSE模型，与它们相应的那些缺乏辅助致病因子的神经元细胞和非神经细胞、仅会受到PrPSc轻微损伤或不会受到损伤的对比NTSE模型；并制作能够清楚显示表达那些模型的组织形态学、细胞形态学、亚分子形态学的变化与改变，可以通过计算机成象系统显示出它们的高清晰二维、三维图象的，高质量的连续断层切片电镜标本。系统的对比分析由TSE致病传染因子——PrPSc所造成的，那些TSE模型标本与对比NTSE模型标本的组织形态学、细胞组织形态学发生的变化与改变的不同；对比分析由增添含有辅助致病因子外加条件所造成的那些增强PrPSc损伤的TSE模型标本，与它们相应的那些缺乏辅助致病因子仅会受到PrPSc轻微损伤或不会受到损伤的对比NTSE模型标本的，组织形态学、细胞组织形态学发生的变化与改变的不同。而能够揭示出传染性海棉状脑病(TSE)致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物及人的中枢神经系统综合致病机制，与综合致病机制中所必不可少的某些种相关辅助致病因子，及相关辅助致病因子的致病机制。使现代生命科学未来能够通过认识揭示PrPSc-朊病毒需要与某些必不可少的相关辅助致病因子协同，才能严重损伤动物及人的中枢神经系统的综合分子致病机制，及它们的分子生物调控靶位，而寻找出可以有效抑制PrPSc-朊病毒严重损伤中枢神经系统所必不可少的、相关辅助致病因子的分子生物损伤致病机制，进而才会寻找出可以有效抑制传染性海棉状脑病(TSE)的治疗方法、及药物！具体实施方式
为达到上述目的，实施本发明采用的方案准备传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子—PrPSc。
PrPSc可取自于自然中存在的羊瘙痒病-Scrapie发病动物、疯牛病-BSE发病动物、人克-雅氏病-CJD病人的TSE病变脑组织，可将其制作小块或均匀浆或提取的PrPSc。
但是，最好还是要采用基因重组具有复制生物活性的PrPSc，因为脑组织中存在PrPSc辅助致病因子可能会对以下的TSE实验造成干扰。可以通过克隆羊瘙痒病-Scrapie、人克-雅氏病-CJD、疯牛病-BSE的PrP表达基因，在原核或真核表达系统表达生产基因重组的羊、人、牛的，三维空间构象正常的PrP朊蛋白——PrPc。应用液相色谱法-HIC、IEC、SEC、AFC对表达系统表达生产的基因重组的蛋白及羊、人、牛的PrP朊蛋PrPc，实施复性提纯、及改变它的蛋白分子三维空间构象，获得由人工改变出含有β-折叠三维构象的基因重组的PrPSc。自1994年就有人首先利用AFC法，对基因重组的人朊病毒-rhPrion实施成功的复性——1.Sinha D，Bakhshi M，Vora R。Bio Techniques，1994，17509～514——2.Zahn R，Von Schroetter C，Wuthrich K。FEBS Lett，1997，417(3)400～404。“如果疏水色谱固定相给变性蛋白提供过高的能量，变性蛋白可能折叠成某些自然中不存在，但构象稳定的折叠中间体——摘自于耿信笃，白泉用疏水色谱复性并同时纯化蛋白质的机理及其应用；中国科学B辑，2002年10月等32卷第5期”。相关于能够将原核或真核表达系统表达生产的基因重组蛋白实施复性提纯的细节问题、与具体的科学方法，可向疏水色谱法HIC的发明人耿信笃等人直接请教、联系。电话86-029-8303817，8302808；传真86-029-8303817E-ailxdgeng@nwu.edu.cn。系统的建立由TSE致病传染因子——PrPSc所造成的，严重损伤脑中枢神经组织、及脑中枢神经元细胞的TSE模型，一定程度损伤脊髓中枢神经组织、及脊髓中枢神经元细胞的TSE模型，与仅轻微损伤或不损伤缺乏辅助致病因子的外周神经组织、及某些种神经元细胞和某些种非神经细胞的对比NTSE模型；由增、减辅助致病因子的外加条件所造成的，能够增强PrPSc损伤缺乏辅助致病因子的神经元细胞和非神经细胞的TSE模型、减轻PrPSc损伤中枢神经元细胞的NTSE模型，与它们相应的那些缺乏辅助致病因子的神经元细胞和非神经细胞、仅会受到PrPSc轻微损伤或不会受到损伤的对比NTSE模型；并制作能够清楚显示表达那些模型的组织形态学、细胞形态学、亚分子形态学的变化与改变，可以通过计算机成象系统显示出它们的高清晰二维、三维图象的，高质量的连续断层切片电镜标本。
创造培养神经元细胞TSE、NTSE的对比模型及形态学标本实验1应用胚胎发育12～15周的绵羊胚胎，分别取出羊胚胎的脑灰质组织、脊髓灰质组织、颈上神经结。按照常规分离神经元方法，分别分离3种不同神经组织的各自的神经元细胞。应用含有25％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法，分别培养3种不同的神经元细胞。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，接种在分别培养3种神经元细胞的各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1种培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的3种神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。
应用胚胎发育15～18天大鼠胚胎，分别取出鼠胚胎的脑灰质组织、脊髓灰质组织、颈上神经结。按照常规分离神经元方法，分别分离3种不同神经组织的各自的神经元细胞。应用含有25％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法，分别培养3种不同的神经元细胞。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，接种在分别培养3种神经元细胞的各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1种培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的3种神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。
应用胚胎发育20～24周的人胚胎，分别取出入胚胎的脑灰质组织、脊髓灰质组织、颈上神经结。按照常规分离神经元方法，分别分离3种不同神经组织的各自的神经元细胞。应用含有20％胎牛血清、10％人AB型血清的EagleMEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法，分别培养3种不同的人胚胎神经元细胞。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，接种在分别培养3种神经元细胞的各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1种培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的3种神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。
制作可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达培养神经元细胞标本的细胞形态、亚分子形态的高质量的透射电镜切片标本的方法把终止培养的神经元细胞用0.1mol/L PBS液漂洗2次；置于2％多聚甲醛、0.5％戊二醛、0.2％苦味酸、0.1mol/L磷酸缓冲液的4℃固定液中固定浸泡1～3h后，用PBS液漂洗5次，每次20mim；把贴壁细胞刮下，置于2％明胶液悬浮，4000g离心，使其成为细胞团块；置于2.3/mol/L蔗糖溶液中，进行防冰晶保护处理；置于液氮中冷冻后，在超薄切片机上做60～80nm切片，载于铜网上；用适当稀释的、由10nm胶体金标记的PrPc一抗，与用适当稀释的、由20nm胶体金标记的PrPSc二抗，分别进行免疫染色；再用1％从醋酸铀复染5～10mim；于室温或灯下干燥，表面可覆盖一层甲基纤维素膜。对培养神经元细胞标本做30000倍放大透射电镜图像，储存在计算机中。
利用上述那些能够清楚显示表达由相同培养液培养的绵羊胚胎、大鼠胚胎、人胚胎的，被PrPSc感染损伤的脑灰质组织神经元细胞、脊髓灰质组织神经元细胞、颈上神经结神经元细胞，所表达具有的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中的表达存在形态的，各种TSE培养神经元细胞模型标本的高质量的透射电镜图像；分别做1种动物胚胎的、3种不同的培养神经元细胞TSE模型标本图像对比分析，做3种不同动物胚胎的、3种相同培养神经元细胞TSE模型标本图像对比分析，就可以显示揭示3种不同动物胚胎的脑中枢神经元培养细胞被PrPSc感染以后，都会表达具有相似的较严重的TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；3种不同动物胚胎的脊髓中枢神经元培养细胞被PrPSc感染以后，都会表达具有相似的一定程度TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；3种不同动物胚胎的外神经结神经元培养细胞被PrPSc感染以后，都会表达具有相似的轻微TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；绵羊胚胎的3种不同的培养神经元细胞被PrPSc感染以后，会分别表达出较严重损伤、一定程度损伤、轻微损伤，3种不同的TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有不同的表达存在形态；大鼠胚胎的3种不同的培养神经元细胞被PrPSc感染以后，会分别表达出较严重损伤、一定程度损伤、轻微损伤，3种不同的TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有不同的表达存在形态；人胚胎的3种不同的培养神经元细胞被PrPSc感染以后，会分别表达出较严重损伤、一定程度损伤、轻微损伤，3种不同的TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有不同的表达存在形态。能够创造出一个，显示揭示传染性海棉状脑病(TSE)致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物脑中枢神经系统、与脑中枢神经元细胞，一定程度损伤动物脊髓中枢神经系统、与脊髓中枢神经元细胞，仅轻微损伤动物外神经结组织、与外神经结组织神经元细胞，具有不同的综合致病机制的；多种不同神经组织神经元培养细胞TSE模型综合科学实验平台。能够为进一步证实传染性海棉状脑病(TSE)致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物脑中枢神经系统、与脑中枢神经元细胞，一定程度损伤动物脊髓中枢神经系统、与脊髓中枢神经元细胞，仅轻微损伤动物实验大鼠外神经结组织、与外神经结组织神经元细胞，具有不同的综合致病机制；是由于在脑中枢神经元细胞中、表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种辅助致病因子，在脊髓中枢神经元细胞中、不表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种辅助致病因子，外神经结神经元细胞中、不表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种必不可少的关键辅助致病因子，而提供相关科学依据。
创造培养神经元细胞TSE、NTSE的对比模型及形态学标本实验2应用胚胎发育12～15周的绵羊胚胎，取颈上神经结，按照分离神经元常规方法分离神经元细胞。分为1、2、3组，1组应用含有25％胎牛血清的EagleMEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；2组应用含有5％离乳小羊或小牛脑脊液与20％胎牛血清的EagleMEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；3组应用含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，分别接种在1、2、3组应用不同培养液培养的神经元细胞各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1组培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的1、2、3组神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液的培养基的制取方法取110g离乳小羊或小牛脑组织在低于4℃的条件下，细细研磨制作成过200目的脑组织均匀浆，与1L配制好的Eagle MEM培养基混合，摇动5～10分钟充分混合后，离心取上清液，再补加20％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L。
应用胚胎发育15～18天大鼠胚胎，取颈上神经结，按照分离神经元常规方法分离神经元细胞。分为1、2、3组，1组应用含有25％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；2组应用含有5％离乳小羊或小牛脑脊液与20％胎牛血清的EagleMEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；3组应用含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液与10~20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，分别接种在1、2、3组应用不同培养液培养的神经元细胞各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1组培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的1、2、3组神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液的培养基的制取方法取110g离乳小羊或小牛脑组织在低于4℃的条件下，细细研磨制作成过200目的脑组织均匀浆，与1L配制好的Eagle MEM培养基混合，摇动5～10分钟充分混合后，离心取上清液，再补加20％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L。
应用胚胎发育20～24周的人胚胎，取出颈上神经结，按照分离神经元常规方法分离神经元细胞。分为1、2、3组，1组应用含有20％胎牛血清、5％人AB型血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000~40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；2组应用含有5％离乳小羊或小牛脑脊液、5％人AB型血清、与15％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；3组应用含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液、5％人AB型血清、与15％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，分别接种在1、2、3组应用不同培养液培养的神经元细胞各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1组培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的1、2、3组神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液的培养基的制取方法取110g离乳小羊或小牛脑组织在低于4℃的条件下，细细研磨制作成过200目的脑组织均匀浆，与1L配制好的EagleMEM培养基混合，摇动5～10分钟充分混合后，离心取上清液，再补加5％人AB型血清、15％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol。
制作高质量的透射电镜切片标本的方法同实验1。
利用上述那些能够清楚显示表达由3种不同培养液分别培养的绵羊胚胎、大鼠胚胎、人胚胎的，被PrPSc感染损伤的颈上神经结神经元细胞，所表达具有的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中的表达存在形态的，各种TSE培养神经元细胞模型标本的高质量的透射电镜图像分别做由3种不同培养液分别培养1种动物胚胎的外神经元细胞的、3种培养外神经元细胞TSE模型标本图像对比分析，做由1种相同培养液培养3种不同动物胚胎的相同外神经元细胞的、3种培养外神经元细胞TSE模型标本图像对比分析，就可以显示揭示由普通培养液培养的，3种不同动物胚胎的相同外神经元细胞被PrPSc感染以后，3种不同动物的外神经元培养细胞都会表达具有相似的，仅受到轻微TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由含有脑脊液的培养液培养的，3种不同动物胚胎的相同外神经元细胞被PrPSc感染以后，3种不同动物的外神经元培养细胞都会表达具有相似的，受到一定程度TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由含有脑组织提取液的培养液培养的，3种不同动物胚胎的相同外神经元细胞被PrPSc感染以后，3种不同动物的外神经元培养细胞都会表达具有相似的，受到较严重TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由3种不同培养液分别培养1种动物胚胎的外神经元细胞被PrPSc感染以后，那种动物的外神经元培养细胞会分别表达出仅受到轻微损伤、一定程度损伤、较严重损伤，3种不同的TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有3种不同的表达存在形态。表明动物的外神经结细胞组织、及神经元细胞，由于缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种必不可少的关键辅助致病因子，而仅会受到TSE致病传染因子——PrPSc的轻微损伤；动物的脑中枢细胞组织、及神经元细胞，由于能够表达分泌PrPSc综合致病机制必不可少的所有辅助致病因子，而会受到TSE致病传染因子——PrPSc的严重损伤；动物的脊髓中枢细胞组织、及神经元细胞，由于缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种辅助致病因子，及由于在脑脊液中缺乏由脑中枢细胞组织是以细胞接触分泌表达型式所表达的、PrPSc综合致病机制的某些种辅助致病因子，而会受到TSE致病传染因子——PrPSc的一定程度损伤创。能够造出一个，显示揭示传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物脑中枢神经系统、与脑中枢神经元细胞，一定程度损伤动物脊髓中枢神经系统、与脊髓中枢神经元细胞，仅轻微损伤动物外神经结组织、与外神经结组织神经元细胞，具有不同的综合致病机制的；多种不同神经组织神经元培养细胞TSE模型综合科学实验平台。能够为进一步证实传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子——PrPSc-朊病毒，严重损伤动物脑中枢神经系统、与脑中枢神经元细胞，一定程度损伤动物脊髓中枢神经系统、与脊髓中枢神经元细胞，仅轻微损伤动物实验大鼠外神经结组织、与外神经结组织神经元细胞，具有不同的综合致病机制；是由于在脑中枢神经细胞组织中、表达分泌PrPSc综合致病机制的所有辅助致病因子，在脊髓中枢神经细胞组织中、不表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种辅助致病因子，外神经结神经细胞组织中、不表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种必不可少的关键辅助致病因子，而提供足够充分的科学依据。
创造培养神经元细胞TSE、NTSE的对比模型及形态学标本实验3应用胚胎发育15～18天大鼠胚胎，取颈上神经结，按照分离神经元常规方法分离神经元细胞。分为1、2、3、4、5组，1组应用含有25％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；2组应用含有5％已应用层析技术滤除了大于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑脊液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；3组应用含有5％已应用层析技术滤除了小于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑脊液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；4组应用含有10％已应用层析技术滤除了大于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑组织提取液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；5组应用含有10％已应用层析技术滤除了小于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑组织提取液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，分别接种在1、2、3、4、5组应用不同培养液培养的神经元细胞各自的培养器皿中。培养6～12周，待其中有1组培养的神经元细胞发生培养死亡其数量剩余至30％时，全部停止培养。将培养的1、2、3、4、5组神经元细胞，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。
应用鼠神经瘤细胞-ScN2a。分为1、2、3、4、5组，1组应用含有25％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；2组应用含有5％已应用层析技术滤除了大于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑脊液与20％胎牛血清的EagleMEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；3组应用含有5％已应用层析技术滤除了小于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑脊液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；4组应用含有10％％已应用层析技术滤除了大于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑组织提取液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养；5组应用含有10％已应用层析技术滤除了小于7.4PH范围所有细胞因子的、离乳小羊或小牛脑组织提取液与20％胎牛血清的Eagle MEM培养基补加胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L的培养液，按照30000～40000个/cm2神经元细胞，每周换液2次的常规神经元细胞培养法培养。培养成活后，再把基因重组具有复制生物活性的PrPSc、或动物TSE病变脑组织提取的PrPSc，分别接种在1、2、3、4、5组应用不同培养液培养的鼠神经瘤细胞-ScN2a各自的培养器皿中。培养6～8周，全部停止培养。将培养的1、2、3、4、5组鼠神经瘤细胞-ScN2a，分别制作出可以同时特异区分显示出PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子，在模型标本的细胞中、亚分子细胞器中表达存在形态，能够清楚显示表达标本的细胞形态、亚分子形态的，高质量的透射电镜切片标本。
制作高质量的透射电镜切片标本的方法同实验1。
第2组含有5％离乳小羊或小牛脑脊液的培养基的制取方法取100g离乳小羊或小牛脑脊液与2L配制好的Eagle MEM培养基混合，应用7.4～14PH范围的离子交换树脂层析柱，滤除大于7.4PH范围所有细胞因子；取1L滤后液再补加20％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L。
第3组含有5％离乳小羊或小牛脑脊液的培养基的制取方法取100g离乳小羊或小牛脑脊液与2L配制好的Eagle MEM培养基混合，应用1～7.4PH范围的离子交换树脂层析柱，滤除小于7.4PH范围所有细胞因子；取1L滤后液再补加20％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L。
第4组含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液的培养基的制取方法取200g离乳小羊或小牛脑组织在低于4℃的条件下，细细研磨制作成过200目的脑组织均匀浆，与2L配制好的Eagle MEM培养基混合，摇动5～10分钟充分混合后，离心取上清液；应用7.4～14PH范围的离子交换树脂层析柱，滤除大于7.4PH范围所有细胞因子；取1L滤后液再补加20％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L。
第5组含有10％离乳小羊或小牛脑组织提取液的培养基的制取方法取200g离乳小羊或小牛脑组织在低于4℃的条件下，细细研磨制作成过200目的脑组织均匀浆，与2L配制好的Eagle MEM培养基混合，摇动5～10分钟充分混合后，离心取上清液，应用1～7.4PH范围的离子交换树脂层析柱，滤除小于7.4PH范围所有细胞因子；取1L滤后液再补加20％胎牛血清、胰岛素5ug/ml、转铁蛋白50ug/ml、孕铜20nmol/L、腐胺100umol/L、亚矽酸钠20nmol/L、KCI至30mmol/L、葡萄糖至30mmol/L。
利用上述那些能够清楚显示表达由5种不同培养液分别培养的大鼠胚胎颈上神经结神经元细胞、鼠神经瘤细胞-ScN2a，所表达具有的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在那些培养细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中的表达存在形态的，各种TSE培养细胞模型标本的高质量的透射电镜图像；分别做由5种不同培养液分别培养大鼠胚胎外神经元细胞的、5种培养外神经元细胞TSE模型标本图像对比分析，做由5种不同培养液分别培养鼠神经瘤细胞-ScN2a的、5种鼠神经瘤细胞-ScN2a培养细胞TSE模型标本图像对比分析，就可以显示揭示由第1组普通培养液培养的，大鼠胚胎外神经元细胞、鼠神经瘤细胞-ScN2a被PrPSc感染以后，2种不同动物培养细胞都会表达具有相似的，仅受到轻微TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在2种培养细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由第2组含有小于7.4PH细胞因子的脑脊液的培养液培养的，2种不同动物培养细胞被PrPSc感染以后，2种不同动物的培养细胞都会表达具有相似的，比第1组培养细胞受到更大程度TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在2种培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由第3组含有大于7.4PH细胞因子的脑脊液的培养液培养的，2种不同动物培养细胞被PrPSc感染以后，2种不同动物的培养细胞都会表达具有相似的，比第1组培养细胞受到更大程度TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在2种培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由第4组含有小于7.4PH细胞因子的脑组织提取液的培养液培养的，2种不同动物的培养细胞都会表达具有相似的，比第1组培养细胞受到更大程度TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在2种培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态；由第5组含有大于7.4PH细胞因子的脑组织提取液的培养液培养的，2种不同动物的培养细胞都会表达具有相似的，比第1组培养细胞受到更大程度TSE病理损伤的细胞形态、亚分子形态，与PrPc蛋白分子和PrPSc蛋白分子在2种培养神经元细胞模型标本的细胞中、亚分子细胞器中具有相似的表达存在形态。表明动物的外神经结神经元细胞、鼠神经瘤细胞-ScN2a，由于缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种必不可少的关键辅助致病因子，而仅会受到TSE致病传染因子——PrPSc的轻微损伤；在小于7.4PH细胞因子的动物脑脊液中至少存在有1种，致病传染因子——PrPSc综合致病机制的辅助致病因子，在大于7.4PH细胞因子的动物脑脊液中至少存在有1种，致病传染因子——PrPSc综合致病机制的辅助致病因子，而且它不同于小于7.4PH细胞因子的动物脑脊液中那种辅助致病因子，即在动物的脑脊液中至少存在有2种不同的致病传染因子——PrPSc综合致病机制的辅助致病因子；在小于7.4PH细胞因子的脑组织提取液中至少存在有1种致病传染因子——PrPSc综合致病机制的辅助致病因子，在大于7.4PH细胞因子的脑组织提取液中至少存在有1种，致病传染因子——PrPSc综合致病机制的辅助致病因子，而且它不同于小于7.4PH细胞因子的动物脑组织提取液中那种辅助致病因子，即在动物的脑组织提取液中至少存在有2种不同的致病传染因子——PrPSc综合致病机制的辅助致病因子。
可以采用与创造培养神经元细胞TSE、NTSE的对比模型及形态学标本实验3相类似科学方法，分别应用普通培养液与含有动物的脑脊液或含有动物脑组织提取液的培养液，分别培养动物的某些种被TSE致病传染因子——PrPSc感染的细胞、或肿瘤细胞系-株，对比分析应用含有动物的脑脊液或含有动物脑组织提取液的培养液那种细胞、或肿瘤细胞系-株，如鼠神经瘤的某种细胞系-株是否会受到TSE致病传染因子——PrPSc更大损伤；即可应用此法选择出动物的某些种细胞由于缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制的某些种必不可少的关键辅助致病因子，而仅会受到TSE致病传染因子——PrPSc的轻微损伤、或不会受到损伤的，那一类缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞、或肿瘤细胞系-株。
可以采用与创造培养神经元细胞TSE、NTSE的对比模型及形态学标本实验3相类似科学方法，应用动物的那一类缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞、或肿瘤细胞系-株，如鼠神经瘤细胞-ScN2a，通过应用含有动物的脑脊液或脑组织提取液中某种提取成分的培养液、与普通培养液分别培养的方法对比分析在动物的脑脊液或脑组织提取液中哪种提取成分，会增加缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞所受到的损伤，即可证实在那种动物的脑脊液或脑组织提取液的提取成分中，含有PrPSc综合致病机制辅助致病因子。例如应用各种不同的层析技术，分别从动物的脑脊液或脑组织提取液中提取出各种不同的成分，分别加入普通培养液中，制作出各种含有不同的成分的脑脊液或脑组织提取液的培养液，分别培养鼠神经瘤细胞-ScN2a，对比分析脑脊液或脑组织提取液中那些种不同的成分，会增加对鼠神经瘤细胞-ScN2a的损伤，在那种动物的脑脊液或脑组织提取液的提取成分中，即含有PrPSc综合致病机制辅助致病因子。可通过不断缩小层析技术的提取范围、结合应用电泳分离技术，即可在含有PrPSc综合致病机制辅助致病因子的脑脊液或脑组织提取液中，提取出PrPSc综合致病机制各种不同的辅助致病因子。而后再克隆出那种辅助致病因子的表达基因——那种辅助致病因子的分子生物调控靶位，将那种辅助致病因子的表达基因，在原核或真核表达系统表达生产基因重组的那种辅助致病因子。而后再应用基因重组的那种辅助致病因子制作出，抗那种辅助致病因子的单克隆抗体；即可应用揭示传染性海棉状脑病-TSE病理机制的实验模型与方法，揭示出那种辅助致病因子的致病机制。
权利要求
1.一种揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于将动物的缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞(1).用传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子PrPSc(3).感染，置于含有动物脑组织液(2).成分的培养液中培养，揭示PrPSc综合致病机制辅助致病因子。
2.根据权利要求1中所述的揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物的缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞(1).是由动物神经组织中分离的神经元细胞。
3.根据权利要求1中所述的揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物的缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞(1).是由动物神经结组织中分离的神经元细胞。
4.根据权利要求1中所述的揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物的缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞(1).是动物神经瘤细胞系-株。
5.根据权利要求1中所述的揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物的缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞(1).是鼠神经瘤细胞系-株。
6.根据权利要求1中所述的揭示传染性海棉状脑病-TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物的缺乏表达分泌PrPSc综合致病机制辅助致病因子的细胞(1).是鼠神经瘤细胞-ScN2a。
7.根据权利要求1至6中所述的揭示传染性海棉状脑病TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子PrPSc(3).是动物TSE病变脑组织。
8.根据权利要求1至6中所述的揭示传染性海棉状脑病TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子PrPSc(3).是由动物TSE病变脑组织中提取的PrPSc。
9.根据权利要求1至6中所述的揭示传染性海棉状脑病TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于传染性海棉状脑病-TSE致病传染因子PrPSc(3).是基因重组PrPSc。
10.根据权利要求1至9中所述的揭示传染性海棉状脑病TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物脑组织液(2).是动物脑脊液。
11.根据权利要求1至9中所述的揭示传染性海棉状脑病TSE辅助致病因子的实验与方法，其特征在于动物脑组织液(2).是动物脑组织提取液。
全文摘要
本发明名称为揭示传染性海棉状脑病－TSE辅助致病因子的实验与方法，涉及生命科学领域及医药领域。提供了一个能够系统的、逐步深入地揭示传染性海棉状脑病－TSE致病因子PrP
文档编号G01N33/569GK1529166SQ0315444
公开日2004年9月15日 申请日期2003年9月29日 优先权日2003年9月29日
发明者叶新新 申请人:叶新新