专利名称：药物在人体中的肝代谢和肝功能的预测方法
技术领域：
本发明涉及准确预测药物在人体中的肝代谢和对肝功能的影响的方法。
背景技术：
被摄入体内的物质通常首先在肝脏进行代谢。特别是药品的开发中，从安全性的角度来看，药物在肝脏进行怎样的代谢以及是否对肝功能产生影响是必需的数据。此外，不仅是药品，为了评价存在于环境中的各种化学物质对人的影响，也必须评价该化学物质对肝功能的影响。
药品开发等过程中，这些被测物质在人的肝脏中的代谢和对肝功能的影响无法通过直接对人给药来进行测定，所以目前使用大鼠、小鼠、兔、狗、黑猩猩等哺乳动物。但是，已知肝脏中的代谢根据动物种类的不同而存在巨大差异，所以很难根据使用除人以外的动物而得到的试验结果来预测在人体中的代谢。
因此，目前开发并使用了采用各种人药物代谢酶表达类微粒体的体系和采用肝细胞的体系等体外测定体系。然而，这些体外测定体系也存在时常由于辅酶的添加和测定体系的差别而出现不同结果等许多问题，目前无法准确地预测人的代谢。
与此同时，作为用于测定体内的被测药物的肝代谢等的动物，报道了在体内具有人肝细胞群体、该肝细胞群体实质上承担动物的肝功能的嵌合体动物(专利文献1和2)。
专利文献1日本专利特开2002-45087号公报专利文献2WO 03/080821 A1发明的揭示然而，前述专利文献1中，没有对嵌合体动物投与被测物质的实施例，对于实际投与被测物质时嵌合体动物会进行怎样的药物代谢并不清楚。此外，也无法预测会引发怎样的症状。实际对前述嵌合体动物投与被测物质后，发现异常地血液凝固等。此外，该嵌合体动物自身的肝功能受到损害，所以肝功能的指标显示出异常值，无法判断投与被测药物时的肝功能指标的变化是否是被测药物对移植的人肝细胞造成的影响。此外，无法判断被测药物投与后的测定值是全部来源于人肝细胞，还是来源于动物的肝细胞。
本发明的目的在于提供在体内准确预测药物在人体中的肝药物代谢和对肝功能的影响等的方法。
于是，本发明人进行了各种研究后发现，向人肝细胞移植嵌合体动物投与被测物质时，如果事先控制人补体反应，则可以保持该嵌合体动物稳定，而且不仅是人肝细胞移植嵌合体动物，如果同时使用该嵌合体动物和同种的非嵌合体动物，向这两者投与被测物质，分析比较这些动物的肝代谢、肝功能，则可以准确地预测人体中被测物质的肝代谢物、对肝功能的影响等，从而完成了本发明。
即，本发明提供人体中被测物质的肝代谢物的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物。
此外，本发明提供人体中该被测物质的排泄类型的判定方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物。
另外，本发明提供人体中被测物质对肝功能的影响的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，检测比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的肝功能。
另外，本发明提供被测物质的人特异性代谢物的分析方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，进而分析与该嵌合体不同种的动物中该被测物质的代谢物，将得到的结果进行对比。
另外，本发明提供对于被测物质具有人类型代谢特征的动物的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，进而分析与该嵌合体不同种的动物中该被测物质的代谢物，将得到的结果进行对比。
若采用本发明，可以在体内准确预测药物在人体中的肝代谢、排泄类型、对肝功能的影响等。因此，如果使用本发明的方法，可以在对人进行给药前预测药物对人的影响，使药品开发中的候选物质的筛选、对人的副作用的产生和有效性的预测变得容易。因此，有利于基于开发初期的候选物质的甄选等的开发成本的削减和对人的副作用的防止，在药品开发中是非常有用。
附图的简单说明
图1为表示血浆中放射性浓度变化的图。
图2为表示向胆汁中的排泄的图。
图3为表示向尿和粪便中的放射性排泄率的图。
图4为表示给药2小时后血浆中的主要的峰的图。
图5为表示胆汁中的放射性色谱的图。
图6为表示给药2小时后的肝脏和肾脏中的放射性色谱的图。
图7为粪便中的放射性色谱的图。
图8为尿中的放射性色谱的图。
实施发明的最佳方式本发明中所用的非人嵌合体动物为体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的嵌合体动物。该嵌合体动物较好是向该动物原本的肝细胞受损且对于人肝细胞不显示排斥反应的免疫缺陷动物(免疫缺陷肝功能障碍动物)移植人肝细胞，确认人肝细胞存活的动物。
在这里，作为肝功能障碍动物，可以使用Science，263，1149(1994)中记载的导入了白蛋白的启动子和增强子区域与u-PA(尿激酶型纤溶酶原激活物)的融合基因的转基因小鼠。此外，作为免疫缺陷动物，可以使用遗传性免疫缺陷的SCID小鼠(重症联合免疫缺陷小鼠)。免疫缺陷肝功能障碍动物可以简单地使用使这些肝功能障碍小鼠和免疫缺陷小鼠交配而得到的子代小鼠。作为这样的动物的种类，较好是小鼠。作为免疫缺陷肝功能障碍小鼠的例子，较好是uPA-Tg(+/+)/SCID小鼠。
作为用于移植到免疫缺陷肝功能障碍动物中的人肝细胞，较好是冷冻肝细胞、新鲜肝细胞、增殖性强的小型肝实质细胞等。此外，为了进行基于人种的评价，可以移植来源于日本人、韩国人、中国人、白人、黑人和其它人种的上述细胞。
人肝细胞向免疫缺陷肝功能障碍动物的移植较好是在脾脏中进行。如果移植到脾脏中，则移植的人肝细胞容易在动物的肝脏中存活。
作为本发明所用的嵌合体动物，较好是使用日本专利特开2002-45087号公报的在uPA-Tg(+/+)/SCID(+/+)小鼠的脾脏中移植人肝细胞并确认人肝细胞存活的小鼠。
此外，作为与本发明所用的前述嵌合体动物同种的非嵌合体动物，较好是免疫缺陷肝功能障碍动物，更好是免疫缺陷肝功能障碍小鼠，特好是uPA-Tg(-/-)/SCID(+/+)小鼠、uPA-Tg(+/-)/SCID(+/+)小鼠、uPA-Tg(+/+)/SCID(+/+)小鼠。
本发明中，在使其免受肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，向嵌合体动物和同种的非嵌合体动物投与被测物质。这是因为不防止人补体的攻击的情况下，被测物质的投与会引发弥漫性凝固症候群等。为了使其处于免受人补体的攻击的状态，较好是预先对动物投与甲磺酸萘莫司他等补体抑制剂或用于抑制血液凝固的肝素等抗凝剂。给药量为可以获得抗凝效果的量即可。这些药剂的给药时间为投与被测物质之前。
此外，本发明中，向嵌合体动物和同种的非嵌合体动物这两者投与被测物质。作为给药方法，可以是被测物质原来的给药方法，若考虑到吸收率等存在种间差异，较好是静脉给药、经口给药等。
投与被测物质后，如果分析嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，将两者进行比较，则可以准确地预测人体中被测物质的肝代谢物。代谢物的分析是指获得代谢物的种类、量、存在比和它们的经时变化、量的变化等信息，较好是分析血浆、组织、胆汁、尿、粪便中的代谢物。作为代谢物的分析方法，可以通过使用具有放射性同位素的物质作为被测物质，测定其放射性，从而简便地进行。此外，作为代谢物，可以例举各种分解物、结合物等。
按照本发明，通过使用嵌合体动物和非嵌合体动物这两者，比较两者的分析结果，例如即使嵌合体动物中的人肝细胞功能的发生率为数十％，也可以准确地掌握被测物质对于人肝细胞的作用。此外，可以区分嵌合体动物自身产生的肝功能障碍和因投与被测物质而产生的肝功能障碍。另外，通过以各种方法测定肝脏的mRNA、蛋白质等的变化，可以分析肝功能障碍或肝毒性的机理。
投与被测物质后，通过分析比较嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，还可以判定人体中被测物质的排泄类型。即，例如通过测定并比较两者的尿、粪便和胆汁中的代谢物，可以判定被测物质在人体中的排泄类型。该排泄类型在动物种间的差异大，因此在药品开发中，了解被测物质在人体中的排泄类型非常重要，无需对人投与被测物质就可以评价人体中的排泄类型和代谢物的本发明非常有用。
投与被测物质后，若检测比较嵌合体动物和非嵌合体动物的肝功能，则可以准确地预测人体中被测物质对肝功能的影响，例如对于肝功能障碍的预防、治疗效果、对于肝细胞的毒性等。嵌合体动物自身存在肝障碍，自投与被测物质之前显示肝功能的指标、例如GOT和GPT就表现出异常值，如果不同时使用对照动物，则无法完全把握被测物质对人的肝功能的影响。作为前述对照动物，理想的是同种的非嵌合体动物。作为前述非嵌合体动物，可以例举与该嵌合体动物同种的免疫缺陷肝功能障碍动物、免疫缺陷动物、无障碍的动物。
作为显示肝功能的检测项目，可以例举GOT、GPT等生化学检测值，也可以通过公知的方法对肝脏的mRNA的变化、表达蛋白等的变化进行测定。
如上所述，如果投与被测物质后分析比较嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，评价人体中该被测物质的排泄类型和代谢物，再分析与该嵌合体动物不同种的动物中该被测物质的代谢物，将得到的结果进行对比，则可以预测对于被测物质具有人类型代谢特征的动物。即，可以在各种动物中容易地确认是否被测物质的代谢特征为人类型，在讨论被测物质及其代谢物对生物体的影响时，可以确认该动物的使用是否恰当。
实施例以下，例举实施例，对本发明进行详细说明，但本发明并不局限于此。
实施例1A.材料(1)被测物质使用已知在人体中以葡糖醛酸结合物的尿中排泄为主要清除途径的酮基布洛芬。
3H-酮基布洛芬(ART391，Lot 040219)从ARC购入。标记部位为非特异，放射性比度为1110 GBq/mmol。
(2)使用动物嵌合体小鼠使用株式会社フエニツクスバイオ制小鼠。即，使用在作为肝缺陷型的转基因小鼠的uPA-Tg(+/+)/SCID小鼠(雌性)的脾脏中移植人肝细胞并确认人肝细胞存活的小鼠(体重10.2～18.0g)。使用人肝细胞的置换率为60％～80％，移植后45天～87天的小鼠。作为对照小鼠，使用6～10周龄的uPA(-/-)/SCID小鼠(体重15.1～22.2g)。
使搬入后的小鼠自由地摄取水(含0.012％次氯酸)和含维生素C的灭菌固体饲料(CRF-1，オリエンタル酵母)，在室温23±3℃、湿度55±20％的条件下进行饲养。另外，向嵌合体小鼠1天2次通过腹腔给药投与甲磺酸萘莫司他注射液(0.3mg/0.2mL/个体)。
(3)给药量和给药方法取规定量的3H-酮基布洛芬乙醇溶液，在氮气气流下干燥后，加入酮基布洛芬的0.125mol/L氢氧化钠溶液溶解。用0.1％柠檬酸水溶液调至pH7.0，用注射用蒸馏水调整至1mg/mL的浓度。将该投与液以5mL/kg的量向小鼠尾静脉进行单次快速静脉注射(5mg/5mL/kg)。
(4)试样采集将嵌合体小鼠和对照小鼠在代谢笼内饲养至给药后5天，采集尿和粪便。给药后2小时放血处死后，采集肝和肾。从眼窝静脉丛采血，离心分离采集血浆。对于胆汁，对嵌合体小鼠和对照小鼠实施胆管插管术，在给药后72小时采集。
(5)放射性的测定液体闪烁体使用ハイオニツクフロ一(パ一キンエルマ一制)，液体闪烁计数器使用TRICARB2500，对各试样中的放射性进行2分钟的测量。
另外，计数效率的校正通过外部标准曲线法进行。
(6)血浆、组织、胆汁、尿和粪便中的浓度的测定对于血浆、胆汁和尿，采集10μL至20mL用玻璃管瓶中，加入10mLハイオニツクフロ一进行测定。
对于组织(肝和肾)，加入3倍重量的乙酸缓冲液(0.1M，pH3.0)，用POLYTRON匀浆器进行匀浆。将50μL以2mL Soluen 350(パ一キンエルマ一)可溶化，加入10mLハイオニツクフロ一进行测定。
对于粪便，将全部混合至15或30mL，用POLYTRON匀浆器进行匀浆。将0.5mL以2mL Soluen 350(パ一キンエルマ一)可溶化，加入10mL液体ハイオニツクフロ一进行测定。
(7)血浆、组织、尿中的代谢物分析(i)血浆、组织和粪便的分析将50μL血浆或100μL组织匀浆物加入到eppendorf管中，添加4倍量的乙腈，剧烈搅拌。离心分离后(22000×g，4℃，10分钟)，取上清，在氮气气氛下浓缩干燥。用200μL乙酸缓冲液(0.1M，pH3.0)再次溶解后，再次离心分离(22000×g，4℃，10分钟)，将上清注入HPLC。
对于粪便匀浆物，取500μL该匀浆物到玻璃试管中，添加9倍量的乙腈，剧烈搅拌。离心分离后(1800×g，4℃，10分钟)，取上清。在残渣中加入500μL蒸馏水搅拌后，重复同样的乙腈提取。合并上清，在氮气气氛下浓缩干燥。用200μL乙酸缓冲液(0.1M，pH3.0)再次溶解后，再次离心分离(22000×g，4℃，10分钟)，将上清注入HPLC。
(ii)胆汁和尿的分析对于胆汁，将25μL用75μL乙酸缓冲液(0.1M，pH3.0)稀释，用ウルトラフリ一(0.45μm，日本ミリポア)进行超滤(22000×g，4℃，10分钟)。将滤液注入HPLC。
对于尿，在代谢笼的尿收集管中预先加入200μL或500μL乙酸缓冲液(0.1M，pH3.0)进行采集。将100μL用ウルトラフリ一(0.45μm，日本ミリポア)进行超滤(22000×g，4℃，10分钟)，将滤液注入HPLC。
(iii)酶处理对于胆汁和尿的试样，进行采用β-葡糖醛酸糖苷酶·芳基硫酸酯酶(Helixpomatia，Roche Diagnostics)的酶处理。即，在胆汁和尿的试样中加入β-葡糖醛酸糖苷酶·芳基硫酸酯酶(3％)，在37℃孵育16小时。将孵育试样进行离心分离(22000×g，4℃，10分钟)，将上清注入HPLC。
(iv)HPLC分析条件HPLC系统岛津LC-10Avp系列柱Inertsil ODS-3.5μm，4.6mm×150mm(GL Science)流动相A液)0.1％乙酸水溶液B液)0.1％乙腈梯度时间(分钟)0→15→25→26→35B浓度(％)25→80→80→25→25柱温40℃检测UV检测装置(254nm)和连续放射性检测器B.试验结果(1)血浆、组织、胆汁、尿和粪便中的浓度的测定血浆中放射性浓度的变化示于图1，通过非隔室模型分析(non-compartment analysis)得到的动力参数示于表1。对照小鼠(n＝2)和嵌合体小鼠(n＝3)的以总放射量为基准的AUC分别为45.8μg eq.·h/mL和35.7μg eq.·h/mL，t1/2(0-4h)分别为0.92h和0.78h。两动物间大致相同。
向胆汁中的排泄如图2所示。相对于给药量的向胆汁中的排泄率，对照小鼠(n＝3)为19.9±9.6％，嵌合体小鼠(n＝3)为10.5±7.8％，两种动物之间没有发现显著差异，对照小鼠显示出较高值。
给药2小时后的组织中放射性浓度，在对照小鼠(n＝3)和嵌合体小鼠(n＝3)的肝脏中分别为2.58±0.33μg eq./mL和2.14±0.98μg eq./mL，在肾脏中分别为4.70±0.61μg eq./mL和5.03±1.25μg eq./mL(表2)。这时血浆中的放射性浓度，对照小鼠和嵌合体小鼠分别为6.82±1.10μg eq./mL和6.96±2.65μgeq./mL(表2)。这些组织中和血浆中的浓度在两种动物之间没有发现显著差异。计算组织对血浆中的浓度比(Kp)，结果发现嵌合体小鼠的肝脏中与对照小鼠相比显著降低(表2)。
*p＜0.05向尿和粪便中的放射性的排泄率如图3所示。到120小时为止的相对于给药量的向尿中的排泄率，对照小鼠(n＝3)为66.5±6.4％，嵌合体小鼠(n＝3)为80.3±26.9％。此外，到1 20小时为止的相对于给药量的向粪便中的排泄率，对照小鼠(n＝3)为17.9±13.0％，嵌合体小鼠(n＝3)为11.1±2.3％。嵌合体小鼠中，显示出更倾向于尿排泄型的质量平衡。
(2)血浆、组织、尿中的代谢物分析如图4所示，作为给药后2小时的血浆中的主要的峰，对照小鼠和嵌合体小鼠都确认为未变化体和氢氧化代谢物(推定，以下记作M1)。M1的生成在对照小鼠中多于嵌合体小鼠。
胆汁中的放射性色谱示于图5。胆汁中几乎没有发现未变化体，出现来源于葡糖醛酸结合物的峰。进行酶处理后，结果在对照小鼠中发现若干被判断为氢氧化代谢物的峰，但嵌合体小鼠中未变化体为主要的峰。
作为给药后2小时的组织中的峰，对照小鼠的肝脏(图6)中，没有观测到未变化体，M1为主要的峰，相对地，嵌合体小鼠中发现未变化体和M1。此外，肾脏(图6)中，对照小鼠和嵌合体小鼠都发现未变化体和M1为主要的峰。肝脏和肾脏中，M1的生成在对照小鼠中都多于嵌合体小鼠。
粪便的放射性浓度低，所以放射性色谱的噪声大，但是认为对照小鼠和嵌合体小鼠中都是未变化体和M1为主要的峰(图7)。
尿的代表性的色谱示于图8。作为尿中的峰，对照小鼠和嵌合体小鼠中都发现大量被认为是未变化体、氢氧化代谢物及它们的结合物的峰。特别是对照小鼠在17.8分钟溶出的峰，认为是小鼠中特有的峰。另外，由这些放射性色谱上的峰在经β-葡糖醛酸糖苷酶·芳基硫酸酯酶处理后的结果可知，生成未变化体和M1。氢氧化代谢物的生成在对照小鼠中都多于嵌合体小鼠。
另外，使用乙腈的分析预处理时的放射性的回收率在血浆、组织(肝和肾)、粪便试样中都良好，在88.5～95.7％的范围内，认为在进行代谢特征的研究中没有问题。
(1)由上述的结果可知，血浆中的浓度变化、组织内的浓度在对照小鼠和嵌合体小鼠之间没有较大的差异，但是对照小鼠的胆汁排泄率比嵌合体小鼠大。此外，尿粪排泄的比例的偏差较大，所以没有发现显著差异，但嵌合体小鼠的尿中排泄率比对照小鼠高。这被认为是因为，有报道显示人的包括代谢物的尿中排泄比啮齿类高，因而嵌合体小鼠具有更接近人的胆汁排泄机能。
(2)另外，比较尿中和胆汁中的代谢特征后发现，嵌合体小鼠中主要生成被认为由未变化体生成的结合物，而对照小鼠中存在氢氧化代谢物和其结合物。该结果显示，嵌合体小鼠表现出更接近人的代谢特征。
由此可知，通过对于体内存在具有来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与被测物质，分析比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，可以预测该被测物质是尿排泄型或胆汁排泄型等人的排泄类型。另外，通过与其它的动物种类比较，可以确认是否有人特异性的代谢物，预测该动物种的代谢特征是否为人类型。
(3)另一方面，主要涉及2相类代谢酶(特别是葡糖醛酸结合)的情况下，有报道显示由体外试验得到的数据向体内的外插困难，使用人肝细胞的情况下，发现氢氧化代谢物的生成，但未发现结合代谢物的生成。然而，通过本发明，可以确认在使用人肝细胞的体外试验中未得到确认的结合代谢物，由此可知，本发明是非常有用的。
权利要求
1.人体中被测物质的肝代谢物的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物。
2.人体中该被测物质的排泄类型的判定方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物。
3.人体中被测物质对肝功能的影响的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，检测比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的肝功能。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，对肝功能的影响为对肝功能障碍的预防和治疗效果或者对肝细胞的毒性。
5.如权利要求1～4中任一项所述的方法，其特征在于，前述非人嵌合体动物为在免疫缺陷肝功能障碍动物中移植了人肝细胞的非人嵌合体动物，前述非嵌合体动物为选自同种的免疫缺陷肝功能障碍动物、免疫缺陷动物、肝功能障碍动物或无障碍的动物的1种。
6.被测物质的人特异性代谢物的分析方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，进而分析与该嵌合体动物不同种的动物中该被测物质的代谢物，将得到的结果进行对比。
7.对于被测物质具有人类型代谢特征的动物的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物，进而分析与该嵌合体动物不同种的动物中该被测物质的代谢物，将得到的结果进行对比。
全文摘要
本发明提供准确预测药物在人体中的肝代谢和对肝功能的影响的方法。人体中被测物质的肝代谢物以及肝功能的预测方法，其特征在于，对于体内存在具有增殖能力的来源于人的肝细胞群体且该肝细胞群体实质上承担该嵌合体动物的肝功能的非人嵌合体动物以及同种的非嵌合体动物，在使其免受该肝细胞产生的人补体的攻击的状态下，投与该被测物质，分析比较该嵌合体动物和非嵌合体动物的代谢物。
文档编号G01N33/15GK101014855SQ20058002739
公开日2007年8月8日 申请日期2005年8月19日 优先权日2004年8月20日
发明者二宫真一, 大曽根义泰, 安达弥永, 堀江透, 添野吉德, 井上多惠 申请人:第一化学药品株式会社, 飞氏生物株式会社