专利名称：：一种淡水环境重金属汞污染的贝类监测方法
技术领域：
：本发明涉及一种淡水环境重金属汞污染的贝类监测方法，能较为系统而快速地监测水环境中持续性污染物汞的污染程度，属于生物监测环境
技术领域：
。技术背景近些年来，水环境中重金属和其它微量元素的污染制约着我国经济的快速发展，胁迫着人们的身体健康和生活质量的倾向日益明显，有些甚至酿成了重大灾难。内陆渔业是我国渔业产业中非常重要的部分。渔业水域生态环境是渔业发展的根本。内陆渔业资源的数量变动、增养殖业的健康发展无不与环境状况密切相关。随着我国经济的快速发展，内陆渔业水域环境质量下降成了无法回避的事实。目前内陆渔业环境已成为水体污染最严重的受害者。因此，加强内陆渔业水域生态环境有效监测体系的建设，深入了解污染物分布和污染状况、生物累积效应和毒性影响，为防治渔业水域的荒漠化，保护渔业资源的可持续利用、渔业的生存空间和水产品安全等方面均具有特别重要的意义。目前我国渔业水域生态环境的汞污染状况主要通过测定水或沉积物中目标污染物的浓度来评价。这种方式存在着很大的局限性。汞一般在水中的浓度非常低，需要较为复杂的样品前处理过程，苛刻的仪器和试剂条件。另外，由于水中污染物的浓度容易变动，要取得有代表性的客观数据相对困难。一旦水中汞的浓度被检出超标，这时的汞对生态系统的胁迫通常已非常严重，由此造成的损失将很大，且一般已无法挽回。同样沉积物因受到泥水界面和不同深度的影响，汞浓度亦不稳定。因此，仅以水、沉积物样检测方式已无法满足进行有效的预测预警和风险防范的迫切需要。在环境监测领域中，生物监测是近年来发展起来的备受国际重视，公认的既简便且成效显著的方法。它是利用污染物在生物体内的浓缩特性，通过测定指示生物中持续性环境污染物的含量来监测环境污染，预测污染的动态并指导风险防范。迄今除本研究室的一些探索研究外，国内外尚无任何在淡水环境内开展持续性污染物污染的贝类监测报道，因此蚌种的选择、监测方法的建立和监测结果的可靠性检验是本发明的关键所在
发明内容本发明的目的在于克服上述不足之处，从而提供一种淡水环境重金属未污染的贝类监测方法，即用待监测自然水域的背角无齿蚌样作为测定的对象，通过汞在其中的残留浓度，从而了解汞在各水域的污染程度差异和可能的来源，为未来渔业水域建立标准化的汞"淡水贝类观察"体系打下良好的基础。本发明的主要解决方案是这样实现的本发明一种淡水环境重金属污染物汞污染的贝类监测方法采用以下工艺步骤1、筛选出贝类一背角无齿蚌作为用于重金属污染物汞污染监测的指示生物样本；背角无齿蚌具有分布广，活动能力弱，易采集，对污染物的累积和胁迫有很强的耐受力等特点。2、重金属污染物汞污染监测的贝类一背角无齿蚌的样本前处理方法(1)、选出背角无齿活蚌在曝气的水中暂养35日，使其排除壳内和消化道内的杂物，然后解剖去除蚌壳，获取蚌软组织，将蛘软组织于-18_20°C冰箱内保存至进行步骤(2)时随用为止；(2)、取出蚌软组织解冻后用超纯水冲洗610遍，于60100。C的干燥箱中烘1224h至恒重；将背角无齿蚌软组织千样研磨成粉末均一化，制成粉末状蚌软组织干样，置于干燥器室温中待用；3、采用日本仪器株式会社NICMA-2000型汞分析仪测定太湖不同水域指示贝类-背角无齿蚌中汞污染物的含量，从而确定和证实其在监测不同水域汞污染的程度和地区特征方面的有效性。(1)、在船形的陶瓷容器中先加入1015g粉末状的活性氧化铝，然后加入0.050.lg粉末状蚌软组织干样于其上；再用1015g的活性氧化铝覆盖样本；最后再加入1015g粉末状碳酸钠和氢氧化l丐的混合物为荥分析仪测定标本；(2)、将装有上述标本的船形的陶瓷容器放入汞分析仪，通过对其加热，加热温度为800900°C，使样品形成蒸气汞，进而经气液分离，富集形成金汞齐，然后，载气将释放的蒸气汞带入检测池进行汞浓度测定。所述的汞浓度测定回收率为90110%。用所述方法有效测得太湖监测水域蚌样中的汞残留水平，并能清楚地了解各监测水域残留水平的地区差异。本发明与已有技术相比具有以下优点本发明选用背角无齿蚌作为检测对象，采样方便，前处理方法比较简单，针对不同水域的重金属污染物，经标准化的前处理方法后，可以运用大型精密分析仪器日本NICMA-2000汞分析仪快速而精确测定指示贝类-背角无齿蚌中汞的浓度、组分特点、污染程度、生物毒性影响及其水域间的差异；结果精确，且稳定性好，可重复性高、可比性强，系统误差小，可以为准确评估及预测上述各污染物对渔业水域的危害风险和发展趋势，较为快速地提供大量详实的基础数据。同时与仅测水、泥样相比，应用本发明的背角无齿蚌的生物监测法还具有的涵盖数据广、污染物累积、水产品质量的警示效应明显等优势。具体实施方式下面本发明将结合实施例作进一步描述实施例一本发明一种淡水环境重金属污染物汞污染的贝类监测方法采用以下工艺步骤背角无齿蚌(36只)于2003-2004年间采自环太湖九个采样点无锡五里湖的蠡湖宾馆、石塘、犊山水域；外太湖的无锡五里湖威尼斯花园、无锡三山岛、常州雪堰、宜兴大浦、浙江湖州和无锡华庄水域。将活蚌先在经曝气的水中暂养3日，使其排空肠内杂物，再测量壳长、壳高、壳宽、带壳重等生物学性状。然后解剖获取软组织，软组织称重后于-2(TC冰箱内保存随用。解冻后用超纯水(美国密理博公司，Milliprore-Simplicity个人型超纯水系统，出水电阻率18.2MQ.cm)水冲洗8遍，于IO(TC的干燥箱中烘12h至恒重；将背角无齿蚌软组织干样研磨成粉末均一化，即制成粉末状蚌软组织干样，置于干燥器室温中待用(可随用)。利用NICMA-2000水银分析仪测定所获粉末状蚌软组织干样中汞的浓度。从而确定和证实其在监测不同水域荥污染的程度和地区特征方面的有效性。船形的陶瓷容器中先加入10g粉末状的活性氧化铝，然后加入0.05g粉末状蚌软组织干样于其上；再用10g的活性氧化铝覆盖样本；最后再加入10g粉末状碳酸钠和氢氧化钙的混合物(两者重量比为1:1);将上述装有标本的船形的陶瓷容器放入NICMA-2000型汞分析仪，通过对其加热850°C，加热时间1.5min，使样品形成蒸气汞，进而经气液分离，富集形成金汞齐，然后，载气将释放的蒸气汞带入检测池进行汞浓度的分析测定。本研究方法的可靠性和精度用国际标样D0RM2(加拿大国家研究委员会，汞保证浓度值为4.64土0.26mg/kg干重，平均士标准差，下同)来确认。三次重复测定的浓度为4.36±0.03mg/kg干重。保证浓度值的测定回收率为94%。证明分析方法可靠，精度良好。通过测定所获太湖不同水域粉末状蚌软组织干样中汞的浓度来确认和证实本方法实际应用的有效性。我们有效测得太湖监测水域蚌样中的汞残留总体水平为0.049±0.074nig/kg干重，各监测水域残留水平有显著的地区差异(表1)。因此，本发明利用统一的生物指示贝种、样本消解和测定方法所获得数据可以客观地反映太湖相关水域重金属汞污染，监测效果良好。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>实施例二:本发明一种淡水环境重金属污染物汞污染的贝类监测方法采用以下工艺步骤背角无齿蚌(36只)于2003-2004年间采自环太湖九个釆样点无锡五里湖的蠡湖宾馆、石塘、犊山水域；外太湖的无锡五里湖威尼斯花园、无锡三山岛、常州雪堰、宜兴大浦、浙江湖州和无锡华庄水域。将活蚌先在经曝气的水中暂养3日，使其排空肠内杂物，再测量壳长、壳高、壳宽、带壳重等生物学性状。然后解剖获取软组织，软组织称重后于-18'C冰箱内保存随用。解冻后用超纯水(美国密理博公司，Milliprore-Simplicity个人型超纯水系统，出水电阻率18.2MQ.cm)水冲洗6遍，于80°C的干燥箱中烘18h至恒重；将背角无齿蚌软组织干样研磨成粉末均一化，即制成粉末状蚌软组织干样，置于干燥器室温中待用(可随用)。利用NICMA-2000水银分析仪测定所获粉末状蚌软组织干样中汞的浓度。从而确定和证实其在监测不同水域汞污染的程度和地区特征方面的有效性。船形的陶瓷容器中先加入12g粉末状的活性氧化铝，然后加入0.08g粉末状蚌软组织干样于其上；再用12g的活性氧化铝覆盖样本；最后再加入12g粉末状碳酸钠和氢氧化钙的混合物(两者重量比为1:1);将上述装有标本的船形的陶瓷容器放入NICMA-2000型汞分析仪，通过对其加热820°C，加热时间2min，使样品形成蒸气汞，进而经气液分离，富集形成金汞齐，然后，载气将释放的蒸气汞带入检测池进行汞浓度的分析测定。本研究方法的可靠性和精度用国际标样D0RM2(加拿大国家研究委员会，汞保证浓度值为4.64±0.26mg/kg干重，平均士标准差，卜同)来确认。三次重复测定的浓度为4.36±0.02mg/kg干重。保证浓度值的测定回收率为94%。证明分析方法可靠，精度良好。上述太湖不同水域粉末状蚌软组织干样中汞的浓度采用事实例1中NICMA-2000水银分析仪法来测定。同样证实了本发明利用统一的生物指示贝种、样本消解和测定方法所获得数据可以客观地反映太湖相关水域重金属汞污染，监测效果良好。为今后在全国范围内建立内陆渔业水域重金属汞污染的"贝类观察"监测体系打下了坚实的基础。实施例三本发明一种淡水环境重金属污染物污染的贝类监测方法采用以下工艺步骤背角无齿蚌(36只)于2003-2004年间采自环太湖九个采样点无锡五里湖的蠡湖宾馆、石塘、犊山水域；外太湖的无锡五里湖威尼斯花园、无锡三山岛、常州雪堰、宜兴大浦、浙江湖州和无锡华庄水域。将活蚌先在经曝气的水中暂养4日，使其排空肠内杂物，再测量壳长、壳高、壳宽、带壳重等生物学性状。然后解剖获取软组织，软组织称重后于-19i:冰箱内保存随用。解冻后用超纯水(美国密理博公司，Milliprore-Simplicity个人型超纯水系统，出水电阻率18.2MQ.cm)水冲洗9遍，于70°C的干燥箱中烘16h至恒重；将背角无齿蚌软组织干样研磨成粉末均一化，即制成粉末状蚌软组织干样，置于干燥器室温中待用。利用NICMA-2000水银分析仪测定所获粉末状蚌软组织干样中汞的浓度。从而确定和证实其在监测不同水域汞污染的程度和地区特征方面的有效性。船形的陶瓷容器中先加入15g粉末状的活性氧化铝，然后加入0.1g粉末状蚌软组织干样于其上；再用15g的活性氧化铝覆盖样本；最后再加入15g粉末状碳酸钠和氢氧化钙的混合物(两者重量比为1:1);将上述装有标本的船形的陶瓷容器放入NICMA-2000型汞分析仪，通过对其加热860°C，加热时间lmin，使样品形成蒸气汞，进而经气液分离，富集形成金汞齐，然后，载气将释放的蒸气汞带入检测池进行汞浓度的分析测定。本研究方法的可靠性和精度用国际标样D0RM2(加拿大国家研究委员会，汞保证浓度值为4.64±0.26mg/kg干重，平均士标准差，下同)来确认。三次重复测定的浓度为4.83士0.09mg/kg干重。保证浓度值的测定回收率为104°/。。证明分析方法可靠，精度良好。采用实例1中NICMA-2000水银分析仪法对上述太湖不同水域粉末状蚌软组织干样中汞的浓度进行了有效测定。再一次证实了本发明利用统一的生物指示贝种、样本消解和测定方法所获得的数据可以客观地反映太湖相关水域重金属汞污染，监测效果良好。为今后在全国范围内建立内陆渔业水域重金属汞污染的"贝类观察"监测体系打下了坚实的基础。本发明中采用的设备为常规设备，使用的原材料为市场所购。权利要求1、一种淡水环境重金属污染物汞污染的贝类监测方法，其特征是采用以下工艺步骤(1)、选定背角无齿蚌作为用于重金属污染物汞污染监测的指示生物样本；(2)、重金属污染物污染监测的贝类一背角无齿蚌的样本前处理方法(2.1)、将选出的背角无齿活蚌在曝气的水中暂养35日，使其排除壳内和消化道内的杂物，然后解剖去除蛘壳，获取蚌软组织，蚌软组织于-18-2CTC冰箱内保存随用；(2.2)、取出蛘软组织解冻后用纯水冲洗610遍，于6010(TC的干燥箱中烘1224h至恒重；将背角无齿蚌软组织干样研磨成粉末均一化，即制成粉末状蚌软组织干样，置于干燥器室温中待用；(3)、采用汞分析仪测定指示贝类-背角无齿蚌中重金属污染物的浓度含(3.1)、在船形的陶瓷容器中先加入1015g粉末状的活性氧化铝，然后加入0.050.lg粉末状蚌软组织干样于其上；再用1015g的活性氧化铝覆盖粉末状蚌软组织干样；再加入1015g粉末状碳酸钠和氢氧化钙的混合物为测定标本；(3.2)将上述测定标本放入汞分析仪，通过对其加热，加热温度为800900°C，加热时间1-2min，使标本形成蒸气汞，将释放的蒸气汞带入检测池进行汞浓度测定。2、根据权利要求1所述的一种淡水环境重金属污染物汞污染的贝类监测方法，其特征在于所述的汞浓度测定回收率为90110%。全文摘要本发明涉及一种淡水环境重金属污染物汞污染的贝类监测方法，属于生物监测环境
技术领域：
。特征是先将活蚌在曝气的水中暂养，使其排除壳内和消化道内的杂物，然后解剖获取蚌软组织，蚌软组织于冰箱内保存；取出解冻后用水冲洗，于干燥箱中烘至恒重；再将背角无齿蚌软组织干样研磨成粉末，与活性氧化铝、粉末状碳酸钠和氢氧化钙制成标本，采用汞分析仪测定蚌中重金属污染物汞的含量本发明采样方便，前处理方法比较简单；能精确测定蚌中重金属汞的积累特征，快速了解污染物汞的浓度、污染程度、生物毒性影响及其水域间的差异；稳定性好、可重复性高、可比性强，系统误差小，可以为准确评估及预测上述污染物对渔业水域的危害风险和发展趋势。文档编号G01N33/18GK101122594SQ20071013114公开日2008年2月13日申请日期2007年8月21日优先权日2007年8月21日发明者刘洪波,健杨申请人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心