专利名称：一种用hplc法测定非洛地平缓释片有关物质的方法
技术领域：
本发明涉及一种高效液相方法，特别是一种非洛地平缓释片有关物质的高效液相
色谱测定方法。
背景技术：
非洛地平是钙通道阻滞药，分子式为(:181119(:12冊4，化学名为2，6-二甲基-4-(2，3
二氯苯基)-1 ， 4- 二氢-3， 5-吡啶二甲酸甲乙酯，其结构式如下
<formula>formula see original document page 3</formula> 本法采用普通的色谱柱((:18色谱柱)快速准确的实现了非洛地平缓释片有关物质 的测定，从而实现了非洛地平缓释片各杂质的控制，保证了非洛地平缓释片的质量可控，具 有现实意义。 本发明的目的在于提供一种用高效液相色谱法分离测定非洛地平缓释片有关物
质的方法，可用于非洛地平缓释片的质量控制。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，选用十八
烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇和乙腈为有机相与水相的混合溶剂作为流动 相。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，流动相中
的有机相为甲醇和乙腈，甲醇与乙腈的比例为i : 1 5。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，流动相中
的有机相为甲醇和乙腈，甲醇与乙腈的比例为i : 1.5。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，流动相中
为有机相与水相的混合溶剂，有机相与水相比例为i 5 : i。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，流动相为
有机相与水相的混合溶剂，有机相与水相比例为3 : i。 本发明提供一种用高效液相色谱测非洛地平缓释片有关物质的方法，所述水相为 磷酸盐缓冲液，其pH范围为2 6。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，所述磷酸
盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、戊烷磺酸钠或庚烷磺酸钠中的
发明内容
一种或其混合物。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，所述磷酸 盐为磷酸二氢钠。 本发明提供一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，可按以下 方法实现 取非洛地平缓释片细粉适量，用流动相溶解，配制成每1ml含非洛地平0. 5mg的样 品溶液，检测波长254nm，选用C18色谱柱，柱温25°C 。取样品溶液20 y 1，注入高效液相色 谱仪，完成非洛地平缓释片有关物质的测定。 1)取非洛地平缓释片细粉适量，用流动相溶解样品，并配制成每1ml含非洛地平 0. 5mg的样品溶液。 2)设置流动相流速为0. 5 1. 5ml/min，流动相的流速优选为1. 0ml/min ;检测波 长210 290nm，最佳检测波长为254nm ;选用C18色谱柱；色谱柱柱温20 30°C ，柱温最佳 为25°C。 3)取非洛地平杂质A及非洛地平对照品适量，用流动相溶解制成一定浓度的溶 液，注入液相色谱仪，非洛地平杂质A(相对保留时间约O. 9)与非洛地平的分离度应符合要 求，理论塔板数按非洛地平色谱峰计应不少于3000。 4)取l)的样品溶液10 50iil，优选20ia，注入高效液相色谱仪，完成非洛地平 缓释片有关物质的测定。 本发明能够有效测定非洛地平缓释片的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高， 结果准确可靠。可用于非洛地平缓释片的质量控制。
图1非洛地平杂质分离的液相色谱图 图2非洛地平高温破坏样品的高效液相色谱图 图3非洛地平缓释片高温破坏样品的高效液相色谱图 图4非洛地平缓释片空白辅料高温破坏样品的高效液相色谱图 图5非洛地平缓释片空白辅料的高效液相色谱图 图6非洛地平缓释片的高效液相色谱图
具体实施例方式
以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。
实施例1
仪器与条件 日本岛津LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外-可见光多波长检测器，RHEODYNE 7725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱Apollo-C18 250 X 4. 6mm， 5 y m，紫外检测 波长254nm，流动相甲醇-乙腈-pH3. 0磷酸盐缓冲溶液(取磷酸二氢钠6. 9g，用水溶解 稀释到lOOOml，磷酸调pH为3. 0±0. 05) (30 : 45 : 25)。
实验步骤 取非洛地平杂质A及非洛地平对照品适量，用流动相溶解制成一定浓度的溶液，按上述条件进行高效液相分析，记录色谱图，结果见图1。 图1中保留时间为11. 000分钟的色谱峰为非洛地平的色谱峰，保留时间为9. 850 的色谱峰为非洛地平杂质A的色谱峰。在上述条件下非洛地平及其杂质A的色谱峰分离度
良好，可以满足中国药典的要求。
实施例2
仪器与条件 日本岛津LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外-可见光多波长检测器，RHEODYNE 7725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱Apollo-C18 250 X 4. 6mm， 5 y m，紫外检测 波长254nm，流动相甲醇-乙腈-pH3. 0磷酸盐缓冲溶液(取磷酸二氢钠6. 9g，用水溶解 稀释到lOOOml，磷酸调pH为3. 0±0. 05) (30 : 45 : 25)。
实验步骤 取非洛地平约12mg，置于25ml量瓶中，于105t:高温条件下破坏3天后，加流动相 溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液I。另分别取非洛地平缓释片细粉及空白辅料细 粉适量(约相当于非洛地平5mg)，置于10ml量瓶中，于105t:高温条件下破坏3天后，加流 动相适量，超声使非洛地平溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，高速离心15分钟，滤过，续滤 液分别作为供试品溶液II和供试品溶液III。 取供试品溶液I、II、III，照上述条件进行高效液相分析，记录色谱图，结果见分别 图2 4。 图2中保留时间为11. 733分钟的色谱峰为非洛地平的色谱峰，图3保留时间为 11. 250分钟的色谱峰为非洛地平的色谱峰。图4可以表明辅料空白在相对主峰保留时间小 于0. 35和相对主峰保留时间约为1. 55的位置上存在明显的色谱峰，图2表明在空白辅料 出峰的位置并未出现破坏出的杂质，故计算时应予以扣除。图2 4表明非洛地平缓释片 各，^与主峰分离良好，空白辅料对杂质检测无干扰，本法可以用于非洛地平缓释片的质 实施例3
仪器与条件 日本岛津LC-10ATVP泵，岛津SPD-10AVP紫外-可见光多波长检测器，RHEODYNE 7725i进样器及TL9900色谱数据工作站，色谱柱Apollo-C18 250 X 4. 6mm， 5 y m，紫外检测 波长254nm，流动相甲醇-乙腈-pH3. 0磷酸盐缓冲溶液(取磷酸二氢钠6. 9g，用水溶解 稀释到1000ml，磷酸调pH为3. 0±0. 05) (30 : 45 : 25)。
实验步骤 取非洛地平缓释片细粉适量(约相当于非洛地平5mg)，置于10ml量瓶中，加流动 相适量，超声使非洛地平溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，高速离心15分钟，滤过，续滤液 作为供试品溶液。取供试品溶液，照上述条件进行高效液相分析，并同法进行辅料空白试 验，结果见图5，图6。 图3证明，辅料空白在相对主峰保留时间小于0. 35和相对主峰保留时间约为1. 55 的位置上存在明显的色谱峰，计算时予以扣除；图4中保留时间为11. 300分钟的色谱峰为 非洛地的色谱峰，其有关物质单一杂质小于1.0%，总杂质小于2.0%，结果表明非洛地平 缓释片的有关物质达到制剂的要求，本法可以用于非洛地平药用组合物的质量监测。
权利要求
一种用高效液相色谱测定非洛地平缓释片有关物质的方法，其特征在于选用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇和乙腈为有机相与水相的混合溶剂作为流动相。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征是流动相中的有机相为甲醇和乙腈，甲醇与乙腈的比例为i : i 5。
3. 根据权利要求2所述的方法，其特征是流动相中的有机相为甲醇和乙腈，甲醇与乙腈的比例为i : 1.5。
4. 根据权利要求1所述的方法，其特征流动相是以甲醇和乙腈为有机相与水相的混合溶剂，有机相与水相的比例为i 5 : i。
5. 根据权利要求4所述的方法，其特征流动相是以甲醇和乙腈为有机相与水相的混合溶齐U，有机相与水相的比例为3 : i。
6. 根据权利要求1 5任一项所述的方法，其特征是所述水相为磷酸盐缓冲液，其pH 范围为2 6。
7. 根据权利要求6所述的方法，其特征是所述磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷 酸二氢钠、磷酸二氢钾、戊烷磺酸钠或庚烷磺酸钠中的一种或其混合物。
8. 根据权利要求7所述的方法，其特征在于所述磷酸盐为磷酸二氢钠。
9. 根据权利要求1 9任一项所述的方法，其特征在于取非洛地平缓释片细粉适量， 用流动相溶解，配制成每1ml含非洛地平0. 5mg的样品溶液，检测波长254nm，选用C18色谱 柱，柱温25°C ，取样品溶液20 1，注入高效液相色谱仪，完成非洛地平缓释片有关物质的
全文摘要
本发明公开了一种非洛地平缓释片有关物质的高效液相色谱测定方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以甲醇和乙腈为有机相与水相的混合溶剂作为流动相，可用于非洛地平缓释片的质量控制。
文档编号G01N30/00GK101762648SQ20081022400
公开日2010年6月30日 申请日期2008年10月9日 优先权日2008年10月9日
发明者杜丹 申请人:北京德众万全药物技术开发有限公司