肾复康片的质量控制方法

专利名称：肾复康片的质量控制方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，尤其是指中药制剂中成份含量测定和 鉴别方法。
背景技术：
肾复康片是由土茯苓366g、槐花93g、白茅根366g、益母草93g、 藿香28g组成的中药复方制剂，土茯苓183g、藿香粉碎成细粉；其 余土茯苓183g、槐花、白茅根、益母草加水煎煮二次，第一次加水 煎煮3小时，第二次加水煎煮2小时，滤过，合并滤液，浓縮至相对 密度为1.32-1.35 (50°C)的稠膏，加入土茯苓、藿香细粉，混匀，减 压干燥，粉碎成细粉，加入糖粉，混匀，制粒，干燥，加入羧甲淀粉 钠、硬脂酸镁，混匀，压制成1000片，包薄膜衣，即得。
该药物为薄膜衣片，除去包衣后显黄褐色；气微，味微甜。该药
物的功能主治为清热利尿，益肾化浊，用于热淋涩痛，急性肾炎水 肿，慢性肾炎急性发作。该药物的用法用量口服， 一次4 6片， 一日3次。该药物每片相当于处方药材0.946g。
槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花及花蕾，具有凉 血止血，清热凉血的功效，用于便血，尿血、血淋等出血证，主要成 分芦丁、槲皮素，具有抗炎、改善微循环、解痉、抗溃疡的作用。
土茯苓为百合科植物光叶菝葜Smilax glabra Roxb.的干燥根茎，具有除湿，解毒，通利关节的功效，用于湿热淋浊，带下，痈肿，瘰 疬，疥癣。
益母草为唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鲜或 干燥地上部分，具有活血调经，利尿消肿的功效，可用于水肿尿少， 急性肾炎水肿。
白茅根为禾本禾斗植物白茅Imperata cylindrica Beauv. var. major (Nees)C.E.Hubb.的干燥根茎，具有凉血止血，清热利尿的功效，可用 于血热吐血，衄血，尿血，热病烦渴，黄疸，水肿，热淋涩痛；急性 肾炎水肿。
藿香为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin (Blanco) Benth.的 干燥地上部分或唇形科植物藿香Agastache rugosus(Fisch.et.Mey.) O.Ktze.的干燥地上部分，具有芳香化浊，开胃止呕，发表解暑的功 效，可用于湿浊中阻，脘痞呕吐，暑湿倦怠，胸闷不舒，寒湿闭暑， 腹痛吐泻，鼻渊头痛。
该药物目前的质量控制方法较为单一，在《中华人民共和国卫生 部药品标准》(中药成方制剂)第十三册104页颁布了肾复康胶囊的 质量标准，在肾复康胶囊的质量标准中，没有鉴别方法和含量测定方 法，质量控制方法局限性大，专属性不强，难于控制药物的产品质量。

发明内容
本发明提供一种肾复康片的质量控制方法，以解决质量控制方法 较为单一、专属性不强，难于控制药物的产品质量的问题。本发明采
取的技术方案是包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
用高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3()016的含量 色谱条件
以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以甲醇水冰乙酸 =10-40:57-89:1-3或甲醇:水:磷酸=10-40:57-89:0.2-2.5为流动相；检测 波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000;
对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇或乙醇制成每lml含芦丁 25pg-75吗的溶液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml-75ml甲醇或乙醇，称定 重量，超声处理20-40分钟，超声功率50-200W,频率25-75KHz， 放置至18 25t:，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，滤过， 取滤液，即得；
含量测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lpl-10W，注入液相色 谱仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 <:27113()016计，不得少于0.95mg;
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁
供试品溶液的制备
取本品20片，除去包衣，加10ml-20ml的甲醇或乙醇，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓縮至2.5ml-7.5ml，作为供试品溶液； 对照品溶液的制备
称取芦丁对照品，加甲醇或乙醇制成每lml含芦丁 lmg-3mg的 溶液，作为对照品溶液； 薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各5jil-15|Lil，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干 后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明一种实施方式是显色反应中喷以10%硫酸乙醇溶液或者 喷以1%亚硝酸钠溶液，加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；以及 其它常用显色反应；
本发明一种实施方式是展开剂是二氯甲烷:甲醇:甲酸=15-25: 2.5-7.5: 0.5-1.5或乙酸乙酯:甲酸:水=6-10: 0,5-1.5: 0.5-1.5上层溶液 或乙酸乙酯:丁酮:甲酸:水=8-12: 4-8: 0.5-1.5: 1-3上层溶液;以及其 它常用的展开剂及配比。
本发明的优点是克服了现有技术的不足，提高了药品的质量控 制标准，建立了该药物先进的质量控制方法，建立了药物的鉴别项目 和含量测定项目及其检测方法，对药物中主药槐花药味进行了薄层色 谱法鉴别，采用高效液相色谱法测定该药物中的芦丁的含量，保证了 药物质量控制方法的准确性和先进性，能够有效地控制该药物的产品质量。
具体实施方式
实施例1
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层 色谱法鉴别其中的一种成分；
用高效液相色谱法测定该药物中芦丁 c27h3()o16的含量-.
色谱条件-.
以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水:冰乙酸-10: 89:1 为流动相；检测波长为276mn士2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低
于3000;
对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每lml含芦丁 25吗的溶
液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml甲醇，称定重量，超声 处理20分钟，超声功率200W，频率75KHz，放置至18°c，再称定 重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1W，注入液相色谱仪, 测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 <:271€3。016计，不得少于0.95mg;用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁-供试品溶液的制备
取本品20片，除去包衣，加10ml的甲醇，超声处理20分钟， 滤过，滤液浓縮至2.5ml,作为供试品溶液； 对照品溶液的制备.-
称取芦丁对照品，加甲醇制成每lml含芦丁 3mg的溶液，作为 对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以展开剂乙酸乙酯:甲酸:水=6: 0.5: 0.5上层溶液展开，取出， 晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365誰紫外光灯下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑 点。
本实施例中用高效液相色谱法测定该药物中芦丁 <:27113()016的
含量的色谱条件，还可以是以甲醇:水:磷酸=10: 89:0.2为流动相；
本实施例中用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，显色反 应中喷以10%硫酸乙醇溶液或者喷以1%亚硝酸钠溶液，加热至斑点 显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点；
本实施例中用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，展开剂 还可以是二氯甲烷甲醇甲酸=15: 2.5: 0.5或乙酸乙酯丁酮 甲酸水=8: 4: 0.5: 1上层溶液。实施例2
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层 色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3Q016的含量 色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇水冰乙酸=25:73:2 为流动相；检测波长为276nm士2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低
于3000;
对照品溶液的制备.-
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每lml含芦丁 50吗的溶
液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50ml甲醇，称定重量，超声 处理30分钟，超声功率120W，频率50KHz，放置至2rC，再称定 重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪， 测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 (:27113。016计，不得少于0.95mg;
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁
供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，加15ml的甲醇，超声处理15分钟， 滤过，滤液浓縮至5ml,作为供试品溶液； 对照品溶液的制备
称取戸丁对照品，加甲醇制成每lml含芦丁2mg的溶液，作为 对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各10|il，分别点于同一硅胶G薄
层板上，以乙酸乙酯甲酸水=8: 1: 1的上层溶液为展开剂，展
开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光 灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点；
本实施例中用高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3()016M 含量的色谱条件，还可以是以甲醇水磷酸=25:73:2为流动相；
本实施例中用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，显色反
应中喷以10%硫酸乙醇溶液或者喷以1%亚硝酸钠溶液，加热至斑点 显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点；
本实施例中用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，展开剂 还可以是二氯甲垸甲醇甲酸=20: 5: 1或乙酸乙酯丁酮甲酸: 水=10: 6: 1: 2上层溶液。 实施例3
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3Q016的含量 色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇水冰乙酸=40:57: 3为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低
于3000;
对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品适量，加甲醇制成每lml含芦丁 75jLig的溶
液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75ml甲醇，称定重量，超声 处理40分钟，超声功率50W，频率25KHz，放置至25'C，再称定重 量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l(Hil，注入液相色谱 仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 <:27^()016计，不得少于0.95mg; 用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁-
供试品溶液的制备
取本品20片，除去包衣，加20ml的甲醇，超声处理10分钟， 滤过，滤液浓缩至7.5ml,作为供试品溶液；对照品溶液的制备
称取芦丁对照品，加甲醇制成每lml含芦丁 lmg的溶液，作为 对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各15|J，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以展开剂乙酸乙酯甲酸水=10: 1.5: 1.5上层溶液展开， 取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下 检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的 荧光斑点。
本实施例中用高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3oO,6的 含量的色谱条件，还可以是以甲醇水磷酸=40:57.5: 2.5为流动相；
本实施例中用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，显色反 应中喷以10%硫酸乙醇溶液或者喷以1%亚硝酸钠溶液，加热至斑点
显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位
置上，显相同颜色的斑点；
本实施例中用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁中，展开剂 还可以是二氯甲烷甲醇甲酸=25: 7.5: 1.5或乙酸乙酯丁酮 甲酸水=12: 8: 1.5: 3上层溶液。
实施例4
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层 色谱法鉴别其中的一种成分；
用高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3Q016的含量色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水:冰乙酸=10: 89:1 为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低 于3000;
对照品溶液的制备
精密称取戸丁对照品适量，加乙醇制成每lml含芦丁 25pg的溶
液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml乙醇，称定重量，超声 处理20分钟，超声功率200W，频率75KHz，放置至18°C，再称定 重量，用乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lpl，注入液相色谱仪， 测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 C27H3。0,6计，不得少于0.95mg; 用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁
供试品溶液的制备
取本品20片，除去包衣，加10ml的乙醇，超声处理20分钟， 滤过，滤液浓縮至2.5ml,作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取芦丁对照品，加乙醇制成每lml含芦丁 3mg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以展开剂乙酸乙酯:甲酸:水=6: 0.5: 0.5上层溶液展开，取出， 晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑 占。
"\、 o
实施例5
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层 色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3Q016的含量 色谱条件
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇水冰乙酸=25:73:2 为流动相；检测波长为276nm士2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低
于3000;
对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品适量，加乙醇制成每lml含芦丁 50吗的溶
液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50ml乙醇，称定重量，超声 处理30分钟，超声功率120W，频率50KHz，放置至2rC，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5jxl，注入液相色谱仪， 测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 <:27113()016计，不得少于0.95mg;
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁 供试品溶液的制备
取本品20片，除去包衣，加15ml的乙醇，超声处理15分钟， 滤过，滤液浓縮至5ml,作为供试品溶液； 对照品溶液的制备
称取芦丁对照品，加乙醇制成每lml含芦丁 2mg的溶液，作为 对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各lOpl，分别点于同一硅胶G薄
层板上，以乙酸乙酯甲酸水=8: 1: 1的上层溶液为展开剂，展
开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光 灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点； 实施例6
包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层 色谱法鉴别其中的一种成分；
高效液相色谱法测定该药物中芦丁 C27H3Q016的含量色谱条件-
以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以甲醇水冰乙酸=40:57: 3为流动相；检测波长为276nm士2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低 于3000;
对照品溶液的制备
精密称取芦丁对照品适量，加乙醇制成每lml含芦丁 75吗的溶
液；
供试品溶液的制备
取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75ml乙醇，称定重量，超声 处理40分钟，超声功率50W，频率25KHz，放置至25X:，再称定重 量，用乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；
含量测定方法-
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各iow，注入液相色谱
仪，测定芦丁含量；
该药物每片含槐花以芦丁 <:27113()016计，不得少于0.95mg;
用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁
供试品溶液的制备
取本品20片，除去包衣，加20ml的乙醇，超声处理10分钟， 滤过，滤液浓縮至7.5ml，作为供试品溶液；
对照品溶液的制备
称取芦丁对照品，加乙醇制成每lml含芦丁 lmg的溶液，作为对照品溶液；
薄层色谱法试验
吸取供试品溶液和对照品溶液各15^1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以展开剂乙酸乙酯甲酸水=10: 1.5: 1.5上层溶液展开，
取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下 检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的 荧光斑点。
权利要求
1、一种肾复康片的质量控制方法，其特征在于包括用高效液相色谱法测定所述药物的一种成分的含量；用薄层色谱法鉴别其中的一种成分；高效液相色谱法测定该药物中芦丁C27H30O16的含量色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰乙酸＝10-40∶57-89∶1-3或甲醇∶水∶磷酸＝10-40∶57-89∶0.2-2.5为流动相；检测波长为276nm±2nm，理论板数按芦丁峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品适量，加甲醇或乙醇制成每1ml含芦丁25μg-75μg的溶液；供试品溶液的制备取本品10片，除去包衣后，精密称定药物重量，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25ml-75ml甲醇或乙醇，称定重量，超声处理20-40分钟，超声功率50-200W，频率25-75KHz，放置至18～25℃，再称定重量，用甲醇或乙醇补足减失的重量，滤过，取滤液，即得；含量测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl-10μl，注入液相色谱仪，测定芦丁含量；该药物每片含槐花以芦丁C27H30O16计，不得少于0.95mg；用薄层色谱法鉴别槐花的主要成分芦丁供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，加l0ml-20ml的甲醇或乙醇，超声处理10-20分钟，滤过，滤液浓缩至2.5ml-7.5ml，作为供试品溶液；对照品溶液的制备称取芦丁对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml含芦丁1mg-3mg的溶液，作为对照品溶液；薄层色谱法试验吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl-15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，待挥干后，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2、 根据权利要求1所述的肾复康片的质量控制方法，其特征在 于显色反应中喷以10%硫酸乙醇溶液或者喷以1%亚硝酸钠溶液， 加热至斑点显色清晰，在日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色 谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3、 根据权利要求1所述的肾复康片的质量控制方法，其特征在于展开剂是二氯甲烷甲醇甲酸=15-25: 2.5-7.5: 0.5-1.5或乙酸 乙酯甲酸水=6-10: 0.5-1.5: 0.5-1.5上层溶液或乙酸乙酯:丁酮 甲酸水=8-12: 4-8: 0.5-1.5: 1-3上层溶液。
全文摘要
本发明涉及一种肾复康片的质量控制方法，属于中药技术领域，尤其是指中药制剂中成份含量测定和鉴别方法。包括用高效液相色谱法测定该药物中芦丁C₂₇H₃₀O₁₆的含量；用薄层色谱法鉴别其中的槐花的主要成分芦丁成分。优点是建立了该药物先进的质量控制方法，建立了药物的鉴别项目和含量测定项目及其检测方法，对药物中主药槐花药味进行了薄层色谱法鉴别，采用高效液相色谱法测定该药物中的芦丁的含量，保证了药物质量控制方法的准确性和先进性，能够有效地控制该药物的产品质量。
文档编号G01N30/36GK101601821SQ20091006725
公开日2009年12月16日 申请日期2009年7月8日 优先权日2009年7月8日
发明者刘同彦, 夏国凤, 宏 李, 苹 李, 柳洪峰, 袁家升, 许家洁, 陈志国 申请人:吉林敖东集团力源制药股份有限公司