专利名称：：调经活血胶囊的质量检测方法
技术领域：
：本发明属于中药制剂的质量控制领域，特别涉及调经活血胶囊的质量检测方法。
背景技术：
：调经活血胶囊是由木香41.67g、川芎41.67g、延胡索(醋制)41.67g、当归125.0g、熟地黄83.33g、赤芍83.33g、红花62.5g、乌药62.5g、白术62.5g、丹参125.Og、香附(制)125.Og、菟丝子166.67g、泽兰125.Og、鸡血藤125.Og、吴茱萸(甘草水制)20.83g。以上十五味，将木香、川芎、延胡索及当归83.33g粉碎成细粉，备用。将当归41.67g与熟地黄等十一味分别加6倍、4倍量水煎煮两次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮成相对密度为1.051.15(70°C)的清膏，喷雾干燥，所得喷雾粉与上述细粉混匀，制粒，干燥，粉碎，装入胶囊，制成IOOO粒，每粒装O.38g，包装，即得。系由已有国家药品标准的药品"调经活血片"改剂型而得，现有的"调经活血片"质量标准仅对延胡索、木香进进行鉴别，且无含量测定，无法对质量实施有效控制。
发明内容本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种方法稳定、重现性好、有利于对产品质量进行控制的调经活血胶囊的质量检测方法。本发明的一种调经活血胶囊的质量检测方法，包括如下步骤(1)鉴别:a、取本品内容物，置显微镜下观察螺纹导管823iim，有的加厚壁互相连接，似网状螺纹导管。薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲，有的连珠状增厚，纹孔细密。b、取本品内容物4g，加氨水3ml使湿润，再加甲苯10ml，冷浸24h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲苯lml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品适量，加乙醇制成每lml中含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10iU、对照品溶液2iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺(5:3:0.5:o.os)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸汽中熏，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。c、取本品内容物4g，加二氯甲烷10ml，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液。再取木香烃内酯对照品适量，加二氯甲烷制成每lml含O.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各510iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-环己烷(5:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。d、取本品内容物4g，加乙醇30ml，超声处理(功率250W，频率34KHZ)1小时，放冷至室温，滤过，滤液挥干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上挥干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取赤芍对照药材lg，同法制得对照药材溶液；再取芍药苷对照品适量，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各25ia，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。a、色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(25:75)为流动相；检测波长为230nm;流速为1.Oml/min;柱温为25°C。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。b、对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含50iig的溶液，即得。c、供试品溶液的制备取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。d、测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ii1，注入液相色谱仪，测定，即得。上述的调经活血胶囊的质量检测方法，其中本品每粒含赤芍以芍药苷(C23H28On)计，不得少于O.55mg。上述的调经活血胶囊的质量检测方法，其中还可设检查步骤应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IL)。本发明与现有技术相比，具有明显的有益效果，由以上技术方案可知同时对调经活血胶囊中延胡索、木香、赤芍同时进行鉴别，经多比样品实验，该方法稳定、重现性好，且阴性无干扰。通过色谱条件选择、供试品溶液的制备选择、系统适用性、线性关系、精密度、样品稳定性、样品重现性、样品加样回收率、样品测定等试验选择芍药苷为含量测定成份、并确定含量测定方法，使得调经活血胶囊质量更容易控制。具体实施例方式以下通过试验例来进一步说明本发明方法的有益效果。—、鉴别1.鉴别1.1仪器、对照品、对照药材、试剂和试药仪器BYCDE薄层自动铺板器；电子天平(万分之一)BS-210S型。试剂二氯甲烷、氨水、乙醇、甲苯、正己烷、甲醇、二乙胺、碘、醋酸乙酯、石油醚(6090°C)、香草醛、硫酸、丙酮、石油醚(3060°C)、正丁醇、甲酸、乙醚、冰醋酸、三乙胺、环己烷均为分析纯。对照品延胡索乙素对照品(批号110726-200409)、木香烃内酯对照品(批号11524-200402)、芍药苷对照品(批号110736-200320)、熊果酸对照品(批号110742-200415)均由中国药品生物制品检定所提供。对照药材红花对照药材(批号120907-200408)、吴茱萸对照药材(批号120909-200307)香附对照药材(批号121059-200404)、乌药对照药材(批号121096-200402)、白术对照药材(批号120925-200407)、当归对照药材(批号120929-200512)川芎对照药材(批号120918-200507)均由中国药品生物制品检定所提供。熟地黄药材、木香药材、赤芍药材、鸡血藤药材、丹参药材，经鉴定合格作为对照药材使用，由贵阳新天药业股份有限公司提供。试药调经活血胶囊由贵阳新天药业股份有限公司提供。1.2鉴别本鉴别为显微鉴别参照调经活血片及2005版《中国药典》一部附录IIC药材及成方制剂显微鉴别法进行鉴别。取本品内容物研细，置显微镜下观察螺纹导管823iim，有的加厚壁互相连接，似网状螺纹导管。薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。木纤维长梭形，直径1624iim，壁稍厚，纹孔口横裂缝状、十字状或人字状。厚壁组织碎片绿黄色，细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲，有的连珠状增厚，纹孔细密。经过三批中试样品显微鉴别试验，均未观察到调经活血片质量标准鉴别(1)中所描述的"木纤维长梭形，直径1624ym，壁稍厚，纹孔口横裂缝状、十字状或人字状。厚壁组织碎片绿黄色"，其余显微特征明显，故将其列入质量标准草案正文。1.3鉴别本鉴别为延胡索薄层鉴别。1.3.1提取条件的选择参照调经活血片质量标准鉴别(2)。调经活血片质量标准鉴别(2)中提取溶剂为苯，而苯对人体伤害较大，因此将苯换成甲苯。其提取条件为取本品内容物4g，加氨水3ml使湿润，再加甲苯10ml，冷浸24h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲苯lml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品适量，加乙醇制成每lml中含lmg的对照品溶液。经过试验，该方法分离效果较好，故列入正文。1.3.2吸附剂的选择参照调经活血片质量标准鉴别(2)，选用硅胶G为吸附剂分离效果较好，故将其列入正文。1.3.3展开剂和显色条件的选择a、参照调经活血片质量标准鉴别(2)，以正己烷-三氯甲烷-甲醇-二乙胺(io:6:i:i滴)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏，在紫外灯下检视，结果主斑点不能完全分开，且用苯、氯仿作为展开剂，对人体伤害较大，故对此展开糸统进行了调整，将苯换为甲苯、将氯仿换为二氯甲烷。b、以正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺(5:3:0.5:i滴)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸气中熏。结果各斑点之间分离效果好，且阴性对照无干扰，因此将该展开剂和显色条件列入正文。综上所述，确定了正文的延胡索TLC检查方法，经3批中试样品试验，该方法稳定、重现性好，且阴性无干扰。1.4鉴别本鉴别为方中木香的薄层鉴别。1.4.1提取条件的选择取本品内容物4g，加二氯甲烷10ml，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，滤6过，取续滤液，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液；再取木香烃内酯对照品适量，加二氯甲烷制成每lml含0.5mg的对照品溶液。经过试验，该方法分离效果较好，故列入正文。1.4.2吸附剂的选择采用羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板进行分离，效果较好，故将其列入正文。1.4.3展开剂和显色条件的选择以二氯甲烷-环己烷(5:l)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。结果各斑点之间分离效果好，且阴性对照无扰，因此将该展开剂和显色条件列入正文。综上所述，确定了正文的木香TLC检查方法，经3批中试样品试验，该方法稳定、重现性好，且阴性无干扰。1.5鉴别本鉴别为方中赤芍的薄层鉴别。1.5.1提取条件的选择取本品内容物4g，加乙醇30ml，超声处理(功率250W，频率34KHZ)lh，放冷至室温，滤过，滤液挥干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏中，用水饱和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上挥干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取赤芍对照药材lg，同法制得对照药材溶液；再取芍药苷对照品适量，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。经过试验，该方法分离效果较好，故将其列入正文。1.5.2吸附剂的选择采用羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G板进行分离，效果较好，故将其列入正文。1.5.3展开剂和显色条件的选择二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:o.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。结果各斑点之间分离效果好，且阴性对照无干扰，因此将该展开剂和显色剂列入正文。综上所述，确定了正文的赤芍TLC检查方法，经3批中试样品试验，该方法稳定、重现性好，且阴性无干扰。除此之外，还对方中当归、红花、丹参、泽兰、川芎、熟地黄、乌药、香附、鸡血藤、白术、吴茱萸、进行了TLC鉴别，结果方法不可行，所以未列入质量标准草案正文。二、检查1.1—般检查2.1.l装量差异按(中国药典2005年版一部附录IL)胶囊剂项下规定，装量差异限度应在标示装量(或平均装量)的±10%以内，超出装量差异限度的不得多于2粒，并不得有l粒超出限度l倍。依法检查，结果均符合规定。2.1.2崩解时限按(中国药典2005年版一部附录XI1A)崩解时限检查法规定，各粒应在30分钟内全部崩解。依法检查，结果均符合规定。2.1.3微生物限度检查按《中国药典》2005年版一部"微生物限度标准"规定，胶囊剂细菌数每1克不得过10000个，霉菌、酵母菌数每1克不得超过100个，大肠埃希菌每1克不得检出，大肠菌群每1克小于100个，活螨不得检出。本制剂检测结果均符合规定。2.2重金属及砷盐检查2.2.1重金属检查按《中国药典》2005版一部附录IXE重金属检查法第二法检查。结果小于百万分之十。2.2.2砷盐检查按《中国药典》2005版一部附录IXF砷盐检查法第一法检查。结果小于百万分之二。根据以上的检验结果，说明本品中重金属、砷盐的含量都很低，且都符合规定，因此不列入质量标准草案。三、含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VID)测定。3.1仪器、对照品、试剂和试药3.1.1仪器Agilent1100型高效液相色谱仪、VWD检测器、Agilent化学工作站；超声波清洗器CX-250型(频率29-34KHz，功率250W，北京医疗设备二厂)；电子天平(万分之一)BS-210S型(塞多利斯公司)；电子天平(十万分之一)AE240型(Mettler公司)；岛津2500紫外扫描仪。3.1.2对照品芍药苷对照品(批号110736-200320)供含量测定用，购于中国药品生物制品检定所。3.1.3试剂甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水。3.1.4试药调经活血胶囊样品由贵阳新天药业股份有限公司提供。3.2对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品12.5mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取lml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每lml含50.Oiig的溶液。3.3色谱条件试验色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(EliteHypers250mmX4.6mm，5ym)流速1.0ml/min柱温25。C检测波长230nm3.3.l流动相的选择取本品内容物O.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。以甲醇-水(25:75)为流动相，分别精密吸取对照品溶液(C=50.Oiig/ml)和供试品溶液各lOia，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果从供试品图谱中可以看出，芍药苷峰与其它峰之间有良好的分离，且峰形好、柱效高，表明该流动相及相关色谱条件可作为本实验的色谱条件。3.4供试品溶液的制备选择方法l:取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。方法2:取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率34KHZ)45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。方法3:取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定8重量，超声处理(功率250W，频率34KHZ)1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。方法4:取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分别精密吸取对照品溶液(C=50.0iig/ml)和4个供试品溶液各10y1，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表1。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结论从以上试验结果可以看出，各方法中，芍药苷峰与其它峰之间均有良好的分离，方法1、2含量较低，方法4含量最高，综合考虑故将方法4列入正文，即为取本品内容物O.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声处理(功率250W，频率34KHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。3.5系统适用性试验取本品内容物O.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声(功率250W，频率34KHZ)处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取阴性样品同法制成阴性样品溶液。精密吸取对照品溶液(50.0iig/ml)、阴性样品溶液和供试品溶液各10ii1注入液相色谱仪，记录色谱图。从色谱图中可看出，供试品在与对照品保留时间相应的位置上有峰，且峰形好，而阴性样品在相应的位置上无峰，说明阴性样品对样品测定无干扰。样品在图谱中的芍药苷峰的理论板数为4500，与其它物质有良好的分离，峰形好，综合考虑，规定本实验的理论塔板数按芍药苷峰计算，应不得低于3000。3.6线性关系试验对照品贮备液的制备精密称取芍药苷对照品12.50mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每lml含0.50mg的溶液。对照品溶液①精密吸取上述对照品贮备液lml置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每lml含10.0iig的溶液。对照品溶液②精密吸取上述对照品贮备液lml置20ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每lml含25.Oiig的溶液。对照品溶液③精密吸取上述对照品贮备液2ml置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每lml含40.Oiig的溶液。对照品溶液④精密吸取上述对照品贮备液lml置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含50.0iig的溶液。对照品溶液⑤精密吸取上述对照品贮备液2ml置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含100.0g的溶液。精密吸取上述5个对照品溶液各10ia，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果表2。表2序号12345对照品溶液浓度(ug/ml)10.025.040.050.0100.0峰面积136.64156353.08981561.16827705.785951387.72986以峰面积为纵坐标，以浓度(mg/ml)为横坐标作线性关系图得线性方程Y=13.873x+4.5912R=0.9999拟合过原点的直线方程为Y=13.943xR=0.9999将对照品峰面积代入上述两式计算，相对标准偏差小于1.0%，故可认为标准曲线过原点，回归方程截距为零，由此含量测定可采用外标一点法计算。对照品溶液浓度在10.0iig/ml100.0iig/ml之间线性关系良好。3.7精密度试验精密吸取芍药苷对照品溶液(C=50.0g/ml)10y1，注入液相色谱仪，连续进样5次，记录色谱图，结果见表3:表3序号12345峰面积709.85071711.53357701.44183718.21570709.64862平均峰面积710.1381RSD0.8%实验结果表明，该方法有良好的精密度。3.8样品稳定性试验取本品内容物约0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声(功率240W，频率45KHZ)处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.45iim)滤过，取续滤液，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液(浓度为50.Oiig/ml)和供试品溶液各10ia，注入液相色谱仪，记录色谱图，并在供试品溶液放置0、1、2、4、12小时后，精密吸取供试品溶液10iU进样测定，记录色谱图，结果见表4:表410<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>1.1%从上述试验结果得出，供试品溶液在12小时内稳定性良好。3.9样品重复性试验取本品内容物0.7g，精密称定(平行称取5份)，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声(功率240W，频率45KHZ)处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液(浓度为50.0iig/ml)和五份供试品溶液各10ii1进样测定，结果见表5:表5序<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>通过上述试验结果得出，该方法的样品重现性好。3.IO样品加样回收率试验取本品内容物约(批号20051201)0.35g，精密称定(平行样6份)，精密加入芍药苷甲醇溶液(C=0.50mg/ml)lml，再精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声(功率240W，频率45KHZ)处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。分别精密吸取芍药苷对照品溶液(C=50.0iig/ml)及上述6份供试品溶液各10iU，分别进样测定，结果见表6:M测得总量一M样品中含芍药苷量回收率(％)=-x100%M对照品加入量表6编号123456称样量(g)0.34730.33900.33320.33910.34750.3373样品含量(mg/g)1.67加入芍药苷对照品的量(mg)0.5对照品峰面积709.14014供试品峰面积588.62726580.65985576.25055580.51697588.21301579.22455回收率(％)99.8198.6799.9499.5899.6099.71平均回收率(％)99.7RSD%0.14从上述实验结果得出，该方法有良好的回收率。3.ll样品测定三批中试样品含量测定结果见表7:表7批号含量1(mg/粒)含量2(mg/粒)平均含量(mg/粒)200512010.650.660.66200512020.670.680.68200512030.680.670.68含量限度计算公式赤芍药材中芍药芬最低含量x赤芍药材处方量x1000-x44.47%IOOO粒根据上述计算公式计算结果为0.56mg，因此规定本品每粒含赤芍以芍药苷(C23H28On)计，不得少于0.55mg。实施例—种调经活血胶囊的质量检测方法，包括如下步骤(1)鉴别:a、取本品内容物，置显微镜下观察螺纹导管823iim，有的加厚壁互相连接，似网状螺纹导管。薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲，有的连珠状增厚，纹孔细密。b、取本品内容物4g，加氨水3ml使湿润，再加甲苯10ml，冷浸24h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲苯lml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品适量，加乙醇制成每lml中含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10iU、对照品溶液2iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺(5:3:0.5:0.05)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸汽中熏，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。c、取本品内容物4g，加二氯甲烷10ml，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液。再取木香烃内酯对照品适量，加二氯甲烷制成每lml含O.5mg的对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各510iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-环己烷(5:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。d、取本品内容物4g，加乙醇30ml，超声处理(功率250W，频率34KHZ)1小时，放冷至室温，滤过，滤液挥干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上挥干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取赤芍对照药材lg，同法制得对照药材溶液；再取芍药苷对照品适量，加乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各25ia，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:io:0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)含量测定应符合胶囊剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IL)。(3)照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。a、色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇_水(25:75)为流动相；检测波长为230nm;流速为1.Oml/min;柱温为25°C。理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000。b、对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含50iig的溶液，即得。c、供试品溶液的制备取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，超声处理(功率250W，频率34KHZ)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。d、测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每粒含赤芍以芍药苷(C23H28On)计，不得少于O.55mg。权利要求一种调经活血胶囊的质量检测方法，包括如下步骤(1)鉴别a、取本品内容物，置显微镜下观察螺纹导管8～23μm，有的加厚壁互相连接，似网状螺纹导管；薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理；细胞类多角形或略延长，壁稍弯曲，有的连珠状增厚，纹孔细密；b、取本品内容物4g，加氨水3ml使湿润，再加甲苯10ml，冷浸24h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲苯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取延胡索乙素对照品适量，加乙醇制成每1ml中含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比5∶3∶0.5∶0.05的正己烷-二氯甲烷-甲醇-二乙胺为展开剂，展开，取出，晾干，置碘蒸汽中熏，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；c、取本品内容物4g，加二氯甲烷10ml，功率250W、频率34KHZ超声处理30分钟，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取木香对照药材0.5g，同法制得对照药材溶液；再取木香烃内酯对照品适量，加二氯甲烷制成每1ml含0.5mg的对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比的5∶1二氯甲烷-环己烷为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；d、取本品内容物4g，加乙醇30ml，功率250W、频率34KHZ超声处理1小时，放冷至室温，滤过，滤液挥干，残渣加水20ml使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，置水浴上挥干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取赤芍对照药材1g，同法制得对照药材溶液；再取芍药苷对照品适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2～5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比40∶5∶10∶0.2的二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)含量测定照高效液相色谱法测定；a、色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比的25∶75甲醇-水为流动相；检测波长为230nm；流速为1.0ml/min；柱温为25℃；理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000；b、对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品内容物0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，放置1小时，功率250W，频率34KHZ超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。2.如权利要求l所述的调经活血胶囊的质量检测方法，其中本品每粒含赤芍以芍药苷计，不得少于O.55mg。3.如权利要求2所述的调经活血胶囊的质量检测方法，其中检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定。全文摘要本发明公开了一种调经活血胶囊的质量检测方法，包括如下步骤鉴别延胡索、木香、赤芍TLC检查；含量测定照高效液相色谱法测定；a、色谱条件与系统适用性试验b、对照品溶液的制备c、供试品溶液的制备d、测定法。检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定。本方法稳定、重现性好、有利于对产品质量进行控制。文档编号G01N30/90GK101703656SQ200910102908公开日2010年5月12日申请日期2009年11月30日优先权日2009年11月30日发明者董大伦申请人:贵阳新天药业股份有限公司