专利名称：子痫前期风险的检测的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种评估孕妇发生子痫前期风险的方法。特别地，本发明涉及一种孕妇发生子痫前期风险的早期检测方法。
背景技术：
子痫前期(pre-eclampsia, PE)影响着5%的妊娠初产妇并且在全球每年折磨着大约4百万妇女。在全世界，子痫前期仍是导致孕产妇死亡的主要原因，并且对大量的婴儿发病率和死亡率负有重要责任。此外，子痫前期增加了高血压、冠状动脉疾病、中风和2型糖尿病的风险，对妇女之后的生活健康产生影响。同时子痫前期的确切病因尚未可知，越来越多的证据表明此疾病是复杂的相互作用结果，包括在妊娠早期子宫胎盘动脉的重塑缺陷导致的胎盘灌注不足以及母体对胎盘源触发的反应，涉及脉管系统，连同炎症和氧化应激相 关的凝血过程。子痫前期临床发病前血浆大范围变化，因此引起预测生物标志物鉴定的强烈兴趣。已经提出了数目众多的候选生物标志物来预测疾病，包括胎盘激素类、血管生成因子和脂类。迄今为止，作为对子痫前期风险的早期预测检测，没有出现一个(也没有任何组合物)能满足临床应用所需的特异性和灵敏性。所以，临床医生不能为高危的妊娠初产妇提供有针对性的监控或有效的预防性治疗。本发明的目的就是为了解决至少一个上述问题。
发明内容
申请人:已经确定了一组与孕妇发生子痫前期的早期风险预测有关的代谢物，例如在妊娠大约11-17周时的子痫前期风险预测。此组代谢物如表I所示。申请人已表明表I所示的一种或多种代谢物的丰度发生改变(差别或调整(modulated)丰度)与妇女之后发生(或患有)子痫前期的风险增加相关，特别地选自由下述组的代谢物(此后称为“首选代谢物”)，所述组包括5_羟色氨酸、单糖、癸酰基肉毒碱(decanoylcarnitine)、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid)和/或二十二碳三炔酸(docosatriynoic acid)、Y - 丁内酯和 / 或二氢-3 (2H)-呋喃酮(oxolan-3_one)、2-氧代戍酸和/或氧代甲基丁酸(oxo-methylbutanoic acid)、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn_ 甘油(hexadecenoyl-eicosatetraenoyl-sn-glycerol )、I-憐酸-鞘氨醇、I-憐酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物。因此，本发明涉及怀孕早期在发生常规临床症状前使用一种或多种代谢物，以确定孕妇发生子痫前期风险的手段，或者辅助确定孕妇存在发生子痫前期的风险。表I所示的大多数代谢物，与参考丰度(正常妊娠时的代谢物丰度，即阴性对照)相比丰度增加，这与发生子痫前期风险增加相关，然而对于其中三种代谢物，与参考丰度相比丰度的降低与发生子痫前期风险增加相关。应该理解，可以采用阳性对照作为参考，在这种情况下对于表I所示的大多数代谢物，与参考丰度(发生子痫前期孕妇的代谢物丰度)相比丰度的降低与发生子痫前期风险增加相关，对于其中一种代谢物，与参考丰度相比丰度的增加与发生子痫前期风险增加相关。
表I表I.在发现和验证阶段鉴定的代谢物
权利要求
1.一种用于孕妇发生子痫前期风险的早期检测的试验方法，包含测定取自妊娠11至17周妇女的测试生物样品含量的步骤，以测定至少一种代谢物生物标志物的丰度，所述代谢物生物标志物选自5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y-丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物；其中所述至少一种代谢物生物标志物相对于此所述至少一种代谢物生物标志物的参考丰度的调整丰度与孕妇发生子痫前期的风险相关。
2.根据权利要求I所述的试验方法，其中所述测试生物样品获自妊娠14至16周的妇女。
3.根据权利要求I或2所述的试验方法，其中所述参考丰度为参考生物样品中的代谢物标志物的丰度，所述参考生物样品取自与所述测试生物样品在相同周的妊娠阶段(+/-I周)的受试者，以及，其中所述受试者为顺利妊娠。
4.根据权利要求3所述的试验方法，其中所述顺利妊娠是没有子痫前期的妊娠，或者没有子痫前期和其他任何并发症的妊娠。
5.根据权利要求I所述的试验方法，其中所述参考丰度为取自确实发生子痫前期的受试者的生物样品中的代谢物标志物的丰度。
6.根据上述任何权利要求所述的试验方法，包含测定下列基本全部的生物标志物丰度的步骤并且将所有所述生物标志物的丰度与所述孕妇发生子痫前期的风险关联，其中，所述生物标志物包括5_羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y-丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物。
7.根据上述任何权利要求所述的试验方法，包含测定多个生物标志物的丰度的步骤并且将生物标志物组合的丰度与所述孕妇发生子痫前期的风险关联，所述生物标志物包括5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y -丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物。
8.根据权利要求I至7中的任何一项所述的试验方法，进一步包含检测妇女至少一项临床风险变量的步骤以增加检测的灵敏性和/或特异性。
9.根据权利要求8所述的试验方法，其中所述临床风险变量选自下组，该组包括血压、体重指数、年龄、子痫前期或冠心病的家族史和包括胎儿的生物统计学测量以及脐带和子宫动脉多普勒波形分析的超声参数。
10.根据权利要求8或9所述的试验方法，其中所述试验方法包括将基于生物标志物的预测风险和至少一项临床风险变量与子痫前期的发生的整体风险关联。
11.根据权利要求7所述的试验方法，进一步包括检测包括孕妇的年龄、体重指数和血压的多个临床风险变量的步骤并且将基于生物标志物组合的预测风险和所述年龄、体重指数和血压的风险变量与子痫前期的发生的整体风险相关联的步骤。
12.—种监测子痫前期治疗有效性的试验方法，包括测定表I中的一种或每种代谢物的丰度水平的步骤并且将检测到的所述一种或每种代谢物的丰度水平与所述一种或每种代谢物的参考丰度值关联的步骤，所述代谢物取自被诊断为患有子痫前期并且正在接受治疗的孕妇的生物样品。
13.根据权利要求12所述的试验方法，其中代谢物生物标志物选自由5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y -丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物组成的组。
14.根据权利要求12所述的试验方法，包括测定多个生物标志物的丰度的步骤并且将生物标志物组合的丰度与子痫前期治疗的有效性相关联，其中，所述生物标志物包括5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y -丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物。
15.一种用于孕妇发生高血压疾病风险的早期检测的试验方法，包括对取自妊娠11至17周妇女的测试生物样品进行分析的步骤，以测定一选自表I所示代谢物生物标志物组的丰度，其中相对于所述代谢物生物标志物的参考丰度的所述代谢物生物标志物的调整丰度与妇女发生高血压疾病增加的风险有关。
16.根据权利要求15所述的试验方法，其中高血压疾病选自由子痫、轻度子痫前期、慢性高血压、EPH妊娠中毒症、妊娠高血压、并发子痫前期、HELLP综合征和肾病组成的组。
17.一种治疗或预防孕妇子痫前期的方法，包括在早期妊娠阶段根据任何权利要求I至11的方法检测妇女发生子痫前期风险的步骤，以及，其中当妇女被鉴定为具有发生子痫前期风险时，应用临床干预措施治疗或预防子痫前期。
18.一种用于执行检测孕妇子痫前期风险的方法的系统，所述系统包括 -一测定系统，用于检测取自孕妇样品中的代谢物生物标志物的丰度，所述代谢物生物标志物选自表1，特别地选自5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y - 丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、I-磷酸-鞘氨醇、I-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物； -可选地，一存储系统，用于存储由所述测定系统生成的代谢物丰度数据； -一比较系统，用于将来自所述测定系统的丰度数据与参考丰度数据比较，以提供子痫前期风险的定量评估；以及 -一显示模块，用于显示所述子痫前期的定量评估。
19.根据权利要求18所述的系统，其中所述测定系统包括质谱仪或者液相色谱仪器。
20.一种计算机程序，其中，当在一台计算机上执行时，所述程序使所述计算机能够执行用于早期预测孕妇发生子痫前期风险的方法，所述程序包括用于以下方面的指令 -输入表I中的至少一种代谢物生物标志物的丰度，所述丰度通过对取自妊娠11至17周妇女的测试生物样品进行分析得到； -将所述至少一种代谢物生物标志物的丰度与所述至少一种代谢物生物标志物的参考丰度比较；以及 -基于比较步骤测定子痫前期风险的定量评估。
21.根据权利要求20所述的计算机程序，其中输入选自下述组的至少一种代谢物生物标志物的丰度，所述组包括5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y - 丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、1-磷酸-鞘氨醇、1-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物。
22.根据权利要求20所述的计算机程序，其中输入多种代谢物生物标志物的丰度，所述代谢物生物标志物包括5-羟色氨酸、单糖、癸酰基肉碱、甲基戊二酸和/或已二酸、油酸、二十二碳六烯酸和/或二十二碳三炔酸、Y-丁内酯和/或二氢-3 (2H)-呋喃酮、2-氧代戊酸和/或氧代甲基丁酸、乙酰乙酸、六癸烯酰基-二十碳四烯基-sn-甘油、1-磷酸-鞘氨醇、1-磷酸-二氢鞘氨醇、和维他命D3衍生物。
23.根据权利要求20或21所述的计算机程序，其中测定所述子痫前期风险定量评估的步骤包括使用多元判别PLS-DA模型测定子痫前期的可能性。
24.—种计算机程序记录介质,所述记录介质存储根据权利要求20至23中任何一项的计算机程序。
25.一个计算机程序，包括用于使计算机执行权利要求I至16中任何一项所述的试验方法的程序指令。
全文摘要
本发明提供一种用于孕妇高血压疾病风险的早期预测的方法，所述高血压疾病包括例如子痫、轻度子痫前期、慢性高血压、EPH妊娠中毒症、妊娠高血压、并发子痫前期、HELLP综合征、或肾病。
文档编号G01N33/68GK102893156SQ201080063774
公开日2013年1月23日 申请日期2010年12月21日 优先权日2009年12月21日
发明者L·肯尼, P·牛顿贝克, D·布洛德赫斯特 申请人:爱尔兰国立科克大学