专利名称：一种测定刺梨中砷含量的方法
技术领域：
本发明涉及一种测定刺梨中砷含量的方法，具体涉及一种应用氢化物-原子荧光光度法测定刺梨中砷的方法。
背景技术：
刺梨具有很高的营养价值和医疗价值。其味酸、涩、平；消食健脾，收敛止泄；特别是刺梨富含超氧化物岐化酶(简称SOD)，SOD是国际公认具有抗衰、防癌作用的活性物质，还具有抗病毒、抗辐射的作用，在心血管、消化系统和各种肿瘤疾病防治方面，应用十分广泛。刺梨的果实同时也是加工保健食品的上等原料。砷在自然界分布很广，动物机体、植物中都含有微量的砷。人食用含砷产品或含砷制剂，砷侵入人体后，除了部分从尿液、消化道、唾液、乳腺中排出外，其余蓄积于骨质疏松部、肝、肾、脾、肌肉、头发等部位。砷作用于神经系统，刺激造血器官，长时期的少量侵入人体，对红血球生成有刺激影响，长期接触砷还能引发细胞中毒和毛细管中毒，还有可能引发恶性肿瘤。由于砷对人体的强烈毒性，含砷制剂中砷的含量为人们所重视，而我国目前尚未制定各类中药材及其制剂中重金属的标准检测方法。随着中药现代化建设进程的推进，越来越多的中药被应用并出口国外。为提高传统中药质量，参与国际医学市场竞争，急需建立和完善我国中药产品中砷元素含量分析的标准方法。一般常用的砷检测法有古蔡氏法，比色法、原子吸收分光光度法等，本文建立了氢化物-原子荧光光度法快速测定刺梨中砷的含量。其方法简便、分析速度快，结果准确，可广泛运用于医药卫生领域。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种测定刺梨中砷含量的方法。本发明所述刺梨中砷的含量测定方法是这样的它包括如下步骤①绘制标准曲线制备多个不同浓度的砷标准溶液，并对其分别检测，根据所测得的数据，绘制砷含量与检测结果之间的标准曲线；②制备样品溶液上机检测，得到检测结果；样品溶液同时做空白试验；③将步骤②中的检测结果与所述的标准曲线比对，即得到样品中砷的含量；④上述步骤中所使用的检测仪器为原子荧光光度计。上述步骤①中所述不同浓度砷标准溶液的制备方法为分别吸取IOOppb的砷标准溶液 0. OmL, 0. 5mL, 1. OmL, 2. OmL, 4. OmL, 8. OmL, 12. OmL 于 IOOmL 容量瓶中，分别加入 5mL浓盐酸和IOmLlO%的硫脲溶液，用超纯水定容至IOOmL,摇勻，即得。上述步骤②中所述样品溶液的处理方法为取刺梨，粉碎，精密称定，加入硝酸、高氯酸，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜；置于可调温电热板上，加热至消化完全；当硝酸与高氯酸完全蒸干时，取下冷却至室温；加入浓盐酸，用超纯水转移至容量瓶中，再加入10%的硫脲，用超纯水定容，摇勻，30°C -50°c加热10-60min并冷却至室温，即得。
优选地，前述样品溶液的处理方法为取刺梨，粉碎，过3号筛，取样品0. 5g精密称定，于250mL的锥形瓶中，加入硝酸10mL、高氯酸2. 5mL，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜；置于可调温电热板上，先低于IOOV加热，随着温度的升高，有大量的红棕色气体逸出，当红棕色气体的量减少时提高温度继续消化至大量冒白烟，直至消化完全，当硝酸与高氯酸完全蒸干时，取下冷却至室温；加入2. 5mL浓盐酸，用超纯水转移至50mL容量瓶中，再加入5mL10%的硫脲，用超纯水定容至50mL，摇勻，40°C加热30min并冷却至室温，即得。所述原子荧光光度计检测参数为灯电流80mA，负高压270V，原子化温度200°C，原子化器高度8mm，载气流量700mL/min，读数时间20s，延迟时间k。具体地，所述测定刺梨中砷的方法为采用氢化物-原子荧光光度法；检测参数灯电流80mA，负高压270V，原子化温度200°C，原子化器高度8mm，载气流量700mL/min，读数时间20s，延迟时间k。绘制标准曲线分别吸取IOOppb的砷标准溶液0. OmL, 0. 5mL, 1. OmL, 2. OmL,4. OmL, 8. OmL, 12. OmL于IOOmL容量瓶中，分别加入5mL浓盐酸和IOmLlO %的硫脲溶液，用超纯水定容至IOOmL,摇勻，并对其分别检测，根据所测得的数据，绘制砷含量与检测结果之间的标准曲线；制备样品溶液取刺梨，粉碎，过3号筛，取样品0. 5g精密称定，于250mL的锥形瓶中，加入硝酸10mL、高氯酸2. 5mL，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜；置于可调温电热板上，先低于100V加热，随着温度的升高，有大量的红棕色气体逸出，当红棕色气体的量减少时提高温度继续消化至大量冒白烟，直至消化完全，当硝酸与高氯酸完全蒸干时，取下冷却至室温；加入2. 5mL浓盐酸，用超纯水转移至50mL容量瓶中，再加入5mL10 %的硫脲，用超纯水定容至50mL，摇勻，40°C加热30min并冷却至室温，即得。取样品溶液上机检测，得到检测结果；样品溶液同时做空白试验。测定法选择砷空心阴极灯为光源，以1. 3%的硼氢化钠的氢氧化钠溶液为还原剂，在5%盐酸溶液的条件下进行反应，分别测定对照品及样品的吸收值，均扣除同步操作的空白样品值，按标准曲线法计算样品中砷的含量。所述1.3%的硼氢化钠的氢氧化钠溶液的制备方法为称取15g硼氢化钠，用1200mL0. 2%的氢氧化钠溶液溶解，摇勻，即得。本发明的实验原理为刺梨中的砷经硫脲还原后，完全生成低价的砷，利用还原反应来生成这些元素的氢化物气态组分氢化砷，本发明采用硼氢化钠或硼氢化钾进行氢化反应。其反应原理如下石申3++NaBH4+H20+HCl — NaCl+H2B03+H3 砷个 +H2 个这些气态氢化物组分具有热稳定性较差的特性。原子荧光光度计利用惰性气体作载气，将气态氢化物和过量氢气与载气混合后，导入加热的原子化装置，氢气和氩气在特制火焰装置中燃烧加热，氢化物受热以后迅速分解，被测元素离解为基态原子蒸气，利用激发光源照射一定浓度的砷原子蒸气后，基态原子跃迁到激发态后回到较低能态或基态时会发出原子荧光，通过测定原子荧光即可求得砷在刺梨中的含量。本发明的有益效果在于本发明首次应用原子荧光法测定刺梨中的砷，并对其不同的植物部位子、果、叶等进行了测定；且首次应用原子荧光法进行含量测定方法学研究，确定了线性范围，进行了加样回收试验，消除了刺梨样品的对方法的影响，对该方法的稳定性、精密度和重复性进行了验证和考察，建立的含量测定方法可实现含量在2ppm下的定量测定；特别是对供试液制备的反应时间和温度进行了考察，确定以烘箱45°C，加热30分钟得到供试液，通过稳定性分析测试表明供试液稳定，克服了以往文献中采用室温反应的不确定性，更加规范了反应条件，提高了测定方法稳定性和重现性，本发明所述方法的精密度高，重现性好，达到了发明的目的。
图1为实验例中砷标准曲线示意2为实验例中砷标准溶液稳定性曲线图实验例1 刺梨中的砷含量测定方法研究1.实验前准备1. 1试剂试药IOOOppm砷标准储备液(10% HCl介质，GSB G 62028-90)，国家钢铁材料测试中心
钢铁研究总院； 浓盐酸(优级纯)，硝酸(优级纯)，高氯酸(优级纯)，氢氧化钠(分析纯)，硼氢化钠(分析纯)，硫脲(分析纯)，超纯水(实验室自制)。刺梨13 批(090830、100901、100902、100903、100904、110101、110102、110103、110104、110105、110106、110107、110108)；刺梨子 10 批(090830、100902、110101、110102、110103、110104、110105、110106、110107、110108)；刺梨叶 3 批(090721、091017、091018)。1. 2仪器与参数AF-640型原子荧光光度计(北京瑞利分析仪器公司)；HAF-3型砷空心阴极灯(北京有色金属研究总院)；ML型可调式电热板(天津市泰斯特仪器有限公司)。AL204型电子天平(Mettle-Toledo Group)1. 3实验溶液的制备1. 3. 1 1. 3%硼氢化钠的氢氧化钠溶液的制备称取15g硼氢化钠，用1200mL0. 2%的氢氧化钠溶液溶解，摇勻备用；1. 3. 2 5% HCl溶液的制备用刻度吸管取浓盐酸40mL，加超纯水至800mL，摇勻备用；1. 3. 3 10%硫脲溶液的制备称取硫脲20g，加超纯水溶解至200mL，摇勻备用，次溶液现用现配；1. 3. 4 IOOppb砷标准溶液的制备用移液管取砷标准储备液适量，用超纯水稀释至砷标准溶液的浓度为lOOppb，摇勻备用。1.4样品处理取刺梨，粉碎，过3号筛，取样品0. 5g精密称定，于250mL的锥形瓶中，加入硝酸10mL、高氯酸2. 5mL，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜。次日置于可调温电热板上，先低温档(低于100V)加热，随着温度的升高，有大量的红棕色气体逸出，当红棕色气体的量减少时可以提高温度继续消化至大量冒白烟，以赶尽ΗΝ0(若消化不完全可以补加硝酸，遵循少量多次的原则，直至消化完全。)当消解液完全蒸干时，取下冷却至室温。小心加入2. 5mL浓盐酸，用超纯水转移至50mL容量瓶中，再加入5mL10%的硫脲，超纯水定容至50mL，摇勻，40°C加热30min并冷却至室温后上机測定。样品溶液同时做空白试验。1. 5测定条件通过试验优化得到的測定条件为灯电流80mA，负高压270V，原子化温度200°C， 原子化器高度8mm，载气流量700mL/min，读数时间20s，延迟时间k。測定法选择砷空心阴极灯为光源，以1. 3%的硼氢化钠的氢氧化钠溶液为还原 齐U，在5%盐酸溶液的条件下进行反应，分別测定对照品及样品的吸收值，均扣除同步操作 的空白样品值，按标准曲线法计算样品中砷的含量。2实验方法和结果2.1标准曲线的绘制准确吸取砷标准溶液(IOOppb)O.OmL, 0. 5mL, 1. OmL, 2. OmL, 4. OmL, 8. OmL, 12. OmL 于IOOmL容量瓶中，分別加入5mL浓盐酸和IOmLlO%的硫脲溶液，用超纯水定容至IOOmL, 摇勻，结果见表1 ；绘制标准曲线，见图1。表 权利要求
1.一种测定刺梨中砷的方法，其特征在于，包括如下步骤①绘制标准曲线制备多个不同浓度的砷标准溶液，并对其分别检测，根据所测得的数据，绘制砷含量与检测结果之间的标准曲线；②制备样品溶液上机检测，得到检测结果；样品溶液同时做空白试验；③将步骤②中的检测结果与所述的标准曲线比对，即得到样品中砷的含量；④上述步骤中所使用的检测仪器为原子荧光光度计。
2.如权利要求1所述测定刺梨中砷的方法，其特征在于，所述不同浓度砷标准溶液的制备方法为分别吸取IOOppb的砷标准溶液0. OmL,0. 5mL，1.0mL，2. OmL,4. OmL,8. OmL,·12. OmL于IOOmL容量瓶中，分别加入5mL浓盐酸和IOmLlO %的硫脲溶液，用超纯水定容至IOOmL,摇勻，即得。
3.如权利要求1所述测定刺梨中砷的方法，其特征在于，所述样品溶液的处理方法为取刺梨，粉碎，精密称定，加入硝酸、高氯酸，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜；置于可调温电热板上，加热至消化完全；当硝酸与高氯酸完全蒸干时，取下冷却至室温；加入浓盐酸，用超纯水转移至容量瓶中，再加入10%的硫脲，用超纯水定容，摇勻，30°C -50°c加热10-60min并冷却至室温，即得。
4.如权利要求3所述测定刺梨中砷的方法，其特征在于，所述样品溶液的处理方法为取刺梨，粉碎，过3号筛，取样品0. 5g精密称定，于250mL的锥形瓶中，加入硝酸10mL、高氯酸2. 5mL，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜；置于可调温电热板上，先低于100V加热，随着温度的升高，有大量的红棕色气体逸出，当红棕色气体的量减少时提高温度继续消化至大量冒白烟，直至消化完全，当硝酸与高氯酸完全蒸干时，取下冷却至室温；加入2. 5mL浓盐酸，用超纯水转移至50mL容量瓶中，再加入5mL10 %的硫脲，用超纯水定容至50mL，摇勻，40°C加热30min并冷却至室温，即得。
5.如权利要求1所述测定刺梨中砷的方法，其特征在于，所述原子荧光光度计的检测参数为灯电流80mA，负高压270V，原子化温度200°C，原子化器高度8mm，载气流量700mL/min，读数时间20s，延迟时间k。
6.如权利要求1所述测定刺梨中砷的方法，其特征在于，所述测定方法为采用氢化物-原子荧光光度法；检测参数灯电流80mA，负高压270V，原子化温度200°C，原子化器高度8mm，载气流量700mL/min，读数时间20s，延迟时间k。绘制标准曲线分别吸取IOOppb的砷标准溶液0. OmL,0. 5mL，1.0mL，2. OmL,4. OmL,·8. OmL, 12. OmL于IOOmL容量瓶中，分别加入5mL浓盐酸和IOmLlO %的硫脲溶液，用超纯水定容至IOOmL,摇勻，并对其分别检测，根据所测得的数据，绘制砷含量与检测结果之间的标准曲线；制备样品溶液取刺梨，粉碎，过3号筛，取样品0. 5g精密称定，于250mL的锥形瓶中，加入硝酸10mL、高氯酸2. 5mL，摇动使样品充分接触酸液，静置过夜；置于可调温电热板上，先低于100V加热，随着温度的升高，有大量的红棕色气体逸出，当红棕色气体的量减少时提高温度继续消化至大量冒白烟，直至消化完全，当硝酸与高氯酸完全蒸干时，取下冷却至室温；加入2. 5mL浓盐酸，用超纯水转移至50mL容量瓶中，再加入5mL10 %的硫脲，用超纯水定容至50mL，摇勻，40°C加热30min并冷却至室温，即得。取样品溶液上机检测，得到检测结果；样品溶液同时做空白试验。测定法选择砷空心阴极灯为光源，以1. 3%的硼氢化钠的氢氧化钠溶液为还原剂，在5%盐酸溶液的条件下进行反应，分别测定对照品及样品的吸收值，均扣除同步操作的空白样品值，按标准曲线法计算样品中砷的含量。
7.如权利要求6所述测定刺梨中砷的方法，其特征在于，所述1. 3%的硼氢化钠的氢氧化钠溶液的制备方法为称取15g硼氢化钠，用1200mL 0. 2%的氢氧化钠溶液溶解，摇勻，即得。
全文摘要
本发明公开了一种测定刺梨中砷含量的方法；本发明首次建立了用原子荧光测定刺梨中砷含量的方法，本发明所述方法精密度高，重现性好，且在本发明的检测参数下，灵敏度高，可应用于不同产地的刺梨和刺梨不同部位砷的测定。
文档编号G01N1/28GK102393388SQ20111024928
公开日2012年3月28日 申请日期2011年8月26日 优先权日2011年8月26日
发明者张松, 李慧娟, 江帆 申请人:贵州师范大学