专利名称：一种同时检测养血清脑颗粒中阿魏酸与芍药苷含量的方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及一种同时检测养血清脑颗粒中阿魏酸与芍药苷的 含量测定方法背景技术
养血清脑颗粒是天津天士力制药股份有限公司研制的现代中药制剂，并于1996 年获得国家新药证书，并于1999年被列入国家基本药物目录，2000年被列入国家医保药品 目录。养血清脑颗粒是由当归、川芎、白芍、鸡血藤、决明子、延胡索等11味中药组成，并经 现代高科技手段提取后，加入适当辅料，经混合制粒等制剂过程制成的一种颗粒剂。该制剂 具有有效成分溶出快，生物利用度高等优点。养血清脑颗粒具有养血平肝，活血通络的功 效，可用于血虚肝亢所致的头痛、眩晕眼花、心烦易怒、失眠多梦等病症，在临床上具有显著 的疗效。
当归、川芎同为养血清脑颗粒中君药，两者所含化学成分较为相似(如阿魏酸、挥 发油等)，《中国药典》2010年版中当归、川芎药材含量测定项中，均以阿魏酸为指标成分，而 且阿魏酸有抗血栓、抗血小板凝聚等药理活性，可用于治疗脑血栓，这与本方的功能主治相 符，因此以阿魏酸作为指标成分对养血清脑颗粒进行定量分析，可作为养血清脑颗粒质量 检测的常规方法。
白芍为方中臣药，其主要成分为白芍总苷，其中芍药苷的活性较强，含量较大，因 此对养血清脑颗粒中的芍药苷进行定量分析，亦可以作为养血清脑颗粒质量检测的常规方 法。
但现有技术对测定君药的检测方法操作复杂，精度不高，实际操作过程中容易出 现差错。发明内容
所要解决的技术问题
本发明提供了一种同时检测养血清脑颗粒中阿魏酸与芍药苷的含量测定方法，解 决了目前质量检测中的一些重要技术问题。
技术方案
本发明的养血清脑颗粒其处方如下
主药当归、川芎、白芍、熟地黄、钩藤、鸡血藤、夏枯草、决明子、珍珠母、延胡索、细辛。
辅料为糊精、甜菊素。
本发明提供一种养血清脑颗粒的质量检测方法，包括芍药苷与阿魏酸的含量测定 方法。本发明的含量测定方法采用高效液相色谱法。
本发明的芍药苷与阿魏酸的含量测定方法，包括对照品和供试品溶液的制备步骤 和测定步骤。
本发明的芍药苷与阿魏酸的含量测定方法，其中，对照品溶液的制备方法如下
取芍药苷对照品，加甲醇溶解即得。
取阿魏酸对照品加甲醇溶解即得。
本发明的芍药苷与阿魏酸的含量测定方法，其中，养血清脑颗粒供试样品溶液的制备方法如下
步骤1，取养血清脑颗粒用碱性溶液溶解，优选碳酸氢钠溶液，碳酸氢钠溶液的浓度优选的为O. 1-0. 6%，最优选为O. 2%，此步骤中还可包括超声处理；
步骤2，溶液通过大孔吸附树脂洗脱，优选先用水洗脱，再用甲醇洗脱；优选采用 DlOl型大孔吸附树脂柱(60 80目)；
步骤3，收集甲醇洗脱液。
本发明的芍药苷与阿魏酸的含量测定方法，其中，测定步骤采用高效液相色谱法， 其色谱条件为填充剂优选十八烷基硅胶键合硅胶，所用流动相优选异丙醇-甲醇-5mmol/ L枸橼酸水溶液(2-4 20-22 78-80，优选2 22 78)，所用检测波长为240nm(芍药苷)、324nm(阿魏酸)；柱温30_35°C，优选30°C。理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于 3000，按阿魏酸峰计算应不低于5000。
本发明优选的测定方法见实施例。
上述方法是经过筛选获得的，以下为筛选过程。
1.色谱条件的确定
1.1流动相比例的确定
试验中分别考察了以下流动相配比，见表I。
表I流动相配比考察表
权利要求
1.一种养血清脑颗粒的质量检测方法，其特征在于，包括采用高效液相色谱法测定养血清脑颗粒中芍药苷与阿魏酸的含量，其中操作步骤如下步骤1，对照品溶液和养血清脑颗粒供试品溶液的制备；步骤2，采用高效液相色谱法测定。
2.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，其中，对照品溶液的制备方法如下取芍药苷对照品，加甲醇溶解即得，取阿魏酸对照品加甲醇溶解即得；其中，养血清脑颗粒供试样品溶液的制备方法如下步骤I，取养血清脑颗粒用碱性溶液溶解，步骤2，溶液通过大孔吸附树脂洗脱，步骤3，收集甲醇洗脱液。
3.根据权利要求2的检测方法，其特征在于，其中，步骤I中碱性溶液为浓度为O.1-0. 6%的碳酸氢钠溶液，步骤I中还包括溶解过程中用超声处理。
4.根据权利要求3的检测方法，其特征在于，其中步骤I中碳酸氢钠溶液的浓度为O.2%。
5.根据权利要求2的检测方法，其特征在于，其中步骤2中采用DlOl型大孔吸附树脂柱(60 80目)，先用水洗脱，再用甲醇洗脱。
6.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，其中，测定步骤采用高效液相色谱法， 其色谱条件为填充剂为十八烷基硅胶键合硅胶，流动相为异丙醇-甲醇-5mmol/L枸橼酸水溶液(2-4 20-22 78-80，)，所用检测波长为240nm芍药苷、324nm阿魏酸；柱温 30-35°C，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000，按阿魏酸峰计算应不低于5000。
7.根据权利要求6的检测方法，其特征在于，所用流动相为异丙醇-甲醇-5mmol/L枸橼酸水溶液=2 22 :78，柱温30。。。
8.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤如下色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以异丙醇-甲醇-5mmol/L枸橼酸水溶液(2 : 22 78)为流动相；检测波长为240nm芍药)、324nm阿魏酸；柱温30°C，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000，按阿魏酸峰计算应不低于5000，对照品溶液的制备取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取阿魏酸对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，加 70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取上述芍药苷对照品溶液20ml，及阿魏酸对照品溶液2ml，置同一 IOOml棕色容量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，供试品溶液的制备取本品适量，研细，取约O. 08g，精密称定，置IOml容量瓶中，加入O.2%碳酸氢钠溶液5ml，超声处理5分钟，加在DlOl型大孔吸附树脂柱上，用水5ml洗脱， 弃去洗脱液，再用甲醇9ml洗脱，收集洗脱液于IOml量瓶中加水至刻度，摇勻，过O. 45 μ m 微孔滤膜，即得，测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
9.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤如下色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以异丙醇-甲醇-5mmol/L枸橼酸水溶液(4 20 78)为流动相；检测波长为240nm(芍药苷)、324nm (阿魏酸)；柱温30°C，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000，按阿魏酸峰计算应不低于·5000,对照品溶液的制备取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取阿魏酸对照品约20mg，精密称定，置IOOml棕色容量瓶中，加 70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取上述芍药苷对照品溶液20ml，及阿魏酸对照品溶液2ml，置同一 IOOml棕色容量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，供试品溶液的制备取本品适量，研细，取约O. 08g,精密称定，置IOml容量瓶中，加入O.2%碳酸氢钠溶液5ml，超声处理5分钟，加在DlOl型大孔吸附树脂柱上，用水5ml洗脱， 弃去洗脱液，再用甲醇9ml洗脱，收集洗脱液于IOml量瓶中加水至刻度，摇勻，过O. 45 μ m 微孔滤膜，即得，测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
10.根据权利要求1的检测方法，其特征在于，步骤如下色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以异丙醇-甲醇-5mmol/L枸橼酸水溶液(2 : 22 78)为流动相；检测波长为240nm芍药苷、324nm阿魏酸；柱温35°C，理论塔板数按芍药苷峰计算应不低于3000，按阿魏酸峰计算应不低于5000，对照品溶液的制备取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，取阿魏酸对照品约10mg，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，加 70 %甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取上述芍药苷对照品溶液20ml，及阿魏酸对照品溶液2ml，置同一 IOOml棕色容量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，供试品溶液的制备取本品适量，研细，取约O. 08g，精密称定，置IOml容量瓶中，加入O.2%碳酸氢钠溶液5ml，超声处理10分钟，加在DlOl型大孔吸附树脂柱上，用水5ml洗脱， 弃去洗脱液，再用甲醇9ml洗脱，收集洗脱液于IOml量瓶中加水至刻度，摇勻，过O. 45 μ m 微孔滤膜，即得，测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
全文摘要
本发明涉及医药领域，具体涉及一种同时检测养血清脑颗粒中阿魏酸与芍药苷的含量测定方法本发明所述的质量检测方法，本发明的芍药苷与阿魏酸的含量测定方法，包括对照品和供试品溶液的制备步骤和测定步骤，其中，对照品溶液的制备方法如下取芍药苷对照品，加甲醇溶解即得，取阿魏酸对照品加甲醇溶解即得，其中，养血清脑颗粒供试样品溶液的制备方法如下取养血清脑颗粒用碱性溶液溶解，溶液通过大孔吸附树脂洗脱收集甲醇洗脱液。
文档编号G01N30/28GK102998375SQ20111026907
公开日2013年3月27日 申请日期2011年9月13日 优先权日2011年9月13日
发明者高展, 阚红玉, 曹凤兰, 孙玉侠 申请人:天士力制药集团股份有限公司