生物标志物在评估从动脉高血压向心力衰竭的早期转变中的用途的制作方法

专利名称：生物标志物在评估从动脉高血压向心力衰竭的早期转变中的用途的制作方法
生物标志物在评估从动脉高血压向心力衰竭的早期转变中
的用途本发明涉及预测具有出现心力衰竭的风险因子的个体患心力衰竭的风险的方法。本发明还涉及在具有出现心力衰竭的风险因子的个体中，早期诊断先于左心室肥大(LVH)和/或心力衰竭的心脏的功能性和/或结构性异常。在优选的实施方案中，对象患有高血压和/或糖尿病。在另一个优选的实施方案中，对象患有舒张病症。仍然在另一个优选的实施方案中，对象是女性。特别的是，本发明提供了在显而易见的左心室肥大(LVH)之前(即，通过例如超声心动图或ECG可见的)，预测心力衰竭的风险的方法。此外，本发明还涉及预测此类个体由于存在心脏的功能性和/或结构性异常，而患心力衰竭的风险的方法。本发明还涉及预测女性对象患左心室肥大的方法。此外，本发明还涉及预测此类个体先于心力衰竭，患心血管和肾事件的风险的方法缺血性中风、有害的非致死性中风、心肌缺血/心肌梗塞、动脉瘤、慢性肾衰竭和最终心力衰竭。通过测量至少一种心脏肌钙蛋白的浓度进行诊断。根据具体情况，任选地确定选自⑶F-15和IGFBP7中的另外一种标志物。方法还可以用于决定对个体的可能的治疗，所述个体具有患心力衰竭的风险因子，和/或先于心力衰竭已被诊断为功能性和/或结构性心脏异常，和/或预测具有升高的患心力衰竭的风险。此外，本发明涉及适合进行本发明方法的装置和试剂盒。本发明还涵盖了上述多种标志物用于在具有出现心力衰竭的风险因子的个体中，诊断和/或预测上文提及的健康状态的用途。现代医学的目的是提供个性化的或私人化的治疗方案。这是考虑了患者的个人需求或风险的治疗方案。甚至应该考虑个性化的或私人化的治疗方案来决定潜在治疗方案所
需的工具。心力衰竭(HF)是主要的和日益增长的公共健康问题。据估计，在美国有约5百万HF患者，每年有超过500000名患者首次诊断为HF，并且美国每年有超过50，000名患者死于以HF为主要死因。心力衰竭(HF)是发达国家发病率和死亡率的主要原因之一。由于人群衰老和患心血管疾病的患者寿命越来越长，HF的发病率和流行程度日益增加。对于在HF不可逆的发展或发生主要并发症之前开始恰当的预防性治疗而言，鉴别处于出现HF、缺血性中风、有害的非致死性中风、心肌缺血/心肌梗塞、动脉瘤、慢性肾衰竭和最终心力衰竭的增加的风险的人，和改善早期HF患者的风险分层(根据AHA/ACC分类的阶段A/B)是重要的。心力衰竭是复杂的临床综合症，可以由任何结构性或功能性心脏病症导致，其中所述心脏病症损害了心室血液充盈或射血，以及确保身体对血/氧供应的代谢需求的能力。在上述情况下，身体试图通过以维持所需供应为目标的心肌的结构性改变(例如，纤维化、凋亡、坏死)，来补偿供应的缺失。心肌首先的结构性改变一般是可逆的改变，但当不作处理时，将转变为不可逆的永久性改变，最终导致慢性HF和末期HF的最后阶段。HF分为多个严重程度一种分类是所谓的NYHA (纽约心脏协会)分类。心力衰竭患者被分为NYHA1、I1、III和IV类。患心力衰竭的患者的心包、心肌、冠脉循环或心瓣膜已经经历了结构性和功能性的改变。他不能完全恢复健康，需要治疗性处理。NYHA I类患者没有心血管疾病的任何明显症状，但已经有功能性损伤的客观证据。NYHA II类患者身体活动轻微受限。NYHA III类患者表现出身体活动显著受限。NYHA IV类患者不能毫无不适地进行任何身体活动。他们在静歇状态表现出心功能不全的症状。此功能性分类得到了美国心脏病学学院和美国心脏协会的更新分类的补充(参见 J. Am. Coll. Cardiol. 2001 ；38 ;2101_2113，于 2005 年更新；参见 J. Am. Coll.Cardiol. 2005 ;46 ;el-e82)。定义了 4个阶段A、B、C和D。阶段A和B不是HF，但被认为帮助鉴别出现“真实的’MF之前的患者。阶段A和B的患者的最佳定义是具有出现HF的风险因子的患者。例如，尚未表现出受损的左心室(LV)功能、肥大或几何腔室变形的具有冠状动脉病、高血压或糖尿病的患者将被认为是阶段A，而无症状但表现出LV肥大(LVH，心室壁增厚的现象)和/或受损的LV功能的患者可称为阶段B。阶段C则表示具有与潜在的结构性心脏病相关的、现有或过去的HF症状的患者(大部分的HF患者)，而阶段D是真正难治的HF的患者。动脉高血压对左心室心肌产生增加的张力，表现为僵直和肥大。与其独立的是，由于高血压的原因，在冠状血管中出现动脉粥样硬化。具有高血压的对象患有有害的非致死性中风的风险增加。抗高血压药可以帮助降低有害的非致死性中风的风险。已知患糖尿病的对象患动脉粥样硬化的风险增加。患动脉粥样硬化的对象患缺血性中风的风险增加。抗高血压药可以帮助降低缺血性中风和缺血性心脏病的风险。已发现收缩功能障碍与出现有症状的收缩HF的增加的风险相关。舒张功能障碍被认为是舒张HF的前体。高血压的早期治疗可以改善舒张功能。大量具有左心室功能障碍、收缩和舒张功能障碍的个体仍然是未确诊和未治疗的，尽管早期疗法可能改善治疗结果。未治疗的高血压与出现心力衰竭的增加的风险相关，如果患者存活时间够长则在心力衰竭之前通常有其他的心血管和肾事件高血压或糖尿病导致缺血性中风、有害的非致死性中风、心肌缺血/心肌梗塞、动脉瘤和最终的心力衰竭。持续的高血压是慢性肾衰竭的主要病因。高血压的早期治疗可以帮助阻止疾病发展为多种心血管和肾的死亡风险。一般而言，通过例如超声心动图和多普勒超声成像术诊断HF，然而，这只能允许诊断HF的症状晚期。通过这些已确立的方法，不能诊断患症状发生前形式的HF的个体。低下的诊断是诊断患有HF的个体5年生存率仅为50%的原因之一。目前的治疗对策关注通过早期治疗心肌已经经历了功能性和/或结构性改变的个体来预防HF(即，ACC/AHA阶段C或D)。因此一般而言，这些对象携带了患心力衰竭和其他心血管和肾性疾病的风险因子，并且将要出现(早期阶段)或已经出现(晚期阶段)先于心力衰竭的、并由心肌的功能性和/或结构性改变所导致的功能性和/或结构性心脏异常。一般而言，这些对象被分类为ACC/AHA阶段B(即，将要离开阶段A和将要进入阶段B或已经进入阶段B)。发明的目标因此，迫切需要可用的方法和工具，所述方法和工具允许在患者出现明显的心力衰竭的症状前(例如，ACC/AHA分类中的阶段C或D的典型的对象)，鉴别对象中先于由心肌的功能性和/或结构性改变所导致的心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。优选地，方法和工具应该允许鉴别处于心功能受损早期的对象，即，对象将要出现受损的心脏功能。优选地，对象应该处于这样的阶段，其中患者的心包、心肌、冠脉循环或心瓣膜(例如患者左心室的结构性改变)发生了最小的功能性和/或结构性改变，优选在左心室肥大变得明显之前。优选地，对象应该将要离开ACC/AHA分类的阶段A，并将要进入ACC/AHA分类的阶段B。方法和工具允许鉴别处于出现HF和相关的其他心血管和肾性疾病的增加的风险的对象，改善具有先于心力衰竭的早期功能性和/或结构性心脏异常的患者(根据AHA/ACC分类的阶段A/B)的风险分层，从而在HF的不可逆发展和出现主要并发症之前开始恰当的预防性治疗。方法和工具应该允许对相应的个体/对象作出恰当治疗的早期决定，和监控治疗。在本发明上下文进行的研究中，令人惊讶的发现:确定心脏肌钙蛋白的浓度允许鉴别处于阶段B早期甚至在肥大变得明显前的对象，并因此，允许鉴别这样的对象，所述对象具有患心力衰竭的风险因子并显示左心室的首次结构性改变和/或舒张功能障碍，但尚未患左心室肥大。因此，确定心脏肌钙蛋白允许区分具有左心室的首次结构性改变和/或舒张功能障碍的对象，和没有左心室的首次结构性改变和/或舒张功能障碍的对象。特别的是，确定心脏肌钙蛋白允许鉴别处于阶段B早期的女性。相反，在本发明上下文中进行的研究还显示，NT-前BNP( S卩，用于诊断心力衰竭的普遍已知的标志物)不能鉴别具有左心室的首次结构性改变和/或舒张功能障碍的对象。NT-前BNP仅在具有左心室肥大(LVH)的患者中增加。在没有LVH的患者中，NT-前BNP的水平不增加，因此在左心室质量指数低于用于定义LVH的截止值(cutoff)的患者中NT-前BNP的水平不增加。因此，与NT-前BNP相反，心脏肌钙蛋白是用于诊断先于LVH和心力衰竭(因此是在没有LVH的对象中)的首次功能性和/或结构性心脏异常的有价值的标志物。本发明的发现是有利的，因其允许早期诊断先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的结构性和/或功能性心脏异常。早期的功能性和/或结构性心脏异常和心力衰竭通常仍未确诊，特别是在女性中。心脏的首次结构性改变一般而言是可逆的，但当不作处理时，将转变为不可逆的永久性改变，最终导致慢性HF和末期HF的最后阶段。因此，由于心脏的结构性改变的早期诊断，可以在发展为LVH和/或HF或其他主要并发症出现之前开始恰当的预防性治疗。诊断方法相应的，本发明涉及诊断对象中的功能性和/或结构性心脏异常，通常是心力衰竭的方法，所述方法基于比较至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，以及任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与对照样品中的该标志物或这些标志物的浓度。本发明的方法可以包括下列步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度山)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和0)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量(例如与对照样品中确立的该标志物或这些标志物的浓度)，诊断所述功能性和/或结构性异
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巾o因此，本发明提供了诊断对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和
c)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量，诊断所述功能性和/或结构性异常。一般而言，对象未患心力衰竭，S卩，患者尚未经历对其心肌的永久性的结构性或功能性损害。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这对本领域技术人员是已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象未表现出明显的心力衰竭的迹象和/或症状。最优选的是，对象未表现出LVH。优选地，对象患高血压、糖尿病、肥胖、代谢综合症和/或吸烟史(即，对象具有吸烟史)。在特别优选的实施方案中，对象患高血压和/或糖尿病。优选地，先于心力衰竭和/或左心室肥大的心脏的结构性和/或功能性异常是选自左心室结构性改变、增加的中隔直径、增加的后壁直径和舒张功能障碍的异常。优选的，对象是女性。因此，本发明特别涉及诊断患高血压、糖尿病、肥胖、代谢综合症和/或具有吸烟史的对象中的先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量，诊断所述功能性和/或结构性异常，其中对象优选地没有表现出左心室肥大，且其中先于心力衰竭和/或左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常包含选自左心室结构性改变、增加的中隔直径、增加的后壁直径和舒张功能障碍的异常。区别方法在其他实施方案中，本发明涉及区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象的方法，所述方法基于比较至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与对照样品中的该标志物或这些标志物的浓度。本发明的方法可以包括下列步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度山)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和0)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量(例如，在对照样品中确立的该标志物或这些标志物的浓度)，来评估所述功能性和/或结构性异常因此，本发明提供了区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有先于左心室肥大和/或先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量，区分所述对象(即，仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象)，
一般而言，对象(即，具有风险因子和/或患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体)未患心力衰竭，即，患者尚未经历对其心肌的永久性的结构性或功能性损害，将能够完全恢复健康，且不将他分入ACC/AHA分类的阶段C或D。心力衰竭的风险因子是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象未表现出明显的心力衰竭的迹象和/或症状。最优选的是，对象未表现出LVH。优选地，先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常是选自左心室结构性改变、增加的中隔直径、增加的后壁直径和舒张功能障碍的异常。因此，本发明还涉及区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常的对象的方法，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量，区分所述对象，其中对象优选地没有表现出左心室肥大，且其中先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常包含选自左心室结构性改变、增加的中隔直径、增加的后壁直径和舒张功能障碍的异常。本发明还提供了预测对象患心力衰竭的风险的方法和工具。优选地，对象具有出现心力衰竭的风险因子，且优选地对象分类为阶段A。本发明优选地提供了在明显的左心室肥大(LVH)前，预测心力衰竭的风险的方法和工具。本发明还提供了诊断处于阶段A的将要进入阶段B(ACC/AHA分类)的对象的方法和工具，特别是当左心室肥大不明显(通过例如超声心动图和/或ECG不可鉴别)，且所述对象处于在未来数月或数年内发展出左心室肥大的高风险时。具有风险因子的个体可已经经历了朝向先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常发展的生理性改变，优选是左心室舒张功能障碍或具有保留的左心室射血分数(LVEF)的左心室舒张功能障碍。这些先于心力衰竭的功能性/结构性心脏异常是通过本发明的方法诊断的，将在下文的后续章节中予以更详细的解释。具有风险因子的个体尤其可以在没有明显的LVH的条件下，已经经历了朝向先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常发展的生理性改变，优选是没有LVH的心室的结构性改变，特别是没有LVH的左心室舒张功能障碍，但仍然功能性和/或结构性的破坏心肌、心外膜、瓣膜或冠脉循环。这些在没有明显的LVH的先于心力衰竭的功能性/结构性心脏异常是通过本发明的方法诊断的，将在下文的后续章节中予以更详细的解释。在其他实施方案中，本发明提供了对这些对象分层进行抗高血压药物治疗的方法和工具，特别是作为功能性和/或结构性心脏异常的早期诊断的结果，从而甚至在LVH明显之前(特别是甚至在LVH通过例如超声心动图或ECG可见前)预测心力衰竭。本发明的方法和工具允许以简单直接的方式诊断对象是否患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。特别的是，本发明有利地允许在对象中诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的早期阶段(如下文定义的)，特别是在左心室肥大LVH变得明显之前。因此，本发明还提供了区分出现心力衰竭的风险因子(具有出现心力衰竭的风险因子的对象)和先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法。本发明的方法和工具允许预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险。特别是本发明有利地允许了在左心室肥大(LVH)明显之前预测心力衰竭的风险。作为诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的结果，本发明的其他方法允许了在LVH变得明显之前，对处于心力衰竭风险的对象进行疗法调整。本发明的其他方法包括决定对于已鉴定患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体的疗法的方法，和监控所述治疗的方法。根据以整体研究本申请，这些实施方案是显而易见的。出于清楚的原因，将在后文关于本发明方法的内容中给出本发明的原则(包括优选的实施方案在内)，所述方法之前已经以独立权利要求的形式进行了陈述(诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，和区分具有所述功能性和/或结构性心脏异常的个体和仅具有风险因子的个体)。若无另外指出，这些原则和实施方案也适用于属于本发明的其他方法。通用定义可以将心力衰竭分类为根据纽约心脏协会(NYHA)的功能性分类系统。NYHA I类患者没有明显的心血管疾病症状，但已经具有功能性损伤的客观证据。身体活动未受限，并且日常身体活动不引起过度疲劳、心悸或呼吸困难(呼吸短促)。NYHA II类患者具有轻微的身体活动限制。在静歇时舒适，而日常身体活动导致疲劳、心悸或呼吸困难。NYHA III类患者显示出明显的身体活动限制。在静歇时舒适，而低于日常活动的量就引起疲劳、心悸或呼吸困难。NYHA IV类患者不能在没有不适的条件下进行任何身体活动。在静歇时就表现出心机能不全的症状。心力衰竭，即，受损心脏收缩和/或舒张功能，也可以通过例如，超声心动图、血管造影、闪烁扫描法或磁共振成像确定。此功能性损伤可以伴随上文列举的心力衰竭的症状(NYHA I1-1V类)，但一些患者可以表现出没有显著症状(NYHAI)。本发明指心力衰竭的较新的ACC/AHA分类，参见导言部分，鉴别了 HF综合症发展中涉及的4个阶段。前2个阶段(A和B)明确地不是HF，但却尝试帮助健康护理供应者早期鉴别处于发展HF的风险的患者。阶段A和B患者最好定义为具有明显倾向于向HF发展的风险因子的患者。而阶段C表示具有现有或过去的与潜在的结构性心脏病相关的HF症状的患者，而阶段D指定了具有真正难治的HF的患者，所述患者符合专门的晚期治疗对策的资格，例如机械循环支持、促进体液去除的方法、肌力剂灌注、或心脏移植，或其他创新的或实验性的手术方法，或临终关怀如安养院。该分类承认对于HF发展的确立的风险因子和结构性先决条件，并且甚至在LV功能障碍或症状出现前所导入的治疗性干预可以降低HF的群体发病率和死亡率。多个阶段的定义如下(来自用于评估和管理成人慢性心力衰竭的ACC/AHA指导条例，J. Am. Coll. Cardiol. 2001 ；38 ;2101_2113)。后文包括对阶段的描述和分入相应阶段的个体的病理生理状态的实例。阶段A 描述患者处于出现HF的高风险，因为存在与出现HF强烈相关的病况。此类患者没有被鉴定的心包、心肌、冠脉循环或心瓣膜的结构性或功能性异常，且从未表现出HF的迹象或症状。实M :全身性高血压；冠状动脉病；糖尿病；心脏毒性药物疗法史或酗酒史；风湿热的个人史；心肌症的家族史。阶段B 描述患者已出现了与出现HF强烈相关的结构性心脏病，但从未表现出HF的迹象或症状。实M :左心室肥大或纤维化；左心室扩张或收缩力过低；无症状的瓣膜心脏病；先前的心肌梗塞。阶段C 描述患者具有与潜在的结构性心脏病相关的现有或在先的HF症状。实M :由于左心室收缩功能障碍造成的呼吸困难或疲劳；经历了对在先的HF症状治疗的无症状患者。阶段D:描述患者具有晚期结构性心脏病和在静歇时显著的HF症状(虽然进行了最大程度的医学疗法)，且需要专门的干预。实M:患者频繁的因为HF住院，或不能安全的出院；医院中等待心脏移植的患者；在家接受连续的静脉内支持用于减轻症状的患者或用机械循环辅助装置支持的患者；在管理HF的安养院设施中的患者。上述ACC/AHA阶段A、B、C和D在本发明的上下文中称为“阶段A”，“阶段B”，“阶段C”和“阶段D”。在本发明的上下文中，阶段A的对象是不具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象，其具有与出现心力衰竭典型相关的风险因子，但没有被确定的心包、心肌、心瓣膜或冠脉循环的结构性或功能性异常。阶段B的对象是具有心肌、心外膜、心瓣膜或冠脉循环的功能性和/或结构性损伤的对象，其已出现了与出现HF强烈相关的且通常先于HF的功能性和/或结构性心脏病，但从未表现出HF的迹象或症状。本发明有利地诊断先于心力衰竭(阶段B早期)和甚至先于LVH(阶段B晚期)的功能性和/或结构性心脏异常的早期阶段。本发明还区分先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的早期阶段(阶段B早期)和先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的较晚阶段(阶段B晚期)。先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常在本发明方法的上下文中，应该诊断先于心力衰竭和/或先于左心室肥大前的功能性和/或结构性心脏异常。在本文中使用的术语“异常”优选意在意指“至少一种异常”。因此，在本文所述方法的上下文中，可以诊断一种异常或一种以上的异常。术语“先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常”涉及心肌的若干种病理学状态，所述状态是本领域已知通常发生在心力衰竭之前的(即，通常先于心力衰竭)。就本发明的意义而言，先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常一般是无症状的、先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。在去除潜在的病因或通过训练运动后，先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常可以消失。先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，特别是无症状的、先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，也可以发展为心力衰竭。在本文中使用的术语“先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常”涉及心肌、心外膜、冠脉循环或瓣膜的功能性和/或结构性改变，和/或功能性和/或结构性损伤，并被视为是心脏的功能性异常，和/或心脏的结构性异常。心脏的功能性异常的例子是受损害的泵出或充盈能力，通常是收缩或舒张损伤。心脏的结构性异常的例子是左心室几何形状的改变。通常，当治愈了潜在的病因时(例如，当受恰当的治疗时)，结构性和/或功能性的心脏异常/损伤是可逆的，不会使心肌遗留对于心力衰竭典型的永久性的结构性或功能性伤害(即，分入阶段B的个体可以重新回到阶段A)。具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体没有表现出心力衰竭的迹象(因此优选所述个体是表观健康的)。心力衰竭通常开始于左心室几何形状的改变，潜在地改变收缩和舒张功能(左心室的功能障碍LVD). LVD细分为收缩LVD和舒张LVD。LVD可以发展成左心室肥大(LVH)，其中心室壁增厚。左心室的功能障碍始于对心肌的压力或损伤，一般是进行性的过程，导致LV的几何形状和结构的改变。腔室膨大和/或肥大，变得更接近球形。该过程一般被称为心脏重塑。腔室大小和结构的此改变增加了对(衰竭的)心脏壁的血液动力学压迫，并抑制了心脏的机械性能。此外，这还可以增加通过二尖瓣回流，维持和加剧了重塑过程。心脏重塑通常先于症状出现(可能花费数月或者甚至数年)，在症状出现后持续，并本质地促使症状恶化。冠状动脉病、糖尿病、高血压的发展，或开始心房纤颤也可以促使HF的发展。在本发明方法的上下文中，甚至可以在对象患有左心室肥大之前，诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。因此，本发明的方法允许诊断先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的结构性心脏异常。术语“左心室肥大”是本领域普遍已知的。关于左心室肥大的详细综述可见于例如标准教科书(参见Swamy Curr Cardiol Rep (2010) 12 277-282)。可以通过心电图、超声心动图或心脏磁共振成像(MRI)检测LVH。优选地，通过超声心动图检测LVH。此外，LVH的诊断标准是本领域普遍已知的(Mancia等人，EuropeanHeart J. 2007,28 :1462,Die Innere Medizin Referenzwerk fiir den Facharzt-ffoIfgangGerok-2007，第 293 页，Swamy Curr Cardiol Rep(2010) 12 :277-282)。诊断LVH优选地包括测量中隔直径、左心室后壁厚度和舒张末期直径，和根据本领域已知的公式计算左心室质量。特别优选的LVH诊断标准是例如指导条例中公开的(Mancia 等人，European Heart J. 2007,28 :1462)。优选地使用Cornell电压标准、Cornell乘积标准、Sokolow-Lyon电压标准或Romhilt-Estes 得分系统(Mancia 等人，European Heart J. 2007,28 :1462)。在本文中使用的术语“左心室肥大”(缩写“LVH”)优选地涉及增厚的心室壁。LVH优选地是对慢性增加的心脏工作负荷的应答。LVH可见于患动脉高血压的患者中，是需要治疗的疾病。在本发明的上下文中，功能性和/或结构性心脏异常通常先于左心室肥大和/或心力衰竭。作为对与升高的全身血管阻力相关的增加的后负荷的应答，肥大在一定程度之前是必需且保护性的。超过上述程度，则有多种伴随LVH的功能障碍，包括降低的冠脉血流量、抑制的左心室壁力学和异常的左心室舒张充盈方式。优选的，如果左心室质量与身体表面的比例大于112g/m2，或更优选的，如果上述比例大于125g/m2，则男性对象表现出LVH(及因此优选地患LVH)。优选的，如果左心室质量与身体表面的比例大于89g/m2，或更优选的，如果上述比例大于110g/m2，则女性对象表现出 LVH (及因此优选地患 LVH)。(参见例如，Drazner MH, Dries DL, Peshock RM, CooperRS, Klassen C, Kazi F, Willett D, Victor RG. Left ventricular hypertrophy is moreprevalent in blacks than whites in the general population the Dallas HeartStudy. Hypertension. 2005 ；46 124-129)。在本发明方法的上下文中，术语LVH还可以包括向心性或离心性肥大。已知治疗动脉高血压将导致LVH消退。用抗高血压药治疗已表现出导致LVH消退。伴随消退，通常改善了左心室功能和减少心血管发病率。本发明涉及这样的对象，所述对象已知具有至少一种在本申请别处提及的出现心力衰竭的风险因子，并已经进入了先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的状态。功能性和/或结构性异常可以是先于心力衰竭的早期或晚期的心脏功能性和/或结构性异
堂
巾o在本发明的实施方案中，个体之前已被分入阶段A，并已进入先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B晚期)。在优选的实施方案中，个体将要进入先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)。阶段B因此，本发明的方法允许鉴别患任何功能性和/或结构性心脏异常的个体，所述心脏异常通常先于左心室肥大和通常先于心力衰竭，包括具有阶段B晚期典型的晚期结构性心脏病的个体。已进入先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体，通常通过罹患一种或多种下列已知发展为心力衰竭的结构性心脏异常，而发展为心力衰竭。下面的列表包括心脏功能性和/或结构性异常的早期和晚期阶段。个体优选属于ACC/AHA分类的B类，包括阶段B的早期和晚期阶段收缩和舒张不规则；几何腔室扭曲；左心室扩大；心脏重塑；左心室肥大；向心性肥大、左心室纤维化；左心室收缩力过低；无症状的瓣膜性心脏病；区域性壁运动异常；左心室收缩功能障碍，优选LVEF < 50%;左心室舒张功能障碍(DD)，优选是没有增加的LV舒张末期充盈压的异常松弛的轻度的DD (下降的E/A比例< 0. 75)，或是具有增加的LV舒张末期充盈压的异常松弛的中度或假性DD(E/A0. 75至1. 5，减速时间>140ms，和2种其他的LV舒张末期充盈压升高的多普勒指数)；具有保持的射血分数的心肌功能障碍、6分钟步行测试时心脏功能障碍、用冠脉导管插入术可检测到的心脏功能障碍的DD ;先前的心肌梗塞。优选的，在本文中提及的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常是早期(较早阶段)功能性和/或结构性异常。优选的，早期(较早阶段)功能性和/或结构性心脏异常先于心力衰竭和左心室肥大。在本发明的上下文中，早期阶段的、先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体(优选阶段B早期)一般患至少一种下列功能性和/或结构性心脏异常心肌、心外膜、瓣膜或冠脉循环的功能性和/或结构性损伤；受损害的泵血或充盈能力，通常是收缩或舒张损坏；左心室几何形状改变；与几何腔室扭曲相关的高血压；没有引发左心室肥大或已经出现左心室肥大的，与左心室结构性改变相关的高血压，优选没有肥大的，与中隔直径增加(或中隔扩大)相关的高血压；与后壁直径增加相关的高血压；与向心性增加的心肌扩大相关的高血压；与离心性增加的心肌扩大相关的高血压；具有保持的左心室射血分数(LVEF)，特别是LVEF > 50%的无症状型舒张左心室功能障碍。在优选的实施方案中，先于心力衰竭和/或左心室肥大的心脏的功能性和/或结构性异常是至少一种选自以下的异常 左心室的结构性改变， 中隔直径增加(和/或中隔扩大)，特别是与中隔直径增加(或中隔扩大)相关的高血压， 后壁直径增加，特别是与后壁直径增加相关的高血压，和 舒张功能障碍，特别地具有保持的射血分数。优选的，舒张功能障碍是具有保持的左心室射血分数(LVEF)的无症状型舒张左心室功能障碍，特别是LVEF > 50%。因此，优选的先于心力衰竭和/或左心室肥大的心脏结构性异常选自左心室结构性改变、中隔直径增加(和/或中隔扩大)，和后壁直径增加。因此，优选的先于心力衰竭的心脏功能性异常是舒张功能障碍，特别是具有保持的射血分数的舒张功能障碍。优选的，如果中隔壁厚于11_，则中隔直径是增加的(和/或中隔是扩大的)。更优选的，如果中隔壁的厚度大于11但小于16mm,或最优选的,如果厚度在12至16mm之间，则中隔直径是增加的(和/或中隔是扩大的)。优选的，如果后壁厚于11mm，则后壁直径是增加的。更优选的，如果后壁的厚度大于11但小于16mm,或最优选的,如果厚度在12至16mm之间,则后壁直径是增加的。在本发明的优选的实施方案中，具有早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)的患者显示出下列患心力衰竭的风险因子:吸烟史、肥胖、代谢综合症、I型和2型糖尿病、动脉高血压。因此，对象优选地患高血压、糖尿病、肥胖、代谢综合症和/或吸烟史(以及因此具有吸烟史)。在特别优选的实施方案中，对象患高血压和/或糖尿病。舒张病症在本发明的优选的实施方案中，方法允许诊断具有早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)的个体中的无症状型舒张功能障碍。个体还可以患收缩功能障碍。此外，个体的左心室可患有形态学改变。优选的，患舒张功能障碍的个体未患左心室射血分数LVEF降低(即，个体具有保持的LVEF)。在一个优选的实施方案中，患舒张功能障碍的个体未患收缩功能障碍。特别地，个体未患左心室肥大LVH。在本发明的甚至更优选的实施方案中，具有早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)和患舒张功能障碍的患者，如前述段落所述，表现出至少一种患心力衰竭的下列风险因子:吸烟史、肥胖、代谢综合症、I型和2型糖尿病、动脉高血压，特别是动脉高血压。心力衰竭心力衰竭是可以由任何结构性或功能性的心脏病症导致的病况，所述心脏病症损害了心脏向全身充盈或泵送足量血液的能力。心力衰竭是慢性病；尤其可以在急性心血管事件(如心肌梗塞)之后发生， 或者可以作为例如心肌组织中的炎性或退行性改变的结果发生。
心脏的功能性和/或结构性异常和心力衰竭通常保持未确诊的，特别是当病症被认为是“轻度的”时。然而，具有心力衰竭的患者将不能完全恢复健康。即使使用最佳疗法，心力衰竭仍然具有约10%的每年死亡率。本文中使用的术语“心力衰竭”涉及心脏的受损害的收缩和/或舒张功能，其伴有本领域技术人员已知的心力衰竭的明显迹象。优选的，心力衰竭在本文中还指慢性心力衰竭。根据本发明的心力衰竭包括明显的和/或晚期心力衰竭。在明显的心力衰竭中，对象表现出本领域技术人员已知的心力衰竭症状。本文中使用的术语“心力衰竭”指ACC/AHA分类的阶段C和D ;在上述阶段中，对象表现出典型的心力衰竭症状。即，对象不是表观健康的。具有心力衰竭并分入阶段C或D的对象的心肌已经经历了永久性的、不可逆的结构性和/或功能性改变，作为这些改变的结果，完全恢复健康是不可能的。已经达到ACC/AHA分类的阶段C或者甚至D的对象不能回到阶段B或者甚至A。心肌的永久性的结构性或功能性伤害(所述伤害对于心力衰竭是典型的)是本领域技术人员已知的，包括多种分子上的心脏重塑过程，例如间质纤维化、炎症、浸润、瘢痕形成、凋亡、坏死。由于间质纤维化的更僵硬的心室壁引起舒张功能障碍中的心室充盈不充分。对心肌的永久性的结构性或功能性损伤是由心肌细胞的功能障碍或破坏导致的。肌细胞及其组分可以被炎症或浸润损伤。毒素和药理学活性剂(例如乙醇、可卡因和安非他明)导致细胞内破坏和氧化胁迫。常见的损伤机制是导致梗塞和瘢痕形成的缺血。在心肌梗塞后，死亡的肌细胞被瘢痕组织取代，有害地影响心肌的功能。在超声心动图上，表现为异常的或缺乏的壁运动。HF的表现形式(症状)是呼吸困难、疲劳和体液滞留，其可以导致肺充血和外周性水肿，身体检查的典型迹象是水肿和罗音。尚无HF的单个诊断测试，因为主要地是基于护理史和身体检查的临床诊断。HF的临床综合症可以由心包、心肌、心内膜或大血管的病症导致，但大部分HF患者患有LV心肌功能损害。心力衰竭可以与多种LV功能性异常相关，从例如正常的LV大小和保持的EF，至严重的膨胀和/或显著降低的EF。在大部分患者中，收缩异常和舒张功能障碍共存。具有正常EF的患者可具有不同的自然史(natural history),并可以要求与具有降低的EF的患者不同的对策。伴随LVH的多种收缩和舒张功能变化明显可以发展成充血性心力衰竭(CHF)。可以通过本领域技术人员已知的方法，优选超声心动图，特别是组织多普勒超声心动图(TD)诊断收缩和舒张心力衰竭。一般而言，收缩心力衰竭中明显的是降低的左心室射血分数(LVEF)。在本发明的实施方案中，在本文中的心力衰竭伴有少于50%的左心室射血分数(LVEF)或壁内缩短分数(midwall fractional shortening) (MFS) < 15%。舒张心力衰竭(DHF)被认为是超过50%的全部心力衰竭患者的原因，并被称为具有正常LVEF射血分数的心力衰竭(HFNEF)。诊断HFNEF需要满足下列条件(i)心力衰竭的迹象或症状；(ii)正常或轻度异常的收缩LV功能；(iii)舒张LV功能障碍的证据。正常或轻度异常的收缩LV功能暗示LVEF > 50%和LV舒张末期体积指数(LVEDVI) < 97mL/m2。舒张LV功能障碍优选是通过组织多普勒(TD)诊断的，其中比例E/E' > 15被视为是舒张LV功能障碍的诊断证据(E是早期二尖瓣流速；E’是早期TD伸长速度)。如果TD产生了提示舒张LV功能障碍的E/E'比例(15>E/E' >8)，则需要其他非侵入性研究用于舒张LV功能障碍的诊断证据(例如，侧向二尖瓣环多普勒、二尖瓣或肺静脉多普勒、LV质量指数或左心房体积指数的回声测量、心房纤颤的心电描记证据)。关于舒张LV功能障碍的更详细详细，参考欧洲心脏病学会的心力衰竭和超声心动图协会的诊断具有正常左心室射血分数的心力衰竭的共有声明，European Heart Journal 2007，28，2359-2550。风险因子一般而言，在进行本发明的方法前，诊断各个个体出现心力衰竭的风险因子。风险因子是本领域技术人员已知的，包括高血压；衰老；收缩和舒张高血压；冠状动脉病(CAD);亚临床器官损伤，例如，心脏、脑、肾、血管的损伤；肥胖，优选定义为体重指数BMI <25kg/m2的肥胖；肥胖症；代谢综合症；I型或2型糖尿病，特别是2型糖尿病；具有微白蛋白尿的I型糖尿病；抽烟；血管再生成史；心毒性药物疗法史或酗酒；血脂异常；总胆固醇；总胆固醇/HDL-胆固醇比例；风湿热的个人史；心肌病家族史。应理解上述列举不是详尽的。关于风险因子更详尽的论述可见于2007GuidelineSfor the Management of Arterial Hypertension, European Heart Journal (2007)28,1462-1536中，其关于风险因子的内容，特别是表1、2和3，与

图1，以整体整合到本文中。个体风险因子包含CVD风险和出现致死性动脉粥样硬化事件的风险，可使用自欧洲高血压协会(European Society of Hypertension Scientific Newsletter 2010,11,第48期)获得的SCORE系统计算。根据推荐的基于风险因子的数量和水平的高血压的
ESC评分系统，形成了不同的风险组(低、低-中等......)，并适用相应的疗法。European
Socieyof Hypertension Scientific Newsletter2010, ll,No48 中的公开内容通过引用全文整合到本申请中。术语“亚临床器官损伤”在本文中用于指器官的病理生理性状态(损伤)。术语是本领域技术人员已知的。亚临床器官损伤可由多种原因导致，例如，由上述一种或多种患心力衰竭的风险因子(特别是动脉高血压)导致，不产生临床症状且本领域技术人员在不参考已确立的诊断方法(例如，心脏肥大、低度蛋白尿、脉搏波速度...)的条件下无法识别。关于亚临床器官损伤更详细的定义，可参考European Heart Journal (2007) 28,1462-1536，其关于风险因子的内，特别是3. 6章(包括box7)以整体整合到本文中。应理解，上述列举不是详尽的。此外，各个个体可表现出一种风险因子，或2种，或者甚至更多种风险因子。例如，已知糖尿病一般触发CAD和/或高血压；冠状动脉病(不论是否存在糖尿病)通常导致高血压。如果在个体中没有诊断出先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，患一种或多种如前所述的风险因子且不具有心力衰竭症状(表观健康)的个体一般且优选地分入ACC/AHA阶段A中。重要的是应注意到，标准不是模棱两可的，并且个体的分类可以取决于进行检查的医生而改变。ACC/AHA分类的阶段A (以及阶段B、C和D)的个体的第一分类标准是患者描述(参见上文的ACC/AHA分类定义，选自指导条例的原始出版物)。根据检阅原始出版物可知，风险因子/各个阶段的病理学状态的例子是无法穷举的。这意味着在本发明的上下文中，即使个体所具有的风险因子没有在指导条例中明确指出，该个体仍然一般且优选的分入ACC/AHA分类的阶段A中。在本发明的实施方案中，具有出现心力衰竭的风险因子的个体是在进行根据本发明的方法之前，已经分入ACC/AHA阶段A的个体。分入阶段A的个体可已经经历了向属于ACC/AHA阶段B的病理生理状态发展的生理学改变(即，先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常)。在本发明的上下文中，该状态被称为“先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的早期阶段”(阶段B早期)，并且不同于“先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的晚期阶段”(阶段B晚期)。优选的，个体不表现出明显的心力衰竭症状。甚至更优选的是个体不表现出左心室肥大(即，个体是表观健康的)。由于个体优选地不表现出明显的或显著的心力衰竭迹象，并且更优选地不表现出左心室肥大(即，个体是表观健康的)，在不使用本领域已知的方法(费时费力且高成本)或本发明的方法进行详细诊断的条件下，可能已发生的生理学改变是不可诊断的。优选的，对象患高血压，特别是动脉高血压。在本发明的上下文中，患高血压的个体被称为“高血压个体”。高血压可以是本领域技术人员已知的任何形式的高血压。非限制性实例包括根据指导条例的推荐，由于其心血管风险谱而适合抗高血压药物的对象，以及已经使用抗高血压药物的对象。在该方面,参考2007Guidelines for the Managementof Arterial Hypertension, European Heart Journal(2007)28,1462-1536 和 EuropeanSociety of Hypertension Scientific Newsletter2010，11，No48。在本发明的优选的实施方案中，个体患动脉高血压、收缩和/或舒张高血压。高血压可以伴有一种或多种上述其他的风险因子。因此，具有心力衰竭的风险因子的对象可患有伴有一种或多种上述参考的其他的风险因子的高血压。然而，还考虑所述患者只患高血压。在本发明的另一个优选的实施方案中，个体患糖尿病，特别是2型糖尿病。在仍然另一个优选的实施方案中，个体患肥胖。在仍然另一个优选的实施方案中，个体患代谢综合症。在仍然另一个优选的实施方案中，根据欧洲高血压协会的风险图表，个体具有低、中、高或非常高的风险。一般提供本领域技术人员已知的方法进行风险因子诊断，一般是心脏听诊和/或ECG和/或胸部X射线和/或超声心动图、组织多普勒超声心动图、冠脉导管插入术、测定血压、测定脉搏波速度、测定内膜基质厚度、测定糖尿病、测定代谢综合症、测定体重指数、测定吸烟习惯、测定总胆固醇、测定LDL-胆固醇、测定血糖，和根据欧洲高血压协会的风险图表和根据 Guidelines for the Management of Arterial Hypertension, EuropeanHeart Journal (2007)28,1462-1536 和 European Society of Hypertension ScientificNewsletter2010,11, No48测定心血管风险谱。在优选的实施方案中，上述一个或多个其他的诊断步骤是本发明的一部分，S卩，除利用心脏肌钙蛋白或其变体诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的本发明的方法外，还可以进行上述其他步骤。还可用于本发明的其他方法。因此，本发明涉及诊断对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，所述方法基于通过本领域技术人员已知的方法诊断出现心力衰竭的风险因子，以及此外，比较至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度与对照样品中的此/此些标志物的浓度。本发明的方法可以包括下列步骤:a)通过本领域技术人员已知的方法，诊断出现心力衰竭的风险因子，b)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度；c)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和d)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与相对参照量的此标志物或这些标志物的浓度，例如，与在对照样品中确立的该标志物或这些标志物的浓度，评估所述功能性和/或结构性异常。本发明提供了诊断对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，方法包括步骤:a)通过本领域技术人员已知的一种或多种方法，诊断出现心力衰竭的风险因子，b)测量从个体获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度；c)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和d)通过比较步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量，评估所述功能性和/或结构性异常。本领域技术人员已知的方法如下:心脏听诊和/或ECG和/或胸部X射线和/或超声心动图、组织多普勒超声心动图、冠脉导管插入术、测定血压、测定脉搏波速度、测定内膜基质厚度、测定糖尿病、测定代谢综合症、测定体重指数、测定吸烟习惯、测定总胆固醇、测定LDL-胆固醇、测定血糖，和根据欧洲高血压协会的风险图表和根据Guidelines for the Management of ArterialHypertension, European Heart Journal(2007)28,1462-1536 和 European Society ofHypertension Scientific Newsletter2010,11, No48,测定心血管风险谱。在上述方法中，步骤a)和步骤b)，或步骤a)和步骤b)至d)可以同时(S卩，在相同的时间点)或相继(即，在不同的时间点)进行。在步骤相继进行的情况下，步骤之间的时间间隔的长度不足以允许对象的病理生理学状态改变。根据本发明，心脏肌钙蛋白或其变体(特别是肌钙蛋白T或其变体)的增加的浓度指示先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。对象具有出现心力衰竭的风险因子，并且优选地患有左心室功能障碍(LVD)，更优选舒张左心室功能障碍，甚至更优选地患有具有保持的左心室收缩功能的舒张左心室功能障碍。特别的是，个体未出现LVH(即，LVH是不明显的)。心脏肌钙蛋白的减少的浓度，优选肌钙蛋白T或其变体，或肌钙蛋白I或其变体，特别是肌钙蛋白T或其变体，指示没有心脏病。根据上述内容,肌I丐蛋白T浓度彡(等于或高于)约5.0pg/mL,优选彡约6.0pg/mL,特别是彡约7，0pg/mL是增加的肌I丐蛋白T浓度,其指示先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常，如前述章节中指出的。此外，等于或高于约3.3pg/ml，优选等于或高于约3.5pg/ml的肌钙蛋白T浓度是增加的肌钙蛋白T浓度，其指示先于心力衰竭和/或左心室肥大的的功能性和/或结构性心脏异常。此外,优选地,等于或高于0.2-9.0pg/ml,或更优选地,等于或高于约9pg/ml的肌钙蛋白I浓度是增加的肌钙蛋白I浓度，其提示了先于心力衰竭和/或左心室肥大的的功能性和/或结构性心脏异常。低于上述浓度的心脏肌钙蛋白，优选肌钙蛋白T或I的浓度优选指示了没有先于心力衰竭和/或左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常。
在本发明的上下文中进行的研究中，令人惊讶地发现，心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T的增加是比心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T的量大至少20%，或更优选地大至少30%，其指示了对先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常的诊断。根据对本发明的上下文中使用的术语“减少的”或“增加的”的解释，其优选表示相对于来自一个或多个健康个体/对象的样品中的标志物的量/浓度，增加或减少至少10 %，至少20%，优选至少30%。在属于实施例1描述的第I组至第3组的对象中没有观察到Nt-前BNP相对于参照量增加。在本发明的上下文中进行的研究中，还令人惊讶地发现，在源自女性对象的样品中的心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T的增加是比健康女性对象(或健康女性对象组)的样品中的心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T的量大至少30 %，或更优选地大至少50 %，其指示了对先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常的诊断。如果测量肌I丐蛋白T的量,则作为截断的参考量优选落入2至14pg/ml的范围内。甚至更优选地，作为肌钙蛋白截断的参考量落入3.2至4pg/ml的范围内。可作为截断量的特别优选的肌钙蛋白T参考量，按优选递增次序是3.2、3.4和4.2pg/ml。可作为截断量的肌钙蛋白I的优选的参考量是9.0pg/ml。对象的样品(优选血清或血浆样品)中的心脏肌钙蛋白的量大于参考量，优选指示了对先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常的诊断。对象的样品(优选血清或血浆样品)中的心脏肌钙蛋白的量低于参考量，优选指示了对象没有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常。使用罗氏(Roche)的电化学发光ELISA夹心测试Elecsys Troponin Ths (高灵敏度)STAT (短周转时间)测定，确立上述值，如实施例的“方法”下所述。此外，还发现每种所述生物标志物在统计学上都彼此独立。本发明涉及这样的方法，所述方法允许诊断或评估或评价具有心力衰竭的风险因子的对象是否仅具有风险因子，或所述风险因子是否已经发展为先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。如果没有在个体中诊断出心力衰竭，则患前述的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常并且不具有心力衰竭症状(表面健康的)的个体一般并优选地分入ACC/AHA阶段B中。重要的是应注意上述标准不是模棱两可的，个体分类可以取决于进行检查的医师而改变。ACC/AHA分类的阶段B (以及阶段A、C和D)的个体分类的首要标准是患者描述(参见上文的ACC/AHA分类定义，选自指导条例的原始出版物)。根据检阅原始出版物可知，风险因子/各个阶段的病理学状态的例子是无法详尽的。这意味着根据本发明，即使个体所具有的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常没有在指导条例中明确指出，该个体仍然一般且优选的分入ACC/AHA分类的阶段B中。可以在对象的单个样品或多个样品(例如2、3、4或5个样品)中测量在本发明上下文中测量的蛋白质。样品可以同时获得，或在不同的时间点获得。例如，可以在患者的疗法之前和/或之中和/或之后收集样品。优选地，心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白T或其变体，或肌钙蛋白I或其变体，特别是肌钙蛋白T或其变体。
在本发明的其他实施方案中，除选自心脏肌钙蛋白的标志物以外的、至少一种其他标志物(称为心力衰竭的至少一种另外的标志物)用于本发明的方法中。心力衰竭的至少一种标志物选自GDF-15及其变体，和IGFBP7及其变体。在本发明的实施方案中，心脏肌钙蛋白选自肌钙蛋白T及其变体，和肌钙蛋白I及其变体，特别的是，心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白T或其变体。在本发明的一个实施方案中，测定下列标志物组合心脏肌钙蛋白选自肌钙蛋白T和肌钙蛋白I及其变体，特别地，心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白T或其变体；GDF-15或其变体；和IGFBP7或其变体。术语“诊断”在本文中意指评估、鉴别、评价或分类对象是否患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。术语“诊断”还指区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象，或已经患有或先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象。本领域技术人员了解诊断对象是否患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，或将要出现先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，其中对象被分入ACC/AHA阶段A中。该诊断一般是昂贵、费时并要求医学技能和经验的。评价方法是本领域技术人员已知的，通常基于医疗史，其他评价还包括使用诊断装置/设备进行检查(心脏听诊、ECG、超声心动图、胸部X射线、放射性核素成像、室造影、CT扫描、MRI和/或压迫测试、冠脉造影、超声检查法、冠脉导管插入术)。当需要确定病因时，可以进行其他测试。治疗取决于先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的特定类型和严重程度。例如，通常可以基于体检结果作出左心室肥大的初步诊断。经过听诊器听见的心音通常是特征性的。超声心动图是证实诊断的最佳方法。心电图(ECG)和胸部X射线也是有帮助的。仅当考虑手术时，才实施心脏导管插入术这一侵入性的方法以测量心脏腔室内的压力。上文列举的诊断方法可以和基于确定所述标志物的本发明的方法补充/互补使用。用于本发明中的标志物(肽)也可以用于本发明的其他实施方案中，用于证实通过本领域已知的常规诊断方法确立的诊断，反之亦然。因此，本发明还涉及证实不基于或仅部分基于确定本发明使用的标志物所进行的诊断的方法，所述方法通过确定本发明使用的标志物的浓度，与对照样品中的所述标志物的浓度进行比较，和证实或不证实通过现有技术的方法获得的诊断。证实在其他实施方案中，本发明涉及证实对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，所述方法基于通过本领域技术人员已知的一种或多种方法诊断出现心力衰竭的风险因子，以及此外，将至少一种心脏肌钙蛋白或其变体，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与对照样品中的这个或这些标志物的浓度进行比较。本发明的方法可以包括下列步骤a)通过本领域技术人员已知的一种或多种方法诊断出现心力衰竭的风险因子，b)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度；c)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和(1)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量(例如，对照样品中的确立的这个或这些标志物浓度)进行比较，来证实所述功能性和/或结构性异常。因此，本发明提供了证实对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，所述方法包括步骤a)通过本领域技术人员已知的方法诊断对象中的出现心力衰竭的风险因子，b)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，c)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和d)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量进行比较，来证实所述功能性和/或结构性异常。本领域技术人员已知的方法一般使用诊断装置/设备，并选自经静脉心内膜心肌活检、心脏导管插入术、心脏听诊、ECG，超声心动图、胸部X射线、放射性核素成像、室造影、CT扫描、MRI和/或压迫测试、冠脉造影、超声检查法。在上述方法中，可以同时(即，在相同的时间点)，或相继(即，在不同的时间点)进行步骤a)和步骤d)，或步骤a)至c)和步骤d)。在步骤相继进行的情况下，步骤之间的时间间隔的长度不足以允许对象的病理生理学状态改变。如上所述，一种以上的病理机制可能是对象出现病理性左心室肥大的病因。风险预测在其他实施方案中，本发明提供了预测对象患心力衰竭，或先于心力衰竭的各心血管和肾事件的风险的方法，所述方法基于将至少一种心脏肌钙蛋白或其变体，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与这个或这些标志物在对照样品中的浓度进行比较。本发明的方法可以包括下列步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度山)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和0)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量，例如，与对照样品中确立的标志物浓度进行比较，来预测对象患心力衰竭或患心血管和肾事件的风险。因此，本发明提供了预测对象患心力衰竭或先于心力衰竭的各心血管和肾事件的风险的方法，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量进行比较，来预测对象患心力衰竭或患心血管和肾事件的风险。上述预测方法可以包括任选的步骤bb)诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。该步骤bb)可以鉴别任何上述的心脏病，优选包括可见于先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的早期阶段的心脏病。在本发明的优选的实施方案中，个体是确定患有心力衰竭的风险的个体，其中LVH不明显。在LVH前的预测方法因此，在其他实施方案中，本发明提供了在左心室肥大(LVH)明显之前，预测对象的心力衰竭的风险的方法，所述方法基于将至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与对照样品中的这个或这些标志物的浓度进行比较。
本发明的方法可以包括下列步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度山)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；和0)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量例如，与对照样品中的确立的标志物浓度进行比较，来预测对象患心力衰竭或患心血管和肾事件的风险。因此，本发明提供了在左心室肥大(LVH)明显之前，预测对象的心力衰竭的风险的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量进行比较,来预测对象患心力衰竭的风险。对象优选的具有心力衰竭的风险因子，例如高血压和糖尿病。还优选的是,对象未表现出明显的心力衰竭迹象和/或症状。舒张病症在本发明的优选 的实施方案中，上述方法允许预测具有早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)的个体和患无症状型舒张功能障碍的个体，患心力衰竭的风险。个体还可患收缩功能障碍。此外，个体的左心室可具有形态学改变。优选的，患舒张病症的个体未患降低的左心室射血分数LVEF(即，个体具有保持的LVEF)。在一个优选的实施方案中，患舒张功能障碍的个体未患收缩功能障碍。特别的是，个体未患左心室肥大LVH。在上述方法的甚至更优选的实施方案中，如前文章节所述，具有早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)和/或患舒张功能障碍的患者表现出下列患心力衰竭的风险因子:吸烟史、肥胖、代谢综合症、糖尿病I型和2型、动脉高血压，特别是动脉高血压。当预测具有舒张功能障碍的对象时，根据本发明的预测方法可以包括任选的步骤bb):诊断(无症状型)舒张功能障碍。该步骤bb)可以鉴别前述的任何功能性和/或结构性心脏异常，优选包括可见于早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。本领域已知，由于舒张功能障碍的结果，具有舒张期病症的个体易于患心力衰竭这出版在例如:Med Clin North Am.2009May ；93 (3):647-64:Am I Hypertens.2001Feb ；14(2):106-13 !Hypertension.2002 ；40:136-14 中。预测阶段B早期在本发明的优选的实施方案中，上述方法允许预测优选具有出现心力衰竭的风险因子(阶段A)的个体，至患有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B)的个体的风险。在上述方法的优选的实施方案中，预测了具有风险因子的个体患左心室功能障碍，特别是舒张功能障碍的风险。优选地，患舒张功能障碍的个体未患降低的左心室射血分数LVEF (即，个体具有保持的LVEF)。在一个优选的实施方案中，患舒张功能障碍的个体未患收缩功能障碍。在上述方法的其他优选的实施方案中，预测了患左心室结构性改变的风险。特别的是，风险是在个体患LVH之前预测的，S卩，预测了优选具有出现心力衰竭的风险因子(阶段A)的个体患早期阶段功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)的风险，所述异常通常是先于心力衰竭左心室肥大(阶段B晚期)。在上述方法的甚至更优选的实施方案中，如前段落所述，具有患心力衰竭(阶段A)的风险因子的对象，或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B)的对象，显示出下列患心力衰竭的风险因子吸烟史、肥胖、代谢综合症、I型和2型糖尿病、动脉高血压，特别是动脉高血压。在预测具有舒张功能障碍的对象的情况下，根据本发明的预测方法可以包括任选的步骤bb):诊断(无症状型)舒张功能障碍。该步骤bb)可以鉴别任何前述的功能性和/或结构性心脏异常，包括优选可见于早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常中的那些。预测女性对象患LVH的风险的方法本文给出的定义和解释优选地经必要修正应用于下述此外，本发明涉及预测女性对象患左心室肥大的方法，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度，与参考量进行比较，来预测对象患左心室肥大的风险。本发明的方法优选是离体的方法。此外，还可以包括除上述明确提及的步骤之外的步骤。例如，其他步骤可以涉及样品预处理或评价通过方法获得的结果。方法可以手工进行或由自动化辅助。优选的，步骤可以完全或部分受自动化辅助，例如，通过用于测定的合适机械和传感仪器，或基于所述比较的计算机执行比较。更优选的，完全以自动化方式进行方法。在此情况下，以合适的输出形式生成步骤c)中确立的预后结果，使得其可被用作，例如医学实践者确立最终临床预后的辅助。在本发明上述方法的上下文中，应预测女性对象患LVH的风险。在本文中使用的术语“预测风险”优选地指评估本文提及的女性对象将患左心室肥大的可能性。更优选的，预测在某时间窗口内，患左心室肥大的风险/可能性。在本发明的优选的实施方案中，预测窗口优选是至少6个月、至少9个月、至少I年、至少2年、至少3年、至少4年、至少5年、至少10年、至少15年的间隔，或任何间隔的时间范围。在本发明特别优选的实施方案中，预测窗口优选的是10年的间隔，或更优选的，5年的时间间隔。优选的，所述预测窗口是从获得待测试的样品的时间点开始计算的。本领域技术人员将理解，上述预测通常并非意在对100%所分析的对象是正确的。然而，术语要求评估对分析对象的统计学显著部分有效。本领域技术人员使用多种已知的统计学评价工具(例如，确定置信区间、确定P值、Studentt检验、Mann-Whitney检验等)，在不花费额外工作的情况下，可以确定部分是否是统计学显著的。细节可见于Dowdy和ffearden, Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983。优选的置信区间是至少90%、至少95%、至少97%、至少98%或至少99%。术语“预测”优选地涉及评估对象是否处于或不处于患左心室肥大(本文其他地方已经定义了术语左心室肥大，相应地使用该定义)的风险。优选的，应该评估较之对象群体的平均风险，女性风险是否处于升高的风险或降低的风险。术语“预测患左心室肥大的风险”在本文中意指通过本发明的方法分析的对象是分入处于患左心室肥大风险的对象的组，或分入不处于患左心室肥大风险的对象的组。根据本发明所述，具有患左心室肥大的风险优选意指患左心室肥大的风险增加(优选落入预测窗口内)。优选的，较之女性对象组，特别地具有至少一种患心力衰竭的风险因子(优选与测试对象相同的风险因子)的对象组的平均风险，所述风险是升高的。根据本发明所述，不处于患左心室肥大风险的对象优选具有降低的患左心室肥大的风险(优选落入预测窗口内)。优选的，较之女性对象组，特别地具有至少一种患心力衰竭的风险因子(优选与测试对象相同的风险因子)的对象组的平均风险，所述风险是降低的。处于患左心室肥大风险的对象优选具有10-20%或更高，更优选20%或更高的患左心室肥大的风险，优选在5年的预测窗口内。不处于患左心室肥大风险的对象优选具有低于10%，更优选低于5%或更低的患左心室肥大的风险，优选在10年的预测窗口内。本文其他地方已经定义了术语“对象”，相应地使用该定义。根据上述方法的对象应该是女性对象。在上述方法的优选的实施方案中，待测试的女性对象表现出至少一种(因此，一种或一种以上的)患心力衰竭的风险因子。特别地，待测试的女性对象优选地表现出选自吸烟史、肥胖、代谢综合症、I型和2型糖尿病，和高血压，特别是动脉高血压的至少一种风险因子。因此，女性对象优选地患高血压(特别是动脉高血压)、糖尿病、肥胖、代谢综合症和/或吸烟史(即，对象具有吸烟史)。在特别优选的实施方案中，具有至少一种心力衰竭的风险因子的女性对象患高血压(特别是动脉高血压)和/或糖尿病。本文其他地方已经描述了术语“参考量”。相应地使用该定义。此外，本文中使用的术语“参考量”或“参考值”在上述方法的上下文中指允许预测患LVH的风险的多肽的量。因此，参考量通常源自已知处于患LVH风险的对象，或已知不处于患LVH风险的对象。优选的，在源自待测试的女性对象的样品中测量的增加的量的心脏肌钙蛋白或其变体，指示女性对象处于患LVH的风险。并且，在源自待测试的女性对象的样品中测量的增加的量的GDF15或其变体和IGFBP7或其变体，指示患LVH的风险。优选的，相对于参考量的增加的量指示了患LVH的风险。在对照组或对照群体中测量的心脏肌钙蛋白或其变体、GDF15或其变体，和IGFBP7或其变体的量用于例如确立截断量或参考范围。高于此类截断量的量或位于参考范围及其闻端的量被认为是升闻的。在一个实施方案中，确立了固定的截断值。选择此类截断值以匹配目标诊断问题。在上述方法的上下文中，术语“减少的”和“增加的”优选可以指相对于对象群体中的平均量，特别是中位数的量的增加或减少的量。优选的，所述群体是健康对象的群体。优选的，女性对象样品中的心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T的量，比不处于患LVH风险的女性对象(或女性对象组)的样品中的心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T的量多至少30%，或更优选多至少50%，指示了测试的女性对象处于患LVH风险。不处于患LVH风险的对象优选是没有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和结构性心脏异常(该术语的定义参见其他地方)的对象。所述对象可具有心力衰竭的至少一种风险因子(因此，优选处于本文其他地方描述的阶段A)。然而优选的，不处于患LVH风险的对象是健康的对象。优选的，样品是血清或血浆样品。
因此，参考量源自健康的女性对象(或源自其组)。优选的，相比健康的女性对象中的量(或相比健康的女性对象组的中位数量)，心脏肌钙蛋白(特别是肌钙蛋白T)的量增加至少30%，或更优选地，至少50%，指示了对象患左心室肥大的风险。如果测量肌钙蛋白T的量，则作为截断的参考量优选在2至14pg/ml的范围内。甚至更优选的，作为肌钙蛋白T截断的参考量在3.2至4pg/ml的范围内。可作为截断量的特别优选的肌钙蛋白T的参考量按优选递增次序是3.2、3.4和4.2pg/ml。可作为截断量的肌钙蛋白I的优选的参考量在0.2至9.0pg/ml的范围内。可作为截断量的肌钙蛋白I的其他优选的的参考量是9.0pg/ml。女性对象的样品，优先血清或血浆样品中的心脏肌钙蛋白的量大于参考量，优选指示了对象处于患LVH风险。女性对象的样品，优先血清或血浆样品中的心脏肌钙蛋白的量低于参考量，优选指示了对象不处于患LVH风险。如果测量IGFBP7的量，则作为截断的参考量优选在33.3pg/ml至46.2pg/ml的范围内。甚至更优选的，作为16 8 7截断的参考量在42.6至46.2 §/1111的范围内。可作为截断量的特别优选的IGFBP7的参考量按优选递增次序是42.6pg/ml和46.2pg/ml。在本发明方法和用途的实施方案中，IGFBP7也可以用作替代心脏肌钙蛋白的单个标志物(因此，IGFBP7优选可取代心脏肌钙蛋白)。在其他实施方案中，本发明提供了诊断对象中的心力衰竭的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较,评估心力衰竭。本发明的方法优选是体外方法。优选的，至少一种标志物的浓度是在从所述对象获得的样品中确定的。此外，除上述明确提及的内容外，还可以包括其他步骤。例如，其他步骤可以涉及样品预处理或评价方法获得的结果。本发明的方法还可用于监控、证实和细分对象。方法可以手工的进行或由自动化辅助。优选的，确定所述对象的至少一种样品中的至少一种心脏肌钙蛋白的浓度的步骤，将在先前步骤中确定的所述标志物的确定的浓度与在对照样品中确立的该标志物的浓度进行比较的步骤，和/或诊断/区分/预测的步骤，可以完全或部分受自动化辅助，例如，通过合适机械或传感仪器。本领域技术人员可理解，此类评估通常并非意在对全部(即100 % )待鉴定的对象是正确的。然而，术语要求可以鉴定对象的统计学显著部分。本领域技术人员使用多种已知的统计学评估工具(例如，确定置信区间、确定P值、Student t检验、Mann-Whitney检验等)，可以确定部分是否是统计学显著的。细节可见于Dowdy和Wearden, Statistics forResearch, John Wiley & Sons, New York 1983。优选的置信区间是至少 90%、至少 95%、至少97%、至少98%或至少99%。p值优选的是0.1、0.05、0.01、0.005或0.0001。更优选的,通过本发明的方法,可以正确的鉴定群体的至少60 %、至少70 %、至少80 %或至少90 %的对象。术语“个体”、“对象”和“患者”在本文中可互换的使用，涉及动物，优选哺乳动物，更优选人。对象可以是男性 或女性对象。对象优选的是女性对象。根据本发明的上述方法可以想象的是，对象应该是属于ACC/AHA阶段A的对象，并且表现出一种或多种出现HF的风险因子。此外，对象可已经进入ACC/AHA分类的阶段B，或者可将要进入阶段B (阶段B早期)。所述对象将不表现出已知与HF相关的症状和/或生理迹象(即，对象是表面健康的)。本发明的方法利用所谓的“标志物”或“分子标志物”。这些术语是本领域技术人员已知的，指在对象的身体内表达的多妝或蛋白质。另一方面，表达或升闻的表达可以是已经或正在对象中发生的病理生理学状态的结果，并且相对于在生理健康的对象中测量的“正常”值(视情况而定可以是0)，升高的浓度指示了在对象中发生的病理生理学状态(或“疾病”)。另一方面，在生理健康的对象中，可以表达浓度的蛋白质，并且所述表达是已经或正在对象中发生的病理生理学状态的结果。在本发明的上下文中，所测量的标志物都属于第一类，S卩，如果对象患有病理生理学状态或疾病，则所述标志物以高于正常的浓度表达。本发明中使用的所有标志物类型和标志物都是本领域技术人员已知的。本发明利用心脏肌钙蛋白及其变体。已知可以使用心脏肌钙蛋白，优选肌钙蛋白T或I，最优选肌钙蛋白T诊断患心肌梗塞MI的患者。心肌梗塞被视为由心肌的坏死状态(即，细胞死亡)导致的。在细胞死亡后，心脏肌钙蛋白释放，并因而可以用于诊断MI。如果血液中的肌钙蛋白T浓度升高，S卩，高于0.lng/ml，则假定为急性心血管事件，并相应地治疗患者。然而，已知在先于细胞死亡的病理学状态(例如，缺血)时，也释放(低浓度的)心脏肌钙蛋白。术语“心脏肌钙蛋白”指在心脏的细胞内，优选心内膜下细胞内表达的所有的肌钙蛋白同种型。这些同种型是本领域良好表征的，描述在例如Anderson 1995, CirculationResearch,第 76 卷，n0.4:681-686 和 Ferrieres 1998, Clinical Chemistry,44:487-493中。优选的，心脏肌钙蛋白指肌钙蛋白T和/或肌钙蛋白I，最优选的，指肌钙蛋白T。应理解，可以在本发明的方法一起测定肌钙蛋白的同种型，即，同时或相继或单独地，即，完全不测定其他同种型。Anderson,上述引文中和 Ferrieres 1998, Clinical Chemistry, 44:487-493中也描述了人肌钙蛋白T和人肌钙蛋白I的氨基酸序列。术语“心脏肌钙蛋白”还涵盖了上述特定的肌钙蛋白的变体，即优选地肌钙蛋白I的变体，和更优选地肌钙蛋白T的变体。此类变体至少与特定的心脏肌钙蛋白具有相同的基本的生物学和免疫学性质。特别的是，如果可以通过本说明书提及的相同的特别测定(例如通过使用特异性识别所述心脏肌钙蛋白的多克隆或单克隆抗体的ELISA测定)检测它们，则它们享有相同的基本的生物学和免疫学性质。此外应理解的是，本发明提及的变体应该具有由于至少一个氨基酸替换、缺失和/或添加而不同的氨基酸序列，其中变体的氨基酸序列仍然与特定肌钙蛋白的氨基酸序列优选地具有至少约50%、至少约60%、至少约70 %、至少约80 %、至少约85 %、至少约90 %、至少约92 %、至少约95 %、至少约97 %、至少约98%或至少约99%的同一性。变体可以是等位变体，或任何其他物种特异性的同源物、旁系同源物或直系同源物。此外，本文提及的变体包括特定心脏肌钙蛋白或上述变体类型的片段，只要这些片段具有如上所述的基本的免疫学和生物学性质。优选的，心脏肌钙蛋白变体具有与人肌钙蛋白T或肌钙蛋白I可比较的免疫学性质(即，表位组成)。因此，变体应该可以被上述用于确定心脏肌钙蛋白浓度的工具或配体识别。此类片段可以是例如肌钙蛋白的降解产物。还包括了由于翻译后修饰(例如磷酸化或十四烷基化)而不同的变体。优选的，肌钙蛋白I及其变体的生物学性质是抑制肌动球蛋白ATP酶或抑制体内或体外血管发生的能力，可以基于例如Moses等人，1999PNAS USA96 (6) =2645-2650描述的测定来检测。优选的，肌钙蛋白T及其变体的生物学性质是与肌钙蛋白C和I形成复合物的能力，结合钙离子或结合原肌球蛋白的能力，优选如果作为肌钙蛋白C、I和T的复合物或由肌钙蛋白C、肌钙蛋白I和肌钙蛋白T变体形成的复合物存在。已知可以在多种条件下，在对象中检测到低浓度的循环心脏肌钙蛋白，但需要进一步的研究来了解它们各自的作用和速率(Masson 等人，Curr Heart Fail Rep (2010) 7 :15-21)。术语“生长分化因子-15”或“⑶F-15”涉及转化生长因子(TGF)-P细胞因子超家族的成员的多肽。术语多肽、肽和蛋白质在本说明书全文中可互换使用。GDF-15最初作为巨噬细胞抑制性细胞因子-1而克隆，后来也被鉴别为胎盘转化生长因子-P、胎盘骨形态形成蛋白、非固醇类抗炎药物活化的基因-1和前列腺来源的因子(BootcoV，上述引文中；Hromas, 1997Biochim Biophys Acta 1354 :40-44 ;Lawton 1997, Gene 203:17-26;Yokoyama-Kobayashi 1997， J Biochem(Tokyo),122 :622-626 ；Paralkar 1998， J BiolChem273 :13760-13767)。与其他的TGF-0相关的细胞因子类似，⑶F-15是作为无活性的前体蛋白合成的，其经历二硫键同源二聚体化。在蛋白水解切割N端前肽后，GDF-15作为 28kDa 二聚体蛋白分泌(Bauskin2000，Embo J19 :2212-2220)。⑶F-15的氨基酸序列公开在 W099/06445,W000/70051,W02005/113585、Bottnerl999, Gene237 105-111，BootcoV 上述引文中，Tan 上述引文中,Baek2001, Mol Pharmacol 59 :901-908, Hromas 上述引文中，Paralkar 上述引文中，Morrish 1996, Placenta 17 :431-441 或 Yokoyama-Kobayashi 上述引文中中。本文中使用的GDF-15还涵盖了上述特定GDF-15多肽的变体。此类变体与特定⑶F-15多肽至少具有相同的基本生物学和免疫学性质。特别的是，如果可以通过本说明书提及的相同的特定测定(例如使用特异性识别所述GDF-15多肽的多克隆或单克隆抗体的ELISA测定)检测它们，则它们享有相同的基本生物学和免疫学性质。优选的测定描述在所附实施例中。此外应理解的是，本发明提及的变体应该具有由于至少一个氨基酸替换、缺失和/或添加而不同的氨基酸序列，其中变体的氨基酸序列仍然与特定GDF-15多肽的氨基酸序列，优选与人GDF-15的氨基酸序列，更优选在特定GDF-15 (例如人GDF-15)的全长的氨基酸序列上具有优选至少约50%、至少约60%、至少约70%、至少约80%、至少约85 %、至少约90 %、至少约92 %、至少约95 %、至少约97 %、至少约98 %或至少约99 %同一性。可以通过本领域普遍已知的算法确定两条氨基酸序列之间的同一性程度。优选的，通过在比较窗口比较两条最佳比对的序列，确定同一性程度，其中与用于最佳比对的参考序列(不包含添加或缺失)相比较，比较窗口中的氨基酸序列片段可以包括添加或删除(例如，空位或凸出端)。百分比如下计算确定两条序列中都存在的相同氨基酸残基位置数产生匹配位置数，再用匹配位置数除以比较窗口中的位置总数，结果乘以100，产生序列特同一性的百分比。可通过Smith和Waterman Add. APL. Math. 2 :482 (1981)的局部同源性算法，Needleman和 Wunsch J. Mol. Biol. 48 :443(1970)的同源性比对算法，Pearson和 LipmanProc. Natl. Acad. Sc1. (USA) 85 =2444(1988)的相似性搜索方法，通过计算机执行上述算法(Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group (GCG),575ScienceDr.，Madison, WI 中的 GAP、BESTFIT、BLAST、PASTA 和 TFASTA)或肉眼检视，进行比较序列的最佳比对。考虑到已鉴别了用于比较的两条序列，优选使用GAP和BESTFIT确定其最佳比对，并因此确定同一性程度。优选的，使用空位权重默认值为5. 00，空位长度默认值为0. 30。上文提及的变体可以是等位变体，或任何其他物种特异性的同源物、旁系同源物或直系同源物。此外，本文提及的变体包括特定GDF-15多肽或上述变体类型的片段，只要这些片段具有上述的基本免疫学和生物学性质。此类片段可以是例如GDF-15多肽的降解产物。还包括了由于翻译后修饰(例如磷酸化或十四烷基化)而不同的变体。胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)系统在细胞生长和分化中发挥重要的作用。其包含2个配体，IGF-1和IGF-1I，2个受体，I型和2型IGF受体，和到1995年为止的6个IGF-结合蛋白(IGFBP) ,IGFBP-1 至-6 (Jones，J.1.，等人，Endocr. Rev. 16(1995)3-34)。近期，IGFBP家族以扩展至包括IGFBP-相关蛋白(IGFBP-rP)，其与IGFBP具有显著的结构性相似性(Hwa，V.等人，Endocr. ReV20 (1999) 761-787)。因此，IGFBP超家族包括与IGF具有高亲和力的6个常规的IGFBP，和不仅共享保守的IGFBP的氨基末端结构域，而且还表现出与IGF和胰岛素一定程度的亲和力的至少10个IGFBP-rP。IGFBP-rP是富含半胱氨酸的蛋白质的组，控制多种细胞功能，例如细胞生长、细胞贴壁和迁移，和胞外基质合成。此外，这些蛋白质还可以参与生物学过程，如组织增殖和分化、繁殖、血管发生、创伤修复、炎症、纤维化和肿瘤发生(Hwa, V.等人，Endocr. ReV20 (1999) 761-787)。IGF结合蛋白7 ( = IGFBP7)是已知由内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞和上皮细胞分泌的30-kDa模块糖蛋白(Ono, Y.等人，Biochem Biophys ResComm202(1994) 1490-1496)。在文献中，该分子还被标注为FSTL2 ；IBP7 ；IGF结合蛋白相关蛋白I ;IGFBP7 ；IGFBP7v ；IGFBP rPl ；IGFBP7 ；IGFBPRP1 ;胰岛素样生长因子结合蛋白7 ;胰岛素样生长因子结合蛋白7前体；MAC25 ;MAC25蛋白；PGI2刺激因子JPPSF或前列环素刺激因子。Northern印迹研究揭示了该基因在人组织中的广泛表达，包括心脏、脑、胎盘、肝、骨骼肌和胰腺(Oh, Y.等人，J. Biol. Chem. 271 (1996) 30322-30325)。IGFBP7最初被鉴别为较之相应的肿瘤细胞，在正常柔脑膜和乳腺上皮细胞中差异表达的基因，并被称为脑膜瘤相关cDNA(MAC25) (Burger, A. M.等人，0ncogenel6 (1998) 2459-2467)。表达的蛋白质被独立纯化为肿瘤来源的粘附因子(后来被重新命名为血管调节素(angiomodulin)) (Sprenger, C. C.等人，CancerRes59 (1999) 2370-2375)和前列环素刺激因子(Akaogi，K.等人，Proc Natl Acad SciUSA93 (1996) 8384-8389)。它还被报道为T1A12，乳腺癌中被下调的基因(StCroix，B.等人，Science 289(2000)1197-1202)。IGFBP7的生物学作用尚不清楚。初步的实验数据有些自相矛盾，涉及IGFBP7的不同作用，例如肿瘤抑制(Sprenger, C. C.等人，Cancer Res 59(1999)2370-2375)、促进月中瘤生长(Lopez-Bermejo, A.等人，J. Clinical Endocrinology and Metabolism88(2003)3401-3408)、刺激环前列腺素(Akaogi, K.等人，Proc. Natl. Acad. Sc1. USA93(1996)8384-8389)、参与血管发生(Yamauchi, T.等人，Biochem J. 303 (1994) 591-598)和衰老(Lopez-Bermejo, A.等人，Endocrinology 141 (2000) 4072-4080)。在患多种疾病的患者中，测量IGFBP7 mRNA的差异表达，所述疾病包括心脏病、肾病、炎性疾病(Scios Inc.的 US6, 709，855)和脉管移植病(US2006/0, 003，338)。已描述了多种不同的测定，用于测试IGFBP7的激素结合性质。通过竞争性亲和力交联测定，分析低亲和力的IGF结合。重组的人mac25蛋白特异性结合IGF-1和-1I (Oh，Y.等人，J. Biol. Chem. 271 (1996) 20322-20325 ；Kim, H. S.等人，Proc. Natl. Acad. Sci USA94(1997) 12981-12986) o还可以在Western配体印迹中，通过测量蛋白质结合放射性标记的IGF的能力，检测IGFBP活性。最近实施了免疫学确定循环IGFBP7。在随机的人血清中检测到低水平的该分析物，并观察到递增的血清水平与胰岛素抗性相关(Lopez-Bermejo, A.等人，J. ClinicalEndocrinology and Metabolism88 (2003)3401-3408, Lopez-Bermejo, A.等人，Diabetes55(2006)2333-2339)。术语“参考量”或“参考值”在本文的这一本发明实施方案中指这样的多肽的量，所述量允许诊断分入ACC/AHAA类中的相应个体是否已经出现通常先于心力衰竭的心脏病或将要出现通常先于心力衰竭的心脏病。因此，参考量一般源自已知具有通常先于心力衰竭的心脏病的对象，和/或已知将要出现通常先于心力衰竭的心脏病的对象。在本发明的实施方案中，对象被分入ACC/AHAA类中。表达“将......的浓度与对照样品中确立的浓度进行比较”仅用于进一步示例任
何对于本领域技术人员显而易见的。对照样品可以是内参样品或外参样品。在一个实施方案中，使用内参样品，即，评估测试样品中的一种或多种标志物水平，以及采自同一对象的一个或多个其他样品中的一种或多种标志物水平，来确定所述一种或多种标志物的水平是否存在任何改变。在另一个实施方案中，使用外参样品。对于外参样品，将源自个体的样品中的标志物的存在或浓度与在已知患指定病况，或已知处于患指定病况风险的个体，或已知无指定病况的个体，即“正常个体”中标志物的存在或浓度相比较。例如，可以将患者样品中的标志物水平与已知与HF中的特定病程相关的水平相比较。通常，样品的标志物水平与诊断直接或间接相关，且标志物水平用于例如确定个体是否有HF的风险。备选地，样品的标志物水平可以例如与这样的标志物水平进行比较,所述标志物水平水平已知与下述相关患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的患者对疗法的响应性、出现心力衰竭和先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的风险因子的差异诊断、用于选择治疗先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的恰当药物的指导条例，特别是在早期阶段，在判断疾病发展的风险中，或在具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的患者的随访中。取决于预期的诊断用途，选择恰当的对照样品，并从中确立标志物的对照或参考值。熟练的技术人员可以理解，在一个实施方案中，此类对照样品是从年龄匹配且无混淆性疾病的参考群体中获得的。对熟练的技术人员仍然显而易见的是，在对照样品中确立的绝对标志物值将依赖于所使用的测定。优选的，使用来自恰当参考群体的100名清楚表征的个体的样品，来确立对照(参考)值。还优选的是，参考群体可以选择由20、30、50、200,500或1000名个体组成。健康个体代表了用于确立对照值的优选的参照群体。从源自个体的样品测量到的心脏肌钙蛋白或其变体的增加的值，指示了先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，从源自个体的样品测量的GDF15或其变体和IGFBP7或其变体的增加的值，指示了心力衰竭。在对照组或对照群体中测量到的心脏肌钙蛋白或其变体、GDF15或其变体和IGFBP7或其变体的值用于例如确立截断值或参考范围。高于此类截断值或落在参考范围及其高端外的值被认为是升高的。在一个实施方案中，确立固定的截断值。选择此类截断值与目标诊断问题匹配。
在一个实施方案中，在对照组或对照群体中测量到的心脏肌钙蛋白或其变体的值、GDF15或其变体和IGFBP7或其变体的值用于确立参考范围。在优选的实施方案中，如果测量值高于参考范围的90%百分位，则认为心脏肌钙蛋白或其变体、GDF15或其变体和IGFBP7或其变体的浓度是升高的。在其他优选的实施方案中，如果测量值大于参考范围的95 %百分位、96 %百分位、97 %百分位或99 %百分位，则认为心脏肌钙蛋白或其变体、⑶Fl5或其变体和IGFBP7或其变体的浓度是升高的在一个实施方案中，对照样品将是内参样品。在该实施方案中，从研究的个体获得系列样品，并比较标志物水平。例如这可用于评估治疗的功效。诊断和/或预后测试的灵敏度和特异性不仅依赖于测试的分析“品质”，而且还依赖于如何构成为异常结果的定义。在实践中，通常通描绘变量的值与其在“正常”和“疾病”群体中的相对频率，来计算受试者工作特征曲线或“R0C”曲线。对于本发明的任何特别的标志物，有或无疾病的对象的标志物水平的分布很可能是重叠的。在这一条件下，测试不能以100%精确性绝对区分正常和疾病，而重叠面积指示了测试不能区分正常与疾病之处。选择阈值，在高于阈值(或低于阈值，取决于标志物如何随疾病改变)时，认为测试是异常的，而低于阈值时，认为测试是正常的。ROC曲线下方的面积是允许鉴别病况的感知的测量的可能性的量度。即使当测试结果不能必然得到精确数量时，也可以使用ROC曲线。只要可以对结果分级，就可以生成ROC曲线。例如，可以根据严重程度对“疾病”样品的测试结果分级(I =低、2 =正常，和3 =高)。该分级可以与“正常”群体的结果相关，并生成ROC曲线。这些方法是本领域普遍已知的。参见例如Hanley等人，Radiologyl43 :29-36 (1982)。在某些实施方案中，选择这样的标志物和/或标志物组，所述标志物和/或标志物组表现出至少约70%灵敏度，更优选至少约80%灵敏度，甚至更优选至少约85%灵敏度，仍然更优选至少约90%灵敏度，和最优选至少约95%灵敏度，和与至少约70%特异性，更优选至少约80%特异性，甚至更优选至少约85%特异性，仍然更优选至少约90%特异性，和最优选至少约95%特异性的组合。在特别优选的实施方案中，灵敏度和特异性都是至少约75%,更优选至少约80%,甚至更优选至少约85%,仍然更优选至少约90%,和最优选至少约95%。术语“约”在上下文中指指定测量的+/_5%。在其他实施方案中，使用阳性似然比、阴性似然比、让步比或风险比作为测试预测风险或诊断疾病的能力的测量值。在阳性似然比的情况下，值为I指示了阳性结果出现在“疾病”和“对照”组的对象中的可能性相同；值大于I指示了阳性结果更可能出现在疾病组中；值小于I指示了阳性结果更可能出现在对照组中。在阴性似然比的情况下，值为I指示了阴性结果出现在“疾病”和“对照”组的对象中的可能性相同；值大于I指示了阴性结果更可能出现在疾病组中；值小于I指示了阴性结果更可能出现在对照组中。在某些优选的实施方案中，优选地选择这样的标志物和/或标志物组,所述标志物和/或标志物组表现出至少约1. 5或更高，或约0. 67或更低，更优选至少约2或更高，或约0. 5或更低，仍然更优选至少约5或更高，或约0. 2或更低，甚至更优选至少约10或更高，或约0.1或更低，和最优选至少约20或更高，或约0. 05或更低的阳性或阴性似然比。术语“约”在上下文中指指定测量的+/-5 %。在让步比的情况下，值为I指示了阳性结果出现在“疾病”和“对照”组的对象中的可能性相同；值大于I指示了阳性结果更可能出现在疾病组中；值小于I指示了阳性结果更可能出现在对照组中。在某些优选的实施方案中，优选地选择这样的标志物和/或标志物组，所述标志物和/或标志物组表现出至少约2或更高，或约0. 5或更低，更优选至少约3或更高，或约0. 33或更低，仍然更优选至少约4或更高，或约0. 25或更低，甚至更优选至少约5或更高，或约0. 2或更低，和最优选至少约10或更高，或约0.1或更低的让步比。术语“约”在上下文中指指定测量的+/_5%。在风险比的情况下，值为I指示了终点(例如死亡)的相对风险在“疾病”和“对照”组中相等；值大于I指示了疾病组中的风险更大；值小于I指示了对照组中的风险更大。在某些优选的实施方案中，标志物和/或标志物优选的选择这样的标志物和/或标志物组，所述标志物和/或标志物组表现出至少约1.1或更高，或约0. 91或更低，更优选至少约1. 25或更高，或约0. 8或更低，仍然更优选至少约1. 5或更高，或约0. 67或更低，甚至更优选至少约2或更高，或约0. 5或更低，和最优选至少约2. 5或更高，或约0. 4或更低的风险比。术语“约”在上下文中指指定测量的+/_5%。当本文描述示例性的组时，可以从这些示例性的组中替代、添加或减去一个或多个标志物，同时仍然提供临床上有用的结果。组可以包含疾病的特异性标志物(例如，在细菌感染中增加或减少的标志物，而在其他疾病状态中情况不同)和/或非特异性标志物(例如，由于炎症增加或减少的标志物，不论原因；由于内稳态改变而增加或减少的标志物，不论原因等)。虽然在本文所述的方法中，某些标志物没有单独定义，但实际上，特别的“指纹式”改变模式可作为疾病状态的特异性指标。如上所述，改变模式可获得自单个样品，或者可以任选地考虑一个或多个组成员的临时改变(或组响应值的临时改变)。通过本领域技术人员已知的确立的方法,诊断个体是健康的还是患有某病理生理学状态。方法根据个体的病理生理学状态而有所差别。在各实施方案涉及的段落中，本申请给出了确立理想诊断的算法，并给出引用。因此，本发明还包括确定指示了生理学和/或病理学的状态和/或某病理学状态的阈值水平的方法，包括步骤确定恰当的患者组中的一种或多种恰当的标志物的水平，收集数据，通过统计学方法分析数据，和确定阈值。在本发明中，恰当的标志物是心脏肌钙蛋白及其变体，优选肌钙蛋白T或其变体或肌钙蛋白I或其变体，特别是肌钙蛋白T或其变体；任选地至少一种其他标志物选自⑶F-15或其变体和IGFBP7或其变体。本发明还涉及基于上述步骤，决定对上述对象的疗法的方法。因此，本发明的方法允许决定对患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象或将要出现先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象，应该采取何种干预或何种药物，其中所述对象分入ACC/AHA阶段A中。治疗的目标可以是治疗上述先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，或阻止先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的进一步恶化。治疗决策因此，本发明涉及决定对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的方法，所述方法基于将至少一种心脏肌钙蛋白或其变体，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与对照样品中的上述标志物的浓度进行比较。本发明的方法可以包括下列步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度山)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度；C)将如此确定的浓度与参考量，例如，与对照样品中确立的这个或这些标志物的浓度进行比较。优选的，通过将所确定的浓度与参考量进行比较作出疗法决策。因此，本发明提供了决定对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将如此确定的浓度与参考量进行比较，决定对对象的治疗。优选的，在治疗决策前，诊断对象是否患有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性心脏异常。一般而言，对象未患心力衰竭，S卩，患者的心肌还没有经历永久性的结构性或功能性伤害。优选地，对象具有低于用于定义左心室肥大的标准的左心室质量指数。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这些风险因子本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象没有表现出明显的心力衰竭的迹象和/或症状。在实施本发明的方法之前，对象一般被分入ACC/AHA阶段A中。本领域技术人员了解诊断对象是否患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常或将要出现先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，其中所述对象被分入ACC/AHA阶段A中。该诊断一般是昂贵、费时和要求医学技能和经验的。因此，通常未诊断出早期的功能性和/或结构性异常。评价方法是本领域技术人员已知的，通常基于医疗史，其他评价包括使用诊断装置/设备检查(心脏听诊、ECG、超声心动图、胸部X射线、放射性核素成像、室造影、CT扫描、MRI和/或压迫测试、冠脉造影、超声检查法、冠脉导管插入术)。需要时可以进行其他测试，确定病因。由于检测先于LVH和/或心力衰竭的结构性和/或功能性心脏异常的有限灵敏度，上述方法是难以应用的。治疗依赖于先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的特定类型和严重程度。在发展为LVH和/或HF或其他主要并发症之前，可以开始预防性治疗。由于在具有动脉高血压或糖尿病的对象中首次诊断出可以快速发展为LVH的结构性异常，这些患者需要更强力的药物或药物调整，和更密集的监控。在优选的实施方案中，本发明提供了疗法调整的方法，这是诊断早期先于心力衰竭，特别是先于LVH的功能性和/或结构性心脏异常的结果。治疗结果是抗高血压药物的改变，优选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素-11-受体阻断剂(ARB)、醛固酮拮抗剂、P阻断剂和利尿剂和钙拮抗剂。因此，如果诊断了早期先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，优选推荐施用血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素-11-受体阻断剂(ARB)和/或醛固酮拮抗剂。在本发明的其他实施方案中，前面展示的补充/互补性方法可用于基于上述步骤来决定对上述对象的治疗的方法。这些方法在本申请的下文中进一步提出，并允许决定所述对象应该采用何种药物，或所述对象应该进行哪些其他疗法。本发明还涵盖了至少一种标志物用于决定对具有出现心力衰竭的风险因子，但未表现为明显的心力衰竭迹象的对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的用途，所述标志物选自心脏肌钙蛋白及其变体，并且任选地，至少一种标志物选自:⑶F-15或其变体和IGFBP7或其变体。在本发明的实施方案中，心脏肌钙蛋白选自肌钙蛋白T或其变体和肌钙蛋白I或其变体，特别地心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白T或其变体。在本发明的一个实施方案中，组合地确定下列标志物:心脏肌钙蛋白选自肌钙蛋白T或其变体和肌钙蛋白I或其变体，特别地心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白T或其变体；GDF-15或其变体；和IGFBP7或其变体。术语“决定”在本文中意指评估是否应该向已经进行了根据本发明的测试的对象施用某种药物或治疗。疗法，治疗术语“疗法”在本发明的上下文中涵盖了个人史改变、饮食方案、用于治疗根据本发明的对象的身体干预和恰当的药物施用。对象患有先于左心室肥大和/或心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，或将要出现先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，并且对象优选地分入ACC/AHA阶段A中。更优选地，对象具有动脉高血压、收缩和/或舒张高血压、肥胖、代谢综合症，和/或糖尿病(优选2型糖尿病)。在仍然另一个优选的实施方案中，根据欧洲高血压协会的风险表，个体患低、中、高或非常高的风险。适合治疗先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的药物是本领域普遍已知的，参见例如，Heart Disease, 2008,第 8 版，编著 Braunwald, Elsevier Sounders,第 24章(关于心力衰竭)和41章(关于高血压)。这些治疗是本发明的一部分。优选地，施用此类药剂的目标是治疗先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常导致的症状和迹象，并且以阻止先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的进一步发展和/或出现心力衰竭为目标。因此，还考虑了目标是治疗先于左心室肥大和/或心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常和/或左心室功能障碍和/或心力衰竭的药物。个人史改变包括戒烟、减少醇摄入、增加身体活动、减轻体重、钠(盐)限制、体重管理和健康食物、日常鱼油、限盐。治疗还可以包括干预。在本发明的上下文中，一种优选的干预是施用抗高血压药物，优选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素-11-受体阻断剂(ARB)、醛固酮拮抗剂、对抗利尿剂的β阻断剂和钙拮抗剂。在优选的实施方案中，本发明提供了疗法调整的方法，其是诊断早期先于心力衰竭，特别是先于LVH的功能性和/或结构性心脏异常的结果。治疗结果是抗高血压药物的改变，优选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素-11-受体阻断剂(ARB)、醛固酮拮抗剂、β阻断剂和利尿剂和钙拮抗剂。当心脏肌钙蛋白或其变体的水平，特别是肌钙蛋白T或其变体，指示对象具有先于左心室肥大和/或先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常时，应该施用一种或多种下列药物:利尿剂，如髓袢利尿剂、噻嗪和噻嗪样利尿剂、留钾利尿剂、I型盐皮质激素受体拮抗剂、抗醛固酮剂、碳酸酐酶抑制剂、血管加压拮抗剂。β阻断剂，如心得安(proprenolol)、美托洛尔(metoprolol)、比索洛尔(bisoprolol)、卡维地洛(carvedilol)、布新洛尔(bucindolol)、奈比洛尔(nebivolol)；1丐拮抗剂，如二氢卩比唳、异搏定(verapamil)、地尔硫卓(diltiazem)；肾上腺素能激动剂，如多巴酚丁胺、多巴胺、肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、苯肾上腺素；
正性肌力剂，如地高辛、洋地黄毒苷；ACE抑制剂，如依那普利(Enalapril)、卡托普利(Captopril)、雷米普利(Ramipril)、群多普利(Trandolapril)；血管紧张素受体拮抗剂，如氯沙坦(Losartan)、纟颜沙坦(Valsartan)、厄贝沙坦(Irbesartan)、坎地沙坦(Candesartan)、替米沙坦(Telmisartan)、依普罗沙坦(Eprosartan)；醒固酮拮抗剂，如依普利酮(Eplerone)、螺内酯、坎利酮(Canrenone)、Mexrenone、Prorenone ；他汀类，特别是阿托伐他汀(Atorvastatin)、氟伐他汀(Fluvastatin)、洛伐他汀(Lovastatin)、普伐他汀(Pravastatin)、罗苏伐他汀(Rosuvastatin)、辛伐他汀(Simvastatin)；肼屈嗪(Hydazaline)和硝酸异山梨酯。当心脏肌钙蛋白或其变体的水平，特别是肌钙蛋白T或其变体，指示对象患有早期阶段的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常(阶段B早期)，更优选不表现出LVH，甚至更优选无LVH的舒张功能障碍时，应该施用一种或多种下列药物:β阻断剂，如心得安、美托洛尔、比索洛尔、卡维地洛、布新洛尔、奈比洛尔；肾上腺素能激动剂，如多巴酚丁胺、多巴胺、肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、苯肾上腺素；醒固酮拮抗剂，如依普利酮(epIerenone)、螺内酯、坎利酮、Mexrenone、Prorenone ；优选的治疗剂包括:ACE抑制剂，如依那普利、卡托普利、雷米普利、群多普利；血管紧张素受体拮抗剂，如氯沙坦、缬沙坦、厄贝沙坦、坎地沙坦、替米沙坦、依普罗沙坦；治疗监控:此外，本发明提供了监控治疗对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，基于将重复测定的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度；和任选地重复测定的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度与对照样品中的上述标志物的浓度进行比较。本发明的方法可以包括下列步骤:a)在指定的时间间隔内，重复确定至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地重复测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)将步骤a)中确定的所述标志物的确定的浓度，与其在对照样品中的浓度进行比较，和d)基于一种或多种上述标志物的确定的浓度的差异，评估对象是否具有经历了病理生理学状态的改变。优选地，通过将步骤a)和任选地步骤b)中确定的所述标志物的确定的浓度与其在对照样品中的浓度进行比较，实施评估。因此，本发明提供了监控对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的方法，方法包括步骤:a)测定至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，
b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤a)中确定的所述标志物的确定的浓度，及其在对照样品中的浓度，评估对象是否具有经历了病理生理学状态的改变。在本发明的优选的实施方案中，重复进行心脏肌钙蛋白测定，和任选地，心力衰竭的一种或多种其他标志物的测定，即，至少2次，并优选地在给定的一个或多个时间间隔内进行测定。一般而言，对象未患心力衰竭，S卩，患者的心肌还没有经历永久性的结构性或功能性伤害。优选的，对象具有心力衰竭的风险因子。这些风险因子是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的，对象没有表现出明显的心力衰竭的迹象和/或症状。步骤b)中提及的浓度可以是本申请中对于上述疗法决策所提及的浓度，或者可以是疗法开始前确定的浓度，或两者。通常，在本发明的优选的实施方案中，在实施本发明的监控方法之前，实施决定治疗左心室肥大的疗法的方法。疗法调整在本发明的其他实施方案中，提供了疗法调整的方法，是预测在诊断具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象(特别是没有出现LVH时)中的心力衰竭的风险的结果。在心力衰竭的风险的情况下，治疗结果是抗高血压药物的改变，优选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素-11-受体阻断剂(ARB)、醛固酮拮抗剂、β阻断剂和利尿剂和钙拮抗剂。本发明的方法提供了具有阶段A和/或阶段B早期HF的对象的抗高血压疗法调整，是诊断具有先于左心室肥大和/或心力衰竭的结构性改变的结果，优选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素-11-受体阻断剂(ARB)、醛固酮拮抗剂、β阻断剂和利尿剂和钙拮抗剂。可以有利地阻止进一步发展为左心室肥大和/或心力衰竭。确定心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，并根据情况而定，确定GDF-15或其变体，或IGFBP7或其变体，或本说明书中提及的涉及测量浓度的任何其他肽或多肽，优选半定量或定量地进行测量。测量可以直接或间接地进行。直接测量涉及基于信号测量肽或多肽的浓度，所述信号是从肽或多肽本身获得的并且其强度与样品中存在的肽分子数量直接相关。可以获得此类信号——在本文中有时被称为强度信号，例如，通过测量肽或多肽的特定物理或化学性质的强度值。间接测量包括测量从次级组分(即，本身不是肽或多肽的组分)或生物学读出系统获得的信号，例如，可测量的细胞应答、配体、标签或酶促反应产物。在本发明的其他实施方案中，提供了在接受药物施用的对象中疗法监控方法和疗法调整方法，所述药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂，或上述文件的任何组合，和根据情况而定，除已知用于治疗下文提及的疾病的任何其他药物或药物组合以外。根据本发明该实施方案的方法特别允许决定施用醛固酮拮抗剂，任选地除ACE抑制剂和血管紧张素受体阻断剂以外，和根据情况而定，除已知用于治疗心力衰竭和/或先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的任何其他药物以外。在一个实施方案中，对象具有心力衰竭，特别是对象分入ACC/AHA系统的阶段C中。在其他实施方案中，个体患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。根据现有技术，目前推荐用ACE抑制剂和/或血管紧张素受体阻断剂治疗处于心力衰竭风险的患者。这包括根据ACC/AHA指导条例分入阶段A和B中的患者。
从阶段C(包括具有在心脏病先前或当时的症状的结构性心脏病的患者)开始，根据ACC/AHA指导条例，在选定的患者中推荐利尿剂，包括醛固酮拮抗剂。选定的患者包括具有中等至严重程度的心力衰竭，和具有近期代偿失调的证据的患者(参见ACC/AHA指导条例)。可理解的是，ACE抑制剂和血管紧张素受体阻断剂的效应受功能多态性的影响(参见 McNamara, Heart Failure Clin6 (2010),第 35-43 页，特别是表 I)。已显不，在 ACEDD基因型中，ACE抑制剂的醛固酮逃逸的普遍性最高(Me Namara等人，第39页)，支持使用醛固酮拮抗剂的合理性。炎症发生在心肌组织中的胶原形成之前。已知炎症通过激活肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)系统在心力衰竭患者中存在，支持醛固酮拮抗剂在心力衰竭中的用途。之前已显示醛固酮拮抗剂依普利酮降低心力衰竭患者中的胶原形成，如PIIINP水平所指示的(参见G.Mak等人，JACC，第54卷，nol8，2009，第1674-1682页，特别是图2)。这受至Ij进行中的测试醛固酮拮抗剂在NYHA II类患者中的用途的研究的进一步支持(Me MurrayNEJM 362，228-238，2010，特别是第 236 页，“Areas of uncertainty”)。然而，这与指示醛固酮促进心脏中的胶原合成，并促进适应不良性心脏重塑的目前的综述一致(KIM Y.S.，Current Treatment Options in Cardiovascular Medicinell, 455-466,2009,特别是第462 页 “ARA”)。本发明人发现，心脏肌钙蛋白及其变体，优选肌钙蛋白T或其变体或肌钙蛋白I或其变体，特别是肌钙蛋白T或其变体，和GDF-15或其变体，和任选地，选自ANP型和BNP型利钠肽及其变体，优选BNP或其变体或NT-前BNP或其变体，特别是NT-前BNP或其变体的利钠肽，给出了治疗上述对象的效力的相关信息。一方面，这些对象是具有心力衰竭的对象，特别是分入ACC/AHA系统的阶段C中的对象。另一方面，对象具有患心力衰竭的风险因子，并优选分入ACC/AHA分类的阶段A中或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，并优选分入ACC/AHA分类的阶段B中。特别地，确定97名具有明显心力衰竭的患者中⑶F-15、NT-前BNP和肌钙蛋白T的量。所有的患者都进行β阻断剂疗法以及ACE抑制剂疗法，59名患者接受醛固酮拮抗剂，38名未接受醛固酮拮抗剂。在确定上述标志物的量之后，得到NT-前BNP和GDF15的比例，和肌钙蛋白T和GDF-15的比例。有趣的是，发现醛固酮拮抗剂组中的比例高于没有用醛固酮拮抗剂治疗的患者组。因此，确定⑶F-15与利钠肽或心脏肌钙蛋白的组合应该允许对用ACE抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂或醛固酮拮抗剂(或其组合)治疗的患者中的疗法调整作出决定。特别的是，所述确定应该允许对用ACE抑制剂治疗的患者中的疗法调整作出决定。上述药物，特别是ACE抑制剂，有时变得效率较低，导致增加的炎症水平。在此情况下，下文中描述的醛固酮拮抗剂的疗法调整将是有用的，因为醛固酮拮抗剂允许降低炎症的水平。下文中描述的方法允许鉴别可受益于疗法调整的对象。虽然已经显示ACE抑制剂和血管紧张素受体阻断剂(ARB)在大型随机化试验中有效，目前没有方法可以诊断这些药物在个体患者中的效果。这与这些药物在肾病患者中的应用相反，其中尿白蛋白的减少可用于验证治疗成功。因此，所述方法首次提供了诊断治疗失败的方法，并提供了使用醛固酮抑制剂改善治疗或抑制醛固酮合成的未来药物的指导。在本发明的一个实施方案中，监控在根据本发明的对象中开始的药物(即，评估药物是否有效)。在本发明的其他实施方案中，对药物调整做出决策，优选根据监控药物的结果。在特别优选的实施方案中，决定施用醛固酮拮抗剂是否是恰当的。还可以考虑施用一种或多种醒固酮合成酶抑制剂，参见Roumen L.等人，J Medical Chemistry 2010,531712-25。因此，本发明还提供了监控在患心力衰竭或处于先于左心室肥大和/或先于心力衰竭(包括心力衰竭的风险因子)的阶段的对象中已经开始的药物方法，基于将至少一种心脏肌钙蛋白或其变体，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度与对照样品中的这个或这些标志物的浓度进行比较。本发明的方法可以包括下列步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度山)测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，c)通过将如此确定的浓度与参考量(例如在对照样品中)进行比较，来监控药物。优选的，通过比较确定的浓度与参考量，来实施监控。因此，本发明提供了监控施用于对象的药物的方法，所述对象患心力衰竭或处于先于左心室肥大和/或心力衰竭(包括心力衰竭的风险因子)的阶段，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体和/或利钠肽或其变体的浓度，b)测量样品中的⑶F-15或其变体的浓度，c)通过比较如此确定的浓度与参考量，来监控药物。本发明还提供了基于将至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，与对照样品中的这个或这些标志物的浓度进行比较，决定药物调整的方法，所述开始已经在患心力衰竭或处于先于左心室肥大和/或心力衰竭(包括心力衰竭的风险因子)的阶段的对象中。本发明的方法可以包括下列步骤a)重复测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度；b)重复测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，c)通过将如此确定的浓度与参考量进行比较，来决定药物调整。优选的，通过比较确定的浓度与参考量，来决定药物调整。因此，本发明还提供了决定对象中的药物调整的方法，所述对象接受了所述药物并患心力衰竭或处于先于左心室肥大和/或心力衰竭(包括心力衰竭的风险因子)的阶段，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体和/或利钠肽或其变体的浓度，b)测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，和c)通过比较如此确定的浓度与参考量，来决定药物调整。在本发明的优选的实施方案中，重复确定心脏肌钙蛋白，和任选地心力衰竭的一种或多种其他标志物，即，至少2次，并优选在指定的一个或多个时间间隔内。本文的其他地方给出了术语“对象”的定义。相应地应用该定义。优选地，决定药物调整的方法的上下文中的对象，和监控药物的方法的上下文中的对象(两种方法都基于测定GDF-15与利钠肽和心脏肌钙蛋白的组合的量)，优选地不应该在获得用于实施方法的样品之前的至少2周内，或更优选至少4周内表现出急性冠脉综合症。还优选地，特别是在获得用于实施方法的样品时，对象未患急性炎症，特别地未患全身性炎性应答综合症(SIRS)。优选地，药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂。特别的是，药物是ACE抑制剂。这类药物的实例如下ACE抑制剂依那普利、卡托普利、雷米普利、群多普利；优选地，依那普利血管紧张素受体阻断剂氯沙坦、缬沙坦、厄贝沙坦、坎地沙坦、替米沙坦、依普罗沙坦；优选地，氯沙坦醒固酮拮抗剂依普利酮、螺内酯、坎利酮、Mexrenone> Prorenone ;优选地,螺内酯；更优选地，依普利酮。如上所述，在阶段A和B推荐ACE抑制剂指示需要抗炎治疗，然而由于多态性，这并非在所有情况下都表现为有效的。优选当ACE抑制剂和血管紧张素受体阻断剂无效时，醛固酮拮抗剂被认为也可用于属于ACC/AHA分类的阶段A和B的患者。可以通过本发明的方法，鉴别ACE抑制剂和血管紧张素受体阻断剂的缺乏效果。在一方面，这适用于没有患心力衰竭，但具有出现心力衰竭的风险因子的对象，优选分入阶段A的对象；另一方面，方法适用于患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象，优选分入阶段B的对象。本发明的方法还可用于心脏没有不可逆的结构性破坏(即，心力衰竭)的对象，优选分入阶段C的对象。在本发明的上下文中，通过心脏肌钙蛋白及其变体，优选肌钙蛋白T或其变体或肌钙蛋白I或其变体，特别是肌钙蛋白T或其变体的浓度，与GDF-15或其变体的浓度结合，评估药物治疗的效果，所述药物来自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂的组。在其他实施方案中，通过利钠肽，优选BNP或NT-前BNP，特别是NT-前BNP的浓度，与GDF-15的浓度结合，评估治疗效果。从前文所述可知，对象中增加的心脏肌钙蛋白浓度指示了对象患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，或者已经患心力衰竭。增加的心脏肌钙蛋白浓度还可指示对象患有冠状动脉病；如本领域技术人员已知的，此时心脏肌钙蛋白的浓度相对于健康个体可以是增加的。对象中增加的利钠肽浓度指示了对象患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，或者已经患心力衰竭。增加的利钠肽浓度还指示对象患有冠状动脉病；如本领域技术人员已知的，此时利钠肽的浓度相对于健康个体可以是增加的。从前文可知，对象中增加的GDF-15浓度不仅提示心力衰竭，而且还提示在个体的心肌中发生的炎性过程。因此，如果相对于健康个体，GDF-15的浓度未增加或仅轻微增加，提示了在心肌中没有发生或只发生少量的炎性过程。相反，对象中增加的或极大增加的GDF-15或其变体的浓度显示个体的心肌中发生炎性过程。本领域技术人员能够从心脏肌钙蛋白或其变体和GDF-15及其变体的浓度的相应值，总结出监控疗法和/或疗法调整所必需的信息。例如，(相对于健康个体)仅轻微增加的心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白I或其变体或肌钙蛋白I或其变体，特别是肌钙蛋白T或其变体的浓度，与增加的或者甚至极大增加的GDF-15或其变体的浓度的结合，提示对象未患心力衰竭，但他的心肌中正在发生显著数量的炎性过程，指出出现心力衰竭的危险，以及药物是无效的，推荐进行调整(关于疗法调整的解释，请参见本文的其他地方)。因此，增加的GDF-15水平(或极大增加的GDF-15水平)与轻微增加的心脏肌钙蛋白水平的结合，提示了应该调整疗法，特别是使用ACE抑制剂的疗法。另一方面，(相对于健康个体)极大增加的心脏肌钙蛋白，优选肌钙蛋白I或肌钙蛋白I，特别是肌钙蛋白T或其变体的浓度，与仅轻微增加的GDF-15或其变体的浓度的结合，提示对象患心力衰竭，但炎性过程是中等的，且药物是有效的，并且调整是不必要的。因此，极大增加的心脏肌钙蛋白水平与轻微增加的GDF-15水平的组合提示了疗法，特别是使用ACE抑制剂的疗法是不必要的，因此，可以继续该疗法。本领域技术人员了解，上述标志物的浓度存在多种中间值群，提示多种程度的药物施用功效。在本发明即时实施方案的优选实施方案中，得到了心脏肌钙蛋白/GDF15的比例，心脏肌钙蛋白优选是肌钙蛋白T或肌钙蛋白I，特别优选肌钙蛋白T。藉此，通常可以获得相对于各对象的治疗更复杂的信息。一般而言，高比例的心脏肌钙蛋白/GDF-15通常提示了抑制炎性过程的恰当药物。因此，心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的高比例优选提示了疗法调整不是必需的，因此，可以继续治疗。因此，心脏肌钙蛋白量与⑶F-15量的低比例提示了应该调整疗法。在上述方法的优选的实施方案中，得到了心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的比例，并与心脏肌钙蛋白量与⑶F-15量的参考比例比较。优选地，参考比例源自这样的对象，对于所述对象不需要任何疗法调整，或源自这样的对象，对于所述对象需要调整疗法(并因此，源自受益于疗法调整的对象)。优选地，相比参考比例，测试对象的样品中心脏肌钙蛋白量与⑶F-15量的增加的比例提示了不需要任何疗法调整，因此，可以继续疗法(因此，不应改变疗法)，而相比参考比例，测试对象的样品中心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的降低的比例提示了应该调整疗法。下文提及了优选的参考比例。在本发明的甚至更优选的实施方案中，上述心脏肌钙蛋白/GDF 15的比例与各自浓度结合使用。一般而言，肌钙蛋白T/⑶F-15的比例彡(等于或高于)约0.01，优选约0.017，提示了药物是恰当的，不应该改变。相反，肌钙蛋白T/GDF-15的比例 < (低于)约0.01，优选约0.005，提示了药物是不恰当的，应该进行调整。在本发明的其他实施方案中，得到了利钠肽/GDF-15的比例。利钠肽优选的是BNP型或ANP型利钠肽，甚至更优选BNP或NT-前BNP，特别是NT-前BNP。在上述方法的其他优选的实施方案中，得到了利钠肽量与GDF-15量的比例，并与利钠肽量与⑶F-15量的参考比例比较。优选地，参考比例源自这样的对象，对于所述对象不需要任何疗法调整，或源自这样的对象，对于所述对象应该调整疗法(因此，受益于疗法调整的对象)。优选地，相比参考比例，待测试是对象的样品中利钠肽量与GDF-15量的增加的比例提示了不需要任何疗法调整，因此，可以继续疗法(因此，不应改变疗法)，而相比参考比例，待测试对象的样品中利钠肽量与GDF-15量的降低的比例提示了应该调整疗法。下文提及了优选的参考比例。一般而言，NT-前BNP/⑶F-15的比例彡(等于或高于)约0.8，优选约1.9，提示了药物是恰当的，不应该改变。相反，NT-前BNP/GDF-15的比例< (低于)约O. 7，优选约O. 4，提示了药物是不恰当的，应该进行调整。在监控对象中的药物方法的上下文中，优选应用下列内容，所述对象接受了所述药物并患心力衰竭或处于先于心力衰竭(包括心力衰竭的风险因子)的阶段优选地得到了心脏肌钙蛋白/OTF 15的比例，其中心脏肌钙蛋白优选是肌钙蛋白T或肌钙蛋白I，特别是肌钙蛋白T。藉此，通常可以获得相对于各对象的治疗更复杂的信息。一般而言，高比例的心脏肌钙蛋白/⑶F-15通常提示了抑制炎性过程的恰当药物。因此，心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的高的比例优选提示了疗法是恰当的，因此，可以继续疗法。因此，心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的低得比例提示了疗法是不恰当的。在上述方法的优选的实施方案中，得到了心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的比例，并与心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的的参考比例比较。优选地，参考比例源自这样的对象，对于所述对象疗法是恰当的，或源自这样的对象，对于所述对象疗法不是恰当的。优选地，相比参考比例，测试对象的样品中心脏肌钙蛋白量与⑶F-15量的增加的比例提示了疗法是恰当的(因此，不应改变疗法)，而相比参考比例，测试对象的样品中心脏肌钙蛋白量与GDF-15量的降低的比例提示了疗法是不恰当的。下文提及了优选的参考比例。在本发明的甚至更优选的实施方案中，上述心脏肌钙蛋白/GDF 15的比例与各自浓度结合使用。一般而言，肌钙蛋白T/⑶F-15的比例等于或高于约O. 01，优选约O. 017，提示了药物是恰当的。相反，肌钙蛋白T/⑶F-15的比例 < (低于)约0.01，优选约O. 005，提示了药物是不恰当的。在本发明的其他实施方案中，得到了利钠肽/GDF-15的比例。利钠肽优选是BNP型或ANP型利钠肽，甚至更优选BNP或NT-前BNP，特别是NT-前BNP。在上述方法的其他优选的实施方案中，得到了利钠肽量与GDF-15量的比例，并与利钠肽量与⑶F-15量的参考比例进行比较。优选地，参考比例源自这样的对象，对于所述对象疗法是恰当的，或源自这样的对象，对于所述对象疗法是不恰当的。优选地，相比参考比例，测试对象的样品中利钠肽量与GDF-15量的增加的比例提示了疗法是恰当的，而相比参考比例，测试对象的样品中利钠肽量与GDF-15量的降低的比例提示了疗法是不恰当的。下文提及了优选的参考比例。一般而言，NT-前BNP/⑶F-15的比例等于或高于约O. 8，优选约1. 9，提示了药物是恰当的。相反，NT-前BNP/⑶F-15的比例< (低于)约O. 7，优选约O. 4，提示了药物是不恰当的。应理解，本发明的对象(患心力衰竭，优选分入ACC/AHA分类的阶段C ;或具有心力衰竭的风险因子或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，优选分入ACC/AHA分类的阶段A或B)已经接受了用于治疗前述状态的药物，一般而言，药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂。在甚至更优选的实施方案中，对象未接受醛固酮拮抗剂的施用。在对药物调整的决策中，优选的实施方案是对施用醛固酮拮抗剂的决策，或对增大醛固酮拮抗剂浓度的决策，或对施用不同的或另外的醛固酮拮抗剂的决策。
因此，疗法调整优选地选自i)施用醛固酮拮抗剂，ii)增大醛固酮拮抗剂浓度(特别是剂量)，和iii)施用不同的另外的醛固酮拮抗剂。优选推荐i)，如果对象在实施方法前(即，在获得样品前)未接受醛固酮拮抗剂。优选推荐ii)或iii)，如果对象在实施方法前(即，在获得样品前)接受过醛固酮拮抗剂。如果个体中的GDF-15或其变体的浓度显示炎性过程是主要的，特别是考虑到个体中的心脏肌钙蛋白的浓度显示心力衰竭或处于先于心力衰竭的阶段，应该调整疗法。优选地，应该开始施用醛固酮拮抗剂。如果个体中的心脏肌钙蛋白或其变体的浓度显示个体患心力衰竭和处于先于心力衰竭的阶段，特别是考虑到个体中的GDF-15或其变体的浓度显示或未显示炎性过程，若⑶F-15浓度显示炎性过程是主要的，则应该调整药物，以及若相对于健康个体，⑶F-15浓度未增加或仅轻微增加，提示炎性过程不存在或非主要的，则不应该调整药物。心脏中的胶原合成被认为是舒张功能障碍的原因，因为由于细胞间胶原沉积的结果，左心室变得更僵硬。导致受损害的充盈能力。因此，醛固酮拮抗剂表现出特别适合于治疗这样的个体，所述个体处于患舒张功能障碍的风险，或将要出现舒张功能障碍，或患可能恶化的舒张功能障碍。 在本发明的这一实施方案的上下文中，术语“降低的”或“增加的”指健康对象中的平均值。这些值是本领域技术人员已知的，并如下肌钙蛋白T为约2. Opg/mL或约3pg/ml (或O. Opg/mL,考虑到为约2. O的测试灵敏度)；( F-15为约680pg/ml,优选约580pg/mL,特别是约500pg/mL ；NT-前BNP为约68pg/ml,优选约37pg/mL,特别是约18pg/mL。如本领域技术人员已知的，健康对象中的NT-前BNP平均值随年龄而增加(例如，18-44 岁为 37pg/mL，55-64 岁为 72pg/ml，65-74 岁为 107pg/ml，75 岁以上为 211pg/ml)。当评估利钠肽的量是否增加时，本领域技术人员考虑上述情况。因此，本领域技术人员可以在不付出额外劳动的条件下，确定相对于健康个体的样品中的量，利钠肽的量是否增加，例如，增加至少20%。当用于本发明的上下文中时，术语“降低的”或“增加的”表示在GDF-15的情况下，相对于健康个体增加或降低至少10%，优选至少20% ;在肌钙蛋白T和NT-前BNP的情况下，当用于本发明的上下文中时，术语““降低的”或“增加的”表示相对于健康个体增加或减少至少20%,优选至少30%。因此,相对于健康对象的样品中的量,或相对于具有心力衰竭的风险因子但不具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性异常的对象(特别是在阶段A的对象中)的样品中的量，心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T增加优选至少20%，或更优选至少30%提示诊断为先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常。另外优选的是，相对于上述量增加至少50%的心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T，提示了诊断为先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常。优选地，测试对象和参考对象的风险因子是相同的。健康对象/个体优选是不具有心力衰竭的风险因子的对象，特别是正常血压的对象(参见例如，实施例1的第I组)。更优选地，所述对象是不具有心力衰竭的风险因子和不具有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和结构性心脏异常的对象。还优选地是，健康对象是具有心力衰竭的风险因子，但不具有先于心力衰竭和/或先于LVH的功能性和/或结构性异常的对象(参见例如，实施例1的第2组)。优选地，具有心力衰竭的风险因子，但不具有先于心力衰竭和/或先于LVH的功能性和/或结构性异常的对象是阶段A的对象。优选地，如果健康对象具有心脏病的风险因子，则待测试的对象具有相同的风险因子。优选地，相比来自健康对象(或者来自具有心力衰竭的风险因子，但不具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性异常的对象(特别是阶段A的对象))的样品中的心脏肌钙蛋白的量，测试对象的样品中减少的或基本相同的心脏肌钙蛋白的量提示了对象未患先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的功能性和/或结构性异常。可作为截断量的特别优选的肌钙蛋白T的参考量优选是3. 3pg/ml，或更优选是3. 5pg/mL·可作为截断量的优选的肌I丐蛋白I的参考量优选是9pg/ml。优选的参考范围可以是O. 2多至9pg/ml。对象的样品，优选血清或血浆样品中的心脏肌钙蛋白的量大于参考量，优选地提示对象患有先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的结构性或功能性心脏异常。对象的样品，优选血清或血浆样品中的心脏肌钙蛋白的量低于参考量，优选地提示对象未患先于心力衰竭和/或先于左心室肥大的结构性或功能性心脏异常。可作为截断量的特别优选的IGFBP7的参考量优选地是42. 6 pg/ml,或更优选地是46. 2pg/ml。优选的参考范围是33. 3pg/ml至46. 2pg/ml。术语“利钠肽”包括心房利钠肽(ANP)-型和脑利钠肽(BNP)型肽及其具有相同的预测的能力的变体。根据本发明的利钠肽包括ANP-型和BNP-型肽及其变体(参见例如，Bonow, 1996, Circulation93 :1946-1950)。ANP-型肽包含前 ANP 原、前 ANP、NT-前 ANP 和ANP。BNP-型肽包括前BNP原、前BNP、NT-前BNP和BNP。前肽原(前BNP原为134个氨基酸)包含短信号肽，通过酶促切割释放前肽(前BNP为108个氨基酸)。前肽被进一步切割成N端前肽(NT-前肽，在NT-前BNP的情况下为76个氨基酸)和活性激素(BNP为32个氨基酸，ANP为28个氨基酸)。优选地，根据本发明的利钠肽是NT-前ANP、ANP,更优选是NT-前BNP、BNP,及其变体。ANP和BNP是活性激素，具有比各自的失活对应物——NT-前ANP和NT-前BNP更短的半寿期。BNP在血液中代谢，而NT-前BNP作为完整分子在血液中循环，并如此通过肾清除。NT-前BNP的体内半寿期是120min，大于BNP的半寿期，后者是20min (Smith2000, J Endocrinol. 167 :239-46.) qNT-前BNP 的预分析(Preanalytics)更稳健，允许将样品方便的运输到中心实验室(Mueller2004，Clin Chem Lab Med42 :942-4.)。血样可以在室温储藏若干天，或者可以邮寄或船运而没有回收损失。相反，在室温或4°C储藏BNP48小时导致浓度损失至少20% (Mueller，参见上文；Wu2004，Clin Chem50 :867-73)。因此，取决于时程或目标性质，测量活性或失活形式的利钠肽可以是有利的。根据本发明最优选的利钠肽是NT-前BNP或其变体。如前简述，根据本发明所述的人NT-前BNP是这样的多肽，所述多肽优选包含与人NT-前BNP分子的N端部分对应的76个氨基酸的长度。现有技术中已经详细描述了人BNP和NT-前BNP的结构，例如W002/089657、W002/083913或Bonow，参见上文。优选地，本文中使用的人NT-前BNP是EP O 648 228 BI中公开的人NT-前BNP。现有技术文献中公开的涉及NT-前BNP及其变体的具体序列的内容，通过引用整合到本文中。根据本发明所述的NT-前BNP还涵盖了上述人NT-前BNP的所述具体序列的等位基因变体和其他变体。特别地，考虑与人NT-前BNP，优选与人NT-前BNP的全长在氨基酸水平优选至少具有 50%、60%、70%、80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%或 99% 同一性的变体多肽。可以通过本领域普遍已知的算法确定两条氨基酸序列之间的同一性程度。优选通过比较在比较窗口中最佳比对的两条序列，来确定同一性程度，其中用于最佳比对，相比参考序列(不包含添加或缺失)，比较窗口中的氨基酸序列的片段可以包含添加或缺失(例如，空位或凸出端)。如下计算百分比通过确定在两条序列中都存在相同氨基酸残基的位置数，产生匹配位置数，再用匹配位置数除以比较窗口中的位置总数，并将结果乘以100，产生序列同一性的百分比。可通过Smith和Waterman Add. APL. Math. 2 :482(1981)的局部同源性算法，Needleman 和 Wunsch J. Mol. Biol. 48 443 (1970)的同源性比对算法，Pearson和Lipman Proc. Natl. Acad. Sc1. (USA) 85 :2444 (1988)的相似性搜索方法，通过计算机执行上述算法(Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group (GCG),575Science Dr. ,Madison, WI 中的 GAP、BESTFIT、BLAST、PASTA 和 TFASTA)或目测检视，进行比较序列的最佳比对。考虑到已鉴别了用于比较的两条序列，优选使用GAP和BESTFIT确定其最佳比对，并因此确定同一性长度。优选使用空位权重默认值为5. 00，空位长度默认值为O. 30。上文提及的变体可以是等位变体，或任何其他物种特异性的同源物、旁系同源物或直系同源物。基本相似以及同样考虑的还有蛋白水解的降解产物，所述产物仍然被针对相应的全长肽的诊断工具或配体识别。还涵盖了相比人NT-前BNP的氨基酸序列，具有氨基酸缺失、替换和/或添加的变体多肽，只要所述多肽具有NT-前BNP的性质。本文所述的NT-前BNP的性质是免疫学和/或生物学性质。优选的，NT-前BNP具有与人NT-前BNP可比较的免疫学性质(即，表位组成)。因此，变体应该可被上述用于确定利钠肽量的工具或配体识别。可以通过 Karl 等人(Karl 1999, Scand J Clin Lab Invest 230:177-181)，Yeo 等人(Yeo 2003，Clinica Chimica Acta 338:107-115)描述的测定，检测 NT-前 BNP的生物学和/或免疫学性质。变体还包括了翻译后修饰的肽，例如糖基化肽。此外，根据本发明的变体还是在收集样品后修饰的肽或多肽，例如通过共价或非共价连接标签，特别是放射性或荧光的标签修饰。应理解，在本发明的这一实施方案的上下文中的对象(即，在接受药物施用的对象中的疗法监控的方法和疗法调整的方法，所述药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂)不应患有这样的疾病，所述疾病影响相对于未患本发明主题的心脏异常或疾病的个体的标志物浓度。因此，对象除心力衰竭/先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常，和患心力衰竭的风险因子外，应该是临床上健康的。此外，对象不应患糖尿病，不应具有肝病，不应怀孕且不应患恶性肿瘤。本领域技术人员理解，本申请提及的心脏肌钙蛋白(肌钙蛋白T或其变体和肌钙蛋白I或其变体)、NT-前BNP或其变体，和在较小程度上的GDF-15或其变体所述的浓度不可应用于患受损害的肾功能的患者，优选患肾衰竭的患者，特别是患慢性和晚期肾衰竭的患者。在本发明的优选的实施方案中，患受损肾功能的患者，优选患肾衰竭的患者，特别是患慢性和晚期肾衰竭的患者没有包括在(排除于)本发明的方法中。在另一个优选的实施方案中，具有肾性高血压的患者没有包括在(排除在)本发明的方法中。优选的，本文中使用的“对象”排除了患受损肾功能的患者，优选患肾衰竭的患者，特别是患慢性和晚期肾衰竭的患者，更优具有肾性高血压的患者，最优选患本句中提及的疾病和病况之一的所有患者。在上下文中，“肾衰竭”被视为是低于60至120ml/min普通范围，优选低于60ml/min的受损的肾小球滤过率(GFR)。慢性肾衰竭是长期的、进行性肾功能恶化，通常导致晚期肾衰竭。当GFR达到至多约30ml/min的速率时，诊断为晚期肾衰竭。通过本领域技术人员普遍已知的肌酐清除率确定GFR。由于受损的肽清除率，具有受损肾功能的对象表现出高于上述的肌钙蛋白I和肌钙蛋白T水平。水平随肾损坏的严重程度变化。肾损坏的严重程度分为不同级别，如下所示。O: ^ 90ml/minI: ^ 90ml/min和微白蛋白尿2 -S 60- < 90ml/min3 -S 30- < 60ml/min
4 -S 15- < 30ml/min5: < 15ml/min(来源:美国国立肾脏基金会(NationalKidney Foundation),出版于:AmJ.Kidney Dis39supplI,2002 ；Clinical Practice Guidelines for chronic kidneydisease)。本文所述的对象应该优选将要离开阶段A，且将要进入阶段B (或应该已经进入阶段B早期)。因此，对象优选应该无心肌梗塞历史，特别应该无已知的心肌梗塞历史。因此，在本文中使用的术语“对象”优选排除了具已知的心肌梗塞历史的对象。这特别适用于本文所述的诊断方法、区分方法、监控药物的方法，和预测方法。无已知的心肌梗塞(MI)历史的对象优选过去，即，在获得测试样品前，未患心肌梗塞(特别是确诊的心肌梗塞)。术语“心肌梗塞”是本领域普遍已知的。在本文中使用的术语优选包括ST-升高MI (STEMI)和非ST-升高MI (NSTEMI)。还优选的是，在本文中使用的术语“对象”优选排除了患冠状动脉病的对象。因此，待测试的对象不应患冠状动脉病。这特别适用于本文所述的诊断方法、区分方法、监控药物的方法，和预测方法。术语“冠状动脉病”(CAD，通常也被称为冠脉心脏病(CHD))是本领域技术人员已知的。术语优选指这样的病况，其中至少一条主要的冠状动脉变窄，从而每条血管应发生超过50%的狭窄。未患CAD的对象的主要的冠状动脉具有小于50%狭窄(因此小于50%阻塞)。评估冠状动脉阻塞的程度是本领域普遍已知的，优选通过冠脉造影评估所述程度。此外，优选的是，在本发明方法的上下文中，待测试的对象不具有增加的利钠肽水平。这特别适用于本文所述的诊断方法、区分方法、监控药物的方法，和预测方法。优选地，对象不具有增加的脑利钠肽水平。更优选地，对象不具有增加的BNP-型利钠肽水平。最优选的，对象不具有增加的NT-前BNP水平。不具有增加的利钠肽水平，特别是增加的NT-前BNP水平的对象，优选具有增加少于20%的利钠肽，所述增加是相对于健康个体的，更优选相对于具有心力衰竭的风险因子，但不具有先于LVH和/或心力衰竭的功能性和/或结构性异常的健康对象(特别是阶段A的对象)的样品中的量，相对于优选具有心力衰竭的相同风险因子并具有先于LVH和/或先于心力衰竭的功能性和/或结构性异常的对象(特别是阶段B早期的对象)的样品中的量。更优选地，对象具有比上述水平低10%的NT-前BNP水平。上述样品优选适用于血清水平。术语“样品”指体液的样品，分离的细胞的样品或组织或器官的样品。体液样品可以通过普遍已知的技术获得，并且优选包括血液、血浆、血清、尿的样品，血液、血浆或血清的样品。应理解，样品取决于待确定的标志物。因此，涵盖了在不同样品中确定本文所述的多肽。心脏肌钙蛋白或其变体、NT-前BNP或其变体、GDF 15或其变体和IGFBP7或其变体优选是在血清或血浆样品中确定的。根据本发明，可以通过用于确定样品中的肽浓度(术语“浓度”、“水平”和“量”在本文中优选可互换使用)的所有已知工具实现肽或多肽浓度的确定。所述工具包含免疫测定设备和可以在多种夹心、竞争性或其他测定模式中利用经标记的分子的方法。所述测定可发出指示存在或不存在肽或多肽的信号。此外，信号强度可以优选与样品中存在的多肽浓度直接或间接相关(例如，成反比)。其他合适的方法包含测肽或多肽特异性的物理或化学性质，例如其精确的分子量或NMR谱。所述方法优选包含生物传感器、与免疫测定偶联的光学设备的、生物芯片、分析设备例如质谱、NMR分析仪或层析设备。此外，方法包括基于显微平板ELISA的方法、全自动或机械化的免疫测定(例如可用ElecsysTM分析仪)、CBA (酶促钴结合测定,可用例如Roche-HitachiTM分析仪)，和乳胶凝聚测定(例如可用Roche-HitachiTM 分析仪)。优选地，确定肽或多肽的浓度包括以下步骤(a)将能够触发细胞应答的细胞与所述肽或多肽接触足够的时间，所述细胞应答的强度指示肽或多肽的浓度，(b)测量细胞应答。为了测量细胞应答，优选将样品或经处理的样品添加至细胞培养物，并测量内部或外部的细胞应答。细胞应答可以包括可测量的报告子基因的表达，或物质(例如，肽、多肽或小分子)的分泌。表达或物质应该生成与肽或多肽的浓度相关的强度信号。还优选地，确定肽或多肽的浓度包括测量可从样品中的肽或多肽获得的特异性强度信号的步骤。如上所述，此类信号可以是肽或多肽特异性的m/z变量处的信号强度，所述m/z变量是在肽或多肽特异性的质谱或NMR谱中观测到的。确定肽或多肽的浓度可以优选包括步骤(a)将肽与特异性配体接触，(b)(任选地)去除未结合的配体，(C)测量结合的配体的浓度。结合的配体将生成强度信号。根据本发明的结合包括共价的和非共价结合。根据本发明的配体可以是与本文所述肽或多肽结合的任何化合物，例如肽、多肽、核酸或小分子。优选的配体包括抗体、核酸、肽或多肽，例如肽或多肽及其片段的包含对于肽的结合结构域的受体或结合搭档，和适配体，例如核酸或肽适体。制备此类配体的方法是本领域普遍已知的。例如，商业供应商也提供合适抗体或适配体的鉴别和生产。本领域技术人员熟悉开发具有较高亲和力或特异性的此类配体的衍生物的方法。例如，可以向核酸、肽或多肽中导入随机突变。然后，可以根据本领域已知的筛选程序，例如，噬菌体展示，测试这些衍生物的结合。本文提及的抗体包括多克隆和单克隆抗体，及其片段，例如能够结合抗原或半抗原的FV、Fab和F(ab)2片段。本发明还包括单链抗体和人源化杂合抗体，其中表现出理想的抗原特异性的非人供体抗体的氨基酸序列与人受体抗体的序列组合。供体序列通常至少包括供体的抗原结合氨基酸残基，但还可以包含供体抗体的其他结构性和/或功能性相关的氨基酸残基。此类杂合体抗原可以通过本领域普遍已知的若干方法制备。优选的，配体或活性剂特异性结合肽或多肽。根据本发明，特异性结合意指配体或活性剂不与待分析样品中存在的另一种肽、多肽或物质本质地结合(“交叉反应”)。优选地，特异性结合的肽或多肽应该以比任何其他相关肽或多肽高至少3倍，更优选高至少10倍，甚至更优选，高至少50倍的亲和力来结合。如果非特异性结合仍然是可区分且明确地测量的，例如，根据它在Western印迹上的大小，或通过它在样品中相对较高的丰度，则非特异性结合可以是可忍受的。可以通过本领域已知的方法测量配体的结合。优选地，所述方法是半定量或定量的。合适的方法描述如下。 首先，可以直接测量配体的结合，例如，通过NMR或表面等离子体共振。其次，如果配体还作为目标肽或多肽的酶促活性的底物发挥作用，则可以测量酶促反应产物(例如，可以通过测量被切割的底物的浓度，例如，在Western印迹中，来测量蛋白酶的浓度)。备选地，配体本身可以表现出酶促性质，且“配体/肽或多肽”复合物或分别结合了肽或多肽的配体可以与合适的底物接触，允许通过生成强度信号来检测。为了测量酶促反应产物，底物浓度优选是饱和的。还可以在反应前用可检测的标签标记底物。优选地，样品与底物接触足够的时间。足够的时间指产生可检测的，优选可测量的产物浓度所必需的时间。代替测量产物浓度，可以测量出现给定(例如可检测)的产物浓度所必需的时间。第三，配体可以与标签共价或非共价的偶联，允许检测和测量配体。可以通过直接或间接的方法进行标记。直接标记涉及直接(共价或非共价)偶联标记与配体。间接标记涉及(共价或非共价)结合第二配体与第一配体。第二配体应该特异性结合第一配体。所述第二配体可以与合适的标记偶联，和/或是结合第二配体的第三配体的靶(受体)。第二、第三或者甚至更高阶配体的使用通常用于增加信号。合适的第二或更高阶配体可以包括抗体、二抗和普遍已知的链霉亲和素-生物素系统(Vector Laboratories, Inc.)。配体或底物还可以用本领域已知的一种或多种标签“标记”。然后，此类标签可以用作更高阶配体的靶。合适的标签包括生物素、地高辛、His-标签、谷胱甘肽-S-转移酶、FLAG、GFP、myc-标签、A型流感病毒血凝素(HA)、麦芽糖结合蛋白等。在肽或多肽的情况下，标签优选位于N-端和/或C-端。合适的标签是然后可以通过恰当的检测方法检测的标签。典型的标签包括金颗粒、乳胶珠、二氢化吖啶酯、鲁米诺、钌、酶促活性的标签、放射性标签、磁性标签(例如，磁珠，包括顺磁性和超顺磁性的标签)和荧光标签。酶促活性的标签包括例如，辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、半乳糖苷酶、荧光素酶及其衍生物。合适的检测底物包括二氨基联苯胺(DAB)、3，3-5，5'-四甲基联苯胺、NBT-BCIP (4-氯化硝基四氮唑和5-溴-4-氯-3-吲哚憐酸酯，可自 Roche Diagnostics 获得即用储液)、CDP-Star (Amersham Biosciences)、ECF (Amersham Biosciences)。合适的酶-底物组合可以导致可以根据本领域已知的方法测量(例如，使用光敏感薄膜或合适的照相系统)的显色的反应产物、荧光或化学发光。为了测量酶促反应，可以类似地应用上文给出的标准。典型的荧光标记包括荧光蛋白(例如GFP及其衍生物)、Cy3、Cy5、德克萨斯红、荧光素和Alexa染料(例如，Alexa568)。其他荧光标记可获得自例如Molecular Probes (Oregon)。还考虑使用量子点作为突光标记。典型的放射性标记包括等。可以通过任何已知的和恰当的方法检测放射性标记，例如，光敏感型薄膜或磷成像仪。根据本发明的合适的测量方法还包括沉淀(特别是免疫沉淀)、电化学发光(电致化学发光)、RIA (放射性免疫测定)、ELISA (酶联免疫吸附测定)、夹心酶免疫测试、电化学发光夹心免疫测定(ECLIA)、解离增强的镧系荧光免疫测定(DELFIA)、闪烁邻近测定(SPA)、比浊法、浊度测定法、基于乳胶的比浊法或浊度测定法，或固相免疫测试。其他本领域已知的方法(例如凝胶电泳、2D凝胶电泳、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western印迹和质谱)可以单独使用或与进行标记或其他上述检测方法组合使用。肽或多肽的浓度还可以优选如下确定(a)将包含上述肽或多肽的配体的固体支持物与包含肽或多肽的样品接触，和(b)测量与支持物结合的肽或多肽的浓度。优选选自核酸、肽、多肽、抗体和适配体的配体，优选地以固定的形式位于固体支持物上。用于生产固体支持物的材料是本领域普遍已知的，尤其包括可商购的柱材料、聚苯乙烯珠、乳胶珠、磁珠、金属胶体颗粒、玻璃和/或娃芯片和表面、硝酸纤维素条、膜、薄片、duracytes、反应盘的孔和壁、塑料管等。配体或活性剂可以与许多不同的载体结合。普遍已知的载体的例子包括玻璃、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚丙乙烯、聚乙烯、聚碳酸酯、葡聚糖、尼龙、直链淀粉、天然和经修饰的纤维素、聚丙烯酸酯、琼脂糖和磁铁。用于本发明的目的，载体的性质可以是可溶的或不可溶的。用于固定/固化所述配体的合适方法是普遍已知的，包括但不限于离子、疏水、共价相互作用等。还考虑使用“悬液阵列”，如根据本发明的阵列(Nolan2002，TrendsBiotechnol.20(l) :9-12)。在此类悬液阵列中，载体(例如，微珠或微球)存在于悬液中。阵列由携带了不同配体的可能被标记的不同微珠或微球组成。生产此类阵列的方法一般是已知的，例如基于固相化学和光不稳定的保护基团(US5，744，305)。术语“浓度”在本文中涵盖了多肽或肽的绝对浓度、所述多肽或肽的相对浓度，以及与其相关或可自其衍生的任何值或参数。此类值或参数包含来自通过直接测量从所述肽获得的所有特异性物理或化学性质的强度信号值，例如，质谱或NMR谱的强度值。此外，涵盖了通过本说明书的其他地方提及的间接测量获得的所有值或参数，例如，从应答于肽的生物学读出系统确定的应答水平，或者从特异性结合的配体获得的强度信号。应理解，还可以通过所有的标准数学运算获得与上述浓度或参数相关的值。此外，本发明还涵盖了适用于实施本发明的方法的设备，包含a)用于确定下列肽的浓度的工具心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或肌钙蛋白I或其变体；和任选地一种或多种下列工具用于确定炎性标志物的浓度的工具，优选GDF-15或其变体；和/或用于确定IGFBP7或其变体的浓度的工具；b)用于比较步骤a)中确定的浓度与对照样品中的所述标志物各自的浓度的工具，从而实施本发明的方法。设备适用于实施本发明的方法。本发明的方法优选如下诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常和/或分别的中风和/或分别的慢性肾病；和/或在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险。一般而言，对象(即，具有风险因子和/或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体)未患心力衰竭，即，患者的心肌尚未经历永久性的结构性或功能性伤害，并且将能够完全恢复健康，并且不被分入ACC/AHA分类的阶段C或D。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象没有表现出心力衰竭的明显迹象和/或症状。
取决于根据本发明的装置可获得的结果，可以做出疗法或疗法调整的决定。可以通过例如提高或减少所施用药物的浓度来调整疗法。因此，装置还可以也适用于监控所述疗法。本发明还涉及一种或多种上述装置的用途，用于在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或中风和/或慢性肾病，在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险。一般而言，对象(即，具有风险因子和/或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体)未患心力衰竭，即，患者的心肌尚未经历永久性的结构性或功能性伤害，将能够完全恢复健康，并且不被分入ACC/AHA分类的阶段C或D。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这些风险因子是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象没有表现出心力衰竭的明显迹象和/或症状。取决于使用根据本发明的设备可获得的结果，可以作出疗法或疗法调整的决定。可以通过例如提高或减少所施用药物的浓度来调整疗法。因此，还可以使用装置监控所述疗法。术语“装置”在本文中涉及工具的系统，其至少包含彼此有效连接，从而允许进行预测的上述工具。用于确定上述多肽之一的浓度的优选工具，以及用于实施比较的工具公开在上文涉及本发明方法的内容中。如何以有效的方式连接工具取决于包括在装置内的工具的类型。例如，当应用自动确定肽浓度的工具时，可以通过例如计算机程序对由所述自动化操作工具获得的数据进行加工，从而获得理想的结果。优选地，在上述情况下，工具包括在单个装置中。此类装置可以因此包括用于测量应用的样品中的肽或多肽浓度的分析单元，和用于加工评价的结果数据的计算机单元。计算机单元优选包含数据库，所述数据库包括本说明书其他地方提及的储存的参考浓度或其值，以及用于实施确定的多肽浓度与数据库中储存的参考浓度的比较的计算机执行算法。本文中使用的计算机实施指确实包括在计算机单元中的计算机可读程序代码。备选地，在使用工具(例如测试条)确定肽或多肽浓度的条件下，比较的工具可以包括将确定的浓度定位至参考浓度的对照条或表。测试条优选与配体偶联，所述配体特异性结合本文所述的肽或多肽。条或设备优选包含用于检测所述肽或多肽与所述配体结合的工具。用于检测的优选工具连同涉及上述本发明方法的实施方案公开。在此情况下，工具有效连接使系统的用户能够根据手册中给出的说明和解释，收集浓度测定的结果及其诊断或预后值。在上述实施方案中，工具可以作为独立的设备出现，优选作为试剂盒包装在一起。本领域技术人员将认识到如何在不进行额外劳动的条件下连接工具。优选的装置是可以在不需要专业临床医生的特别知识的条件下应用的，例如仅需要装载样品的测试条或电动设备。结果可以作为需要临床医生解译的原始数据的输出结果给出。然而优选地，装置的输出结果是经过加工(即，评价)的，即，不需要临床医生解译原始数据。其他优选的装置包含分析单元/装置(例如，与特异性识别心脏肌钙蛋白、IGFBP7或GDF 15的配体偶联的生物传感器、阵列、固体支持物、等离子体表面共振装置、NMR分光光度计、质谱等)和/或上文根据本发明的方法提及的评价单元/装置。
本发明还涉及上述装置的用途，用于在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，监控诊断有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象中的疗法。此外，本发明涉及适用于实施本发明上述的方法的试剂盒，其包含a)用于确定下列肽的浓度的工具心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体；炎性标志物，优选⑶F-15或其变体；IGFBP7或其变体，和b)用于比较步骤a)中确定的浓度与对照样品中的所述标志物的各浓度的工具，从而实施本发明的方法。 试剂盒适用于实施本发明上述方法。优选地，试剂盒包含用于实施本发明的方法的说明。本发明的方法优选如下诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险。一般而言，对象(即，具有风险因子和/或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体)未患心力衰竭，即，患者的心肌尚未经历永久性的结构性或功能性伤害，将能够完全恢复健康，并且不被分入ACC/AHA分类的阶段C或D。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这些风险因子是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象没有表现出心力衰竭的明显迹象和/或症状。取决于根据本发明的试剂盒可获得的结果，可以做出疗法或疗法调整的决定。可以通过例如提高或减少所施用药物的浓度来调整疗法。因此，试剂盒也适用于监控所述疗法。本发明还涉及上述试剂盒的用途，用于诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或分别出现中风，和/或分别出现慢性肾病，在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险。一般而言，对象(即，具有风险因子和/或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体)未患心力衰竭，即，患者的心肌尚未经历永久性的结构性或功能性伤害，将能够完全恢复健康，并且不被分为ACC/AHA分类的阶段C或D。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这些风险因子是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象没有表现出心力衰竭的明显迹象和/或症状。取决于使用根据本发明的试剂盒可获得的结果，可以做出疗法或疗法调整的决定。可以通过例如提高或减少所施用药物的浓度来调整疗法。因此，还可以使用试剂盒监控所述疗法。
术语“试剂盒”在本文中指上述工具的集合，优选分别或在单个容器中提供。容器还优选包含用于实施本发明的方法的说明。本发明还涉及上述试剂盒、装置和工具用于下列目的的用途试剂盒或装备用于确定对象样品中的心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体；以及视情况而定，GDF-15或其变体；和/或IGFBP7或其变体的浓度的用途；和工具用于确定心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体；以及视情况而定，GDF-15或其变体；和/或IGFBP7或其变体的浓度的用途；以及工具用于将心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体；以及视情况而定，GDF-15或其变体；和/或IGFBP7或其变体的浓度，与对照样品中的至少一种所述标志物的浓度进行比较的用途，用于诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险，并且，其中所有的用途都基于诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。本发明还涉及用于下列目的下列抗体和工具的用途心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的抗体；以及视情况而定，GDF-15或其变体的抗体，和/或IGFBP7或其变体的抗体，和/或用于确定心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的浓度的工具；以及视情况而定，用于确定GDF-15或其变体的浓度的工具，和/或用于确定IGFBP7或其变体的浓度的工具，和/或用于将心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的浓度；以及视情况而定，GDF-15或其变体和/或IGFBP7或其变体的浓度与对照样品中的至少一种所述标志物的浓度进行比较的工具，用于生产诊断组合物的用途，所述诊断组合物用于诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险，并且，其中所有的用途都基于诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。本发明还涉及用于下列目的下列抗体和工具的用途心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的抗体；以及视情况而定，GDF-15或其变体的抗体，和/或IGFBP7或其变体的抗体，和/或用于确定心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的浓度的工具；以及视情况而定，用于确定GDF-15或其变体的浓度的工具，和/或用于确定IGFBP7或其变体的浓度的工具，和/或用于将心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的浓度；以及视情况而定，GDF-15或其变体和/或IGFBP7或其变体的浓度与对照样品中的至少一种所述标志物的浓度进行比较的工具用于下述的用途诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或在具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，区分对象是仅具有风险因子，还是对象已经患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常；和/或预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险，并且，其中所有的用途都基于具有出现心力衰竭的风险因子的对象中，诊断先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。此外，本发明涉及特异性结合女性对象的样品中的心脏肌钙蛋白或其变体，优选肌钙蛋白T或其变体和/或肌钙蛋白I或其变体的抗体；以及视情况而定，特异性结合GDF-15或其变体的抗体，和/或特异性结合IGFBP7或其变体的抗体，用于预测具有出现心力衰竭的风险因子的女性对象患LVH的风险的用途。一般而言，上文中关于上述本发明用途所提及的对象(即，具有风险因子和/或患先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的个体)未患心力衰竭，即，患者的心肌尚未经历永久性的结构性或功能性伤害，将能够完全恢复健康，并且不被分入ACC/AHA分类的阶段C或D。优选地，对象具有心力衰竭的风险因子。这些风险因子是本领域技术人员已知的，包括例如高血压和糖尿病。还优选的是，对象没有表现出心力衰竭的明显迹象和/或症状。如前所述，本发明的用途优选是体外方法。本文之前给出的解释和定义经必要修正后应用于下列主题。本发明的特别优选的主题如下1、诊断对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较，诊断所述功能性和/或结构性异常。2、根据主题I的方法，其中对象未患心力衰竭或没有表现出心力衰竭的症状。3、根据主题I或2的方法，其中心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白I或T或其变体。4、根据主题I至3的任一项的方法，其中对象患有左心室功能障碍。5、根据主题I至4的任一项的方法，其中心力衰竭的一种或多种其他标志物选自⑶F-15或其变体，和/或IGFBP7或其变体。6、区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象的方法，方法包括步骤a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较，区分所述对象。7、预测对象患心力衰竭或先于心力衰竭的分别的心血管和肾事件的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较，预测对象患心力衰竭的风险。8、根据主题7的方法，其中对象患有左心室功能障碍，优选舒张期功能障碍。9、决定对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将如此确定的浓度与参照量进行比较，决定对象的治疗。10、根据主题9的方法，其中治疗是施用下列药物中的至少一种:利尿剂、钙拮抗齐U、肾上腺素能激动剂、正性肌力剂、他汀类、肼屈嗪和异山梨醇硝酸酯，优选β阻断剂、醛固酮拮抗剂，特别是ACE抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂。11、监控对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的方法，方法包括步骤:a)确定至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤a)中确定的所述标志物的如此确定浓度与对照样品中的浓度进行比较，评估对象是否已经发生了病理生理学状态的改变。12、诊断对象中的心力衰竭的方法，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较,评估心力衰竭。13、监控对象中药物的方法，所述对象接受所述药物并患有心力衰竭或处于包括心力衰竭的风险因子的先于心力衰竭的阶段，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体和/或利钠肽或其变体的浓度，b)测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，和c)通过将如此确定的浓度与参照量进行比较，监控药物。14、决定对象中药物调整的方法，所述对象接受所述药物并患有心力衰竭或处于包括心力衰竭的风险因子的先于心力衰竭的阶段，方法包括步骤:a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体和/或利钠肽或其变体的浓度，b)测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，和c)通过将如此确定的浓度与参照量进行比较，决定药物调整。
15、根据主题13或14的方法，其中药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂。本说明书中的所有参考文献都通过引用以其全部公开内容以及本说明书中具体提及的公开内容整合到本文中。附图显示:图1:属于实施例描述的第1、2、3或4组的患者中的肌钙蛋白T的值。图2:属于实施例描述的第1、2、3或4组的患者中的⑶F_15的值。图3:属于实施例描述的第1、2、3或4组的患者中的IFGBP7的值。图4:属于实施例描述的第1、2、3或4组的患者中的NT-前BNP的值。下列实施例应该仅示例本发明。无论如何不应被视为限制本发明的范围。
实施例方法使用Roche的电化学发光ELISA夹心测试Elecsys Troponin Ths (高灵敏度)STAT(短周转时间)测定，确定肌钙蛋白T。测试使用特异性针对人心脏肌钙蛋白T的两种单克隆抗体。抗体识别位于心脏肌钙蛋白T蛋白质中心部分上的两个表位(氨基酸位置125-131和136-147)，所述心脏肌钙蛋白T由288个氨基酸组成。hs-TnT测定允许测量范围在3至10000pg/mL内的肌钙蛋白T水平。使用Roche的电化学发光ELISA夹心测试Elecsys前BNP II STAT (短周转时间)测定，确定NT-前BNP。测试使用两种单克隆抗体，所述抗体识别位于前BNP (1-108)的N端部分(1-76)的表位。为了确定血清和血浆样品中⑶F-15浓度，使用Elecsys原型测试，所述测试使用R&D Systems (AF957)的多克隆、⑶F-15亲和层析纯化的山羊抗人⑶F_15IgG抗体。在每个实验中，用R&D Systems (957-GD/CF)的重组人⑶F-15生成标准曲线。在标准血浆样品中测试新批次或重组GDF-15蛋白的结果，通过向该测定中引入调整因子来校正大于10%的任何偏差。在用最终稀释因子校正后，来自同一患者的血清和血浆样品中的⑶F-15测量产生几乎相同的结果。测定的检测限制为200pg/ml。为了检测人血清或血浆中的IGFBP7，使用夹心ELISA。为了捕获和检测抗原，分别将R&D Systems (货号:AF1334)的抗IGFBP7多克隆抗体的等份试样与生物素和地高辛缀
八
口 ο在Ix PBS溶液中，按lpg/ml，用IOOpi生物素化的抗IGFBP7多克隆抗体孵育链霉亲和素包被的96孔微滴度板60min。孵育后，用Ix PBS+0.02% Tween-20洗涤平板3次，用PBS+1%BSA(牛血清白蛋白)封闭，然后用Ix PBS+0.02% Tween-20再洗涤3次。然后，分别用作为标准抗原的重组IGFBP7的系列稀释液，或用来自患者或对照个体的稀释的血清或血浆样品(I: 50)，孵育孔1.511。在结合IGFBP7后，用Ix PBS+0.02% Tween-20洗涤平板3次。为了特异性地检测结合的IGFBP7，在Ix PBS+1 % BSA中，按I μ g/ml，用100 μ I地高辛化的抗IGFBP7多克隆抗体孵育孔60min。之后，洗涤孔3次，去除未结合的抗体。在下一步骤中，在lxPBS+1% BSA中，用75mU/ml抗地高辛-POD缀合物(Roche DiagnosticsGmbH，Mannheim，德国，货号1633716)孵育孔60min。之后用同一缓冲液洗涤平板6次。为了检测抗原-抗体复合物，用 100 μ I ABTS 溶液(Roche Diagnostics GmbH, Mannheim,德国，货号11685767)孵育孔，并在15min后，用ELISA读板器测量405和492nm处的光密度(OD)。实施例1:在下列个体集合中确定肌钙蛋白T、NT-前BNP、⑶F15和IGFBP7。已经获得了患者的知情同意。组1:正常血压对象，η = 32组2:具有患心力衰竭的风险因子的高血压对象(阶段Α)，η = 47组3:具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的高血压对象(阶段B早期)；对象不具有升高的NT-前BNP水平，对象表现出左心室的结构性改变(增加的中隔壁厚度(> Ilmm)、增加的后壁厚度(> 12_)，或肥大或向心性肥大的首次迹象)和/或对象表现出收缩功能障碍(LVEF < 50% )和/或具有至少50%的保持的射血分数LVEF的舒张功能障碍，η = 37。对象没有患左心室肥大。组4:具有膨胀型心肌病(DCM)的对象，η = 29对于第1-3组，对象未表现出受损的肾功能。此外，第I组-第3组排除了具有已知的心肌梗塞和冠状动脉病历史的患者。通过超声心动图确定左心室的几何结构改变(中隔壁厚度ST、后壁厚度PWT、LVEF, LVEDD);通过超声心动图确定功能性改变(LVEDD)。数据显示，第3组对象(具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的高血压对象)中的肌钙蛋白T水平高于第I组(正常血压对象)和第2组(仅具有患心力衰竭的风险因子)中的肌钙蛋白T水平。当个体向心力衰竭发展时，肌钙蛋白T水平继续升高(DCM，第4组)。数据显示，第3组对象(具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的高血压对象)中的⑶F15水平高于第I组(正常血压对象)和第2组(仅具有患心力衰竭的风险因子)中的GDF15水平。当个体向心力衰竭发展时，GDF15水平继续升高(DCM，第4组)。数据显示，第3组对象(具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的高血压对象)中的IGFBP7水平高于第I组(正常血压对象)和第2组(仅具有患心力衰竭的风险因子)中的IGFBP7水平。当个体向心力衰竭发展时，胰岛素生长因子结合蛋白7水平继续升高(DCM，第4组)。数据显示，仅第4组对象(具有膨胀型心肌病的对象)中的NT-前BNP水平升高，但第I组(正常血压对象)、第2组(具有患心力衰竭的风险因子的高血压对象)和第3组(具有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的高血压对象)中的NT-前BNP水平中未观察到任何差异。令人惊讶地发现，肌钙蛋白水平可以鉴别处于阶段B早期，甚至在肥大变得明显之前的对象，即，对象具有患心力衰竭的风险因子，并表现出左心室的首次结构性改变，但未患肥大。⑶F-15和IGFBP7提供相似的诊断信息。数据显示在下表1、2、3和4中。图1、2、3和4分别是表1、2、3和4中的数据的图
/Jn ο
权利要求
1.诊断患高血压、糖尿病、肥胖、代谢综合症和/或具有吸烟史的对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，方法包括步骤: a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度， b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和 c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较，诊断所述功能性和/或结构性异常， 其中对象没有表现出左心室肥大，且 其中先于心力衰竭的结构性和/或功能性心脏异常包含选自左心室结构性改变、增加的中隔直径、 增加的后壁直径和舒张功能障碍的异常。
2.根据权利要求1的方法，其中对象未患心力衰竭或未展示出心力衰竭的症状。
3.根据权利要求1至2中任一项的方法，其中心脏肌钙蛋白是肌钙蛋白I或T或其变体。
4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中对象患高血压，特别是动脉高血压，和/或糖尿病，特别是2型糖尿病。
5.根据权利要求1至4中任一项的方法，其中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常是先于心力衰竭和/或左心室肥大的结构性和/或功能性心脏异常。
6.根据权利要求1至5中任一项的方法，其中功能性和/或结构性异常是增加的中隔直径。
7.根据权利要求1至6中任一项的方法，其中功能性和/或结构性异常是舒张功能障碍，特别是具有保持的左心室射血分数(LVEF)的舒张功能障碍无症状的舒张左心室功能障碍。
8.根据权利要求1至7中任一项的方法，其中对象不具有增加的NT-前BNP水平，特别地，其中对象不具有较之参照量、特别是较之健康个体中的NT-前BNP的量增加至少20%或至少30%的NT-前BNP。
9.根据权利要求1至8中任一项的方法，其中相对于健康个体中的量，心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T，增加至少20%，特别地，增加至少30%提示诊断为先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常。
10.根据权利要求1至9中任一项的方法，其中心力衰竭的一种或多种其他标志物选自⑶F-15或其变体，和/或IGFBP7或其变体。
11.区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象的方法，方法包括步骤: a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度， b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和 c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较，区分所述对象， 其中对象没有表现出左 心室肥大，且 其中先于心力衰竭的结构性和/或功能性心脏异常包含选自左心室结构性改变、增加的中隔直径、增加的后壁直径和舒张功能障碍的异常。
12.权利要求11的方法，其中对象患有高血压。
13.预测女性对象患左心室肥大的风险的方法，方法包括步骤: a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体的浓度， b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和 c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与参照量进行比较，预测对象患左心室肥大的风险。
14.权利要求13的方法，其中对象具有至少一种心力衰竭的风险因子。
15.权利要求14的方法，其中具有至少一种风险因子的对象患高血压。
16.权利要求13至15中任一项的方法，其中参照量源自健康的女性对象或其组，且其中较之参照量，心脏肌钙蛋白，优选地，肌钙蛋白T增加至少30%，特别地增加至少50%指示对象患左心室肥大的风险。
17.在接受药物的对象中监控所述药物的方法，所述药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂，所述对象患心力衰竭或处于包括心力衰竭风险因子的先于心力衰竭的阶段，方法包括步骤: a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体和/或利钠肽或其变体的浓度， b)测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，和 c)通过比较如此确定的浓度与参照量，监控药物。
18.决定对象中药物调整的方法，所述药物选自ACE抑制剂、血管紧张素受体阻断剂和醛固酮拮抗剂，所述对象接 受所述药物并且患心力衰竭或处于包括心力衰竭风险因子的先于心力衰竭的阶段，方法包括步骤: a)测量从对象获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白或其变体和/或利钠肽或其变体的浓度， b)测量样品中的GDF-15或其变体的浓度，和 c)通过比较如此确定的浓度与参照量，决定药物调整。
19.根据权利要求17或18的方法，其中药物是ACE抑制剂。
20.根据权利要求17至19中任一项的方法，其中测量心脏肌钙蛋白，特别是肌钙蛋白T和⑶F-15的浓度，且其中得到心脏肌钙蛋白和⑶F-15(心脏肌钙蛋白/⑶F-15)的比例。
21.根据权利要求20的方法，其中肌钙蛋白T/⑶F-15的比例等于或高于约0.01，优选等于或高于约0.017，指示药物恰当和不应改变药物，和/或其中肌钙蛋白T/GDF-15的比例低于约0.01，优选低于约0.005指示药物不恰当和应该改变药物。
22.根据权利要求17至19中任一项的方法，其中测量利钠肽，特别是NT-前BNP和⑶F-15的浓度，且其中得到利钠肽和⑶F-15 (利钠肽/⑶F-15)的比例。
23.根据权利要求22的方法，其中NT-前BNP/⑶F-15的比例等于或高于约0.8，优选等于或高于约1.9，指示药物恰当和不应改变药物，和/或其中NT-前BNP/GDF-15的比例低于约0.7，优选低于约0.4指示药物不恰当和应该改变药物。
24.根据权利要求18至23中任一项的方法，其中调整选自i)施用醛固酮拮抗剂，ii)提高醛固酮拮抗剂的浓度，和iii)施用不同的或其他醛固酮拮抗剂。
25.心脏肌钙蛋白或特异性结合心脏肌钙蛋白的抗体用于诊断患高血压、糖尿病、月巴胖、代谢综合症和/或具有吸烟史的对象中的如权利要求1定义的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的体外用途，其中对象未表现出左心室肥大。
26.心脏肌钙蛋白或特异性结合心脏肌钙蛋白的抗体用于区分患阶段A心力衰竭的对象和患阶段B早期心力衰竭的对象的体外用途。
27.心脏肌钙蛋白或特异性结合心脏肌钙蛋白的抗体用于区分仅具有出现心力衰竭的风险因子的对象和不仅具有风险因子而且已经患有如权利要求1定义的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的对象的体外用途，其中对象未表现出LVH。
28.心脏肌钙蛋白或特 异性结合心脏肌钙蛋白的抗体用于预测女性对象患左心室肥大的风险的体外用途。
29.权利要求25至28的体外用途，还包括心力衰竭的一种或多种其他标志物，特别是GDF-15和/或IGFBP7的用途，或特异性结合所述一种或多种心力衰竭的标志物的一种或多种抗体的用途。
全文摘要
本发明涉及诊断具有出现心力衰竭的风险因子的对象中先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的方法，方法包括步骤a)测量从个体获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白的浓度，b)任选地测量样品中心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与在对照样品中确立的该标志物或这些标志物的浓度进行比较，评估功能性和/或结构性异常。本发明还涉及预测具有出现心力衰竭的风险因子的对象患心力衰竭的风险的方法，方法包括步骤a)测量从个体获得的样品中的至少一种心脏肌钙蛋白的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)通过将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与在对照样品中确立的该标志物或这些标志物的浓度进行比较，预测对象患心力衰竭的风险。方法的特征还在于所述一种或多种其他标志物选自心脏肌钙蛋白标志物、GDF15和胰岛素生长因子结合蛋白7(IGFBP7)。在本发明的优选的实施方案中，对象患有左心室舒张功能障碍。本发明还涉及决定对具有出现心力衰竭的风险因子的对象的治疗的方法，和监控治疗的方法。在本发明的优选的实施方案中，至少一种其他标志物选自心脏肌钙蛋白、GDF15和IGFBP7。本发明还涉及监控对象中的先于心力衰竭的功能性和/或结构性心脏异常的治疗的方法，方法包括步骤a)在给定的时间间隔内，重复确定所述对象的至少一种样品中的至少一种心脏肌钙蛋白的浓度，b)任选地测量样品中的心力衰竭的一种或多种其他标志物的浓度，和c)将步骤(a)中确定的浓度和任选地步骤(b)中确定的浓度与在对照样品中确立的该标志物或这些标志物的浓度进行比较，和d)基于在一种或多种上述标志物中确定的浓度差异，评估对象是否经历病理生理性状态改变。
文档编号G01N33/53GK103080746SQ201180041314
公开日2013年5月1日 申请日期2011年8月3日 优先权日2010年8月26日
发明者U-H·维恩赫斯-特伦, D·布拉克, H·哈蒂格, S·沃格尔-齐博尔茨, C·伯姆, G·海斯, A·霍施, D·兹度耐克 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司