专利名称：重金属回收方法以及其中使用的重金属回收用试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及重金属的回收方法以及其中使用的重金属回收用试剂。
背景技术：
已知汞、镉、铅、砷等重金属在人体中蓄积并对健康产生不良影响。因此，尿等生物 试样、水等饮品食品试样中的重金属的分析是重要的。
重金属的分析中，一般作为前处理，从试样中去除杂质，分离重金属，然后对所述 分离的重金属进行分析。所述前处理通用溶剂提取。所述溶剂提取是利用与重金属结合 的螯合剂的极性并基于对于水性介质和有机介质的分配系数的差异来将试样中的重金属 提取到所述有机介质中的方法。提取之后，通过使所述有机介质蒸发，还能够浓缩所述重金 属。作为具体例，例如，JIS规定了双硫腙法，该方法在酸性条件的水性介质中将不溶性的 I，5-二苯基-3-硫卡巴腙(以下也称“双硫腙”)作为所述螯合剂使用(参见汞分析手册 (水銀分析7 二 - r > )环境省平成16年3月、特许第2969226号)。所述双硫腙法首先 在酸性条件下混合所述双硫腙和所述尿等液体待测体(或称“待测物”)，从而在所述混合 液中形成所述双硫腙和所述液体待测体中的重金属的络合物。接着，向所述混合液中添加 四氯化碳或氯仿等有机介质。这样，所述络合物由于对于水性介质和有机介质的分配系数 不同，而被提取到所述有机介质中。通过回收该有机介质，能够从所述液体待测体以所述络 合物的状态回收重金属。另外，如果使所述有机介质蒸发，还能够浓缩重金属。
但是，本发明人明确了在用这样的方法回收重金属的情况下虽在相同条件下进行 处理但待测体间回收率存在偏差的问题。因为待测体间回收率存在偏差，因此在定量回收 重金属的情况下，定量结果的可靠性有可能不充分。发明内容
因此，本发明目的在于提供一种抑制待测体间的重金属回收率的偏差的重金属回 收方法。
为了达到所述目的，本发明的重金属回收方法的特征在于，包括
络合物形成步骤，制备待测体和能够与重金属螯合的螯合剂的混合液，并在所述 混合液中形成所述待测体中的重金属和所述螯合剂的络合物；以及
重金属回收步骤，通过回收所述络合物来回收所述待测体中的重金属，
在所述络合物形成步骤中，在巯基的掩蔽剂的存在下，在所述混合液中形成所述 络合物。
本发明的重金属分析方法的特征在于，包括通过所述本发明的重金属回收方法从待测体中回收重金属的重金属回收步骤；以及分析所述重金属的分析步骤。
本发明的重金属回收用试剂的特征在于，包含能够与重金属螯合的螯合剂和巯基 的掩蔽剂。
根据本发明，通过在所述掩蔽剂的存在下，形成所述待测体中的重金属和所述螯 合剂的络合物，能够抑制上面所述那样的待测体之间的回收率的偏差。另外，关于回收率低 的待测体，例如也可能提高回收率。因此，能够进行可靠性更加优异的重金属分析。因此， 本发明例如在针对源自生物体的待测体的临床检查、环境试验等中是极其有用。
具体实施方式
本发明人针对从待测体中回收重金属，为了阐明待测体间的回收率的偏差的原 因，进行了锐意研究。其结果，发明人获得了如下见解待测体中，尤其是对于源自正在接受 用于排出生物体内蓄积的重金属的解毒疗法的患者的待测体，回收率的偏差显著，而且回 收率低。所述解毒疗法一般是为了排出生物体的重金属而施与螯合剂的方法，作为所述螯 合剂，例如使用内消旋-2，3-二巯基丁二酸(DMSA)等。因此，本发明人推测所述DMSA由 于具有巯基，因此源自所述待测体的DMSA的巯基与从外部添加的双硫腙竞争待测体中的 重金属，其结果是，待测体中的重金属不能充分地与双硫腙形成络合物，回收率降低。因此， 在形成双硫腙等螯合剂与所述重金属的络合物时，实际上，当并用了巯基的掩蔽剂时，实现 了抑制待测体间回收率的偏差、提高回收率的效果。
本发明不仅能够应用于前述那样的源自正接受所述解毒疗法的患者的待测体，而 且也能够应用于源自健康人的待测体。在源自生物体、食品和环境等的待测体中，例如由于 大量存在作为氨基酸的半胱氨酸等、含巯基化合物，因此由于这些化合物也会产生与所述 DMSA相同的影响。因此，我们理解为通过使用所述掩蔽剂，也能够消除可能基于与DMSA同 样的原因而由这些含巯基化合物产生的待测体间的回收率的偏差。此外，本发明并不限制 于这些推定。
<重金属的回收方法>
如前所述，本发明的重金属回收方法的特征在于，包括络合物形成步骤，制备待 测体和能够与重金属螯合的螯合剂的混合液并在所述混合液中形成所述待测体中的重金 属和所述螯合剂的络合物；以及重金属回收步骤，通过回收所述络合物来回收所述待测体 中的重金属；在所述络合物形成步骤中，在巯基的掩蔽剂的存在下，在所述混合液中形成所 述络合物。
本发明的特征在于，在所述掩蔽剂的存在下，在所述混合液中形成所述待测体中 的重金属和所述螯合剂的络合物，其他的构成和条件无任何限制。
在本发明的回收方法中，回收目标重金属无特别限制。所述重金属例如可举出 Bi (铋)、Hg (汞)、Cd (镉)、Pd (钯)、Zn (锌)、Tl (铊)、Ag (银)、Pb (铅)等。待测体中 的所述重金属的形态无特别限制，例如可以是重金属的单体，也可以是重金属的合金，也可 以是含有重金属的化合物。所述含有重金属的化合物例如可以是含有重金属的有机化合 物，也可以是含有重金属的无机化合物。在所述重金属为Hg的情况下，例如可以是有机汞， 也可以是无机汞。本发明的回收方法中，回收目标重金属例如可以是一种，也可以是两种以 上。本发明的回收方法例如也可以从所述待测体中通过一次的回收处理同时回收两种以上的重金属。
在本发明的回收方法中，所述待测体无特别限制。所述待测体例如可以举出源自生物体的待测体、源自环境的待测体、化学物质、医药用品等。所述化学物质例如可以举出试剂、农药或化妆品等。所述源自生物体的待测体无特别限制，可举出尿、血液、毛发、脐带等。所述血液待测体例如可举出红细胞、全血、血清、血浆等。其中，优选尿待测体。所述源自环境的待测体无特别限制，例如可举出生物、食品、水、土壤、大气/空气等。所述生物待测体例如可以是鱼贝类等动物或者植物等。所述食品待测体例如可以举出生鲜食品或加工食品等。所述水待测体例如可以举出饮用水、地下水、河水、海水、生活排水等。
所述待测体例如从处理容易的角度来说优选液状的待测体(液体待测体)。所述待测体例如可以将未稀释液直接用作液体待测体，也可以将悬浮、分散或者溶解在介质中的稀释液用作液体待测体。在所述待测体为固体的情况下，例如，可以将所述悬浮、分散或者溶解在介质中的稀释液用作液体待测体。以下将所述介质称为稀释介质。所述稀释介质无特别限制，例如可以举出水、缓冲液等。所述缓冲液无特别限制，例如可以举出Tris缓冲液、磷酸缓冲液、醋酸缓冲液、硼酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、巴比妥缓冲液、各种Good缓冲液等。所述缓冲液的浓度无特别限制，例如为10 lOOmmol/L。
在本发明中，“掩蔽”是指使SH基的反应性失活的意思。例如，能够通过SH基的化学修饰来进行。所述掩蔽剂无特别限制，例如，可以使用公知的掩蔽剂，包括所谓的SH抑制剂。所述化学修饰无特别限制，例如可举出烷基化、加成到活性双键、烯丙基化、与二硫键的交换反应、氧化、氰化、硫醇化等。
所述掩蔽剂例如可以使用从由选自下述结构式(I) (3)所组成的组中的至少一种结构式表示的化合物。用下述结构式(I) (3)表示的化合物例如可以使用任一种，也可以并用两种以上。
权利要求
1.一种重金属回收方法，其特征在于，包括络合物形成步骤，制备待测体和能够与重金属螯合的螯合剂的混合液，并在所述混合液中形成所述待测体中的重金属和所述螯合剂的络合物；以及重金属回收步骤，通过回收所述络合物来回收所述待测体中的重金属，在所述络合物形成步骤中，在巯基的掩蔽剂的存在下，在所述混合液中形成所述络合物。
2.根据权利要求1所述的回收方法，其中，所述络合物形成步骤包括向所述待测体中添加所述螯合剂和所述掩蔽剂的步骤。
3.根据权利要求1所述的回收方法，其中，所述络合物形成步骤包括在添加所述掩蔽剂之后向所述待测体中添加所述螯合剂的步骤。
4.根据权利要求1所述的回收方法，其中，所述掩蔽剂由选自下述结构式⑴ (3)所组成的组中的至少一个结构式表示
5.根据权利要求4所述的回收方法，其中，所述结构式(I)的掩蔽剂为马来酰亚胺、 N-甲基马来酰亚胺或N-乙基马来酰亚胺，所述结构式(2)的掩蔽剂为碘代乙酰胺，所述结构式(3)的掩蔽剂为碘乙酸。
6.根据权利要求1所述的回收方法，其中，所述螯合剂为含有含硫基团的螯合剂。
7.根据权利要求6所述的回收方法，其中，所述含硫基团为硫酮基。
8.根据权利要求1所述的回收方法，其中，所述螯合剂为1，5-二苯基-3-硫卡巴腙。
9.根据权利要求1所述的回收方法,其中,所述待测体为源自生物体的待测体。
10.根据权利要求1所述的回收方法，其中，所述重金属为选自B1、Hg、Cd、Pd、Zn、Tl、 Ag和Pb所组成的组中的至少一种。
11.一种重金属分析方法，包括通过权利要求1所述的重金属回收方法从待测体中回收重金属的重金属回收步骤；以及分析所述重金属的分析步骤。
12.一种重金属回收用试剂，用于权利要求1所述的重金属回收方法中，所述试剂的特征在于，包含能够与重金属螯合的螯合剂以及巯基的掩蔽剂。
13.根据权利要求12所述的试剂，其中，所述掩蔽剂由选自下述结构式⑴ (3)所组成的组中的至少一个结构式表示
14.根据权利要求13所述的试剂，其中，所述结构式(I)的掩蔽剂为马来酰亚胺、N-甲基马来酰亚胺或N-乙基马来酰亚胺，所述结构式(2)的掩蔽剂为碘代乙酰胺，所述结构式(3)的掩蔽剂为碘乙酸。
15.根据权利要求12所述的试剂，其中，所述螯合剂为含有含硫基团的螯合剂。
16.根据权利要求15所述的试剂，其中，所述含硫基团为硫酮基。
17.根据权利要求12所述的试剂，其中，所述螯合剂为1，5-二苯基-3-硫卡巴腙。
18.—种待测体的前处理方法，所述待测体供于权利要求1所述的重金属回收方法，所述前处理方法的特征在于，在形成待测体中的重金属和能够与重金属螯合的螯合剂的络合物之前，向所述待测体中添加巯基的掩蔽剂。
全文摘要
本发明提供了一种重金属回收方法以及其中使用的重金属回收用试剂。具体地，本发明提供一种抑制待测体间的重金属回收率的偏差的重金属回收方法以及其中使用的重金属回收用试剂。制备待测体和能够与重金属螯合的螯合剂的混合液，在巯基的掩蔽剂的存在下，在所述混合液中形成所述待测体中的重金属和所述螯合剂的络合物，并且通过回收所述络合物来回收所述待测体中的重金属。由此能够抑制待测体间的回收率的偏差并回收重金属。所述螯合剂优选1，5-二苯基-3-硫卡巴腙(双硫腙)，所述掩蔽剂可以使用N-乙基马来酰亚胺、碘代乙酰胺、碘乙酸等。
文档编号G01N33/20GK103018082SQ20121036375
公开日2013年4月3日 申请日期2012年9月24日 优先权日2011年9月22日
发明者下村祐加, 小坂秀子 申请人:爱科来株式会社