专利名称：一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种藏药组合物制剂的质量检测方法，特别涉及一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法。
背景技术：
解毒胶囊源于藏医典籍《甘露库》，是藏医治疗各种中毒症的良方。收载于中成药地方标准上升国家标准部分，标准编号WS-10537 (ZD-0537)-2002。解毒胶囊由马钱子(制)、红花、铁粉(制)、人工牛黄、商陆、干松、草果、翼首草等35味药组成的，具有消热解毒，祛腐生肌的作用。用于各种毒症，陈旧热病，某些接触性皮炎等。
解毒胶囊含有马钱子类毒性药材，其毒性成分主要为生物碱类成分，具有通络止痛，散结消肿的功效，但是服用过量可能引起中毒，甚至死亡等各种不良反应，不宜过多服用或久服。同时处方中含有铁粉，《开宝本草》记载铁粉具有安心神，坚骨髓，润肌肤等作用。铁为人体的微量元素，具有促进红细胞生成等重要作用。藏药组合物解毒胶囊及其制剂处方中所用铁粉是通过炮制后进行入药，更加有利于吸收。但是铁摄入过多可能造成急性铁中毒，危害人体健康。解毒胶囊原质量标准只有胆酸薄层鉴别、没食子酸含量测定项，未对马钱子中毒性成分生物碱，铁粉含量进行质量控制，使该制剂存在安全隐患。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法。发明概述本发明提供了一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂中马钱子中士的宁和马钱子碱、铁粉中铁含量的控制方法，人工牛黄中胆酸、红花中羟基红花黄色素A的含量测定方法，确保士的宁、马钱子碱及铁含量均不过量，使该制剂在治疗疾病的同时，保证了用药的安全有效。术语说明解毒胶囊是国家中成药标准汇编(中成药地方标准上升国家标准部分)记载的药品名称。解毒胶囊及其制剂包括用解毒胶囊原料药配方制备的其他制剂，包括解毒胶囊。各原料药的配比可以与解毒胶囊配比相同，也可以在药效范围内适当调整。马钱子(制)、硼砂(制)、珍珠(制)、青金石(制)、松石(制)、铁粉(制)、响铜(制)、石花(制)，是藏药的常规技术用语，括号中的“制”均按照《青海省藏药炮制规范》(青海省食品药品监督管理局编，青海人民出版社出版的2010年版)里的方法炮制。为实现上述目的，本发明采用下述技术方案一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法，该制剂的原料药组成为动物宝、蔓菁膏、蚓果芥、马钱子(制)、水柏枝、硼砂(制)、珍珠(制)、珊瑚、青金石(制)、松石(制)、铁粉(制)、响铜(制)、石花(制)、岩精膏、肉豆蘧、草果、天竺黄、红花、丁香、诃子、商陆、檀香、紫檀香、麝香、人工牛黄、轮叶棘豆、石菖蒲、豆蘧、翼首草、川西小黄菊、骨碎补、甘松、扁叶珊瑚盘、白花龙胆、藓生马先蒿，其特征是，质量检测方法包括如下含量测定方法中的一种或几种A.马钱子的含量测定分别取士的宁对照品、马钱子碱对照品为对照，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与
O.02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8)为流动相；检测波长为250-270nm的高效液相色谱法；B.铁粉的含量测定将待测定的中药制剂灰化后，用浓盐酸溶解，加入甲基橙指示液，滴加二氯化锡溶液将Fe3+还原为Fe2+，溶液变为淡红色，然后以二苯胺磺酸钠为指示齐U，用重铬酸钾标准溶液滴定至溶液呈紫色即为终点，以已知的重铬酸钾标准溶液的量计 算铁粉的含量；C.红花的含量测定取羟基红花花色素A对照品加体积份数比25%甲醇水溶液配制成对照品溶液，取待检测制剂加入体积份数比25%甲醇水溶液经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20-30:80-70的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相，检测波长为400-410nm的高效液相色谱法；D.人工牛黄的含量测定取胆酸对照品加甲醇配制成对照品溶液，取待检测制剂加入甲醇经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比80-70:20-30的甲醇-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相，蒸发光散射检测器的高效液相色谱法。作为本发明的进一步改进，所述马钱子的含量测定具体步骤为照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8)为流动相；检测波长为250-270nm ;理论板数按士的宁峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品3mg,精密称定,分别置IOOml量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每Iml含士的宁12 μ g，马钱子碱6 μ g);供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末10_14g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液10ml，混匀，放置30分钟，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，置水浴中回流提取2小时，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，分取三氯甲烷液，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。作为本发明的进一步改进，所述铁粉的含量测定方法具体步骤为取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末6 10g，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸O. 5-2ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于500-700°C炽灼3-5小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%_38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在60-70°C左右加热溶解3-5小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%_38%浓盐酸0_15ml，加热至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，可补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液2-10ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用重铬酸钾滴 定液(O. 002mol/l)滴定。每Iml重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)相当于O. 6702mg的铁。作为本发明的进一步改进，所述红花的具体步骤为照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20-30:80-70的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为400_410nm ;理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，力口体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含6-10 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末4_6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液20-30ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。作为本发明的进一步改进，所述人工牛黄含量测定的具体步骤为照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比80-70:20-30的甲醇-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；蒸发光散射检测器；理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 4-0. 5mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末6_8g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇40-60ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液20-30ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液10 μ 1、20 μ 1，供试品溶液10 μ 1，分别注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。本发明优选下面原料药组成的解毒胶囊及其制剂动物宝4. O重量份、蔓菁膏4. O重量份、蚓果芥30. 4重量份、马钱子(制)I. 6重量份、水柏枝30. 4重量份、硼砂(制)O. 8重量份、珍珠(制)3. 2重量份、珊瑚I. 6重量份、青金石(制)1. 6重量份、松石(制)1. 6重量份、铁粉(制)2. 4重量份、响铜(制)O. 8重量份、石花(制)O. 8重量份、岩精膏4. O重量份、肉豆蘧I. 6重量份、草果I. 6重量份、天竺黄I. 6重量份、红花I. 6重量份、丁香I. 6重量份、诃子2. 4重量份、商陆I. 6重量份、檀香30. 4重量份、紫檀香27. 9重量份、磨香I. 6重量份、人工牛黄2. 4重量份、轮叶棘丑30. 4重量份、石菖蒲I. 6重量份、丑蘧I. 6重量份、翼首草30. 4重量份、川西小黄菊30. 4重量份、骨碎补3. 2重量份、甘松I. 6重量份、扁叶珊瑚盘30. 4重量份、白花龙胆30. 4重量份、藓生马先蒿30. 4重量份。对于上述优选制剂，所述质量检测方法是A.马钱子的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20:80的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数 比10%磷酸调节pH值2. 8)为流动相；检测波长为260nm ;理论板数按士的宁峰计算应不低于 5000 ；对照品溶液的制备取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品3mg,精密称定,分别置IOOml量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每Iml含士的宁12 μ g，马钱子碱6 μ g);供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末12g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液10ml，混匀，放置30分钟，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，置水浴中回流提取2小时，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，分取三氯甲烷液，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。B.铁粉的含量测定取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末Sg，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸1ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于600°C炽灼4小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在65°C左右加热溶解4小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%-38%浓盐酸5ml，加热至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，可补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用重铬酸钾滴定液(0.002mol/l)滴定。每Iml重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)相当于O. 6702mg的铁。C.红花的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25:75的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，力口体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含8 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得;测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即
得。 D.人工牛黄的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比76:24的甲醇-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；蒸发光散射检测器；理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 45mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末7g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液10 μ 1、20 μ 1，供试品溶液10 μ 1，分别注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。在对优选制剂的质量检测方法中，所述马钱子含量中马钱子含量以士的宁(C31H22N2O2)计，应为 O. 043mg/g-0. 080mg/g ;以马钱子碱(C23H26N2O1)计，不得少于 O. 028mg/go所述铁粉的含量测定中铁含量为O. 409mg/g-0. 682mg/g。所述红花含量测定中红花含量以羟基红花黄色素A (C27H3tlO15)计，不得少于O. 027mg/g。所述人工牛黄含量测定中人工牛黄含量以胆酸(C24H40O5)计，不得少于 O. 252mg/g。本说明书中所述的重量份与体积份的单位对应关系为g/ml或kg/1。为了保证患者用药安全有效，原标准亟待需要进行提高，对解毒胶囊中马钱子含有的毒性成分生物碱进行含量控制，对铁粉中铁的含量进行全面控制，同时增加有效成分胆酸、羟基红花黄色素A的含量测定。本发明公开了一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法，对马钱子中士的宁和马钱子碱含量、铁粉中铁含量进行了质量控制，对人工牛黄中胆酸、红花中羟基红花黄色素A进行了定量检测，既保证了药效又保证不至于服用过多造成健康隐患，提高了产品质量，确保了产品安全、稳定、质量可控。同时本法还可用于藏药组合物解毒胶囊的其他制剂，如解毒颗粒、解毒丸、解毒片等。下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例I :马钱子的含量测定实验
I.仪器、试药和供试样品仪器L_2100型日立高效液相色谱仪，Auff220D型岛津电子分析天平。对照品士的宁对照品(中国药品生物制品检定所)，批号110705-200306 ;马钱子碱对照品(中国药品生物制品检定所)，批号110706-200505。样品解毒胶囊(青海金诃藏药药业股份有限公司提供)，批号20100701、20100702,20100703ο2.检测波长的选择取士的宁、马钱子碱混合对照品溶液，于190_400nm波长范围内进行扫描，根据紫外吸收图谱，选定260nm为检测波长。
3.流动相选择选择乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8)为流动相。分别考察了乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8)不同体积比例为流动相时的分离效果，体积份数比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与
O.02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8)为流动相时均可达到较好分离效果，且乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液(用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8)体积份数比为20:80时，士的宁峰保留时间为21min,马钱子碱峰保留时间为17min,分离效果最好。4.系统适用性及阴性干扰试验在上述色谱条件下，分别精密吸取混合对照溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，混合对照品、供试品色谱中士的宁、马钱子碱与其相邻色谱峰的分离度均大于I. 5，阴性对照溶液在士的宁、马钱子碱出峰位置无干扰。结果见图I、图2和图3。5.混合对照品制备取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品3mg,精密称定,分别置IOOml量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每Iml含士的宁12 μ g，马钱子碱6 μ g)。6.供试品制备6. I提取溶剂量的考察按含量测定项下方法对供试品溶液进行检测。按供试品溶液的制备项下的方法制备3份，分别精密加入三氯甲烷20ml、25ml、50ml。以每克药品中士的宁、马钱子碱的含量为指标确定加入三氯甲烷量。结果见表I。表I提取溶剂量考察试验结果
权利要求
1.一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法，该制剂的原料药组成为动物宝、蔓菁膏、蝴果芥、制马钱子、水柏枝、制硼砂、制珍珠、珊瑚、制青金石、制松石、制铁粉、制响铜、制石花、岩精膏、肉豆蘧、草果、天竺黄、红花、丁香、诃子、商陆、檀香、紫檀香、麝香、人工牛黄、轮叶棘豆、石菖蒲、豆蘧、翼首草、川西小黄菊、骨碎补、甘松、扁叶珊瑚盘、白花龙胆、藓生马先蒿，其特征是，质量检测方法包括如下含量测定方法中的一种或几种 A.马钱子的含量测定分别取士的宁对照品、马钱子碱对照品为对照，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液并用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8为流动相；检测波长为250-270nm的高效液相色谱法； B.铁粉的含量测定将待测定的中药制剂灰化后，用浓盐酸溶解，加入甲基橙指示液，滴加二氯化锡溶液将Fe3+还原为Fe2+，溶液变为淡红色，然后以二苯胺磺酸钠为指示剂，用重铬酸钾标准溶液滴定至溶液呈紫色即为终点，以已知的重铬酸钾标准溶液的量计算铁粉的含量； C.红花的含量测定取羟基红花花色素A对照品加体积份数比25%甲醇水溶液配制成对照品溶液，取待检测制剂粉末加入体积份数比25%甲醇水溶液经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20-30:80-70的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相，检测波长为400-410nm的高效液相色谱法； D.人工牛黄的含量测定取胆酸对照品加甲醇配制成对照品溶液，取待检测制剂粉末加入甲醇经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比80-70:20-30的甲醇-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相，蒸发光散射检测器的高效液相色谱法。
2.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述马钱子的含量测定具体步骤为 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比15-25:85-75的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液并用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8为流动相；检测波长为250-270nm ;理论板数按士的宁峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品3mg,精密称定，分别置IOOml量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末10_14g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液10ml，混匀，放置30分钟，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，置水浴中回流提取2小时，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，分取三氯甲烷液，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，即得。
测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述铁粉的含量测定方法具体步骤为 取待检测制剂粉末6 10g，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸O.5-2ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于500-700°C炽灼3_5小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在60_70°C左右加热溶解3-5小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%-38%浓盐酸0-15ml，加热至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，可补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液2-10ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用O. 002mol/l重铬酸钾液滴定滴定。
4.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述红花的具体步骤为 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20-30:80-70的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为400_410nm ;理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含6-10 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末4-6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液20-30ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
5.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述人工牛黄含量测定的具体步骤为 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比80-70:20-30的甲醇-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；蒸发光散射检测器；理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 4-0. 5mg的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末6-8g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇40-60ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液20-30ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液10μ 1、20μ 1，供试品溶液10 μ 1，分别注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。
6.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述制剂的原料药组成为动物宝4.O重量份、蔓菁膏4. O重量份、蚓果芥30. 4重量份、制马钱子I. 6重量份、水柏枝30. 4重量份、制硼砂O. 8重量份、制珍珠3. 2重量份、珊瑚I. 6重量份、制青金石I. 6重量份、制松石I. 6重量份、制铁粉2. 4重量份、制响铜O. 8重量份、制石花O. 8重量份、岩精膏4. O重量份、肉豆蘧I. 6重量份、草果I. 6重量份、天竺黄I. 6重量份、红花I. 6重量份、丁香I. 6重量份、诃子2. 4重量份、商陆I. 6重量份、檀香30. 4重量份、紫檀香27. 9重量份、磨香I. 6重量份、人工牛黄2. 4重量份、轮叶棘丑30. 4重量份、石菖蒲I. 6重量份、丑蘧I. 6重量份、翼首草30. 4重量份、川西小黄菊30. 4重量份、骨碎补3. 2重量份、甘松I. 6重量份、扁叶珊瑚盘30. 4重量份、白花龙胆30. 4重量份、藓生马先蒿30. 4重量份。
7.如权利要求6所述的质量检测方法，其特征是，所述质量检测方法是 A.马钱子的含量测定 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比20:80的乙腈-O. Olmol/Ι庚烷磺酸钠与O. 02mol/l磷酸二氢钾等量混合溶液并用体积份数比10%磷酸调节pH值2. 8为流动相；检测波长为260nm ;理论板数按士的宁峰计算应不低于 5000 ； 对照品溶液的制备取士的宁对照品6mg、马钱子碱对照品3mg,精密称定，分别置IOOml量瓶中，加三氯甲烷适量使溶解并稀释至刻度，摇匀；分别精密量取2ml，置同一 IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末12g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液10ml，混匀，放置30分钟，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，置水浴中回流提取2小时，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，分取三氯甲烷液，用铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得； B.铁粉的含量测定 取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末Sg，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸Iml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于600°C炽灼4小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在65°C左右加热溶解4小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%-38%浓盐酸5ml，加热至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，则补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用O. 002mol/l重铬酸钾滴定液滴定； C.红花的含量测定 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25:75的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含8 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取藏药组合物解毒胶囊内容物或制剂粉末5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得； D.人工牛黄的含量测定 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比76:24的甲醇-体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；蒸发光散射检测器；理论板数按胆酸峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 45mg的溶液，SP得; 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末7g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，40°C以下减压回收，转移至5ml量瓶中，加甲醇定容至刻度，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液10μ 1、20μ 1，供试品溶液10 μ 1，分别注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。
8.如权利要求7所述的质量检测方法，其特征是，所述马钱子含量中马钱子含量以士的宁(C31H22N2O2)计，应为 O. 043mg/g-0. 080mg/g ;以马钱子碱(C23H26N2O1)计，不得少于O.028mg/g ;所述铁粉的含量测定中铁含量为O. 409mg/g-0. 682mg/g ;所述红花含量测定中红花含量以羟基红花黄色素A (C27H30O15)计，不得少于O. 027mg/g ;所述人工牛黄含量测定中人工牛黄含量以胆酸(C24H4tlO5)计，不得少于O. 252mg/g。
全文摘要
本发明公开了一种藏药组合物解毒胶囊及其制剂的质量检测方法，采用高效液相色谱法(HPLC法)对马钱子中士的宁和马钱子碱进行了含量控制，使用滴定法对铁粉中铁含量进行了含量控制，同时使用高效液相色谱法对人工牛黄中胆酸、红花中羟基红花黄色素A进行了定量检测，既保证了药效又保证不至于服用过多造成健康隐患，提高了产品质量，确保了产品安全、稳定、质量可控。
文档编号G01N21/78GK102879495SQ20121036550
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者马振元, 陈芹利, 任松鹏, 王海苹, 董玉波 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司