一种蛋白粉新鲜度的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种蛋白粉新鲜度的测定方法，该方法先将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液；然后将糠氨酸标准品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作为蛋白粉新鲜度的评价指标。本发明的方法采用化学法前期处理和反相离子对色谱法的创新结合，用以测定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法来确定蛋白粉的产品质量和新鲜度具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。
【专利说明】一种蛋白粉新鲜度的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于含量测定【技术领域】，具体涉及一种蛋白粉新鲜度的测定方法。
【背景技术】
[0002] 蛋白粉是采用提纯的大豆蛋白或乳清蛋白，通过加工制作成粉剂，为缺乏蛋白 质的人群补充蛋白质，具有提高机体免疫力和缓解体力疲劳的保健功能，被广泛应用到 保健食品和食品添加剂中。蛋白粉分为乳清蛋白粉和大豆蛋白粉，其中的蛋白质含量在 2. 6g/100kJ?8. 5g/100kJ的范围内，平均在4. 4g/100kJ?5. 4g/100kJ，蛋白粉在烘干、压 榨、制粉的加工过程，以及包装、贮藏的过程中，由于条件不恰当，将会降低其营养价值及品 位，直接影响到其经济价值。因此，探求和确立能如实反应蛋白粉新鲜度品质的指标，有效 监控蛋白粉质量，需要不断改进、完善蛋白粉品质标准的检测方法和手段。
[0003] 糠氨酸（furosine)是美拉德反应产物Amadori化合物的水解产物，糠氨酸是美 拉德反应前期评价营养损失程度的一个重要指标，被广泛应用于评价奶制品、焙烤食品、蜂 蜜、鸡蛋等在热处理和贮存过程中的营养损失的程度。由于蛋白粉中的蛋白质及碳水化合 物含量丰富，在一定条件下会发生美拉德反应。
[0004] 现有的糠氨酸检测方法有离子交换色谱法、表面荧光方法、HPLC梯度洗脱、反相离 子对色谱法等，这些测定方法常用于对奶制品中的糠氨酸的测试，由于奶制品具有成分单 一、纯净、易溶解的特点，以上测试方法的准确度高。但蛋白粉则不同，主要是其成分较为复 杂，不够纯净，有些蛋白粉中还添加其他补充人体需要的物质，成为是一种集多种有机物和 无机物的混合物，同时蛋白粉的粘性大，蛋白质含量高，若单纯采用上述检测方法，测定的 干扰大，导致对蛋白质中的糠氨酸无法进行准确分析，其精密度、准确度和检出限等误差较 大。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种蛋白粉新鲜度的测定方法，该方法采用化学法前期处理 和反相离子对色谱法的创新结合，用以测定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法来确定蛋白 粉的产品质量和新鲜度具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的 定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。
[0006] -种蛋白粉新鲜度的测定方法，包括以下步骤：
[0007] 步骤1，糠氨酸标准品溶液制备；
[0008] 步骤2,样品前处理：将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混 合均匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液；
[0009] 步骤3,将步骤1所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液 相色谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作 为蛋白粉新鲜度的评价指标。。
[0010] 作为上述发明的进一步改进，步骤1中用0. lmol/L的盐酸溶液作溶剂配制糠氨酸 标准品溶液。
[0011] 作为上述发明的进一步改进，步骤2中蛋白粉样品的加入量为0.35g，混合溶液的 用量为6mL。
[0012] 作为上述发明的进一步改进，所述混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为 8:1。
[0013] 作为上述发明的进一步改进，所述混合溶液中盐酸溶液的浓度为10. 2mol/L，草酸 溶液的浓度为〇· 5mol/L。
[0014] 作为上述发明的进一步改进，步骤2中溶液的加热方法为在110°C烘箱内放置24 小时。
[0015] 作为上述发明的进一步改进，步骤3中高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键 合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0. 2 ;流速为 0. 8mL/min ;检测器波长为280nm ;柱温为26°C ;进样量为5 μ L。
[0016] 本发明与现有技术相比，其显著优点在于：第一，选用盐酸溶液、草酸溶液和超纯 水的混合溶液对蛋白粉样品进行前处理，可去除蛋白粉中的杂质干扰，并使蛋白粉中的糠 氨酸得到充分溶解；第二，用反相离子对色谱法测定蛋白粉中糠氨酸的含量，方法具有准 确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的 新鲜度和质量。
【具体实施方式】
[0017] 实施例1
[0018] 精密度实验
[0019] 步骤1，糠氨酸标准品溶液制备：称取糠氨酸标准样品2. 5mg，用0. lmol/L的盐酸 溶解于25mL容量瓶中，其浓度为100mg/L，作为标准贮备液，放置于-20°C冰箱中保存。分 别吸取2. 0、4. 0、6. 0、8. 0ml糠氨酸标准贮备液于10ml容量瓶中，用0. lmol/L的盐酸稀释 至刻度摇匀。
[0020] 步骤2,样品前处理：将0. 35g蛋白粉样品加入到6mL盐酸溶液和草酸溶液的混合 溶液中，混合均匀，在溶液中通入高纯氮气，放入ll〇°C烘箱内24小时，取出后冷却至室温， 过滤，取滤液作供试品溶液，其中混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1、盐酸溶液 的浓度为10. 2mol/L、草酸溶液的浓度为0· 5mol/L ;
[0021] 步骤3,将步骤所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效 液相色谱仪中进行检测，高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙 腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0. 2 ;流速为0. 8mL/min ;检测器波 长为280nm ;柱温为26°C ;进样量为5 μ L。
[0022] 精确取6份蛋白粉样品，经处理后测定，结果如下，方法精密度较好。
[0023]
【权利要求】
1. 一种蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：包括以下步骤： 步骤1，糠氨酸标准品溶液制备； 步骤2,样品前处理：将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均 匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液； 步骤3,将步骤1所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色 谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作为蛋 白粉新鲜度的评价指标。
2. 根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤1中用0. lmol/ L的盐酸溶液作溶剂配制糠氨酸标准品溶液。
3. 根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤2中蛋白粉样 品的加入量为〇. 35g，混合溶液的用量为6mL。
4. 根据权利要求3所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：所述混合溶液中盐 酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1。
5. 根据权利要求4所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：所述混合溶液中盐 酸溶液的浓度为10. 2mol/L，草酸溶液的浓度为0. 5mol/L。
6. 根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤2中溶液的加 热方法为在ll〇°C烘箱内放置24小时。
7. 根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤3中高效液相 色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲 酸，体积比为20:80:0. 2 ;流速为0. 8mL/min ;检测器波长为280nm ;柱温为26°C ;进样量为 5 μ L〇
【文档编号】G01N30/89GK104297412SQ201410555280
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】梁峙, 梁骁, 马捷, 梁瑛 申请人:徐州工程学院