本发明属于水体检测领域，具体涉及一种养殖水体亚硝酸盐快速检测试剂盒。
背景技术：
在集约化养殖水体中，水产动物放养密度高，投喂饵料量大，养殖水体中极易蓄积大量的残饵、动植物排泄物、死亡残体等含氮有机物，加之，未经处理的养殖废水和工业、生活污水被排放或被雨水冲刷进入养殖水体，导致养殖水体中亚硝酸盐严重超标。
亚硝酸盐超标易导致有害细菌和条件致病菌大量滋生，鱼、虾等养殖动物的体质下降，抗应激能力差，易受病原菌的侵袭，引起水产动物疾病的大面积爆发，给养殖户造成巨大的经济损失。
目前市场上常见的水质亚硝酸盐检测试剂盒虽然操作简便、携带方便，但是抗干扰能力差，易出现假阳性、假阴性结果，灵敏度较低。且多为粉剂或着多种试剂组合使用，养殖户在检测过程中常常会遇到粉剂的使用量无法控制、试剂质量变质等问题，使检测结果不准确；有时使用的检测试剂较多，操作繁琐，稍不注意检测结果容易出现较大误差。中国专利cn102507553a、cn103743727a、cn104407097都是检测养殖水体中亚硝酸盐含量的试剂盒，他们都是普通的化学指示剂混合而成，前者试剂操作步骤繁琐、试剂稳定性较差，后两者试剂的显色时间有点长。
随着水产养殖业的迅猛发展，减少养殖户的养殖风险，急需有一种新的检测迅速、灵敏度高、质量稳定的亚硝酸盐含量检测试剂盒。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供一种养殖水体亚硝酸盐快速检测试剂盒。
本发明提供的养殖水体亚硝酸盐快速检测试剂盒，其含有测试剂，比色瓶和比色卡，所述的测试剂由对氨基苯磺酸、盐酸萘乙二胺、酸类、表面活性剂、稳定剂和蒸馏水制成。
其中，所述的测试剂按重量份数计，由对氨基苯磺酸1～100份、盐酸萘乙二胺1～100份、酸类10～100份、表面活性剂1～50份、稳定剂1～50份和蒸馏水50～100份制成。
进一步地，所述的测试剂按重量份数计，由对氨基苯磺酸10～80份、盐酸萘乙二胺10～80份、酸类20～90份、表面活性剂5～40份、稳定剂5～40份和蒸馏水55～100份制成。
更进一步地，所述的测试剂按重量份数计，由对氨基苯磺酸15～50份、盐酸萘乙二胺20～40份、酸类50～85份、表面活性剂15～30份、稳定剂10～25份和蒸馏水60～90份制成。
其中，所述的酸类为盐酸、乙酸、柠檬酸、磷酸、酒石酸中的一种或多种。
其中，所述的表面活性剂为十六烷基三甲基溴化铵、溴化十六烷基三甲基铵、十八烷基三甲基溴化铵(stab)、溴化十六烷基吡啶中的一种或多种。
其中，所述的稳定剂为乙二胺四乙酸二钠、单乙醇胺、三乙醇胺、聚乙烯醇、硫脲中的一种或多种。
本发明中，比色卡是由配置的不同浓度梯度的亚硝酸盐标准溶液(0.005、0.01、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mg/l)与测试剂显色制作而成。制作亚硝酸盐测定试剂盒中的比色卡的方法是本领域常规技术手段。
本发明还提供利用本发明的养殖水体亚硝酸盐快速检测试剂盒进行养殖水体亚硝酸盐检测的方法，其包括如下步骤：
1)使用待测水样润洗比色瓶2～3次；
2)吸取待测水样至比色瓶中，定容至15ml；
3)滴加所述测试剂5滴，盖好比色瓶，摇匀后即可与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的亚硝酸盐含量。
本发明的优点和积极效果在于：
1)本发明将市面上常见的粉剂或者多种试剂协同检测的产品迭代升级为一种单一的水剂检测试剂，这使得养殖户携带方便，操作更加简单、使用更加方便。
2)本发明测试剂中添加的表面活性剂，利用其增敏特性，在形成的偶氮染料中加入阳离子表面活性剂，来提高了反应的灵敏度。
3)本发明测试剂中添加的稳定剂，可以维持测试剂理化性质、产品质量的稳定性，增加测试剂的有效保质期。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
按质量份数称取各原料：对氨基苯磺酸45份、盐酸萘乙二胺40份、盐酸85份、十六烷基三甲基溴化铵30份、乙二胺四乙酸二钠25份，充分溶于60份蒸馏水，即得。
试剂盒组装：测试剂1瓶，比色瓶1个和比色卡1张。
具体操作步骤如下：
1)使用待测水样润洗比色瓶2～3次；
2)用吸取待测水样至比色瓶中，定容至15ml；
3)滴加所述测试剂5滴，盖好比色瓶，摇匀后即可与标准比色卡对比，找出颜色相似的色块即为待测水样中的亚硝酸盐含量。
实施例2
按质量份数称取各原料：对氨基苯磺酸40份、盐酸萘乙二胺35 份、乙酸60份、柠檬酸20份、溴化十六烷基三甲基铵15份、十八烷基三甲基溴化铵(stab)10份、单乙醇胺10份、三乙醇胺15份，充分溶于85份蒸馏水，即得。
试剂盒组装：测试剂1瓶，比色瓶1个和比色卡1张。
具体操作步骤如下：
1)使用待测水样润洗比色瓶2～3次；
2)用吸取待测水样至比色瓶中，定容至15ml；
3)滴加所述测试剂5滴，盖好比色瓶，摇匀后即可与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的亚硝酸盐含量。
实施例3
按质量份数称取各原料：对氨基苯磺酸25份、盐酸萘乙二胺30份、乙酸75份、十六烷基三甲基溴化铵20份、聚乙烯醇15份，充分溶于80份蒸馏水，即得。
试剂盒组装：测试剂1瓶，比色瓶1个和比色卡1张。
具体操作步骤如下：
1)使用待测水样润洗比色瓶2～3次；
2)用吸取待测水样至比色瓶中，定容至15ml；
3)滴加所述测试剂5滴，盖好比色瓶，摇匀后即可与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的亚硝酸盐含量。
实施例4
按质量份数称取各原料：对氨基苯磺酸15份、盐酸萘乙二胺20份、乙酸25份、柠檬酸25份、磷酸5份、溴化十六烷基吡啶5份、乙二胺四乙酸二钠5份、硫脲5份，充分溶于85份蒸馏水，即得。
试剂盒组装：测试剂1瓶，比色瓶1个和比色卡1张。
具体操作步骤如下：
1)使用待测水样润洗比色瓶2～3次；
2)用吸取待测水样至比色瓶中，定容至15ml；
3)滴加所述测试剂5滴，盖好比色瓶，摇匀后即可与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的亚硝酸盐含量。
试验例1
采用本发明实施例1、实施例2、实施例3、实施例4制备的亚硝酸盐测试剂分别对配置的不同浓度梯度的亚硝酸盐标准液进行效果观察。
操作方法如下：
(1)使用亚硝酸盐标准液润洗比色瓶2～3次。
(2)用吸管吸取待测水样至比色瓶中，定容至15ml。
(3)分别滴加实施例1、实施例2、实施例3、实施例4制备的氨氮试剂测各5滴，盖好比色瓶，摇匀后即可与标准比色卡对比,找出颜色相似的色块即为待测水样中的亚硝酸盐含量，同时记录反应时间。
(4)每个实施例制备的测试剂各做3个平行。同时将四个实施例制备的测试剂放置6个月、12个月后检测同一批水样的亚盐含量，并与标准比色卡进行颜色比对，试验结果见表1。
表1本发明亚硝酸盐测试剂效果对比
试验结果表明，本发明四个实施例与标准比色卡对比后检测出的亚硝酸盐含量和亚硝酸盐标准液浓度保持一致，其中实施例3在反应速度方面效果更显著。
试验例2本发明亚硝酸盐测试剂稳定性及保存期的试验
采用本发明实施例1、实施例2制备的亚硝酸盐测试剂稳定性及保存期的试验：
加速试验：
将本发明实施例1制备的亚硝酸盐测试剂分别放在三个恒温恒湿培养箱中，箱内温度分别为4℃、25℃、40℃；湿度均为75℃，放置2周。4℃用于保持测试剂的化学特性，作为对照样；25℃用于模拟常温保存样品；40℃用于加速试验，作为环境破坏性样品。然后检测同一批养殖水样，检测结果与4℃对照，25℃、40℃亚硝酸盐检测结果一致，表明实施例1制备的亚硝酸盐测试剂测定值均在正常显色范围之内，测试剂稳定性好。
长期试验：
采用本发明实施例2制备的亚硝酸盐测试剂保存期效果的试验：将同一时间配制好的一批检测试剂盒置于室温条件下避光保存。分别在2个月、4个月、6个月、8个月、10个月、12个月之后，随机抽取中6组检测试剂盒对多组水样同时进行亚硝酸盐含量测定，同时使用该时间点新配制的试剂对同一水样进行测定，保存一段时间的试剂盒与新配置的试剂对每一组水样的检测结果均表现出一致性，检测结果见表2。
表2本发明实施例2制备的亚硝酸盐测试剂检测水样的试验结果
实验结果表明本发明中实施例2制备的亚硝酸盐测试剂在一年时间内不会发生变质，长期保存的试剂检测结果同样可以达到标准要求。
试验例3
采用本发明实施例3制备的亚硝酸盐测试剂与其它亚硝酸盐检测试剂的反应速度对比观察。
亚硝酸盐检测试剂盒反应速度对比试验：第1组为实施例3制备的亚硝酸盐测试剂，第二组为亚硝酸盐检测试剂2组(根据中国专利cn104407097a制备)、第三组为亚硝酸盐检测试剂3组(根据中国专利cn103743727制备)作对比，对诏安某养殖场同一水样进行亚硝酸盐含量检测，记录试剂反应时间。结果见表3。
表3本发明实施例3制备的亚硝酸盐测试剂检测水样的反应时间对比
本试验结果表明，本发明实施例3制备的亚硝酸盐测试剂反应速度明显优于第2组和第3组亚硝酸盐检测试剂的效果。
试验例4
采用本发明实施例4制备的亚硝酸盐测试剂与其它亚硝酸盐检测试剂的稳定性对比观察。
新型亚硝酸盐检测试剂盒稳定性对比试验：使用放置同一时间 段6个月、12个月的第一组为实施例4制备的亚硝酸盐测试剂，第二组为亚硝酸盐检测试剂(根据中国专利cn104407097a制备)、第三组为亚硝酸盐检测试剂(根据中国专利cn103743727制备)、第四组按照gb7493-87检测亚硝酸盐含量作对比，对诏安某养殖场同一水样进行亚硝酸盐含量检测，记录显色颜色变化，结果见表4
表4本发明实施例4制备的亚硝酸盐测试剂检测颜色变化试验结果
本试验结果表明，通过对比本发明实施例4制备的亚硝酸盐测试剂检测的水样亚硝酸盐含量与gb7493-87检测亚硝酸盐含量一致，其测试剂的稳定性及保存时间明显优于第二组和第三组的亚硝酸盐检测试剂的检测效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。