一种检测血清岩藻糖蛋白的免疫渗滤方法及免疫渗滤装置与流程

文档序号:12466857阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种检测血清岩藻糖蛋白的免疫渗滤方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将甲胎蛋白抗原和小扁豆素复合于微孔滤膜上;

(2)滴加血清样品到微孔滤膜上,使样品中的岩藻糖基化甲胎蛋白与微孔滤膜上的小扁豆素结合;

(3)向微孔滤膜上滴加酶标记的甲胎蛋白多克隆抗体,并加入显色底物,得到检测结果。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述甲胎蛋白抗原为原核表达人甲胎蛋白抗原。

3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述酶标记的甲胎蛋白多克隆抗体为兔源抗体。

4.如权利要求1-3之一所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述酶为辣根过氧化物酶。

5.如权利要求1-4之一所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)将甲胎蛋白抗原和小扁豆素复合于微孔滤膜上;

(2)滴加10-15μL的血清样品到微孔滤膜上,使样品中岩藻糖基化甲胎蛋白与微孔滤膜上的小扁豆素结合;然后用封闭液洗涤,去除非特异性结合物;

(3)向微孔滤膜上滴加酶标记的甲胎蛋白多克隆抗体,孵育3-5s后用封闭液洗涤,去除非特异性结合物,加入显色底物显色液;

阳性血清时,甲胎蛋白抗原和岩藻糖基化甲胎蛋白的检测区域显示蓝色;阴性血清时,甲胎蛋白抗原检测区域显示蓝色,岩藻糖基化甲胎蛋白的检测区域不显色。

6.一种检测血清岩藻糖蛋白的免疫渗滤装置,其特征在于,所述免疫渗滤装置的微孔滤膜基质上包括至少1个检测区,所述检测区内设有阳性对照检测亚区、血清岩藻糖蛋白检测亚区和阴性对照区,其中阳性对照检测亚区固定有甲胎蛋白,血清岩藻糖蛋白检测亚区固定有小扁豆素,阴性对照区固定有牛血清白蛋白;同一检测亚区内的检测斑上的物质浓度相同。

7.如权利要求6所述的免疫渗滤装置,其特征在于,所述检测亚区至少包括1个检测斑;

优选地,所述微孔滤膜基质上具有1个检测区,所述检测亚区具有1个检测斑,所述阳性对照区和阴性对照区各具有1个对照斑。

8.如权利要求6或7所述的免疫渗滤装置,其特征在于,所述甲胎蛋白为原核表达人甲胎蛋白;

优选地,所述免疫渗滤装置还包括辣根过氧化酶标记的甲胎蛋白多克隆抗体和显色底物液;

优选地,所述辣根过氧化酶标记的甲胎蛋白多克隆抗体为兔源抗体;

优选地,所述免疫渗滤装置还包括用于洗涤和稀释的PBST和PBS封闭液。

9.如权利要求6-8之一所述的免疫渗滤装置在非诊断和/或非治疗目的的血清岩藻糖蛋白检测中的用途。

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