本发明属于生物技术领域，涉及致癌代谢物2-羟基戊二酸（2-hg），具体涉及一种快速检测肿瘤组织2-hg累积的方法，通过检测肿瘤组织中2-hg累积，有助于idh1突变的快速诊断。
背景技术：
现有技术公开了胶质瘤（glioma）是中枢神经系统最常见的肿瘤，其中恶性胶质瘤治愈率低，复发率高，预后极差，目前临床多采用手术后同步放化疗加6个疗程的替莫唑胺(tmz)化疗，其平均生存期仅为12-15个月。因此，目前临床对于恶性胶质瘤需解决的难题是寻找早诊早治的方法。
目前临床实践中，对于一些诊断不明确的病灶需要进行立体定向穿刺活检，典型者比较容易诊断，但实际操作中往往术中冰冻切片病理并不典型，病理科医生只能观察到胶质增生，而胶质增生在低级别胶质瘤、正常脑组织、炎症、部分淋巴瘤等均可出现。虽然突变型idh1免疫组化染色可鉴别胶质瘤和其他情况，但一般需要5-7天，耗时长，且无法实现术中判断，有时甚至需要反复穿刺，增加病人负担和手术风险。
研究公开了，在大多数弥漫性人脑胶质瘤中常伴随着异柠檬酸脱氢酶基因(isocitratedehydrogenasegene)1(idh1)的突变.临床实践显示，有着此突变的胶质瘤患者在临床上有良好的预后效果，并且对化疗和靶向治疗更为敏感。,因此.idh1突变是胶质瘤一个重要的分子分型标记；idh催化异柠檬酸氧化脱羧，生成a-酮戊二酸（a-kg），突变型idh在丧失其正常酶活性的同时，以a-kg为底物，生成致癌代谢物2-羟基戊二酸（2-hg）。通常，2-hg在正常脑组织中水平很低，而在idh1突变的胶质瘤中高度累积，相关研究表明，idh1突变细胞依赖2-hg维持其致癌特性。因此，idh1突变快速检测，将有助于鉴别诊断胶质瘤，并利于个体化治疗方案的制定和优化，临床意义重大。基于此，
本技术：
的发明人拟提供一种快速检测肿瘤组织2-hg累积的方法，通过检测肿瘤组织中2-hg累积，将实现idh1突变的快速诊断。
技术实现要素：
本发明的目地是针对现有技术的现状，提供一种快速检测肿瘤组织2-hg累积的方法，通过检测肿瘤组织中2-hg累积，为实现idh1突变的快速诊断提供依据并为术后的个体化治疗提供重要指导信息。
具体的，本发明的快速检测肿瘤组织2-hg累积的方法，其包括步骤：
1.获得肿瘤组织样品，置于离心管中；
2.向上述离心管中加入预冷纯甲醇；
3.匀浆机研磨1min，静置片刻；
4.14000rpm离心；
5.取上清，转移至玻璃瓶中，真空干燥离心机充分干燥；
6.加入衍生化试剂mtbstfa，70℃放置；
7.室温冷却，上机（agilent7890a-5975c；色谱柱为hp-5ms，载气为高纯氦气。
采用nist数据库搜索和标准品验证双结合的方式对2-hg鉴定。
本申请中，对术中获得的离体的胶质瘤脑组织进行了快速检测，检测结果显示，采用本发明的检测方法，在术中检测脑组织中是否存在2-hg高水平累积，有助于实现idh1突变胶质瘤的快速鉴别诊断，并为术后的个体化治疗提供重要指导信息。
本发明的检测肿瘤组织2-hg累积的方法的优点有：
1，对2-hg进行检测的同时可以为诊断ｉｄｈ１突变提供具有特异性的参考数据；
2，对于一些诊断不明确的病灶不需要反复穿刺，明显降低病人危险风险；
3、检测时间快速，术中即可获得初步判断，只需判断是否有2-hg累积，进而进行鉴别是否为胶质瘤，或是idh1突变的胶质瘤，为临床判断提供重要信息。
为了便于理解，以下将通过具体的实施例对本发明的方法进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例仅是为了说明，显然本领域的普通技术人员可以根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本发明的范围内。
具体实施方式
实施例1
对胶质瘤术中获得的离体的胶质瘤脑组织进行了快速检测，将肿瘤组织样品切下25-30μg，置于1.5ml离心管中；向所述离心管中加入100μl预冷纯甲醇；手持匀浆机研磨1min，静置片刻；14000rpm离心10min；取上清40μl，转移至v型底gc专用玻璃瓶中，真空干燥离心机充分干燥，耗时约25min；.在通风厨中加入衍生化试剂40μlmtbstfa，盖紧瓶盖，70℃放置25min；室温自然冷却，上机，agilent7890a-5975c；色谱柱为hp-5ms，载气为高纯氦气。采用nist数据库搜索和标准品验证双结合的方式对2-hg鉴定。
检测结果显示，采用本发明的检测方法，在术中检测脑组织中是否存在2-hg高水平累积，有助于实现idh1突变胶质瘤的快速鉴别诊断，并为术后的个体化治疗提供重要指导信息。