快速制备海洋小型鱼类或仔稚鱼中期分裂相染色体的方法与流程

文档序号:12357371阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种快速制备海洋小型鱼类或仔稚鱼中期分裂相染色体的方法,其特征在于所述方法包括:1)充分了解试验鱼的生物学特性及玻片的清洗;2)把小型试验鱼类或仔稚鱼放入秋水仙素溶液中游泳;3)取试验鱼的鳃组织或鳍条组织进行染色体制备;

所述的充分了解试验鱼的生物学特性及玻片的清洗:了解试验鱼的体型特征、营养组成、游泳活动方式和生活方式,以确定取样部位和试验方案,确定取样部位及试验方案的标准如下:鳍条短小者在鳍条游离末端取样,鳍条如蝉翼透明革质或角质则不适合取样,改取鳃丝,鳍条脂肪含量高的应加大低渗力度,选用0.0375M或0.05M KCl低渗液,鳃盖开口度大的取鳃丝游离端,运动激烈的试验鱼游泳水体要求1.5L以上,静止不动的试验鱼鱼游泳水体要求100-200ml;染色体制片的载玻片要求干净无油污,不挂水,在染色体制备前清洗干净;

所述的把小型试验鱼类或仔稚鱼放入秋水仙素溶液中游泳:配制含0.005%或0.01%(g/ml)秋水仙素的海水,让试验鱼在其中游泳4-6小时,游泳水体的水温较原暂养水温提高或降低2-3℃,以刺激增强试验鱼体表组织分裂增生的能力;

所述的取试验鱼少量鳃组织或鳍条组织进行染色体制备:取1-8mm3鳃组织或鳍条组织,立即放入0.0375M、0.05M或0.075M KCl溶液中低渗50min,再转移至新鲜配制预冷的卡诺氏固定液中固定,每一步骤过程中都需要轻轻摇晃处理样品的试管,使作用更充分;然后采用热滴片法制片。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的卡诺氏固定液为甲醇与冰醋酸的体积比为3:1的混合液。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的在卡诺氏固定液中的固定方法为更换固定液3次,每次固定15分钟。

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