达原饮组合物的质量控制方法与流程

技术特征：

1.达原饮组合物的质量控制方法，其特征在于，包括采用高效液相色谱法建立达原饮组合物指纹图谱，色谱条件为：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流速0.8ml/ml；柱温：25℃～35℃；

检测仪器采用紫外-可见分光检测器，指纹图谱的检测波长为215nm～240nm；

理论板数按参照物黄芩苷峰计算，应不低于3000；

参照物溶液为黄芩苷的甲醇溶液；

流动相以乙腈-0.1％磷酸溶液为系统按照如下洗脱顺序进行梯度洗脱：

指纹图谱流动相梯度程序

2.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述指纹图谱包括20个共有峰，各峰的相对保留时间分别为：

1号峰相对保留时间RRT为11.554，2号峰相对保留时间RRT为20.589，3号峰相对保留时间RRT为24.434，4号峰相对保留时间RRT为26.558，5号峰相对保留时间RRT为29.776，6号峰相对保留时间RRT为31.082，7号峰相对保留时间RRT为34.114，8号峰相对保留时间RRT为37.788，9号峰相对保留时间RRT为38.742，10号峰相对保留时间RRT为39.778，11号峰相对保留时间RRT为40.583，S峰相对保留时间RRT为50.099，13号峰相对保留时间RRT为53.925，14号峰相对保留时间RRT为54.927，15号峰相对保留时间RRT为57.315，16号峰相对保留时间RRT为61.652，17号峰相对保留时间RRT为68.702，18号峰相对保留时间RRT为72.735，19号峰相对保留时间RRT为84.317，20号峰相对保留时间RRT为86.291，其中，12号S峰是参照物的色谱峰。

3.根据权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于，所述达原饮组合物按如下两种方法制备：

(1)按重量份计称取如下饮片：槟榔6g，厚朴3g，草果仁1.5g，知母3g，白芍3g，黄芩3g，甘草1g，置于2L煎药砂锅中，加400ml水，浸泡30分钟，加盖，武火加热煮沸，文火保持微沸至药材药液为150-170ml，滤除药渣，放冷，即得第一达原饮组合物；

(2)按重量份计称取如下饮片：槟榔1200g，厚朴600g，草果仁300g，知母600g，白芍600g，黄芩600g，甘草300g；加8倍量的水，煎煮1.0h；滤过，得滤液；减压浓缩至相对密度为1.10-1.30的稠膏，加入麦芽糊精，干燥；混匀，加硬脂酸镁，干压颗粒，制成1000g，即得第二达原饮组合物。

4.根据权利要求3所述的质量控制方法，其特征在于，测定达原饮组合物指纹图谱时的供试品溶液与参照物溶液按如下方法制备：

(1)供试品溶液的制备：取第一达原饮组合物5ml，离心，取上清液，即得；或取第二达原饮组合物1.7g，置50ml容量瓶中，加水稀释，超声溶解，放冷，再加水定容，摇匀，离心，取上清液，即得；

(2)参照物溶液的制备：取黄芩苷对照品，加甲醇配制成80μg/ml的参照物溶液，即得。

5.根据权利要求4所述的质量控制方法，其特征在于，进样量为10μl。

6.根据权利要求5所述的质量控制方法，其特征在于，还包括用高效液相色谱法测定达原饮组合物中槟榔碱含量，色谱条件为：

以强阳离子交换键合硅胶为填充剂；

流动相为乙腈-0.2％磷酸溶液为流动相(50:40)洗脱，2→1000，浓氨试液调节pH值至3.5-4.0；

流速0.8ml/ml～1.2ml/ml；柱温：25℃～35℃；

检测仪器采用紫外-可见分光检测器，槟榔碱含量测定的检测波长为215nm；

理论板数按对照品槟榔碱峰计算，应不低于3000；

对照品溶液为氢溴酸槟榔碱溶液。

7.根据权利要求6所述的质量控制方法，其特征在于，测定达原饮组合物中槟榔碱含量时的供试品溶液、对照品溶液按如下方法制得：

(1)供试品溶液的制备：取第一达原饮组合物5ml，离心，取上清液，即得；或取第二达原饮组合物，研细，取1g，精密称定，置于100ml容量瓶中，加50％乙腈超声溶解并定容至刻度，摇匀，即得；

(2)对照品溶液的制备：取氢溴酸槟榔碱，精密称定，加乙腈-0.2％磷酸溶液为流动相按50:50制成每1ml含40μg的溶液，即得，2→1000，浓氨试液调节pH值至约3.8，槟榔碱重量＝氢溴酸槟榔碱重量/1.5214。

8.根据权利要求7所述的质量控制方法，其特征在于，测定槟榔碱含量时的进样量为20μl～40μl。

9.根据权利要求8所述的质量控制方法，其特征在于，还包括用高效液相色谱法测定达原饮组合物中芒果苷、芍药苷、黄芩苷、甘草酸的含量，色谱条件为：

色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流速0.9ml/min～1.1ml/min；柱温：25℃～35℃；

检测仪器采用二极管阵列检测器，四指标成分检测波长为230nm～254nm；

理论板数按对照品黄芩苷峰计算，应不低于5000；

对照品溶液为：芒果苷、芍药苷、黄芩苷、甘草酸铵的混合对照品溶液

流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相按照如下洗脱顺序进行梯度洗脱：

流动相梯度程序

10.根据权利要求9所述的质量控制方法，其特征在于，测定达原饮组合物中芒果苷、芍药苷、黄芩苷、甘草酸铵含量时供试品溶液和对照品溶液按如下方法制得：

(1)供试品溶液的制备：量第一取达原饮组合物5ml置于10ml的容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得；

或取第二达原饮组合物，研细，取0.5g，称定，置于100ml容量瓶中，加50％甲醇超声溶解并定容至刻度，摇匀，离心，取上清液，即得；

(2)对照品溶液的制备：取芒果苷对照品、芍药苷对照品、黄芩苷对照品、甘草酸铵对照品，称定，加70％甲醇分别制成每1ml含芒果苷20μg、芍药苷36μg、黄芩苷0.15mg、甘草酸铵20μl的溶液，即得，甘草酸重量＝甘草酸铵重量/1.0207；

测定芒果苷、芍药苷、黄芩苷、甘草酸的含量时的进样量为10μl。