一种呋喃西林代谢物的快速检测方法与流程

文档序号:11107350阅读:1363来源:国知局

本发明涉及一种检测方法,具体是一种呋喃西林代谢物的快速检测方法。



背景技术:

硝基呋喃类药物常作为广谱类抗生素用于预防和治疗由沙门氏菌和埃希氏菌引 起的猪、牛、家禽及蜜蜂的胃肠道疾病。但在长时间的实验研究过程中发现,硝基呋喃类药 物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变,此类药物禁止在治疗和饲料中使用。由于硝基呋喃类原型药在生物体内代谢迅速,无法检测,但其代谢产物因和蛋白 质结合而相当稳定,所以在分析此类药物的残留时经常要分析其代谢后的产物,管理部门 就以检测代谢产物为手段达到检测硝基呋喃类残留的目的。目前用来检测硝基呋喃类代 谢物的最常用方法是高效液相色谱法 (HPLC)、液质联用法 (LC-MS/MS) 等,这些方法灵敏度高、结果准确、重复性好、假阳性少,但样品前处理过程复杂,仪器化程度高价格昂贵。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种呋喃西林代谢物的快速检测方法,以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:

一种呋喃西林代谢物的快速检测方法,包括如下步骤:(a)制作荧光增敏标准曲线:配制一系列不同浓度的呋喃西林代谢物标准溶液,并将其分别移至5mL的比色管中,向每个所述比色管中均加入1.0mL浓度为7.25× mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后,室温放置5~10min,用分子荧光光度计检测上述各个体系的荧光强度F;同时,取1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后室温放置15min,用分子荧光光度计检测体系的荧光强度F0;以呋喃西林代谢物浓度为横坐标,以F/F0为纵坐标,得呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程;(b)分别取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代谢物的样品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀使其充分反应,室温放置15min,用分子荧光光度计检测得到体系的荧光强度,与所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程对照,即得所述样品液中呋喃西林代谢物的含量。

作为本发明进一步的方案:所述步骤(a)和所述步骤(b)中,所述荧光强度的检测条件为:激发波长为300nm,激发和发 射狭缝宽度均为3nm。

作为本发明进一步的方案:所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度分别为4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。

作为本发明再进一步的方案:当所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度范围为4μg/L-80μg/L时,所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程F/F0=0.0019C+1.0321,线性相关系数为0.996。

与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明具有灵敏度高、样品预处理简单、短暂的检测时间、较大的检测样本量等特点,适合现场监控和大量样品的筛查。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

本发明实施例中,一种呋喃西林代谢物的快速检测方法,包括如下步骤:(a)制作荧光增敏标准曲线:配制一系列不同浓度的呋喃西林代谢物标准溶液,并将其分别移至5mL的比色管中,向每个所述比色管中均加入1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后,室温放置5~10min,用分子荧光光度计检测上述各个体系的荧光强度F;同时,取1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后室温放置15min,用分子荧光光度计检测体系的荧光强度F0;以呋喃西林代谢物浓度为横坐标,以F/F0为纵坐标,得呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程;(b)分别取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代谢物的样品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀使其充分反应,室温放置15min,用分子荧光光度计检测得到体系的荧光强度,与所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程对照,即得所述样品液中呋喃西林代谢物的含量。所述步骤(a)和所述步骤(b)中,所述荧光强度的检测条件为:激发波长为300nm,激发和发 射狭缝宽度均为3nm。所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度分别为4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。当所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度范围为4μg/L-80μg/L时,所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程F/F0=0.0019C+1.0321,线性相关系数为0.996。

实施例1:

本发明呋喃西林代谢物的快速检测方法,包括如下步骤:(a)制作荧光增敏标准曲线:配制一系列不同浓度的呋喃西林代谢物标准溶液,并将其分别移至5mL的比色管中,向每个所述比色管中均加入1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后,室温放置5min,用分子荧光光度计检测上述各个体系的荧光强度F;同时,取1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后室温放置15min,用分子荧光光度计检测体系的荧光强度F0;以呋喃西林代谢物浓度为横坐标,以F/F0为纵坐标,得呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程;(b)分别取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代谢物的样品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀使其充分反应,室温放置15min,用分子荧光光度计检测得到体系的荧光强度,与所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程对照,即得所述样品液中呋喃西林代谢物的含量。所述步骤(a)和所述步骤(b)中,所述荧光强度的检测条件为:激发波长为300nm,激发和发 射狭缝宽度均为3nm。所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度分别为4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。当所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度范围为4μg/L-80μg/L时,所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程F/F0=0.0019C+1.0321,线性相关系数为0.996。

本发明呋喃西林代谢物的快速检测方法,包括如下步骤:(a)制作荧光增敏标准曲线:配制一系列不同浓度的呋喃西林代谢物标准溶液,并将其分别移至5mL的比色管中,向每个所述比色管中均加入1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后,室温放置10min,用分子荧光光度计检测上述各个体系的荧光强度F;同时,取1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后室温放置15min,用分子荧光光度计检测体系的荧光强度F0;以呋喃西林代谢物浓度为横坐标,以F/F0为纵坐标,得呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程;(b)分别取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代谢物的样品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀使其充分反应,室温放置15min,用分子荧光光度计检测得到体系的荧光强度,与所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程对照,即得所述样品液中呋喃西林代谢物的含量。所述步骤(a)和所述步骤(b)中,所述荧光强度的检测条件为:激发波长为300nm,激发和发 射狭缝宽度均为3nm。所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度分别为4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。当所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度范围为4μg/L-80μg/L时,所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程F/F0=0.0019C+1.0321,线性相关系数为0.996。

本发明呋喃西林代谢物的快速检测方法,包括如下步骤:(a)制作荧光增敏标准曲线:配制一系列不同浓度的呋喃西林代谢物标准溶液,并将其分别移至5mL的比色管中,向每个所述比色管中均加入1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后,室温放置8min,用分子荧光光度计检测上述各个体系的荧光强度F;同时,取1.0mL浓度为7.25×mol/L的CdTe溶液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀后室温放置15min,用分子荧光光度计检测体系的荧光强度F0;以呋喃西林代谢物浓度为横坐标,以F/F0为纵坐标,得呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程;(b)分别取1.0mL7.25×mol/L的CdTe溶液和含呋喃西林代谢物的样品液加入到5mL的比色管中,用pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液定容,摇匀使其充分反应,室温放置15min,用分子荧光光度计检测得到体系的荧光强度,与所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程对照,即得所述样品液中呋喃西林代谢物的含量。所述步骤(a)和所述步骤(b)中,所述荧光强度的检测条件为:激发波长为300nm,激发和发 射狭缝宽度均为3nm。所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度分别为4μg/L、8μg/L、16μg/L、32μg/L、40μg/L、60μg/L和80μg/L。当所述呋喃西林代谢物标准溶液的浓度范围为4μg/L-80μg/L时,所述呋喃西林代谢物对CdTe量子点荧光增敏的线性回归方程F/F0=0.0019C+1.0321,线性相关系数为0.996。

对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

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