本发明涉及一种同时检测塑料制品中颜料橙64、UV-326和DEHP的方法，属于食品药品包材分析检测
技术领域：
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背景技术：
：颜料橙64为苯并咪唑酮类有机颜料，分子式为C12H10N6O4，分子结构图如下：颜料橙64具有优异的耐晒性、耐热性、耐溶剂性、耐酸性、耐碱性和加工应用性能，因此该化合物常常被作为避光剂来使用：涂层在容器表层来盛放一些遇光易分解的物质，以保证物品的稳定性。输液器是临床医疗上必不可少的医疗器械，在临床输液过程中，遇光易分解的药物需要避光输液，这时就会用到一次性避光输液器，避光输液器原料中加入的避光剂可能对人体产生潜在的危险，在一定程度上限制了避光输液器的临床应用，所以在《一次性使用避光输液器注册技术审查指导原则》中明确提出了必须对避光剂进行相应的检测。UV-326属于苯并三唑类紫外光稳定剂，化学名称为2-(2'-羟基-3'-叔丁基-5'-甲基苯基)-5-氯代苯并三唑，分子式为C17H18N3OCl，其分子结构图如下：UV-326能有效地吸收波长为270～380nm的紫外线，且不发生光化学反应，并对水和热的稳定性好，挥发性小。因此，该化合物常被作为塑料添加剂，以减少塑料制品特别是聚烯烃发生光氧老化，从而延长塑料袋的使用寿命。由于食品包装袋直接与食品接触，所以包装袋中残留的有害物质可能会迁移到食品中，造成食品的二次污染。目前，很多国家已将光稳定剂的残留量和迁移量的限制纳入法规。DEHP属于邻苯二甲酸酯的一种，化学名称为邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯，分子式为C6H4(CO2C8H17)2[C24H38O4]，其分子结构图如下：DEHP是少数几种允许用于食品级塑料包装材料的增塑剂中的一种，应用非常广泛，其在塑料中的含量可达60％。增塑剂是小分子物质，与内装食品直接相接触时，能够迁移到食品中，造成内装食品的污染，塑化剂的含量越高，迁移的可能性越大。DEHP对人体具有致畸、致癌等作用，因而，对各种材质食品塑料袋中的DEHP进行准确测定是保障塑料材料安全乃至食品消费安全的重要步骤。综上所述，为了保证安全使用，需要对塑料制品中的避光剂颜料橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP进行检测，以确保其含量控制在安全范围以内，而目前对于避光剂颜料橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP的检测都是单独分别检测，仪器分析方法有GC法、HPLC法和GC-MS法，且由于现有的检测技术所要求的实验样品预处理比较麻烦，存在费时、费力、检测成本高的问题，因而不能将其作为一种快速便捷的检测方法。技术实现要素：本发明的目的是提供一种同时检测塑料制品中颜料橙64、UV-326和DEHP的方法，解决了目前的检测方法存在的需要单独分别检测、检测效率低的问题，具有操作简单、检测结果准确性好、检测效率高、检测成本低的特点。本发明所述的同时检测塑料制品中颜料橙64、UV-326和DEHP的方法是采用60％的甲醇水溶液作为溶剂，将颜料橙64、UV-326和DEHP分别配制成浓度梯度为0.05μg/mL～10μg/mL的标准溶液，然后通过含有DAD检测器的高效液相色谱仪对标准溶液进行定性和定量检测。其中：所述的高效液相色谱的色谱条件如下：(1)色谱柱：反相键合硅胶色谱柱(2)流动相A：甲醇；流动相B：乙酸铵水溶液(3)流速：1.0mL/min(4)洗脱方式：梯度洗脱(5)检测波长：220～440nm(6)柱温：30℃(7)进样量：20μL。其中：所述的高效液相色谱仪优选由四元泵、恒温箱、DAD检测器以及化学工作站所组成的Agilent1260型高效液相色谱仪。所述的梯度洗脱程序如下：流动相A：0～3min，50％；3～5min，由50％升至80％；5～13min，由80％升至95％；13～28min，保持95％；28～30min，由95％降至50％；流动相B：0～3min，50％；3～5min，由50％降至20％；5～13min，由20％降至5％；13～28min，保持5％；28～30min，由5％升至50％；柱后平衡10min。所述的反相键合硅胶色谱柱的型号为岛津ODS-3(150×4.6mm，5μm)色谱柱所述的塑料制品为避光过滤输液器、注射器、食品包装材料、EP管中的任意一种。在得到本发明的检测方法之前，发明人分别摸索了避光剂橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP的高效液相色谱条件：(1)避光剂橙64高效液相色谱条件的建立：首先进行溶剂的筛选，常规溶剂如甲醇、乙腈、乙醇等均不能溶解避光剂橙64，最终选择二甲基亚砜作溶剂，选择50％甲醇/水溶液作为稀释剂，然后进行了检测波长的选择，通过在250-600nm范围内扫描紫外-可见光谱图，得到避光剂颜料橙64在444nm的波长处有最大吸收；色谱条件的选择：色谱柱：岛津ODS-3(250×4.6mm，5μm)；流动相：含0.1％TFA的甲醇-水(70:30)；检测波长：444nm；流速：0.8mL·min-1；柱温：25℃；进样量：20μL，得到避光剂颜料橙64的出峰时间为4.34min。(2)光稳定剂UV-326高效液相色谱条件的建立：首先选择甲醇作为溶剂；然后进行了检测波长的选择，通过在250-600nm范围内扫描紫外-可见光谱图，得到光稳定剂UV-326在349nm的波长处有最大吸收；色谱条件的选择：色谱柱：Agilent-C18(150×4.6mm，5μm)；流动相：95％甲醇；检测波长：349nm；流速：1.0mL·min-1；柱温：30℃；进样量：20μL，得到光稳定剂UV-326的出峰时间为8.98min。(3)塑化剂DEHP高效液相色谱条件的建立：首先选择甲醇作为溶剂，然后进行了检测波长的选择，通过在250-600nm范围内扫描紫外-可见光谱图，得到塑化剂DEHP在226nm的波长处有最大吸收；色谱条件的选择：色谱柱：Agilent-C18(150×4.6mm，5μm)；流动相：95％甲醇；检测波长：349nm；流速：0.9mL·min-1；柱温：30℃；进样量：20μL，得到塑化剂DEHP的出峰时间为6.71min。通过上述分别对避光剂橙64、光稳定剂UV-326和塑化剂DEHP的高效液相色谱条件的摸索，发明人发现了同时检测这三种化合物的可行性，进一步建立了同时检测该三种化合物的高效液相色谱方法。本发明的有益效果如下：本发明通过采用含有DAD检测器的液相色谱仪建立多波长法来同时测定避光剂颜料橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP三种化合物的含量，操作方法简单，检测灵敏度高，且结果可靠，能够实现这三种化合物的快速检测；通过本发明方法的样品处理时间远远少于国标方法处理时间，改变了实验中样品预处理麻烦、费时、费力且检测成本高的现状。附图说明图1是实施例2中一次性避光输液器的滴注安装图。具体实施方式以下结合实施例对本发明做进一步描述。实施例中涉及到的仪器与设备如下：1260型高效液相色谱仪(美国Agilent公司，配DAD检测器)；超声波清洗仪(美国Thermo公司)；BT125D电子分析天平(德国Sartorius公司)；Evolution300紫外-可见分光光度计(美国Thermo公司)实施例中涉及到的试剂如下：二甲基亚砜(分析纯)、乙酸铵(分析纯)、甲醇(色谱纯)、超纯水(由Thermo超纯水仪制备)实施例1同时检测塑料制品中颜料橙64、UV-326和DEHP的方法如下：(1)配置储备液颜料橙64储备液：精密称取10.84mg避光剂颜料橙64于100mL容量瓶中，加入适量二甲基亚砜，超声溶解，加二甲基亚砜至刻度，摇匀，置于4℃冰箱中，作为储备液备用；UV326储备液：精密称取10.08mgUV-326于100mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声溶解，加甲醇至刻度，摇匀，置于4℃冰箱中，作为储备液备用；DEHP储备液：精密称取210.5mgDEHP于100mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声溶解，加甲醇至刻度，摇匀，置于4℃冰箱中，作为储备液备用；(2)配置标准工作液取三种样品储备液各1mL于100mL容量瓶中，加入60％甲醇至刻度摇匀，制成颜料橙64、UV326和DEHP的浓度分别为1.084μg/mL、1.008μg/mL和2.105μg/mL的标准工作液；(3)色谱检测将标准工作液以20μL进样量注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归，回归方程见表1。色谱条件如下：(1)色谱柱：反相键合硅胶色谱柱(2)流动相A：甲醇；流动相B：乙酸铵水溶液(3)流速：1.0mL/min(4)洗脱方式：梯度洗脱(5)检测波长：220～440nm(6)柱温：30℃(7)进样量：20μL。流动相体系中甲醇与乙酸铵的体积百分比随时间变化如下：0～3min，甲醇为50％，乙酸铵水溶液为50％；3～5min，甲醇由50％升至80％，乙酸铵水溶液由50％降至20％；5～13min，甲醇由80％升至95％，乙酸铵水溶液由20％降至5％；13～28min，甲醇保持在95％；28～30min，甲醇由95％降至50％；柱后平衡10min。定性定量分析：单个峰的紫外吸收光谱图分别和避光剂橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP的紫外吸收图一致，峰面积也与同一浓度下单个进样的峰面积在误差允许范围内，说明三者混合进样彼此不影响，该发明方法可以同时测定塑料制品中的避光剂橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP。表1线性回归方程回归方程相关系数线性范围(μg/mL)避光剂颜料橙64y＝119.395x+1.6070.99990.0542～10.84光稳定剂UV326y＝58.46896x+2.258320.99990.1008～20.16塑化剂DEHPy＝28.27799x-7.136590.99990.421～05.25实施例2根据《一次性使用避光输液器注册技术审查指导原则》的要求，模拟临床滴注方式并加大剂量延长过滤时间来测定一次性避光输液器中避光剂橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP的含量。样品处理：选择65％乙醇溶液于40℃下滴注24小时，检测光剂橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP迁移溶出的情况，滴注方式见图1。样品测定：选用实施例1中的色谱条件，测得一次性使用避光一次性避光输液器中避光剂颜料橙64、光稳定剂UV326和塑化剂DEHP迁移溶出情况如表2所示。表2一次性避光输液器中颜料橙64、UV326和DEHP的迁移溶出量化合物峰面积溶出量(mg/套)颜料橙640未检出UV3260未检出DEHP272.75.04当前第1页1 2 3