用高效液相色谱法测定盐酸屈他维林注射液中有关物质的方法与流程

技术特征：

1.一种用高效液相色谱法测定盐酸屈他维林注射液中有关物质的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)配制供试样品溶液：

取盐酸屈他维林注射液用溶剂配制成供试样品溶液；

(2)配制对照品溶液：

取盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮用溶剂配制成对照品溶液；

(3)配制系统适用性溶液：

取盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮用溶剂配制成系统适用性溶液；

(4)进行系统适用性实验；

(5)进行检测灵敏度实验；

用对照品溶液调节高效液相色谱仪的检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10-25％；

(6)按照下列高效液相色谱条件进行测定：

流动相：以磷酸盐缓冲液作为流动相A，以乙腈为流动相B，以甲醇为流动相C；所述磷酸盐缓冲液为0.1％磷酸水溶液用三乙胺调节至pH＝3.3±0.05；

紫外检测器：检测波长为200-400nm；

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流速：0.5-2.0mL/min；

柱温：20-60℃；

(7)按外标法，计算有关物质的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的紫外检测器的检测波长为200-300nm，更优选的为244nm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流速为1.0mL/min；；所述柱温为30-50℃，更优选地为40℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液由0.1％磷酸水溶液用三乙胺调节pH3.3±0.05后制成。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述供试样品溶液的配制具体包括配制含盐酸屈他维林0.8mg/mL的溶液，所述溶液的溶剂为流动相A、甲醇和乙腈形成的混合溶剂，所述混合溶剂为将甲醇和乙腈按体积比2:1混合后的混合液再与流动相A按体积比1:9混合。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的配制具体包括配制含盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮的溶液，所述溶液中盐酸屈他维林的浓度为4.0μg/mL；乙基罂粟碱的浓度为1.6μg/mL；屈他维林酮的浓度为4.0μg/mL；将盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮先用甲醇与乙腈体积比为2:1的混合液溶解，然后加入流动相A、甲醇和乙腈形成的混合溶剂，所述混合溶剂为将甲醇和乙腈按体积比2:1混合后的混合液再与流动相A按体积比1:9混合。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述系统适用性溶液的配制具体包括配制含盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮的溶液，所述溶液中盐酸屈他维林的浓度为0.8mg/mL；乙基罂粟碱的浓度为1.6μg/mL；屈他维林酮的浓度为4.0μg/mL；将盐酸屈他维林、乙基罂粟碱和屈他维林酮先用甲醇与乙腈体积比为2:1的混合液溶解，然后加入流动相A、甲醇和乙腈形成的混合溶剂，所述混合溶剂为将甲醇和乙腈按体积比2:1混合后的混合液再与流动相A按体积比1:9混合。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述系统适用性试验是指取系统适用性溶液20μL注入液相色谱仪，盐酸屈他维林与乙基罂粟碱的分离度大于3.0，各杂质峰之间分离度符合要求，理论塔板数按盐酸屈他维林计算，不低于3000。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，以流动相A、流动相B和流动相C进行梯度洗脱；所述的梯度为：