一种新型唾液CRP检测试纸的制作方法

本实用新型涉及医用检测试纸领域，尤其涉及一种新型唾液CRP检测试纸。

背景技术：

C反应蛋白((C-reactive protein ,CRP) 是一种能与肺炎链球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白，半衰期19小时；血清CRP由肝脏合成，白细胞介素1b、6以及肿瘤坏死因子是其合成的最重要的调节因子；CRP的分子量为105 500，由含有五个相同的未糖基化的多肽亚单位组成，每个亚单位含有187个氨基酸，这些亚单位间通过非共价键连结成环状的五聚体，并有一个链间二硫键。CRP可以引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬作用，而表现炎症反应。CRP作为急性时相反应的一个极灵敏的指标，血浆中CRP浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速显著地增高，可达正常水平的2000倍。结合临床病史，有助于随访病程。特别在炎症过程中，随访风湿病、系统性红斑狼疮、白血病等。

目前对C反应蛋白快速检测的方法和仪器较多，主要有胶体金免疫层析法、荧光免疫层析法、免疫比浊法、化学发光法、酶联免疫法等检测方法，检测样本多为人血清、血浆或全血。需要专业医护人员采集血样、结果判读依赖专业检测仪器等原因。患者无法完成家庭自测。目前国内外尚未有研制和生产以人体唾液作为检测样本的C反应蛋白唾液检测试纸条。

现有的血液试纸条在其使用过程中存在如下不足之处：样本采集会带来一定的疼痛，为很多样本采集者难以接受；而采集血样时需要专业的医护人员，而且采集血样时会造成伤口，产生潜在危险，很不方便，不适用于患者家庭自测；只能检测血液样本，包括全血、血浆、血清；现有技术产品没有进行半定量检测；没有专用的配套智能手机APP进行定量检测，实现个人自测和保留检测CRP结果。

鉴于上述缺陷，本实用新型创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本创作。

技术实现要素：

本实用新型目的在于提供一种新型唾液CRP检测试纸及其制作方法，用以克服上述技术缺陷。

为实现上述目的，本实用新型采用了如下技术方案：一种新型唾液CRP检测试纸，包括检测试纸、唾液采集器和检测装置，其中，

所述的检测试纸包括样品垫、胶体金结合垫、NC硝酸纤维素膜、吸水板及PVC板，所述的样品垫、胶体金结合垫、NC硝酸纤维素膜、吸水板粘贴于所述的PVC板表面；

所述的样品垫与其下部的胶体金结合垫，所述的胶体金结合垫与其下部的NC硝酸纤维素膜，所述的NC硝酸纤维素膜与其上部的吸水板，分别部分重叠交接；

所述的胶体金结合垫喷有胶体金标记的CRP-α单克隆抗体；

所述的NC硝酸纤维膜上分别划有两条平行的抗体捕获线，靠近胶体金结合垫的一条CRP-β单克隆抗体单抗体，作为检测线，另一条含有经确定了浓度的羊抗鼠IgG抗体，作为标准浓度显色质控线。

进一步地，所述的唾液采集器为筒装唾液采集器，其包括采集手柄架、容器筒、采集头和筒帽，所述的采集手柄架设置在采集头的上方，两者连为一体；采集手柄架和采集头设置在容器筒内部。

进一步地，所述的检测装置为第一CRP检测试纸卡。

进一步地，所述的检测装置为第二CRP检测试纸卡。

进一步地，所述的检测装置为配套色标卡，其设置有T线色彩与对应的浓度值,可进行CRP浓度半定量检测。

进一步地，所述的检测装置为APP软件，其内存储有对应的检测浓度值,可进行CRP浓度定量或者半定量检测。

与现有技术相比，本实用新型采用唾液样本进行检测，结合目前较为成熟的胶体金免疫层析技术，可简便、快捷、对患者无任何伤害的完成CRP检测，它可以用于医疗机构的快速检测，更难能可贵的是可以让消费者进行自测。

另外还可以1）通过与本项目配套使用的色标卡对比，可以进行CRP浓度半定量检测。2）通过与本项目一起配套使用的智能APP手机结合，可以进行CRP浓度进行定量检测。消费者也可自己根据手机提示建议进行正确合理用药，防止抗生素滥用。3）连续使用本产品，可以对治疗效果进行评价。

本实用新型有益效果：

1）CRP定性胶体金检测试纸，原理相同，只不过样本来源是不同，是以全血、或者血清和血浆为检测样本的，不能进行半定量和定量进行检测。

2）CRP定量胶体金检测试纸，原理相同，样本是全血、或者血清和血浆，但它将胶体金试纸与专业的金标读数仪结合一起进行定量检测，目前广泛应用于医疗机构。

附图说明

图1为本实用新型的筒装唾液采集器的结构示意图；

图2为本实用新型的第一CRP检测试纸卡的结构示意图；

图3为本实用新型的第二CRP检测试纸卡的结构示意图；

图4为本实用新型的色标卡的结构示意图；

图5为本实用新型的检测试纸的结构示意图；

图6为本实用新型的新型唾液CRP检测试纸的加工工艺的流程图。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。

实施例一

本实施例的唾液CRP检测试纸包括检测试纸、唾液采集器和第一CRP检测试纸卡，其中，所述的唾液采集器为筒装唾液采集器。

所述的第一CRP检测试纸卡包括卡底、试纸条和卡盖组成。其中，所述的卡底内有卡槽，试纸条置于卡槽内，样品垫端对应加样端，吸水板对应手持端。卡盖有集液加样孔21和显示窗22，卡底装好试纸条后，盖上卡盖，扣紧。卡盖的集液加样孔对应着样品垫端，显示窗对应NC硝酸纤维素膜；卡盖和卡底通过立柱23定位及安装。

反应原理为：

将采集好唾液的单采集器的采集头一端插入试纸卡的集液加样孔，稍用力挤压，唾液样本即加入到试纸条的样品端，样本即开始侧向层析运动，进行检测，原理同试纸条，当样本中含有一定量的CRP抗原时，显示窗显示两条平行的线（C和T)，当样本中没有CRP抗原时或者低于检测线性范围低浓度值以下，显示窗只显示一条C线。

将采集好唾液的筒装采集器筒帽拧下，捏集筒的中部，将唾液样本挤入试纸卡的集液加样孔，唾液样本即加入到试纸条的样品端，样本即开始侧向层析运动，进行检测，原理同试纸条，当样本中含有一定量CRP抗原时，显示窗显示两条平行的线（C和T)，当样本中没有CRP抗原时或者低于检测线性范围低浓度值以下，显示窗只显示一条C线。

请参阅图1所示，所述的筒装唾液采集器包括采集手柄架11、容器筒12、采集头13和筒帽14，所述的采集手柄架11设置在采集头13的上方，两者连为一体；采集手柄架11和采集头13设置在容器筒12内部。

请参阅图5所示，本实施例的检测试纸包括样品垫1、胶体金结合垫2、NC硝酸纤维素膜3、吸水板4及PVC板5，所述的样品垫1、胶体金结合垫2、NC硝酸纤维素膜3、吸水板4粘贴于所述的PVC板5表面，且其宽度相同；

所述的样品垫1与其下部的胶体金结合垫2，所述的胶体金结合垫2与其下部的NC硝酸纤维素膜3，所述的NC硝酸纤维素膜3与其上部的吸水板4，分别部分重叠交接，重叠宽度分别为1-4mm。

所述的胶体金结合垫2喷有胶体金标记的CRP-α单克隆抗体；

所述的NC硝酸纤维膜3上分别划有两条平行的抗体捕获线，靠近胶体金结合垫2的一条CRP-β单克隆抗体单抗体，作为检测线6，即T线，另一条含有经确定了浓度的羊抗鼠IgG抗体，作为标准浓度显色质控线7，即C线。

实施例二

本实施例的唾液CRP检测试纸包括检测试纸、唾液采集器和第二CRP检测试纸卡，其中，所述的唾液采集器为实施例一的筒装唾液采集器；检测试纸为实施例一的检测试纸；不同的是采用第二CRP检测试纸卡。

请参阅图3所示，第二CRP检测试纸卡包括卡底、试纸条和卡盖，卡底内有卡槽，试纸条置于卡槽内，样品垫端对应加样端，吸水板对应手持端。卡盖有加样孔31和显示窗32，卡底装好试纸条后，盖上卡盖，扣紧。卡盖的集液加样孔对应着样品垫端，显示窗对应NC硝酸纤维素膜。卡底和卡盖通过立柱33定位及安装。

将采集好唾液的筒装采集器筒帽拧下，捏集筒的中部，将唾液样本挤入试纸卡的集液加样孔，唾液样本即加入到试纸条的样品端，样本即开始侧向层析运动，进行检测，原理同试纸条，当样本中含有一定量的CRP抗原时，显示窗显示两条平行的线（C和T)，当样本中没有CRP抗原时或者低于检测线性范围低浓度值以下，显示窗只显示一条C线。

实施例三

本实施例采用半定量唾液CRP检测试纸，包括检测试纸、唾液采集器装置和配套色标卡；

其中，所述的检测试纸与实施例一的检测试纸相同，所述的唾液采集器装置为实施例一的筒装唾液采集器；采用第一CRP检测试纸卡。

其中，所述的配套色标卡上设置有T线色彩与对应的浓度值,可进行CRP浓度半定量检测。

实施例四

本实施例采用半定量唾液CRP检测试纸，包括检测试纸、唾液采集器装置和配套色标卡；

其中，所述的检测试纸与实施例一的检测试纸相同，所述的唾液采集器装置为实施例一的筒装唾液采集器；不同的是采用实施例二的第二CRP检测试纸卡。可进行CRP浓度半定量检测。

实施例五

本实施例采用定量唾液CRP检测试纸，包括检测试纸、唾液采集器装置和装有配套的APP软件智能手机；

其中，所述的检测试纸与实施例一的检测试纸相同，采用第一CRP检测试纸卡；

其中，所述的APP软件内存储有对应的检测浓度值。进行CRP浓度定量或者半定量检测。

本实用新型的反应机理为：

样本通过本产品自带的唾液采集器采集唾液，产品研制的原理是将C反应蛋白单克隆抗体和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维薄膜上，在聚酯膜上是胶体金标记的特异性极强的C反应蛋白单克隆抗体。在检测时，如样本中没有C反应蛋白存在，胶体金标记的特异性抗体与膜区抗原结合形成两条红线 (一条检测线T，一条质控线C)，表明检测结果为阴性；

如样本中存在C反应蛋白且C反应蛋白的浓度达到10mg/L时，C反应蛋白分子就与胶体金标记的C反应蛋白抗体结合，样本向前涌动时，会被包被在硝酸纤维素膜上的C反应蛋白单克隆抗体捕获，形成肉眼可见的（紫）红色检测线，质控线包被的羊抗鼠IgG也可以捕获胶体金标记的C反应蛋白单克隆抗体，从而形成一条（紫）红色质控线，表明检测结果为阳性。在一定的浓度范围内，检测线的显色颜色越深说明浓度越高，反之浓度就越低。另外，可进行半定量1）配套的梯度显色卡是检测不同浓度的标准质控品检测线的反应颜色做成相应的梯度的，使用时，将检测结果中的检测线与色卡对比，即可知道样本中CRP的大约浓度。还可与手机APP结合使用进行定量检测2）如果用配套使用的智能手机APP扫描试纸的检测线和质控线，手机可以直接定量检测出样本的浓度。

在当前的CRP检测技术及应用中，是以全血、或者血清和血浆为检测样本，没有以唾液作为样本对象的。

请参阅图6所示，本实用新型提供的一种新型唾液CRP检测试纸，其包括

本实用新型提供的一种新型唾液CRP检测试纸的制作方法如下：

1）样品垫的制备：将玻璃纤维素膜切成25*30cm，用样品垫处理液浸泡30分钟上，取出烘干，切成相应宽度的2.5*30cm样品垫条备用；

2）胶体金结合垫的制备：用氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备胶体金液冷却备用，调整PH值至适当值，加入要求量的CRP-α单克隆抗体，搅拌30分钟，加入适量的BSA，搅拌10分钟，离心去上清，加入适量的复溶液复溶至适量体积，振荡均匀，喷涂在聚酯膜上，37℃干燥4小时以上，沿着喷金复溶液的方向，在保证每条金的完整的情况下，裁成1*30cm胶体金结合垫备用；

3）包被膜的制备：用抗体稀释液分别稀释CRP-β单克隆抗体，和羊抗鼠多抗至一定的浓度，分别划线在NC膜上，分别形成T和C线，如上述产品图的位置，37℃干燥4小时以上，然后裁成30cm长备用；

4）吸水材料的制备：将吸水板裁成3.3*30cm条形备用；

5）金膜组合：将包被膜、吸水材料、胶体金结合垫、样品垫按照上图的顺序和层叠粘在PVC板上，形成成型板；

6）分切：将上述成型板切成3mm或者要求宽度的条；

7）条型产品：装袋和封口：将上述条，一条一条分别装入铝泊袋中，封口；备用；

7）板型产品：装袋和封口：将6）步骤生产的条分别装入到相应的卡，分别装入到铝泊袋中，封口；备用。

其中，上述的筒装采集器的生产工艺为：

1）采集手柄架、采集头、容器筒、筒帽用纯化水清洗三遍，分别散开平铺于晾架；

2）将上述晾架推入烘房中进行干燥，分别装入洁净的袋中待用；

3）将采集头浸泡于特定的溶液中，30分钟后置于晾架上，散开平铺于晾架上，然后送入烘房中干燥；

4）取已经烘干过的采集手柄架，和浸泡处理干燥过的采集头，将采集头于超声波焊接机上焊接到采集手柄架的连接端；质检；

5）将质检合格的焊好的采集器逐个装入每个容器筒，带上筒帽；

以上工序在10万级洁净厂房内进行生产；

6）上述组装完毕采集器进行灭菌后，质检合格入库待用。

其中，上述的色标卡生产工艺为：

1）分别配置CRP质控品浓度（mg/L)：0.5、1、5、10、20、50、80、100、120、150；

2）用合格的CRP检测试纸分别检测上述浓度的质控品，分别得出检测线（T线）的显色带；

3）将显色带用相机进行拍照，传到电脑上，将浓度与显色带一一对应，做色标卡的模板原文件；

4）将色标卡原文件将印厂进行印刷；

5）质检合格入待用。

以上具体实施方式仅用以说明本实用新型的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本实用新型进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本实用新型的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本实用新型技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本实用新型的权利要求范围当中。