一种确定样品中靶分子丰度的方法与流程

文档序号:15467008发布日期:2018-09-18 19:31阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种确定液体样品中靶分子丰度的方法,包括以下步骤:

-在反应室中将液体样品与靶分子结合探针一起孵育以提供反应混合物,所述靶分子结合探针包含与荧光探针缀合的单域抗体,其中单链抗体能够选择性结合所述靶分子;

-测定反应室中的反应混合物的荧光偏振以检测激发光和发射光之间的偏振变化;和

-将偏振变化与样品中靶分子的丰度相关联。

2.如权利要求1所述的方法,其中荧光探针具有至少4ns的寿命。

3.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述单域抗体能够特异性结合靶抗体的高变区。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述单域抗体能够特异性结合靶抗体的恒定区。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法,其是同时确定多个液体样品中至少一种靶分子的丰度的快速、高通量的方法,其中将每个液体样品单独孵育在微量滴定板的孔中。

6.如权利要求5所述的方法,其中所述方法使用荧光偏振分析仪,该荧光偏振分析仪能够同时测定微量滴定板的多个孔的荧光偏振。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述液体样品或每个液体样品包含细胞培养物。

8.根据权利要求7的方法,其中靶分子是重组蛋白质,并且其中细胞培养物包含经工程化以过表达重组蛋白质的生产细胞。

9.根据权利要求7的方法,其中重组蛋白质是单克隆抗体。

10.一种单域抗体和荧光探针的缀合物。

11.根据权利要求10所述的缀合物,其中所述荧光探针是长寿命荧光探针。

12.一种通常适用于实施权利要求1-9中任一项所述方法的试剂盒,其包含(a)包含与荧光探针缀合的单域抗体的靶分子结合探针和(b)荧光偏振分析仪。

13.根据权利要求12所述的试剂盒,其中所述荧光探针是长寿命荧光探针。

14.根据权利要求12或13所述的试剂盒,其中所述荧光偏振分析仪配置为同时检测微量滴定板的多个孔中的荧光偏振的变化。

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