一种朱槿纤维快速制片的方法与流程

本发明属于生物非切片制片的技术领域，涉及一种朱槿纤维快速制片的方法。

背景技术：

植物纤维普遍存在于植物体的营养器官中，是植物机械组织的一部分，同时也是植物运输系统重要的组成部分，是植物物质运输、维持正常生命活动的主要场所。植物纤维具有多种类型，根据纤维所在的部位可以将植物纤维分为木纤维、下皮纤维、韧皮纤维、皮层纤维、中柱鞘纤维、环髓纤维；根据纤维的特殊组织形态可以将纤维分为晶鞘纤维、嵌晶纤维、含晶纤维、分隔纤维、分枝纤维等。而通常人们所说的植物纤维主要是指木纤维，木纤维包括木质部中除导管、薄壁细胞和管胞之外的一切细长的厚壁组织。纤维体内主要含有纤维素。但是韧皮纤维也是植物纤维中重要的组成部分。韧皮纤维比木纤维更容易分离出来，因此对于观察植物纤维结构具有重要的意义，是纤维实验教学的重要材料来源。

而目前国内对于纤维的研究主要集中在对丝织品的研究以及对于纤维旋光性、着色性能等方向进行研究尤其是对于热带纤维的研究已经成为一种新研究方向。处理纤维的主要方法有碱法、酸法。其中碱法是一种古老的纤维处理方法，同时也是目前最常用的方法，碱法处理可以除去纤维中的脂肪酸和果酸使植物纤维可以分出来，还能保留木质素。但目前采用的方法离析时间非常长，易破坏纤维结构，导致制片效果均不佳。

在教学方面，朱槿纤维是典型的常用材料。目前，离析朱槿纤维的方法，主要采用10％重铬酸钾和10％硝酸离析法，但是采用该方法，离析时耗费的时间长，而获得的纤维结构不完整，在生物显微镜下很难观察到其结构如清晰的细胞壁以及纹孔等结构。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种朱槿植物纤维快速制片的方法，该方法离析时间短，获得的纤维结构完整，能够在纤维镜下观察到清晰的细胞壁以及纹孔等结构。

本发明的技术方案是：一种朱槿纤维快速制片的方法，包括以下步骤：

(1)、用剪刀剪取两年以上的老枝条，剥下树皮，浸泡到质量百分数为15％-25％重铬酸钾和8％-15％硝酸混合液中，煮沸60～90min，然后再加入质量百分数为10％-15％过氧化氢和50％-65％醋酸混合液10～20ml，继续煮沸处理30～60min；

(2)、将处理好的植物组织用镊子夹到装有自来水的培养皿中，用解剖针挑出植物纤维，置于干净的载玻片中，滴入0.5～1ml的质量百分数为0.1％番红染色液染色10min，然后用70％酒精洗干净多余的番红染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，盖上盖玻片，完成封片；

(3)、生物显微镜下观察植物纤维结构。

步骤(1)是用所述重铬酸钾和硝酸的混合液处理使植物树皮变硬之后，再缓慢加入所述醋酸和过氧化氢混合液处理一段时间，获得完整的植物纤维。

除另有说明外，本发明所述的百分比均为质量百分比，各组分含量百分数之和为100％。

发明人在用10％重铬酸钾和10％硝酸的混合液处理朱槿树皮时发现，仅用10％重铬酸钾和10％硝酸混合液处理朱槿茎段树皮所需要消耗的时间15～20h，并且所获得纤维的观察效果差，部分的纤维结构被分解，细胞壁的染色效果不清晰。然后在发明人用朱槿为材料重新所做的实验中发现在用重铬酸钾和硝酸的混合液处理使植物树皮变硬之后，再缓慢加入醋酸和过氧化氢混合液处理一段时间就可以很快的获取完整的植物纤维。

附图说明

图1-1是光学显微镜下观察朱槿纤维结构图。

图1-2是朱槿纤维局部图。

图1-3是朱槿纤维局部放大图(40x10)。

图2-1是朱槿纤维全景图(100x)。

图2-2是朱槿纤维束局部图(100x)。

图2-3是朱槿纤维局部图(400x)。

图2-4是朱槿纤维局部图(400x)。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明的技术方案作进行进一步的说明。

实施例1

用剪刀剪取两年以上的朱槿老枝条，剥下树皮，将树皮浸泡到质量百分数为15％重铬酸钾和8％硝酸混合液中，煮沸60min，然后再加入质量百分数为10％过氧化氢和50％醋酸混合液20ml，继续煮沸处理30min。将处理好的植物组织用镊子夹到装有澄清自来水的培养皿中，用解剖针挑出植物纤维，置于干净的载玻片中，滴入0.5～1ml质量百分数为0.1％番红染色液染色10min。然后用70％酒精洗干净多余的番红染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，盖上盖玻片，完成封片。电子显微镜下观察植物纤维结构。结果如图1-1、图1-2、图1-3。

实施例2

用剪刀剪取两年以上的朱槿老枝条，剥下树皮，将树皮浸泡到质量百分数为20％重铬酸钾和10％硝酸混合液中，煮沸90min，然后再加入质量百分数为12％过氧化氢和60％醋酸混合液10ml，继续煮沸处理30min。将处理好的植物组织用镊子夹到装有澄清自来水的培养皿中，用解剖针挑出植物纤维，置于干净的载玻片中，滴入0.5～1ml质量百分数为0.1％番红染色液染色10min。然后用70％酒精洗干净多余的番红染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，盖上盖玻片，完成封片。生物显微镜下观察植物纤维结构。生物显微镜下观察植物纤维结构。用此方法所得的结果与实例1所得结果相差不大。

实施例3

用剪刀剪取扶桑两年以上的老枝条，剥下树皮，将树皮浸泡到质量百分数为25％重铬酸钾和15％硝酸混合液中，煮沸60～90min，然后再将质量百分数为25％重铬酸钾和15％硝酸混合液倒掉，再加入质量百分数为15％过氧化氢和65％醋酸混合液10～20ml，继续煮沸处理30～60min。将处理好的植物组织用镊子夹到装有澄清自来水的培养皿中，用解剖针挑出植物纤维，置于干净的载玻片中，滴入0.5～1ml质量百分数为0.1％番红染色液染色10min。然后用70％酒精洗干净多余的番红染色液，再滴入0.5～1ml50％的甘油，盖上盖玻片，完成封片。生物显微镜下观察植物纤维结构。用此方法所得的结果与实例1所得结果相差不大。如图2-1、图2-2、图2-3、图2-4。