一种鉴别当归、欧当归及独活的方法与流程

本发明涉及利用光学手段鉴别中药材的方法，尤其涉及一种利用紫外谱线法鉴别中药的方法。

背景技术：

当归、欧当归及独活是三种性味功效不同的中药。当归味甘、辛，性温，具补血活血、调经止痛、润肠通便的功效。独活味辛、苦，性微温，具祛风除湿，通痹止痛的功效。欧当归味辛辣，具活血调经、利尿的功效。三者不可混用。

当归、欧当归及独活的来源相近，性状相似容易混淆，且欧当归以及独活的生产成本与价格比当归低。所以，中药材市场上常常有人用欧当归或者独活冒充当归。当归、欧当归及独活的性状形态、显微特征均十分相近，但所含的化学成分存在差异，仅凭性状和显微很难准确区分，必须借用理化手段进行鉴别。

紫外谱线法是用多种极性不同的溶剂提取样品，将提取液适当稀释后，在一定条件下进行紫外扫描，得到紫外谱线图，通过比较紫外谱线图从而鉴别不同药材的方法。

紫外谱线法用于鉴别当归、欧当归及独活方面已经有一些研究做过尝试。2012年5月公开的《当归及其常见伪品东当归和欧当归的鉴别》论文公开了一种用甲醇作为溶剂对当归、东当归和欧当归进行提取的方法，其提取液的紫外谱线图表明二者均在275nm波长附近有一个最大吸收峰，二者最大吸收峰的波长距离不超过2nm。这使得当归和欧当归的甲醇提取液无法通过紫外谱线加以区分。因此该论文认为紫外谱线法无法作为区分当归和欧当归的鉴别手段。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种鉴别当归、欧当归及独活的方法。

一种鉴别当归、欧当归及独活的方法，该方法是用氯仿、无水乙醇、石油醚或者水作为溶剂，分别对当归、欧当归及独活三种中药中的任意一种、两种或者三种进行浸提，利用紫外谱线法测出待测中药提取液的紫外谱线图，根据当归、欧当归及独活提取液的紫外谱线图的特征，鉴别出待测中药。

当归、欧当归和独活三种中药虽然性状、成分相似，但是不同极性的溶剂对这三种中药进行浸提时，提取液中物质各不相同，或者提取液中相同物质的浓度也有所不同，这些不同都会造成相应提取液紫外谱线图的差异，尤其是在特定波长上的吸收峰、肩峰或者吸收谷的差异。但对大多数溶剂而言，当归、欧当归及独活提取液的紫外谱线极为相似，也就是三种中药的提取液中的物质成分基本相同，从而导致无法鉴别出三种中药。比如《当归及其常见伪品东当归和欧当归的鉴别》论文中提到的甲醇作为溶剂提取当归、东当归和欧当归时，提取液的紫外谱线图就没有显著差异，因此，甲醇溶剂的提取液不能够鉴别出当归、东当归和欧当归。

本发明不用甲醇提取当归、欧当归及独活，而改用石油醚、氯仿、水或无水乙醇来提取。通过紫外光谱仪测定当归、欧当归及独活的上述四种溶剂的提取液，可以发现在使用某些溶剂作为提取液时，三种中药的紫外谱线特征，尤其是光吸收峰和吸收谷对应的波长存在差异。利用在特定溶剂中的紫外谱线图特征的差异，可以很好地区分当归、欧当归及独活的提取液，从而鉴别出当归、欧当归及独活。

三种中药的上述四种溶剂浸提液的紫外谱线图特征存在的明显差异，至少有九个差异点，每一个差异点都可以从当归、欧当归和独活三种中药的浸提液中鉴别区分出其中的一种或者两种中药的浸提液，从而达到鉴别中药的目的。

用石油醚分别浸提当归、欧当归和独活三种中药，然后测量浸提液的紫外吸收光谱，发现独活的石油醚浸提液的紫外谱线图在248.0±5nm附近有肩峰，在270.0±5nm附近有光吸收谷，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在248.0±5nm附近没有肩峰，在270.0±5nm附近没有光吸收谷。据此，可以确定当溶剂为石油醚时，若中药浸提液的紫外吸收光谱在248.0±5nm附近有肩峰，或者在在270.0±5nm附近有光吸收谷，则待测中药为独活；若中药浸提液的紫外吸收光谱在248.0±5nm附近没有肩峰，或者在在270.0±5nm附近没有光吸收谷，则待测中药为当归或者欧当归。

用氯仿分别浸提当归、欧当归和独活三种中药，然后测量浸提液的紫外吸收光谱，发现独活的氯仿浸提液的紫外谱线图在274.0±5nm附近有吸收谷，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在274.0±5nm附近没有吸收谷。据此，可以确定当溶剂为氯仿时，若所述紫外谱线图在274.0±5nm附近有光吸收谷，则待测中药为独活；若所述紫外谱线图在274.0±5nm附近有没有光吸收谷，则待测中药为当归或者欧当归。

用无水乙醇分别浸提当归、欧当归和独活三种中药，然后测量浸提液的紫外吸收光谱，发现独活的无水乙醇浸提液的紫外谱线图在250.0±5nm附近有肩峰，在271.5±5nm附近有光吸收谷，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在250.0±5nm附近没有肩峰，在271.5±5nm附近没有光吸收谷。据此，可以确定当溶剂为无水乙醇，若所述紫外谱线图在250.0±5nm附近有肩峰，或者在271.5±5nm附近有光吸收谷，则待测中药为独活；若所述紫外谱线图在250.0±5nm附近没有肩峰，或者在271.5±5nm附近没有光吸收谷，则待测中药为独活当归或者欧当归。

用水分别浸提当归、欧当归和独活三种中药，然后测量浸提液的紫外吸收光谱，发现独活的水浸提液的紫外谱线图在252.0±5nm附近有肩峰，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在252.0±5nm附近没有肩峰。据此，可以确定当溶剂为水，若所述紫外谱线图在252.0±5nm附近有肩峰，则待测中药为独活；若所述紫外谱线图在252.0±5nm附近没有肩峰，则待测中药为当归或者欧当归。

用水分别浸提当归、欧当归和独活三种中药，然后测量浸提液的紫外吸收光谱，发现当归的的水浸提液的紫外谱线图在264.0±5nm附近有光吸收峰，在318.0±5nm附近没有光吸收峰，而独活和欧当归浸提液的紫外谱线图在264.0±5nm附近没有光吸收峰，在318.0±5nm附近有光吸收峰。据此，可以确定当溶剂为水，若所述紫外谱线图在264.0±5nm附近有光吸收峰，或者在318.0±5nm附近没有光吸收峰，则待测中药为当归；若所述紫外谱线图在264.0±5nm附近没有光吸收峰，或者在318.0±5nm附近有光吸收峰，则待测中药为独活或者欧当归。

用水分别浸提当归、欧当归和独活三种中药，然后测量浸提液的紫外吸收光谱，发现欧当归的水浸提液的紫外谱线图在279.0±5nm附近有光吸收峰，而独活和当归浸提液的紫外谱线图在279.0±5nm附近没有光吸收峰。据此，可以确定当溶剂为水，若所述紫外谱线图在279.0±5nm附近有光吸收峰，则待测中药为欧当归；若所述紫外谱线图在279.0±5nm附近没有光吸收峰，则待测中药为当归或者独活。

以上情况是氯仿、无水乙醇、石油醚或者水四种溶剂对当归、欧当归和独活三种中药进行浸提的浸提液的紫外谱线图中，有一部分紫外谱线存在明显差异，上述差异可以较好的用于鉴别上述三种中药。除此之外，通过比较不同中药的同一种溶剂的浸提液的紫外谱线图的整体差异，也可以比较容易的鉴别上述中药。

本发明的方法仅需要选择特定的溶剂对当归、欧当归或者独活进行浸提，然后通过紫外分光光度计测量光吸收值，得到紫外谱线图，就可以准确的鉴别出上述三种中药。该方法操作简单，成本低廉，相对于色谱等其他方法，对设备要求低，整个过程无污染，并且可以在非常短的时间内获得鉴定结果。

待测中药提取液的浓度不同，对应的紫外光吸收值也不同，按照郎伯比尔定律，在一定范围内浓度与光吸收值成正比。本发明关注的不是某一个波长对应的光吸收值的大小，而是不同中药的氯仿、无水乙醇、石油醚或者水浸提液的紫外谱线图的整体或者某个局部的谱线特征的差异，这一特征性的差异的出现不依赖于郎伯比尔定律限定的浓度范围，而是可以适当超出该范围。浸提液中中药的浓度为0.8-2mg/ml较为适宜。

待测中药提取液可以采用超声波、震荡或者搅拌方法提取得到，当然也可以用其他有助于中药快速溶解于溶剂的方法。当采用超声波方法提取时，超声波提取的时间最好是10-60min。

本专利所称石油醚是指沸程为60-90℃规格的石油醚。

附图说明

图1为当归、欧当归及独活的石油醚提取液的紫外谱线图，1是独活的石油醚提取液的紫外谱线图，2是欧当归的石油醚提取液的紫外谱线图，3当归的石油醚提取液的紫外谱线图。

图2为当归、欧当归及独活的氯仿提取液的紫外谱线图，1是独活的氯仿提取液的紫外谱线图，2是欧当归的氯仿提取液的紫外谱线图，3当归的氯仿提取液的紫外谱线图。

图3为当归、欧当归及独活的无水乙醇提取液的紫外谱线图，1是独活的无水乙醇提取液的紫外谱线图，2是欧当归的无水乙醇提取液的紫外谱线图，3当归的无水乙醇提取液的紫外谱线图。

图4为当归、欧当归及独活的水提取液的紫外谱线图，1是独活的水提取液的紫外谱线图，2是欧当归的水提取液的紫外谱线图，3当归的水提取液的紫外谱线图。

具体实施方式

下面将结合附图对本发明的实施方式进行详细描述。

实施例一

将当归、欧当归及独活剪成粒度约0.5mm的均匀碎末，各称量一份，每份2.0g，各置50ml碘量瓶内，分别加入20ml石油醚作为溶剂，超声提取30分钟，滤过，收集滤液，稀释到浓度为2mg/ml左右，吸光度为0.3000a-2.0000a，得到待测中药石油醚提取液。利用紫外可见分光光度计对上述待测中药提取液分别进行范围190.0nm-400nm的紫外光谱扫描，得到如图1所示的当归、欧当归及独活石油醚提取液的紫外谱线图，以及如表1所示的紫外谱线最大吸收峰位值。

由图1和表1可知：在石油醚提取液中，独活浸提液的紫外谱线图在248.0nm附近有肩峰，在270.0nm附近有光吸收谷，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在248.0nm附近没有肩峰，在270.0nm附近没有光吸收谷。

表1石油醚提取液紫外谱线最大吸收峰位值

实施例二

其它条件不变，将上述提取液溶剂替换成氯仿，得到如图2所示的当归、欧当归及独活氯仿提取液的紫外谱线图，以及如表2所示的紫外谱线最大吸收峰位值。

表2氯仿提取提取液紫外谱线最大吸收峰位值

由图2和表2可知：在氯仿提取液中，独活浸提液的紫外谱线图在274.0nm附近有吸收谷，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在274.0nm附近没有吸收谷。

实施例三

其它条件不变，将上述提取液溶剂替换成无水乙醇，得到如图3所示的当归、欧当归及独活无水乙醇提取液的紫外谱线图，以及如表3所示的紫外谱线最大吸收峰位值。

表3当归、欧当归及独活无水乙醇提取液紫外谱线最大吸收峰位值

由图3和表3可知：在无水乙醇提取液中，独活浸提液的紫外谱线图在250.0nm附近有肩峰，在271.5nm附近有光吸收谷，而当归和欧当归浸提液的紫外谱线图在250.0nm附近没有肩峰，在271.5nm附近没有光吸收谷。

实施例四

其它条件不变，将上述提取液溶剂替换成水，得到如图4所示的当归、欧当归及独活水提取液的紫外谱线图，以及如表4所示的紫外谱线最大吸收峰位值。

表4水提取部位紫外谱线最大吸收峰位值

由图4和表4可知：在水提取液中，欧当归在318.0nm处比当归多一个吸收峰，且当归在264.0nm处有一稳定吸收峰，而欧当归则在279.0nm处有稳定吸收峰，独活在250nm左右有一肩峰，而当归及欧当归在相应位置是一个吸收谷。

上述超声方法的目的是使中药更快更多的溶于上述提取液溶剂，当然也可以用其它震荡或者搅拌方法代替。

虽然结合附图描述了本发明的实施方式，但是本领域普通技术人员可以在所附权利要求的范围内做出各种变形或修改。