本发明涉及一种对多氯联苯总量进行快速现场检测的方法。
背景技术
多氯联苯是一系列含氯有机物的统称，属于持续性有机污染物。其化学性质稳定，具有非常高的毒性，不溶于水而易溶于脂肪，易在生物体中积累，具有致癌性和神经毒性。因此，对环境、食品中的多氯联苯检测，尤其是对痕量多氯联苯的检测，是非常重要的。同时，环境中多氯联苯泄露事故的及时监测，也是非常重要的。
现有测定多氯联苯的方法主要包括两个步骤，样品萃取和检测。由于多氯联苯易溶于有机溶剂，而不溶于水，因此常用有机溶剂，如正己烷等对多氯联苯进行萃取和富集。经过处理的样品，常使用高效液相色谱(hplc)或液相色谱-质谱联用(lc/ms)进行检测。由于该类检测方法需要使用价格昂贵的大型检测仪器，因此只适用于实验室使用，检测花费相对较高，并对操作人员有严格的实验技术要求。
同时，由于多氯联苯样品常用有机溶剂进行萃取，因此很多常用的方法无法对其进行检测。因为现有方法大多是水相反应，试剂在有机溶剂中溶解度很低，若加入样品(在有机溶剂中)，会产生分层现象，从而阻止了溶剂与待测物的有效反应，导致无法进行检测。还有一些方法，使用蛋白质等试剂，在加入有机溶剂后，可能导致其失活或者活性变化，如酶联免疫法(elisa)。
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种代替大型仪器，操作简便的用纸质检测装置对多氯联苯总量进行快速现场检测的方法。
本发明的技术方案概述如下：
用纸质检测装置对多氯联苯总量进行快速现场检测的方法，包括如下步骤：
1)设计检测装置图形，所述检测装置图形为中间有圆形1分布的矩形，所述圆的直径为5.0mm；
2)使用喷蜡打印机，按照步骤1)的设计，向滤纸上喷蜡打印，使打印的蜡位于矩形除圆形处以外的部分2；
3)将喷蜡打印后的滤纸放在加热盘中，加热，使蜡穿透滤纸，冷却至室温，得纸质检测装置，将滤纸的喷蜡打印的一面称为a面；
4)将核酸适体10pmol加入a面的圆形处，干燥；
5)将0.5μl系列浓度的多氯联苯标准品的正己烷溶液和0.5μl待测样品多氯联苯正己烷萃取液加入到不同的圆形处；干燥；加入5μl、ph＝7.2、10mm磷酸缓冲溶液，反应15分钟；加入金纳米溶胶1μl，反应5分钟；加入2μl、0.25m氯化钠水溶液，放置5分钟，观察结果并进行拍照；
6)使用图像分析软件，对步骤5)获得的系列浓度的多氯联苯标准品的正己烷溶液的照片进行结果颜色分析，并做出标准曲线；
7)使用图像分析软件，对步骤5)获得的待测样品多氯联苯正己烷萃取液照片进行结果颜色分析，根据标准曲线，计算待测样品中多氯联苯的浓度。
所述圆形的个数为5-96之中的正整数个。
所述滤纸为定性滤纸或定量滤纸。
本发明的优点：
1、纸质检测装置小巧，携带、移动方便，无需使用大型仪器，便于现场检测；
2、检测成本低廉，操作简单；
3、使用过的装置便于处理，不会再次产生环境污染。
4、能够对待测样品多氯联苯正己烷萃取液进行定性和定量分析。
附图说明
图1为有96个圆形的纸质检测装置。
图2为多氯联苯样品的测定。
具体实施方式
核酸适体来源文献：mehtaj,rouah-martine,vandorstb,maesb,herreboutw,scippoml,dardennef,blustr,robbensj.selectionandcharacterizationofpcb-bindingdnaaptamers.anal.chem.2012；84:1669-76.中的核酸适体9.3。
金纳米溶胶制备：
将50ml的1mm氯金酸水溶液加热回流并搅拌，溶液沸腾后，快速加入5ml的38.8mm柠檬酸钠水溶液，待溶液变为深红色后，继续回流15分钟后，搅拌冷却到室温，在4度冰箱中保存。
本发明对喷蜡打印机不进行限定，所使用的喷蜡打印机选自：xeroxcolorqube8580，xeroxcolorqube8700，xeroxcolorqube8880或xeroxcolorqube8900。本发明各实施例使用的是xeroxcolorqube8700。
使用图像分析软件选自：imagej、photoshop等。
为了使本发明的技术方案及特点更加清晰，以下结合附图和具体实施方式，对本发明作进一步说明。此处描述的具体实施例仅用于解释本发明，但并不限定本发明的保护范围。
实施例1
用纸质检测装置对多氯联苯总量进行快速现场检测的方法，包括如下步骤：
1)在电脑上设计检测装置图形，检测装置图形为中间有96个圆形1分布的矩形，见图1，圆的直径为5.0mm；
2)使用喷蜡打印机，按照步骤1)的设计，向定性滤纸上喷蜡打印，使打印的蜡位于矩形除圆形处以外的部分2；
3)将喷蜡打印后的滤纸放在加热盘中，在130℃加热3分钟，使蜡穿透滤纸，冷却至室温，得纸质检测装置，将滤纸的喷蜡打印的一面称为a面；蜡穿透滤纸处为疏水区域，圆形处为亲水区域；
4)将核酸适体10pmol加入a面的圆形处，干燥；
5)配制多氯联苯标准品的正己烷溶液：浓度分别为0，700，7×104和7×106ng/l；各取0.5μl加入到不同的圆形处；干燥1分钟；
另取0.5μl待测样品多氯联苯正己烷萃取液加入到另外的圆形处；干燥1分钟；
(另取0.5μl浓度为1×107ng/l多氯联苯的正己烷溶液加入没有核酸适体的圆形处，干燥1分钟，为阳性对照)；
每个样品做三次重复实验。
加入5μlph＝7.2、10mm磷酸缓冲溶液，反应15分钟；加入1μl金纳米溶胶，反应5分钟；加入2μl0.25m氯化钠水溶液，放置5分钟，观察结果并进行拍照；
6)使用imagej图像分析软件，变成多通道图片后，分析红色通道，对步骤5)获得的系列浓度的多氯联苯标准品的正己烷溶液的照片和阳性对照照片进行结果颜色分析，将正己烷的颜色作为100％，阳性对照颜色作为0％，对系列多氯联苯标准品的正己烷溶液颜色进行数据标准化，并做出标准曲线；
7)使用imagej图像分析软件，变成多通道图片后，分析红色通道，对待测样品多氯联苯正己烷萃取液的照片进行结果颜色分析，依据上述界定的0％和100％的颜色范围，得到该样品的颜色结果数值，并根据标准曲线计算样品中多氯联苯的浓度，见图2。
根据标准曲线和样品的溶液颜色，计算样品中多氯联苯的浓度：得到的标准曲线为y＝-12.96+96.68，依此公式计算x＝2.11，多氯联苯浓度即为102.11＝128.8ng/l。
上述实施例仅为本发明的优选例，并不用来限制本发明，凡在本发明的原则之内，所做的任何修改和变化，均在本发明的保护范围之内。
圆形的个数还可以选自5-96之中的任意正整数个。
滤纸也可以选用定量滤纸。