一种生物组织自动免疫组化染色系统的制作方法

本发明属于生物组织培养设备技术领域，特别涉及一种生物组织自动免疫组化染色系统。

背景技术：

免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂荧光素、酶、金属离子、同位素显色来确定组织细胞内抗原多肽和蛋白质，对其进行定位、定性及定量的研究。

免疫组化实验整个流程不仅步骤繁琐，而且每隔一定的时间，需要人工加样和换洗液体，耗时费力，易出现加样量不精确等缺点。

一种采用特制载玻片扁平空间的果蝇翅芽自动免疫组化装置，虽然能够自动操作，但只能用于较薄生物组织的免疫组化染色实验，不适用于较厚的生物组织，例如果蝇的大脑组织，就不能用载玻片扁平空间进行免疫组化染色实验。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种生物组织自动免疫组化染色系统，解决现有免疫组化实验人工操作，耗时费力，且不适用于较厚的生物组织免疫组化的技术问题。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种生物组织自动免疫组化染色系统，其中：包括玻璃染色管、一抗储液罐、二抗储液罐、pbt缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐、进液管、出液管、若干连接管和废液罐；

所述玻璃染色管一端开口，所述玻璃染色管开口处设有密封塞，所述密封塞上设有进液孔和出液孔，所述玻璃染色管内底侧设有出液管保护腔；

所述一抗储液罐、二抗储液罐、pbt缓冲溶液储液罐和甲醛固定液储液罐设在玻璃染色管一侧上方，所述废液罐设在玻璃染色管一侧下方，所述一抗储液罐、二抗储液罐、pbt缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐的出口分别通过连接管与进液管连接，所述进液管穿过密封塞上的进液孔伸至玻璃染色管内，所述出液管的一端穿过密封塞上的出液孔伸至所述出液管保护腔内，所述出液管的另一端与废液罐连接；

所述一抗储液罐、二抗储液罐、pbt缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐与进液管之间的连接管上均设有由单片机控制模块控制的微型液体控制阀，所述出液管上设有由单片机控制模块控制的抽液泵；

所述一抗储液罐、二抗储液罐上设有由单片机控制模块控制的低温控制装置，所述玻璃染色管上设有红外测温探头。

进一步，所述玻璃染色管固定在翘板摇床上，翘板摇床按一定的频率摇动；所述进液管和出液管为软管。

进一步，所述进液管的出口端头弯向所述玻璃染色管内壁。

进一步，所述出液管保护腔侧壁上设有若干阻止生物组织通过的通液小孔，位于所述出液管保护腔内的出液管上设有过滤网。

本发明采用特制的玻璃染色管，可将较厚的生物组织放在染色腔内进行免疫组化染色实验，并自动完成免疫组化流程；密封塞的设置可实现染色管的密封，避免外界微生物侵染培养液；一抗储液罐、二抗储液罐、pbt缓冲溶液储液罐、甲醛固定液储液罐、连接管、微型液体控制阀、进液管、出液管和废液罐的设置，可根据需要对染色管内的培养液进行更换；特别是在甲醛固定液、一抗、二抗、pbt缓冲溶液、储液罐与进液管之间设置了微型液体控制阀，并在出液管上置了抽液泵，可实现自动操作；一抗、二抗储液罐上低温控制装置的设置，确保抗体在染色过程中不变质。玻璃染色管上设有温控系统，确保一抗孵育在低温进行，其他步骤在室温左右进行。

附图说明

图1是一种生物组织自动免疫组化染色系统的结构示意图；

图2是玻璃染色管的结构示意图；

图3是图2的右视图；

图4是单片机控制电路原理框图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步的详细描述。

如图1至图3所示，本实施例中的一种生物组织自动免疫组化染色系统，包括玻璃染色管1、一抗储液罐10、二抗储液罐11、pbt缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13、进液管4、出液管5、若干连接管3和废液罐6；

所述玻璃染色管1一端开口，所述玻璃染色管1开口处设有密封塞7，所述密封塞7上设有进液孔8和出液孔9；

为了防止出液时，生物组织被吸到出液管内，所述玻璃染色管1内底侧设有出液管保护腔2；

所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、pbt缓冲溶液储液罐12和甲醛固定液储液罐13设在玻璃染色管1一侧上方，所述废液罐6设在玻璃染色管1一侧下方，所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、pbt缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13的出口分别通过连接管3与进液管4连接，所述进液管4穿过密封塞7上的进液孔8伸至玻璃染色管1内，所述出液管5的一端穿过密封塞7上的出液孔9伸至所述出液管保护腔2内，所述出液管5的另一端与废液罐6连接；

所述一抗储液罐10、二抗储液罐11、pbt缓冲溶液储液罐12、甲醛固定液储液罐13与进液管4之间的连接管3上均设有由单片机控制模块控制的微型液体控制阀14，所述出液管5上设有由单片机控制模块控制的抽液泵15；

所述一抗储液罐10、二抗储液罐11上设有由单片机控制模块控制的低温控制装置，所述玻璃染色管1上设有红外测温探头17。

所述玻璃染色管1固定在翘板摇床16上，翘板摇床按一定的频率摇动；所述进液管4和出液管5为软管，不影响摇床的摇动。

所述进液管4的出口端头弯向所述玻璃染色管1内壁，防止进液时，液体直接冲刷生物组织造成破坏。

所述出液管保护腔2侧壁上设有若干阻止生物组织通过的通液小孔，位于所述出液管保护腔2内的出液管上设有过滤网，确保液体被顺利抽出玻璃染色管。

如图4所示，所述红外测温探头17与单片机控制模块连接，实时测量玻璃染色管1内的温度，所述一抗储液罐10、二抗储液罐11的低温控制装置与单片机控制模块连接，红外测温探头所测数据反馈给单片机，单片机再控制一抗储液罐10、二抗储液罐11的低温控制装置，从而确保一抗孵育在4～6℃进行，其他步骤在25℃左右进行。

本发明的使用过程：

使用时，将在磷酸缓冲液中解剖下来的翅芽转移到玻璃染色管1内，塞紧密封塞7，并将玻璃染色管1固定在翘板摇床16上，翘板摇床按一定的频率摇动；

通过单片机控制电路：

首先打开甲醛固定液储液罐13下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，确保玻璃染色管1充有一定量的固定液，然后关闭甲醛固定液储液罐13下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，固定40～60min；

然后，开启pbt缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，缓冲液持续清洗甲醛固定液1～1.5h后，关闭pbt缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15；

同时开启一抗储液罐10下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，确保足量的一抗溶液填充玻璃染色管1并充分浸泡生物组织后，关闭一抗储液罐10下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，孵育8～12h。单片机控制玻璃染色管的温度在4-6℃。

再次开启pbt缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，缓冲液持续清洗一抗溶液1～1.5h后，关闭pbt缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15；

同时开启二抗储液罐11下方连接管上的微型液体控制阀14和出液管5上的抽液泵15，确保一定量的二抗溶液填充玻璃染色管1并充分浸泡生物组织后，关闭二抗储液罐10下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，孵育1～1.2h；

最后开启pbt缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和出液管5上的抽液泵15，缓冲液持续清洗二抗溶液1～1.5h后，关闭pbt缓冲溶液储液罐12下方连接管上的微型液体控制阀14和抽液泵15，完成实验。

所述密封塞7塞紧玻璃染色管1后，玻璃染色管1管腔、进液管4、出液管5形成密闭的空间，以便抽液泵15可以将玻璃染色管1腔内的液体抽走。

本发明能够以多种形式具体实施而不脱离发明的精神或实质，所以应当理解，上述实施例不限于前述的细节，而应在权利要求所限定的范围内广泛地解释，因此落入权利要求或其等效范围内的变化和改型都应为权利要求所涵盖。