一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡的制作方法

本实用新型涉及临床医学检验技术领域，尤其涉及一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡。

背景技术：

免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种较成熟的免疫标记技术。由于其成本低、使用方便、快速读取结果等特性，被广泛应用于即时检验(POCT)领域。

急性心肌梗死(AMI)是一种常见的心脏事件，这是由于供应至心脏肌肉区域的血液被中断，导致肌肉细胞逐渐死亡。心脏病发作后进行及时的治疗至关重要，因为每延迟30分钟，相对死亡风险将提高7.5％。据了解，从急性心梗患者入院到血管开通的黄金时间为90分钟，4小时后可挽救的只有20％，12小时后则不足10％。因此，时间就是生命，急性心肌梗死的早期、快速诊断非常必要。

随着医学的不断进步，心肌梗死或损伤标志物也在不断变化发展。从“传统的心肌酶谱”到曾经的“金标准”肌酸激酶同功酶(CK-MB)，再到目前为止最特异的心肌损伤/坏死标志物—肌钙蛋白T/I(cTnT/cTnI)；从曾经的“心肌梗死标志物”到“心肌损伤标志物”；从单纯的心肌梗死诊断到急性冠脉综合症(ACS)及危险分层概念的提出，肌钙蛋白在心肌梗死诊断和预后判断中的作用日渐重要。

临床上测定肌钙蛋白，一般在临床采用全自动的免疫分析，需要价格昂贵的全自动仪器及与仪器严格配套的各种试剂盒，目前只能在医疗和检测中心应用，虽然也能较快地给出结果，但仍需一定时间，不适合远离医疗及检测中心的地区，更不能用于POCT的普查需要。

心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)是心脏中富含的一种新型小胞质蛋白，在心肌缺血性损伤出现后，H-FABP可以早在胸痛发作后1-3小时在血液中被发现，而肌钙蛋白在心肌损伤后释放，一般4-6个小时后，才开始在血液中升高，H-FABP的检测可以弥补肌钙蛋白在胸痛发生后释放时间较晚的不足。

目前，市场上心肌梗死检验领域的胶体金试纸条或检测卡多为一个检测卡检测一个指标，少数可以检测两个或三个指标的免疫层析的胶体金类产品不可避免地会存在一定的相互干扰，也尚未出现可实现H-FABP、cTnI和cTnT同时测定的产品。并且由于常规试纸条样品垫一般为一层，对全血的分离能力不佳，存在不能有效阻拦红细胞、检测效果不佳等问题。上述问题限制了胶体金检测在PCOT监测系统的应用。

有鉴于此，特提出本实用新型。

技术实现要素：

本实用新型的目的是提供一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡，基于纸芯片技术，通过样品垫的数量、尺寸、叠放方式、形状及金标膜涂敷金标抗体的位置进行设计和改进，不仅实现了对全血中血细胞的有效分离，使抗原和金标抗体可以充分结合，实现全血、血浆和血清样本的高效快速测定，还可以对样本进行等体积分流，避免不同目标检测物之间的干扰，实现一次加样即可独立完成多个目标检测物的测定，使得多指标检测可同时稳定进行，保证测定结果互不干扰，更加灵敏准确。本实用新型操作简单，实用性强，高通量，检测效率高，特别适用于急性心肌梗死的POCT系统监测。

为了实现上述目的，本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡，包括外壳及其内部的试纸条，其特征在于，所述外壳上方设有一个加样孔和三个观察窗，所述试纸条的背衬上方由左至右依次叠放有上层样品垫，基于纸芯片技术设计的下层样品垫，三条分别涂敷有H-FABP，cTnI和cTnT单一金标抗体的金标膜，三条硝酸纤维素膜和吸水纸，所述三条硝酸纤维素膜完全贴合于背衬上方平行设置，所述三条金标膜分别位于三条硝酸纤维素膜的上方左端平行设置，并与三条硝酸纤维素膜左端部分重叠，所述吸水纸位于三条硝酸纤维素膜的上方右端，并与三条硝酸纤维素膜右端部分重叠，所述下层样品垫位于三条金标膜的上方左端，并与三条金标膜左端部分重叠，所述上层样品垫位于下层样品垫的上方左端，并与下层样品垫左端部分重叠，所述三条硝酸纤维素膜上左侧分别设有H-FABP、cTnI和cTnT单抗层，右侧均设有羊抗鼠IgG层，所述H-FABP，cTnI和cTnT单抗层上设有检测线，所述羊抗鼠IgG层上设有对照线，所述加样孔和三个观察窗分别与上层样品垫和三条硝酸纤维素膜相对设置。

优选地，所述下层样品垫与金标膜重叠的一侧为梳齿形结构，包括三个梳齿，两侧梳齿的根部宽度为中间梳齿根部宽度的1.4-1.6倍。

优选地，所述上层样品垫长度为下层样品垫长度的1/2-3/4，所述下层样品垫的左端位于上层样品垫的中间位置处。

优选地，所述金标膜上涂敷的金标抗体位于金标膜的中间偏左。

优选地，所述单条硝酸纤维素膜的宽度为2mm。

优选地，所述上层样品垫的材质为全血滤膜。

优选地，所述下层样品垫的材质为玻璃纤维素膜或聚酯膜。

优选地，所述基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡的检测样本可以为血清，血浆或全血。

本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡，具有如下有益效果。

1.本实用新型基于纸芯片技术，通过样品垫的数量、尺寸、叠放方式、形状及金标膜涂敷金标抗体的位置进行设计和改进，实现了对全血中血细胞的有效分离，使抗原和金标抗体可以充分结合，实现全血、血浆和血清样本的高效快速测定。

2.本实用新型可以对样本进行等体积分流，有效避免了不同目标检测物之间的干扰，实现一次加样即可独立完成多个目标检测物的测定，使得多指标检测可同时稳定进行，保证测定结果互不干扰，更加灵敏准确。

3.本实用新型操作简单，实用性强，高通量，检测效率高，特别适用于急性心肌梗死的POCT系统监测。

附图说明

图1为本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡的外表面结构示意图；

图2为本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡内部试纸条的结构示意图；

图3为本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡内部试纸条上金标膜的喷金位置示意图。

图中：

1.背衬2.上层样品垫3.下层样品垫4.金标膜5.硝酸纤维素膜6.H-FABP检测线7.cTnI检测线8.cTnT检测线9.对照线10.吸水纸11.金标抗体12.试纸条13.外壳14.加样孔15.观察窗。

具体实施方式

下面结合具体实施例和附图对本实用新型做进一步说明，以助于理解本实用新型的内容。

如图1和2所示，分别为本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡的外表面结构示意图及其内部试纸条的结构示意图。该基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡，包括外壳13及其内部的试纸条12，所述外壳13上方设有一个加样孔14和三个观察窗15，所述试纸条12的背衬1上方由左至右依次叠放有上层样品垫2，基于纸芯片技术设计的下层样品垫3，三条分别涂敷有H-FABP，cTnI和cTnT单一金标抗体11的金标膜4，三条硝酸纤维素膜5和吸水纸10，所述三条硝酸纤维素膜5完全贴合于背衬1上方平行设置，所述三条金标膜4分别位于三条硝酸纤维素膜5的上方左端平行设置，并与三条硝酸纤维素膜5左端部分重叠，所述吸水纸10位于三条硝酸纤维素膜5的上方右端，并与三条硝酸纤维素膜5右端部分重叠，所述下层样品垫3位于三条金标膜4的上方左端，并与三条金标膜4左端部分重叠，所述上层样品垫2位于下层样品垫3的上方左端，并与下层样品垫3左端部分重叠，所述三条硝酸纤维素膜5上左侧分别设有H-FABP、cTnI和cTnT单抗层，右侧均设有羊抗鼠IgG层，所述H-FABP，cTnI和cTnT单抗层上设有检测线，所述羊抗鼠IgG层上设有对照线9，所述加样孔14和三个观察窗15分别与上层样品垫2和三条硝酸纤维素膜5相对设置，可同时对三个目标检测物进行独立测定。

所述下层样品垫3与金标膜4重叠的一侧为梳齿形结构，包括三个梳齿，两侧梳齿的根部宽度为中间梳齿根部宽度的1.4-1.6倍。所述上层样品垫2长度为下层样品垫3长度的1/2-3/4，所述下层样品垫3的左端位于上层样品垫2的中间位置处。如图3所示，为本实用新型提供的一种基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡内部试纸条上金标膜的喷金位置示意图。所述金标膜4上涂敷的金标抗体11位于金标膜4的中间偏左。所述单条硝酸纤维素膜5的宽度为2mm。所述上层样品垫2的材质为全血滤膜。所述下层样品垫3的材质为玻璃纤维素膜或聚酯膜。所述基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡的检测样本可以为血清，血浆或全血。

本实用新型的检测过程为：只需将待检患者的血液样本滴加在加样孔14中，样本经过下层样品垫3后，被等体积分流至三条通道，分别与三条金标膜4上的H-FABP单抗、cTnI单抗和cTnT单抗(检测抗体)发生反应，生成抗原-金标单抗复合物，同时在吸水纸10的作用下，复合物继续前移至捕获单抗层时，则形成捕获抗体-抗原-金标单抗复合物，并在H-FABP检测线6，cTnI检测线7和cTnT检测线8处形成红色，最后未反应的金标抗体11与羊抗鼠IgG形成IgG-金标抗体复合物，从而在对照线9处形成红色，即在检测时，当检测线和对照线9同时出现红色时，则说明测定结果为阳性，即待检样本中检测线对应的抗原含量增加，待检患者出现了心肌损伤。若对照线9未显示红色，则说明该基于纸芯片的新型多通道胶体金检测卡的结构已经损坏或操作不正确，检测结果无效。

本实用新型基于纸芯片技术，通过样品垫的数量、尺寸、叠放方式、形状及金标膜涂敷金标抗体的位置进行设计和改进，不仅实现了对全血中血细胞的有效分离，使抗原和金标抗体可以充分结合，实现全血、血浆和血清样本的高效快速测定，还可以对样本进行等体积分流，避免不同目标检测物之间的干扰，实现一次加样即可独立完成多个目标检测物的测定，使得多指标检测可同时稳定进行，保证测定结果互不干扰，更加灵敏准确。本实用新型操作简单，实用性强，高通量，检测效率高，特别适用于急性心肌梗死的POCT系统监测。

本文中应用了具体个例对实用新型构思进行了详细阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本实用新型的核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离该实用新型构思的前提下，所做的任何显而易见的修改、等同替换或其他改进，均应包含在本实用新型的保护范围之内。