一种基于酶诱导生物刻蚀双模分离式免疫传感器及其制备方法与流程

本发明属于免疫传感器技术领域，更具体地，涉及一种基于酶诱导生物刻蚀双模分离式免疫传感器及其制备方法。

背景技术：

光电化学(pec)检测作为一种新兴并快速发展的检测技术，引起了人们的广泛关注。与传统的酶联免疫法相比，pec检测以光作为激发光源，以光电流作为检测信号。得益于两种不同的能量转换形式，使pec免疫分析具有较低的检测限和较高的灵敏度。此外，相对简单和低成本的设备更有益于开发便携和小型化仪器。然而，即使pec检测具有上述诸多优点，传统的单信号pec免疫检测平台已逐渐难以满足人们日益增长的检测需求。

赭曲霉毒素a(ota)是由各种曲霉菌和青霉真菌产生的一类真菌毒素，是主要的食品污染物之一，这些毒素广泛存在于谷物、豆类、坚果、可可、干果、发酵饮料、动物饲料等农副产品中。ota作为一种具有良好化学稳定性和热稳定性的小分子毒素，不仅会给农业带来巨大的经济损失，而且可以通过食物链富集作用对人类和动物健康造成威胁。众多研究表明，ota被认为是一种致畸、致癌物质，对生物体的肾脏、肝脏和免疫调节系统具有多重毒性作用。世界卫生组织(who)将100ng/kg体重作为人体每周最高摄入量。目前，已有很多传统的分析方法用于ota的检测，如薄层色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱分析法和酶联免疫测定法。这些检测方法往往由于检测结果不精准、操作耗时长、灵敏度低、成本高或需要专业的操作人员等问题，在实际应用中受到限制。因此，迫切需要建立一种快速、准确、低成本的检测方法用于ota的灵敏检测。

技术实现要素：

本发明解决的技术问题是提供一种基于酶诱导生物刻蚀双模分离式免疫传感器。

本发明要解决的另一技术问题是提供上述传感器的制备方法。

本发明还一要解决的技术问题是提供一种检测赭曲霉毒素a的方法。

本发明目的通过以下技术方案予以实现：

提供一种基于酶诱导生物刻蚀双模分离式免疫传感器，其特征在于，采用三维还原氧化石墨烯r-go作为光电基底，在三维还原氧化石墨烯r-go表面覆盖/制备硫化镉/氧化锌纳米棒阵列cds/znonrs，合成的cd/znonrs/r-go复合材料作为光电极；采用金纳米双锥aunbps作为多色显色底物；利用辣根过氧化物酶hrp连接光电化学免疫分析与比色检测；其中cd/znonrs/r-go通过hrp诱导的酶催化反应发生生物刻蚀，从而形成光电流变化，hrp催化氧化双氧水产生的羟基自由基用于生物蚀刻aunbps形成不同大小和形状的金纳米粒子，从而显示出颜色变化和lspr峰的蓝移。

进一步地，所述辣根过氧化物酶hrp被脂质体包裹，形成hrp-脂质体复合物。

提供上述的传感器的制备方法，包括以下步骤：

s1.制备cds/znonrs/r-go：先合成氧化石墨烯水凝胶(go)，在还原氧化石墨烯r-go上制备硫化镉/氧化锌纳米棒阵列cds/znonrs，得cds/znonrs/r-go复合材料；

制备hrp-脂质体-ab2复合物：通过薄膜分散法制备脂质体包裹的辣根过氧化物酶hrp，得hrp-脂质体复合物，通过戊二醛交联法将hrp-脂质体复合物与第二抗体ab2连接，得hrp-脂质体-ab2复合物；

制备金纳米双锥：运用种子生长法制备金纳米双锥aunbps；

s2.构建双模分离式免疫传感器：通过多巴胺将抗原固定于96微孔板中上，依次加入封闭液、抗体与待测样品的混合液、hrp-脂质体-ab2复合物的溶液、曲拉通x-100、双氧水孵化反应，将最终的反应液分为两份，一份与cds/znonrs/r-go复合材料反应后用于pec检测，另一份与金纳米双锥aunbps混合后，用于光谱检测。

更具体地，步骤s1所述制备cds/znonrs/r-go的具体操作为：将160ml浓硫酸加入干燥的三口烧瓶中，在冰水浴搅拌下缓慢加入4g石墨粉和14g高锰酸钾得混合溶液a，将混合溶液a在35℃下持续搅拌24h；用400ml冰水稀释混合溶液a，然后在混合溶液a中加入双氧水直至颜色不发生改变且没有气泡产生，继续搅拌2h除去未反应的高锰酸钾，随后5000转/min离心3分钟，得沉淀物b；用300ml1mol/l的hcl离心洗涤沉淀物b三次后，再用水洗至上清液呈中性；将沉淀物b透析一周，产物分为两等份，分别用水和乙醇离心洗涤，分别分散在水或乙醇中储存，得水溶石墨烯与醇溶石墨烯，备用；将水溶石墨烯与醇溶石墨烯等体积混合后，浸入锌片，3h后将锌片取出洗涤，浸泡在水中除去物理性吸附的石墨烯片；最后将该锌片冷冻干燥后剥离出还原氧化石墨烯r-go膜；将还原氧化石墨烯r-go膜浸入含有40mm硝酸锌和40mm乌洛托品的生长液中，置于烘箱中95℃下反应5h以生长氧化锌纳米棒znonrs，制得znonrs/r-go；将znonrs/r-go浸入含10mm硝酸镉和10mm硫代乙酰胺的混合液中，40℃下反应40min，以3℃/min的升温速率在550℃下煅烧2h制备得cds/znonrs/r-go复合材料。

更具体地，步骤s1所述通过薄膜分散法制备脂质体包裹的辣根过氧化物酶hrp的具体操作为：称取二棕榈酰磷脂酰胆碱dppc、胆固醇和二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺dppe共30mg，混合溶解于4ml氯仿/甲醇混合液中，得混合溶液c，其中，二棕榈酰磷脂酰胆碱dppc、胆固醇和二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺dppe的摩尔比为10:10:1，氯仿/甲醇混合液中，氯仿/甲醇的体积比为6:1；将混合溶液c转移至圆底烧瓶中45℃下旋转蒸发形成一层均匀的脂质薄膜，随后加入2ml含有2.5mg/ml辣根过氧化物酶hrp的pbs溶液，35℃下孵化2h，得混合物d，其中，pbs的浓度为0.01m，ph为7.4；将混合物d在冰水浴中超声5min，重复三次循环，离心洗涤除去未被包封的hrp，制备得hrp-脂质体复合物。

更具体地，步骤s1所述通过戊二醛交联法将hrp-脂质体复合物与第二抗体ab2连接的具体操作为：将2mlhrp-脂质体逐滴滴入1ml戊二醛溶液中，室温下温和搅拌1h后在pbs中透析以除去过量的戊二醛，得混合物e，其中戊二醛溶液的浓度为2.5％；将50μl浓度为1mg/ml的ab2溶液加入到混合物e中，4℃下温和搅拌12h，制得hrp-脂质体-ab2复合物，离心洗涤后将hrp-脂质体-ab2复合物分散于pbs中，4℃下储存备用。

更具体地，步骤s1所述运用种子生长法制备金纳米双锥aunbps的具体操作为：将0.25ml浓度为25mm的新制备的nabh4溶液快速注入10ml包含50mm十六烷基三甲基氯化铵ctac、0.25mm氯金酸和5mm柠檬酸的混合液f中，快速搅拌2min，将混合液f转移至80℃水浴锅中，温和搅拌90min；反应至混合液f的颜色从棕色变为红色，得金种溶液；然后，将1.25ml金种溶液加入到含有100ml浓度为100mm的十六烷基三甲基溴化铵ctab、5ml浓度为10mm的氯金酸、1ml浓度为10mm的agno3、2ml浓度为1m的hcl以及0.8ml浓度为100mm的抗坏血酸的生长液中，30℃下反应2h，制备得aunbps。

更具体地，步骤s2所述构建双模分离式免疫传感器的具体操作为：将50μl浓度为1mg/ml的多巴胺滴至96微孔板中37℃下孵化30min，干燥后将20μl浓度为10μg/ml的抗原滴入孔中，孵化1h后用20μl封闭液封闭非特异性结合位点；准备20μl浓度为5μg/ml的抗体ab1与待测样品的混合液、20μlhrp-脂质体-ab2复合物的溶液、10μl浓度为10mg/ml的曲拉通x-100、300μl浓度为1m的双氧水、cds/znonrs/r-go复合材料以及金纳米双锥aunbps备用。

优选地，所述抗原为赭曲霉毒素a，所述抗体ab1为赭曲霉毒素a抗体。

提供一种检测赭曲霉毒素a含量的方法，上述传感器或上述方法制备的传感器，具体操作为：将50μl浓度为1mg/ml的多巴胺滴至96微孔板中37℃下孵化30min，干燥后将20μl浓度为10μg/ml的赭曲霉毒素a抗原滴入孔中，37℃下孵化1h后用20μl封闭液封闭非特异性结合位点；将20μl浓度为5μg/ml的赭曲霉毒素a抗体ab1与待测样品混合，滴入微孔，37℃下孵化1h；随后将20μlhrp-脂质体-ab2复合物的溶液滴入，37℃下孵化1h；加入10μl浓度为10mg/ml的曲拉通x-100，使脂质体包裹的hrp酶释放，再加入300μl浓度为1m的双氧水、37℃下孵化15min，得待测酶解液，取200μl待测酶解液刻蚀cds/znonrs/r-go复合材料用于pec检测，取100μl待测酶解液转移至包含有10μl浓度为1m的盐酸和100μlaunbps的混合液中，50℃下刻蚀10分钟后观察溶液的颜色变化并用紫外吸收光谱记录300-900nm范围内的峰位移。

本发明的有益效果是：

1.本发明传感器是通过将pec检测和比色检测相结合来实现的，这种双信号读出免疫分析平台运用不同的转换机制和信号传输模式。与传统的单信号检测相比，这种双模免疫传感器显示出更加精确可靠的读出结果。除此之外，所引入的比色分析使检测结果更加直观，裸眼即可辨别。

2.本发明传感器创造性地引入脂质体，可以通过封装大量hrp和负载更多的ab2来有效放大响应信号，提高传感器的检测灵敏度。

3.本发明传感器采用多功能hrp在双氧水存在下能够诱导酶促反应。一方面，氧化态的hrp能够不可逆地刻蚀cds，使光电基底获得更弱的光电流，另一方面，hrp催化双氧水所产生的羟基自由基能够作为强氧化剂刻蚀aunbps，从而产生形貌和大小不同的金纳米粒子并伴随着金溶液颜色的变化和lspr峰位的蓝移。

4.本发明传感器的构建策略具有很好的商业应用前景，不但可是实现ota的双信号可视化灵敏检测，还可以通过改变相应的免疫分子扩展到其他食品环境等污染物的分析。

附图说明

图1还原氧化石墨烯(r-go)膜的截面扫描电镜图。放大倍数：251x。

图2znonrs扫描电镜图。a：放大倍数：9994x，b：放大倍数：100016x。

图3cds/znonrs扫描电镜图。a：放大倍数：8000x，b：放大倍数：64995x。

图4cds/znonrs/r-go的元素分析谱图。

图5hrp-脂质体的透射电镜图。

图6aunbps刻蚀过程中所产生的颜色变化。a：呈棕色，b：呈灰绿色，c：呈蓝色，d：呈粉色。

具体实施方式

下面结合附图及具体实施例进一步说明本发明。下述实施例仅用于示例性说明，不能理解为对本发明的限制。除非特别说明，下述实施例中使用的试剂原料为常规市购或商业途径获得的试剂原料。

实施例1

一种基于酶诱导生物刻蚀双模分离式免疫传感器的制备方法，包括以下步骤：

s1.制备cds/znonrs/r-go：先合成氧化石墨烯水凝胶(go)，在还原氧化石墨烯r-go上制备硫化镉/氧化锌纳米棒阵列cds/znonrs，得cds/znonrs/r-go复合材料；

制备hrp-脂质体-ab2复合物：通过薄膜分散法制备脂质体包裹的辣根过氧化物酶hrp，

得hrp-脂质体复合物，通过戊二醛交联法将hrp-脂质体复合物与第二抗体ab2连接，

得hrp-脂质体-ab2复合物；

制备金纳米双锥：运用种子生长法制备金纳米双锥aunbps；

所述制备cds/znonrs/r-go的具体操作为：将160ml浓硫酸加入干燥的三口烧瓶中，在冰水浴搅拌下缓慢加入4g石墨粉和14g高锰酸钾得混合溶液a，将混合溶液a在35℃下持续搅拌24h；用400ml冰水稀释混合溶液a，然后在混合溶液a中加入双氧水直至颜色不发生改变且没有气泡产生，继续搅拌2h除去未反应的高锰酸钾，随后5000转/min离心3分钟，得沉淀物b；用300ml1mol/l的hcl离心洗涤沉淀物b三次后，再用水洗至上清液呈中性；将沉淀物b透析一周，产物分为两等份，分别用水和乙醇离心洗涤，分别分散在水或乙醇中储存，得水溶石墨烯与醇溶石墨烯，备用；将水溶石墨烯与醇溶石墨烯等体积混合后，浸入锌片，3h后将锌片取出洗涤，浸泡在水中除去物理性吸附的石墨烯片；最后将该锌片冷冻干燥后剥离出还原氧化石墨烯r-go膜；将还原氧化石墨烯r-go膜浸入含有40mm硝酸锌和40mm乌洛托品的生长液中，置于烘箱中95℃下反应5h以生长氧化锌纳米棒znonrs，制得znonrs/r-go；将znonrs/r-go浸入含10mm硝酸镉和10mm硫代乙酰胺的混合液中，40℃下反应40min，以3℃/min的升温速率在550℃下煅烧2h制备得cds/znonrs/r-go复合材料。

所述通过薄膜分散法制备脂质体包裹的辣根过氧化物酶hrp的具体操作为：称取二棕榈酰磷脂酰胆碱dppc、胆固醇和二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺dppe共30mg，混合溶解于4ml氯仿/甲醇混合液中，得混合溶液c，其中，二棕榈酰磷脂酰胆碱dppc、胆固醇和二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺dppe的摩尔比为10:10:1，氯仿/甲醇混合液中，氯仿/甲醇的体积比为6:1；将混合溶液c转移至圆底烧瓶中45℃下旋转蒸发形成一层均匀的脂质薄膜，随后加入2ml含有2.5mg/ml辣根过氧化物酶hrp的pbs溶液，35℃下孵化2h，得混合物d，其中，pbs的浓度为0.01m，ph为7.4；将混合物d在冰水浴中超声5min，重复三次循环，离心洗涤除去未被包封的hrp，制备得hrp-脂质体复合物。

所述通过戊二醛交联法将hrp-脂质体复合物与第二抗体ab2连接的具体操作为：将2mlhrp-脂质体逐滴滴入1ml戊二醛溶液中，室温下温和搅拌1h后在pbs中透析以除去过量的戊二醛，得混合物e，其中戊二醛溶液的浓度为2.5％；将50μl浓度为1mg/ml的ab2溶液加入到混合物e中，4℃下温和搅拌12h，制得hrp-脂质体-ab2复合物，离心洗涤后将hrp-脂质体-ab2复合物分散于pbs中，4℃下储存备用。

所述运用种子生长法制备金纳米双锥aunbps的具体操作为：将0.25ml浓度为25mm的新制备的nabh4溶液快速注入10ml包含50mm十六烷基三甲基氯化铵ctac、0.25mm氯金酸和5mm柠檬酸的混合液f中，快速搅拌2min，将混合液f转移至80℃水浴锅中，温和搅拌90min；反应至混合液f的颜色从棕色变为红色，得金种溶液；然后，将1.25ml金种溶液加入到含有100ml浓度为100mm的十六烷基三甲基溴化铵ctab、5ml浓度为10mm的氯金酸、1ml浓度为10mm的agno3、2ml浓度为1m的hcl以及0.8ml浓度为100mm的抗坏血酸的生长液中，30℃下反应2h，制备得aunbps。

s2.构建双模分离式免疫传感器：通过多巴胺将抗原固定于96微孔板中上，依次加入封

闭液、抗体与待测样品的混合液、hrp-脂质体-ab2复合物的溶液、曲拉通x-100、双氧

水孵化反应，将最终的反应液分为两份，一份与cds/znonrs/r-go复合材料反应后用于

pec检测，另一份与金纳米双锥aunbps混合后，用于光谱检测。

所述构建双模分离式免疫传感器的具体操作为：将50μl浓度为1mg/ml的多巴胺滴至96微孔板中37℃下孵化30min，干燥后将20μl浓度为10μg/ml的抗原滴入孔中，孵化1h后用20μl封闭液封闭非特异性结合位点；准备20μl浓度为5μg/ml的抗体ab1与待测样品的混合液、20μlhrp-脂质体-ab2复合物的溶液、10μl浓度为10mg/ml的曲拉通x-100、300μl浓度为1m的双氧水、cds/znonrs/r-go复合材料以及金纳米双锥aunbps备用。

实施例2cds/znonrs/r-go复合材料的表征

氧化石墨烯水凝胶(go)的合成：将160ml浓硫酸加入干燥的三口烧瓶中，在冰水浴搅拌下缓慢加入4g石墨粉和14g高锰酸钾，此混合液在35℃下持续搅拌24h。反应结束后用400ml冰水稀释，然后加入双氧水直至混合液颜色不发生改变且没有气泡产生，继续搅拌2h以除去未反应的高锰酸钾，随后以5000转/min的速率离心3分钟。用300mlhcl(1mol/l)离心洗涤三次后再用水洗至上清液呈中性。将离心后的沉淀透析一周，产物分为两等份，分别用水和乙醇离心洗涤，最终分散在水或乙醇中储存备用。

将上述水溶和醇溶的石墨烯等体积混合后，浸入锌片，3h后将锌片取出洗涤，然后浸泡在水中以除去物理性吸附的石墨烯片。最后将该产物冷冻干燥后剥离出还原氧化石墨烯(r-go)膜。将所制备的还原氧化石墨烯膜浸入含有40mm硝酸锌和40mm乌洛托品的生长液中，置于烘箱中95℃下反应5h以生长氧化锌纳米棒(znonrs)。随后，将上述所制备的znonrs/r-go浸入含10mm硝酸镉和10mm硫代乙酰胺的混合液中40℃下反应40min，最后以3℃/min的升温速率在550℃下煅烧2h以制备cds/znonrs/r-go复合材料。

附图1所示为还原氧化石墨烯(r-go)膜的截面扫描电镜图，从图中可以看出所制备的r-go膜的厚度大概在300μm左右。该膜是由许多石墨烯片层以类平行的方式连接堆叠从而形成开放的多孔结构，这种结构为电子的快速传输提供了大的比表面积。附图2是znonrs在不同放大倍数下的扫描电镜图，可以看出它们以很高的密度分散生长在r-go膜上。znonrs具有均一的尺寸和柱状形貌，呈现六边形的柱状顶端，直径大概为250-400nm。此外，纳米棒表面呈现十分光滑的表面形貌。附图3为cds/znonrs/r-go复合材料在不同放大倍数下的扫描电镜图，可以看出当cds沉积后，znonrs的形貌发生明显变化，具体来说，实心的zno棒状结构变成了空心的管状结构，这一形貌变化是由于cd和zn之间不同扩散速率而引起的柯肯达尔效应所导致的。这种管状结构具有更大的表面积-体积比，有利于光生电子的捕获和传输。此外，cd沉积后使znonrs的平滑表面变的更加粗糙。附图4所示为cds/znonrs/r-go的元素分析谱图，结果表明元素zn,o,c,cd和s均存在于样品中，由此可知，光电基底材料cds/znonrs/rgo被成功制备。

实施例3hrp-脂质体-ab2复合物的表征

脂质体包裹的辣根过氧化物酶(hrp)复合物由薄膜分散法制得，过程简要描述如下：称取二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc),胆固醇和二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(dppe)共30mg(摩尔比为10:10:1)，混合溶解于4ml氯仿/甲醇混合液中(体积比为6:1)，然后转移至圆底烧瓶中45℃下旋转蒸发形成一层均匀的脂质薄膜，随后加入2ml含有2.5mg/mlhrp的磷酸缓冲液(pbs，0.01m，ph7.4)，35℃下孵化2h。然后将混合物在冰水浴中超声5min，重复三次循环。最后将所制备的hrp-脂质体复合物离心洗涤以除去未被包封的hrp。

通过戊二醛交联法将上述所制备的复合物与第二抗体(ab2)连接，简述如下：将2mlhrp-脂质体逐滴滴入1ml戊二醛溶液中(2.5％)，室温下温和搅拌1h后在pbs中透析以除去过量的戊二醛。随后，50μl的ab2溶液(1mg/ml)加入到混合物中，4℃下温和搅拌12h。离心洗涤后所制备的hrp-脂质体-ab2复合物分散于pbs中，4℃下储存备用。

附图5显示了hrp-脂质体的透射电镜图，可以看出脂质体呈球形或类球形结构，并且不存在破裂的脂质体。此外，封装有hrp的脂质体直径大概在165nm左右。进一步复合ab2后其直径增加至210nm左右，证明脂质体的成功合成。

实施例4双模分离式免疫传感器对赭曲霉毒素的检测性能

本实施例采用赭曲霉毒素a作为检测指标为例，采用赭曲霉毒素a作为抗原，对应采用赭曲霉毒素a抗体。

首先用具有优异粘附性和生物相容性的多巴胺把抗原固定在96孔板中，封闭非特异性吸附位点后，将一系列含有不同浓度ota和固定浓度抗体的混合物加入孔中。此时，被固定住的抗原和游离的ota能够竞争性结合抗体。脂质体被用于载体可以负载更多的第二抗体并封装更多的辣根过氧化物酶(hrp)从而使检测信号放大。随后表面活性剂(曲拉通x-100)的加入可以快速溶解脂质体从而释放出hrp，所释放的hrp能够与双氧水反应腐蚀作为重要光电基底物质的cds。此外，hrp催化氧化双氧水所产生的羟基自由基能够生物刻蚀金纳米双锥(aunbps)形成不同的尺寸和形貌，同时显现出一系列鲜艳的颜色变化和局域表面等离子体共振(lspr)峰位的蓝移。

在pec检测端，cds/znonrs作为光电活性物质修饰还原氧化石墨烯(r-go)膜，r-go具有较大的比表面积，优良的电子传导能力和优异的光电转换效率，可以作为新型柔性电极来替代传统的氧化铟锡或氟化铟锡导电玻璃。具体来说，由于三维r-go薄膜具有较高的电子迁移率，因此它提供了一个高速电荷通道。此外，修饰了zno和cds后有助于电荷的分离和转移，可以有效防止电子-空穴对的复合。当cds/znonrs/r-go被辐照后，cds和zno半导体均能够被光子激发并产生光生电子，同时电子从价带(vb)跃迁至导带(cb)，光诱导电子-空穴对随之形成。由于cds具有更强的负电位，电子能够从cds的导带快速注入zno的导带然后转移至r-go从而形成光电流。在这种带隙构成中两种半导体zno和cds共存能够有效提高电荷分离。于此同时，zno价带上被激发的空穴能够转回至cds价带。在空穴捕获剂抗坏血酸(aa)的存在下，cds/znonrs/r-go的光腐蚀能够有效避免，从而确保稳定高效的光电输出信号。此外，更重要的是，cds在双氧水存在下能够被hrp诱导的酶催化反应腐蚀，且这种腐蚀是不可逆转的。由于znonrs只能够捕获紫外光，因此腐蚀后的电极显示出弱的光电转换性能。由此可见，通过腐蚀作用cds/znonrs/r-go的光电流强度能够随着hrp量的增加成比例下降，从而构成信号降低的pec检测。

在比色检测端，在双氧水存在下，通过hrp诱导的酶促反应能够使aunbps发生生物刻蚀。简单的说就是双氧水被分解为羟基自由基，其作为强氧化剂刻蚀aunbps产生从棕色到粉色的多色变化和相应的lspr峰位蓝移。附图6是aunbps刻蚀过程中所产生的部分颜色变化。可以看出所制备的aunbps呈现标准的双锥体形貌，溶液呈棕色(附图6a)。继续刻蚀后，aunbps的两个尖端变得更加圆滑同时溶液变为灰绿色(附图6b)。随着反应的继续进行，aunbps的两端被完全刻蚀，呈现类似米粒的形状其颜色变为蓝色(附图6c)。最后，aunbps会被完全刻蚀呈类球形结构，且溶液呈粉色(附图6d)。

基于免疫竞争法运用所制备的双模分离式免疫传感器对赭曲霉毒素a(ota)进行双信号灵敏检测。在pec检测端，随着ota的增加，较少量的hrp-脂质体-ab2复合物被固定，从而仅能释放少量的hrp用于酶促生物刻蚀cds，由此获得较高的光电信号响应。ota浓度在1ng/l至5μg/l范围内其浓度对数值与电流变化值(δi)呈现良好的线性关系，线性回归方程为：δι＝86.77+22.83[lgcota(μg/l)](其中δi是存在和不存在ota时的信号差值)。于此同时，比色检测通过记录aunbps的刻蚀程度来实现。一方面aunbps溶液颜色会发生变化，另一方面其lspr峰位会发生变化。随着ota的减少，lspr峰位逐渐蓝移，并伴随着一系列明显的颜色变化(棕色→灰色→绿色→蓝色→紫色→粉色)。lspr峰位移变化值与ota浓度对数在1ng/l至5μg/l范围内呈现良好的线性关系。线性回归方程为：δλ＝167.27+50.91[lgcota(μg/l)]。