一种双酚S浓度的测定方法与流程

本发明涉及化学分析检测技术领域，具体而言，涉及一种双酚s浓度的测定方法。

背景技术：

双酚s的化学名称为4,4-二羟基二苯砜，具有优良的耐热、耐光和抗氧化性，随着科学技术的发展，双酚s的应用范围越来越广泛，譬如，双酚s可以代替双酚a成为生产环氧树脂、聚酯树脂、酚醛树脂、聚碳酸酯、聚醚砜等多种高分子材料的主要原料；双酚s可以用作添加剂加入多种聚合树脂中以改善聚合树脂的性能：双酚s可以加入聚酯树脂中以增加聚酯树脂的冲击强度，加入聚氨酯树脂中作为增塑剂，加入聚氯乙烯中增加聚氯乙烯的抗紫外线老化性，加入酚醛树脂或环氧树脂中作为加速固化的催化剂；同时，双酚s还是重要的农药、染料、助剂的中间体，可用于制造彩色感光材料、热敏记录材料的显色剂、压敏材料的成色剂、阻燃剂和高效除臭剂等。

虽然双酚s具有多种优良的性能及用途，但是研究表明，双酚s是一种内分泌干扰物，能影响生物体内的雌性激素，摄入过多会导致内分泌失调；同时，双酚s还会导致新陈代谢紊乱从而引发肥胖，对淋巴细胞也具有增殖作用。

随着双酚s的广泛使用，人类受到其污染的威胁日益增大。双酚s的相关研究已成为生态环境科学的前沿课题，而了解并掌握各种环境中双酚s浓度则具有重要的现实意义。因此，建立一个灵敏度高、简便快捷的测定环境中双酚s浓度的检测方法是十分必要的。

技术实现要素：

本发明解决的问题是如何测定双酚s的浓度。

为解决上述问题，本发明提供一种双酚s浓度的测定方法，包括如下步骤：

s1：以硫酸溶液、芬顿试剂以及荧光探针溶液配制空白溶液；

s2：以所述硫酸溶液、所述芬顿试剂、所述荧光探针溶液以及不同浓度的双酚s标准溶液，配制多份标准工作溶液；

s3：分别测定所述空白溶液与多份所述标准工作溶液的光学指标，根据所述光学指标与多份所述标准工作溶液中双酚s的浓度建立标准曲线；

s4：测定待测样品的所述光学指标，根据所述待测样品的所述光学指标以及所述标准曲线，得到所述待测样品中双酚s的浓度。

荧光探针溶液在被氧化时能够产生吸光度下降、荧光猝灭等光学现象；芬顿试剂能够生成强氧化性的羟基自由基，羟基自由基的氧化能力仅次于氟，因此芬顿试剂可以无选择地将水中的大多数有机污染物彻底地无害化；双酚s中含砜基，被芬顿试剂氧化后可生成硫酸，而这些新生成的硫酸又增强了芬顿试剂在酸性条件下的氧化性能，从而加快了体系中荧光探针的吸光度下降和荧光猝灭程度，达到快速、灵敏地测定双酚s浓度的目的。

此外，芬顿反应具有反应迅速，温度和压力等反应条件温和，且无二次污染的优点，使用本发明提供的方法对双酚s的浓度进行测定，避免了有机溶剂的使用，既降低了测定成本又实现了分析试剂的绿色化。

为便于对双酚s的浓度进行测定，本发明通过制备空白溶液以及多份双酚s浓度不同的标准工作溶液，并分别对空白溶液以及多份标准工作溶液的光学指标进行测定；由于标准工作溶液的成分相当于在空白溶液的基础上增加了双酚s，各标准工作溶液中双酚s的浓度已知，通过将空白溶液与各标准工作溶液相应的光学指标进行比对，计算出光学指标的差值，再将该差值与相应的标准工作溶液中双酚s的浓度进行曲线拟合，即可建立标准工作曲线。

需要测定待测样品中双酚s的浓度时，测定该待测样品的光学指标，并计算空白溶液与该待测样品光学指标的差值，通过该差值在上述建立的标准工作曲线中即可查出待测样品中双酚s的浓度。

通过上述方法进行拟合，发现建立的标准工作曲线为直线，因此，还可进一步建立线性回归方程，通过线性回归方程来计算双酚s的浓度。

可选地，所述荧光探针溶液选自罗丹明g溶液、罗丹明3g溶液、罗丹明6g溶液、罗丹明b溶液、丽丝胺罗丹明b溶液、罗丹明s溶液、曙红y溶液、曙红b溶液、吖啶黄溶液、吖啶红溶液、吖啶橙溶液和前黄素溶液中的任意一种。

本发明所使用的荧光探针均为能溶于水的市售荧光试剂，荧光信号强且性能稳定，可靠性高，避免了有机溶剂的使用，既降低了测定成本，又实现了分析试剂的绿色化。

可选地，所述光学指标包括荧光强度和吸光度中的至少一个；所述标准曲线的绘制方法包括：

s3-1：测定所述空白溶液于特定激发波长和特定发射波长处的第一荧光强度f0，和/或，第一吸光度a0；

s3-2：分别测定多份所述标准工作溶液于所述特定激发波长和所述特定发射波长处的荧光强度，和/或，吸光度，得到多个第二荧光强度f，和/或，多个第二吸光度a；

s3-3：分别计算所述第一荧光强度f0与多个所述第二荧光强度f的差值，得到多个荧光强度差值δf；和/或，分别计算所述第一吸光度a0与多个所述第二吸光度a的差值，得到多个吸光度差值δa；

s3-4：以所述标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个所述荧光强度差值δf，和/或，多个所述吸光度差值δa为纵坐标，建立所述标准曲线。

由于荧光探针溶液在被氧化时能够产生吸光度下降、荧光猝灭等光学现象，本发明优选通过溶液荧光强度和吸光度中的至少一个光学指标的变化来对双酚s的浓度进行检测。具体的，如测定的光学指标为荧光强度时，标准曲线的绘制方法如下：

s3-1：测定空白溶液于特定激发波长和特定发射波长处的第一荧光强度f0；

s3-2：分别测定多份标准工作溶液于特定激发波长和特定发射波长处的荧光强度，得到多个第二荧光强度f；

s3-3：分别计算第一荧光强度f0与多个第二荧光强度f的差值，得到多个荧光强度差值δf；

s3-4：以标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个荧光强度差值δf为纵坐标，建立标准曲线。

测定的光学指标为吸光度，或同时测定溶液的荧光强度与吸光度以对双酚s的浓度进行测定时，标准曲线的具体绘制与上述过程相同，本文不再赘述。

其中本发明中所提到的特定激发波长和特定发射波长是指各种荧光探针的最佳激发波长和最佳发射波长。

可选地，所述空白溶液的制备方法包括:

将所述硫酸溶液、硫酸亚铁溶液、过氧化氢溶液以及所述荧光探针溶液于35～45℃范围内反应5～15min后，加入还原剂，加水定容，得到所述空白溶液。

其中硫酸亚铁溶液与过氧化氢溶液构成具有强氧化性的氧化剂，在酸性条件下，该强氧化剂对荧光探针进行氧化，使得氧化探针的结构被破坏，结构被破坏后的荧光探针的光学特征发生改变，因此，测得的该空白溶液的光学指标低于同浓度的光学探针本身的光学指标。

为避免因反应温度、反应时间控制不当而影响反应的正常进行，本发明优选反应温度范围为35～45℃，反应时间范围为5～15min；由于空白试验制备过程中发生的是强氧化反应，在反应达到预设的反应时间后，加入还原剂，以使反应停止。

可选地，多份所述标准工作溶液的配制方法包括：

于不同浓度的多份所述双酚s标准溶液中分别加入所述硫酸溶液、所述硫酸亚铁溶液、所述过氧化氢溶液以及所述荧光探针溶液于35～45℃范围内反应5～15min后，加入所述还原剂，加水定容，得到多份所述标准工作溶液。

与空白溶液的制备过程不同的是，标准工作溶液的配制过程中加入了双酚s标准溶液，且通过加入不同浓度的双酚s标准溶液来得到多份标准工作溶液，各份标准工作溶液中双酚s的浓度不同。

在此过程中，双酚s被芬顿试剂氧化的同时产生了硫酸，而这些新生成的硫酸又会促使芬顿试剂在酸性条件下产生更多的羟基自由基，从而使体系中芬顿试剂的氧化性能明显增强，导致更多的荧光探针分子被破坏，从而使得测得的第二荧光强度f的值小于第一荧光强度f0的值，且第二吸光度a的值小于第一吸光度a0的值。

可选地，所述还原剂选自抗坏血酸、亚硝酸钠、尿素、硼氢化钠中的至少一种。

为对氧化反应的反应时间进行控制，理论上所有具有还原性质的物质均可作为还原剂来使正在进行的强氧化反应终止；为避免还原剂的加入影响对双酚s的浓度测定的准确性，本发明优选上述不影响荧光探针的荧光信号的物质作为还原剂。

可选地，所述硫酸溶液的浓度范围为为0.2-0.3mmol/l。

可选地，所述硫酸亚铁溶液的浓度范围为0.15-0.25mmol/l。

可选地，所述过氧化氢溶液的浓度范围为0.06-0.24mmol/l。

可选地，所述空白溶液中所述硫酸溶液、所述芬顿试剂以及所述荧光探针溶液的体积比范围为(0.5～0.75)：(0.75～1.25)：(0.15～0.6)：(1.0～3.0)。

由于芬顿试剂的氧化能力与溶液的ph值、亚铁离子的浓度、过氧化氢的浓度均有关系，为保证反应过程中芬顿试剂的氧化能力，从而保证对双酚s浓度测定的准确性，本发明优选硫酸溶液的浓度范围为0.2-0.3mmol/l，硫酸亚铁溶液的浓度范围为0.15-0.25mmol/l，过氧化氢溶液的浓度范围为0.06-0.24mmol/l，空白溶液中硫酸溶液、芬顿试剂以及荧光探针溶液的体积比范围为(0.5～0.75)：(0.75～1.25)：(0.15～0.6)：(1.0～3.0)。

相对于现有技术，本发明所述的双酚s浓度的测定方法具有如下优势：

1、本发明提供的双酚s浓度的测定方法，根据双酚s含有砜基的结构特征以及基于芬顿试剂的氧化特点，在酸性条件下，双酚s被芬顿试剂氧化生成有硫酸，新生成的硫酸又进一步促进芬顿试剂产生更多的羟基自由基，加快了荧光探针被氧化的速度，从而加快了荧光探针的吸光度降低、荧光猝灭，从而达到快速、灵敏地测定双酚s浓度的目的。

2、本发明提供的双酚s浓度的测定方法，借助荧光探针，运用荧光光谱法和可见分光光度法测定双酚s浓度，拓展了荧光法以及可见光光度法在双酚s分析技术领域中的应用；该方法具有灵敏度高、线性范围宽的优势，有利于在不同环境领域的实际应用。

3、本发明提供的双酚s浓度的测定方法简单易行，便于推广；与色谱法相比，本发明使用的仪器相对廉价；与化学发光法相比，本发明测定时间短、测试成本低；与紫外分光光度法相比，本发明检测限低、检测范围宽；与电化学法相比，本发明使用的试剂价廉易购买、操作便捷。

附图说明

图1为本发明所述的罗丹明b溶液的荧光光谱图；

图2为本发明所述的荧光检测法标准工作曲线；

图3为本发明所述的罗丹明b溶液的可见光吸收光谱图。

具体实施方式

目前，测定双酚s浓度的检测方法主要有高效液相色谱-质谱法、流动注射化学发光法、分光光度法等，其中高效液相色谱-质谱法需要使用大型仪器设备，具有仪器昂贵、操作不方便、前处理复杂的缺点。化学发光法具有灵敏度高、检出限低、测定结果准确的优点，但也存在测定时间长、测定成本高等不足之处。分光光度法测定结果可靠、测定速度快，但由于双酚s的限量低，普通的紫外分光光谱难以满足相关的检测要求。

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更为明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施例做详细的说明。

实施例一

s0：双酚s标准溶液的配制：准确称取10.0mg的双酚s，加适量水并经超声振荡溶解后，用水定容于100.0ml的棕色容量瓶中，配制成100.0mg/l的双酚s储备溶液；以该储备溶液逐级稀释，配制成不同浓度的双酚s系列标准溶液；

s1：配制空白溶液：在一25ml的容量瓶中加入0.6ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.0ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.2ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和1.5ml浓度为2.0×10^-5mol/l的罗丹明g溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量抗坏血酸溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到空白溶液；

s2：配制多份标准工作溶液：在一系列25ml的容量瓶中分别加入适量不同浓度的双酚s标准溶液，0.6ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.0ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.2ml浓度为0.01mol/l的h2o2溶液和1.5ml浓度为2.0×10^-5mol/l的罗丹明g溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量抗坏血酸溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到多份标准工作溶液；

s3：建立标准曲线：

s3-1：测定空白溶液于λex/λem＝520/550nm处的第一荧光强度f0；

s3-2：分别测定多份标准工作溶液于λex/λem＝520/550nm处的第二荧光强度f；

s3-3：分别计算第一荧光强度f0与多个第二荧光强度f的差值，得到多个荧光强度差值δf＝f0-f；

s3-4：以多份标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个荧光强度差值δf为纵坐标，绘制标准曲线；

s4：测定待测样品的光学指标：将洁净的装饮料或装饮用水的塑料瓶剪至0.5cm×0.5cm碎片，称取碎片2.00g置于碘量瓶中，加入100ml二次纯净水，放入水浴锅中于70℃恒温加热90min，冷却至室温，得到样品溶液；取一定量的样品溶液，于λex/λem＝520/550nm处测定样品溶液的第三荧光强度f1，计算第一荧光强度f0与第三荧光强度f1的差值f0-f1，根据该差值f0-f1于标准曲线中查得相应的浓度，该浓度即为样品溶液中双酚s的浓度。

利用上述方法平行测定11次，相对标准偏差为1.7％，证明本发明提供的双酚s浓度的测定方法测量结果准确度高，重现性好。

用标准加入法进行平行测定三次，双酚s的回收率在95.2～104.6％之间，符合要求，证明本发明提供的双酚s的测定方法测量结果准确度高。

实施例二

s0：双酚s标准溶液的配制：准确称取10.0mg的双酚s，加适量水并经超声振荡溶解后，用水定容于100.0ml的棕色容量瓶中，配制成100.0mg/l的双酚s储备溶液；以该储备溶液逐级稀释，配制成不同浓度的双酚s系列标准溶液；

s1：配制空白溶液：在一25ml的容量瓶中加入0.6ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.0ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.2ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和2.0ml浓度为1.0×10^-5mol/l的罗丹明b溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量抗坏血酸溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到空白溶液；

s2：配制多份标准工作溶液：在一系列25ml的容量瓶中分别加入适量不同浓度的双酚s标准溶液，0.6ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.0ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.2ml浓度为0.01mol/l的h2o2溶液和2.0ml浓度为1.0×10^-5mol/l的罗丹明b溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量抗坏血酸溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到多份标准工作溶液；

s3：建立标准曲线：

s3-1：测定空白溶液于λex/λem＝553/578nm处的第一荧光强度f0；

s3-2：分别测定多份标准工作溶液于λex/λem＝553/578nm处的第二荧光强度f；

s3-3：分别计算第一荧光强度f0与多个第二荧光强度f的差值，得到多个荧光强度差值δf＝f0-f；

s3-4：以多份标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个荧光强度差值δf为纵坐标，绘制标准曲线；

s4：测定待测样品的光学指标：取新鲜地表水200ml，静置，经过滤除去其中的不溶物，得到样品溶液；取一定量的样品溶液，于λex/λem＝553/578nm处测定样品溶液的第三荧光强度f1，计算第一荧光强度f0与第三荧光强度f1的差值f0-f1，根据该差值f0-f1于标准曲线中查得相应的浓度，该浓度即为样品溶液中双酚s的浓度。

参见图1所示，图中1及1’分别为罗丹明b溶液于λem＝578nm处的激发光谱和罗丹明b于λex＝553nm处的发射光谱；图中2及2’分别为加入芬顿试剂后罗丹明b溶液于λem＝578nm处的激发光谱和于λex＝553nm处的发射光谱；图中3及3’分别为加入双酚s溶液和芬顿试剂后，罗丹明b溶液于λem＝578nm处的激发光谱和罗丹明b于λex＝553nm处的发射光谱。

从图1中可看出，随着芬顿试剂和双酚s的加入，罗丹明b溶液的激发光谱和发射光谱逐步下降，从而证明本发明中双酚s被芬顿试剂氧化后可生成硫酸，而这些新生成的硫酸又增强了芬顿试剂在酸性条件下的氧化性能，从而加快了体系中荧光探针的荧光猝灭程度，达到快速、灵敏地测定双酚s浓度的目的。

参见图2所示，用本实施例提供的方法绘制的标准工作曲线为直线，从而证明罗丹明b荧光强度下降的值与双酚s的浓度呈线性关系。

利用上述方法平行测定11次，相对标准偏差为3.7％，证明本发明提供的双酚s浓度的测定方法测量结果准确度高，重现性好。

用标准加入法进行平行测定三次，双酚s的回收率在94.1～106.3％之间，符合要求，证明本发明提供的双酚s的测定方法测量结果准确度高。

实施例三

s0：双酚s标准溶液的配制：准确称取10.0mg的双酚s，加适量水并经超声振荡溶解后，用水定容于100.0ml的棕色容量瓶中，配制成100.0mg/l的双酚s储备溶液；以该储备溶液逐级稀释，配制成不同浓度的双酚s系列标准溶液；

s1：配制空白溶液：在一25ml的容量瓶中加入0.6ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.0ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.5ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和3.0ml浓度为2.0mmol/l的罗丹明b溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入1.0ml浓度为0.125mol/l的抗坏血酸溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到空白溶液；

s2：配制多份标准工作溶液：在一系列25ml的容量瓶中分别加入适量不同浓度的双酚s标准溶液，0.6ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.0ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.5ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和3.0ml浓度为2.0mmol/l的罗丹明b溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入1.0ml浓度为0.125mol/l的抗坏血酸溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到多份标准工作溶液；

s3：建立标准曲线：

s3-1：测定空白溶液于最大吸收峰波长553nm处的第一吸光度a0；

s3-2：分别测定多份标准工作溶液于最大吸收峰波长553nm处的第二吸光度a；

s3-3：分别计算第一吸光度a0与多个第二吸光度a的差值，得到多个吸光度差值δa＝a0-a；

s3-4：以多份标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个吸光度差值δa为纵坐标，绘制标准曲线；

s4：测定待测样品的光学指标：测定待测样品的光学指标：将洁净的装饮料或装饮用水的塑料瓶剪至0.5cm×0.5cm碎片，称取碎片2.00g置于碘量瓶中，加入100ml二次纯净水，放入水浴锅中于70℃恒温加热90min，冷却至室温，得到样品溶液；取一定量的样品溶液，于最大吸收峰波长553nm处测定样品溶液的第三吸光度a1，计算第一吸光度a0与第三吸光度a1的差值a0-a1，根据该差值a0-a1于标准曲线中查得相应的浓度，该浓度即为样品溶液中双酚s的浓度。

参见图3所示，图中a为罗丹明b溶液于最大吸收峰波长553nm处的可见光吸收光谱图；图中b为加入芬顿试剂后罗丹明b溶液于最大吸收峰波长553nm处的可见光吸收光谱图；图中c为加入双酚s溶液和芬顿试剂后，罗丹明b溶液于最大吸收峰波长553nm处的可见光吸收光谱图；其中罗丹明b溶液的浓度为0.24mmol/l，双酚s浓度为0.06mg/l。

从图3中可看出，随着芬顿试剂和双酚s的加入，罗丹明b溶液的吸光度逐步下降，从而证明本发明中双酚s被芬顿试剂氧化后可生成硫酸，而这些新生成的硫酸又增强了芬顿试剂在酸性条件下的氧化性能，从而加快了体系中荧光探针的吸光度下降，达到快速、灵敏地测定双酚s浓度的目的。

利用上述方法平行测定11次，相对标准偏差为0.18％，证明本发明提供的双酚s浓度的测定方法测量结果准确度高，重现性好。

用标准加入法进行平行测定三次，双酚s的回收率在97.5～103.6％之间，符合要求，证明本发明提供的双酚s的测定方法测量结果准确度高。

实施例四

s0：双酚s标准溶液的配制：准确称取10.0mg的双酚s，加适量水并经超声振荡溶解后，用水定容于100.0ml的棕色容量瓶中，配制成100.0mg/l的双酚s储备溶液；以该储备溶液逐级稀释，配制成不同浓度的双酚s系列标准溶液；

s1：配制空白溶液：在一25ml的容量瓶中加入0.5ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，0.75ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.15ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和1.0ml浓度为2.0×10^-4mol/l的曙红y溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量亚硝酸钠溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到空白溶液；

s2：配制多份标准工作溶液：在一系列25ml的容量瓶中分别加入适量不同浓度的双酚s标准溶液，0.5ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，0.75ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.15ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和1.0ml浓度为2.0×10^-4mol/l的曙红y溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量亚硝酸钠溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到多份标准工作溶液；

s3：建立标准曲线：

s3-1：测定空白溶液于λex/λem＝516/536nm处的第一荧光强度f0；

s3-2：分别测定多份标准工作溶液于λex/λem＝516/536nm处的第二荧光强度f；

s3-3：分别计算第一荧光强度f0与多个第二荧光强度f的差值，得到多个荧光强度差值δf＝f0-f；

s3-4：以多份标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个荧光强度差值δf为纵坐标，绘制标准曲线；

s4：测定待测样品的光学指标：取新鲜地表水样200ml，静置，经过滤除去其中的不溶物，得到样品溶液；取一定量的样品溶液，于λex/λem＝516/536nm处测定样品溶液的第三荧光强度f1，计算第一荧光强度f0与第三荧光强度f1的差值f0-f1，根据该差值f0-f1于标准曲线中查得相应的浓度，该浓度即为样品溶液中双酚s的浓度。

利用上述方法平行测定11次，相对标准偏差为3.6％，证明本发明提供的双酚s浓度的测定方法测量结果准确度高，重现性好。

用标准加入法进行平行测定三次，双酚s的回收率在92.1～103.3％之间，符合要求，证明本发明提供的双酚s的测定方法测量结果准确度高。

实施例五

s0：双酚s标准溶液的配制：准确称取10.0mg的双酚s，加适量水并经超声振荡溶解后，用水定容于100.0ml的棕色容量瓶中，配制成100.0mg/l的双酚s储备溶液；以该储备溶液逐级稀释，配制成不同浓度的双酚s系列标准溶液；

s1：配制空白溶液：在一25ml的容量瓶中加入0.75ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.25ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.25ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和2.5ml浓度为1.0×10^-4mol/l的吖啶黄溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量尿素溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到空白溶液；

s2：配制多份标准工作溶液：在一系列25ml的容量瓶中分别加入适量不同浓度的双酚s标准溶液，0.75ml浓度为0.01mol/l的h2so4溶液，1.25ml浓度为5.0mmol/l的feso4溶液，0.25ml浓度为0.01mol/lh2o2溶液和2.5ml浓度为1.0×10^-4mol/l的吖啶黄溶液，加适量水摇匀，于40℃恒温水浴锅中反应10min后取出，加入适量尿素溶液，并用水定容至刻度线，摇匀，得到多份标准工作溶液；

s3：建立标准曲线：

s3-1：测定空白溶液于λex/λem＝450/509nm处的第一荧光强度f0；

s3-2：分别测定多份标准工作溶液于λex/λem＝450/509nm处的第二荧光强度f；

s3-3：分别计算第一荧光强度f0与多个第二荧光强度f的差值，得到多个荧光强度差值δf＝f0-f；

s3-4：以多份标准工作溶液中双酚s的浓度为横坐标，以多个荧光强度差值δf为纵坐标，绘制标准曲线；

s4：测定待测样品的光学指标：将干净的打印纸剪至0.5cm×0.5cm的碎片，称取碎片2.00g于碘量瓶中，加入100ml二次纯净水，放入水浴锅中于40℃恒温加热120min，冷却至室温，过滤除去其中的纸屑，得到样品溶液；取一定量的样品溶液，于λex/λem＝450/509nm处测定样品溶液的第三荧光强度f1，计算第一荧光强度f0与第三荧光强度f1的差值f0-f1，根据该差值f0-f1于标准曲线中查得相应的浓度，该浓度即为样品溶液中双酚s的浓度。

利用上述方法平行测定11次，相对标准偏差为2.8％，证明本发明提供的双酚s浓度的测定方法测量结果准确度高，重现性好。

用标准加入法进行平行测定三次，双酚s的回收率在94.7～106.2％之间，符合要求，证明本发明提供的双酚s的测定方法测量结果准确度高。

虽然本公开披露如上，但本公开的保护范围并非仅限于此。本领域技术人员，在不脱离本公开的精神和范围的前提下，可进行各种变更与修改，这些变更与修改均将落入本发明的保护范围。