一种稳定性好的检测1,5-AG的试剂盒及方法与流程

文档序号:19733645发布日期:2020-01-18 04:13阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种1,5-脱水-d山梨醇的检测试剂盒,其特征在于该试剂盒包含用于消除葡萄糖反应的试剂r1、主反应试剂r2和校准品;其中试剂r1中包含缓冲溶液、己糖激酶、丙酮酸激酶、atp、4-氨基安替吡啉、磷酸烯醇式丙酮酸,稳定剂、酶保护剂、酶促进剂、防腐剂;试剂r2包含缓冲液、吡喃糖氧化酶、过氧化物酶、显色剂、防腐剂、稳定剂。

2.根据权利要求1所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,所述试剂r1组分浓度为:缓冲液0.1-100mmol/l、己糖激酶0.1-50ku/l、丙酮酸激酶0.1-50ku/l、atp0.1-20mmol/l、4-氨基安替吡啉0.1-30mmol/l、磷酸烯醇式丙酮酸0.1-50mmol/l,稳定剂0.1-10g/l、酶保护剂0.1-10g/l、酶促进剂0.1-30mmol/l、防腐剂0.1-10g/l;所述试剂r2组分浓度为:缓冲液0.1-100mmol/l、吡喃糖氧化酶10-100ku/l、过氧化物酶1-100ku/l、显色剂0.1-50mmol/l、防腐剂0.1-10g/l、稳定剂0.1-10g/l。

3.根据权利要求2所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,所述试剂r1组分浓度为:缓冲液50.05mmol/l、己糖激酶25.05ku/l、丙酮酸激酶25.05ku/l、atp10.05mmol/l、4-氨基安替吡啉15.05mmol/l、磷酸烯醇式丙酮酸25.05mmol/l,稳定剂5.05g/l、酶保护剂5.05g/l、酶促进剂15.05mmol/l、防腐剂5.05g/l;所述试剂r2组分浓度为:缓冲液50.05mmol/l、吡喃糖氧化酶55ku/l、过氧化物酶50.5ku/l、显色剂25.05mmol/l、防腐剂5.05g/l、稳定剂5.05g/l。

4.根据权利要求1-3所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,试剂r1中,所述的缓冲液为磷酸缓冲液、tris-hcl,mes缓冲液、hepes缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种;试剂r2中,所述的缓冲液为磷酸缓冲液、tris-hcl,mes缓冲液、hepes缓冲液、甘氨酸缓冲液中的一种或几种。

5.根据权利要求4所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,所述试剂r1和试剂r2中的缓冲液的ph值为6.0-9.0。

6.根据权利要求1-3所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,试剂r1和r2中的稳定剂为tritonx系列,甘油,吐温系列。

7.根据权利要求1-3所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,试剂r1中的酶保护剂为经过修饰以后的磷酸化合物,编号为wd-001。

8.根据权利要求1-3所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,试剂r1中的酶促进剂为氯化镁、硫酸镁、氯化钾、硫酸钾。

9.根据权利要求1-3所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,试剂r1和r2中的防腐剂为叠氮钠、亚硝酸钠、proclin系列。

10.根据权利要求1-3所述的1,5-ag测定试剂盒,其特征在于,试剂r2中的显色剂为对羟基苯甲酸。

11.根据权利要求1-10所述,1,5-ag测定试剂盒的检测方法包括如下步骤:

(1)依次加入试剂r1,待测样本,混匀,37℃下温育4-10分钟,后加入试剂r2,混匀,37℃温育4-10分钟后,546nm波长下测定吸光度;

(2)根据定标的标准曲线计算待测样品中1,5-ag的浓度。

12.根据权利要求11所述,其特征在于,所述的标准曲线采用1,5-ag校准品定标。

13.根据权利要求12所述,其特征在于,1,5-ag校准品的浓度为0-500μmol/l。

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