一种提高含对乙酰氨基酚药物稳定性的方法与流程

本发明属于医药技术领域，涉及一种提高含对乙酰氨基酚药物稳定性的方法。

背景技术：

扑热息痛是常见的解热镇痛药物，其药效成分是对乙酰氨基酚(4-羟基乙酰苯胺)。白加黑、帕尔克、泰诺感冒片、感冒灵、去痛片等均含扑热息痛，常用饮用水与药物一并吞服。对乙酰氨基酚在水溶液中不稳定，易分解为对氨基酚，药用活性大大下降。儿茶素是在自然界中普遍存在的多酚类物质。漆酶(EC 1.10.3.2)存在于蘑菇、细菌及植物中，属于氧化还原酶，可利用氧气将底物氧化。对乙酰氨基酚和儿茶素均是漆酶的底物。陆隽鹤等人阐释了漆酶催化对乙酰氨基酚氧化的机理，对乙酰氨基酚被漆酶氧化形成自由基，自由基相互聚合形成多聚物(陆隽鹤等,利用漆酶去除水中痕量对乙酰氨基酚，第六届全国环境化学大会暨环境科学仪器与分析仪器展览会摘要集，2011)。儿茶素在弱酸性(pH 5.0-6.0)和25℃条件下可被漆酶催化氧化(罗耀红等，漆酶对酚类化合物生物催化氧化动力学研究--以儿茶酚和表儿茶素为模式底物，林产化学与工业，2008)。目前还没有使用儿茶素保护对乙酰氨基酚不被漆酶催化氧化的报道。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种提高含对乙酰氨基酚药物稳定性的方法。

实现本发明目的的技术方案如下：

一种提高含对乙酰氨基酚药物稳定性的方法，在含对乙酰氨基酚药物中加入含有儿茶素衍生物的水溶液。

所述的儿茶素衍生物选自儿茶素(EC)、没食子儿茶素(EGC)、儿茶素没食子酸酯(ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)或茶多酚中的一种或多种。

所述的含有儿茶素衍生物的水溶液可以是茶水。

现有的含对乙酰氨基酚药物服用时，常用饮用水与药物一并吞服。但是对乙酰氨基酚在水溶液中不稳定，易分解为对氨基酚，药用活性大大下降。对乙酰氨基酚和儿茶素衍生物均可被漆酶催化氧化，形成的高聚物可抑制漆酶活力。在对乙酰氨基酚水溶液中加入儿茶素衍生物时，漆酶优先催化氧化儿茶素衍生物，从而保护对乙酰氨基酚不被漆酶氧化。本发明的含对乙酰氨基酚药物稳定性的方法，提高含对乙酰氨基酚药物的稳定性，减少药物的服用次数。

附图说明

图1为实施例1中反应初始反应液(a)和反应96小时反应液(b)的紫外观察TLC对比图。

图2为实施例1中反应初始反应液(a)和反应96小时反应液(b)的普鲁士蓝染色对比图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步详述。

实施例1

相同条件的反应体系下，设置三组实验：第一组以儿茶素为底物，第二组以对乙酰氨基酚为底物，第三组以儿茶素和对乙酰氨基酚混合物为底物。以上三组都以不加酶作为空白对照，反应96小时后取样，使用硅胶薄层层析技术(TLC)检测底物被氧化的效果，具体设置如下：

(1)在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素和10U漆酶。对照为1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素。

(2)在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol对乙酰氨基酚和10U漆酶。对照为1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol对乙酰氨基酚。

(3)在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素、0.05mol对乙酰氨基酚和10U漆酶。对照为在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素、0.05mol对乙酰氨基酚。

(4)将上述实验组和对照组置于30℃水浴反应96小时。

(5)用紫外灯观察或者普鲁士蓝染色两种方法检测。

取5μL反应液在硅胶GF₂₅₄薄层层析板点样做薄层层析，展层剂为甲苯:乙酸乙酯:冰醋酸＝5:3:2(v/v/v)，层析结束后将吹干后的层析板在254nm紫外灯下观察，结果如图1所示。再将层析板使用新制的0.3％氯化铁和0.3％铁氰化钾等体积混合物染色(普鲁士蓝染色)，结果如图2所示。

图1是反应初始反应液紫外观察TLC(图a)和反应96小时反应液紫外观察TLC(图b)对比图，其中：1为含儿茶素不含漆酶的反应液；2为含儿茶素和漆酶的反应液；3为含对乙酰氨基酚不含漆酶的反应液；4为第0小时含对乙酰氨基酚不含漆酶的反应液；5为含儿茶素、对乙酰氨基酚不含漆酶的反应液；6为儿茶素、对乙酰氨基酚和漆酶的反应液。比较a图和b图中的条带1和条带2，或a图和b图中的条带3和条带4，反应前后比较，单加一种物质(儿茶素或对乙酰氨基酚)，均可被漆酶催化氧化形成高聚物。比较a图和b图中的条带5和条带6，反应前后比较，混有儿茶素的对乙酰氨基酚残留量较多，说明对乙酰氨基酚与儿茶素同时存在时，漆酶优先催化氧化儿茶素，进而保护对乙酰氨基酚不被漆酶催化氧化。

图2是反应初始反应液普鲁士蓝染色(图a)和反应96小时反应液普鲁士染色(图b)对比图，其中：1为含儿茶素不含漆酶的反应液；2为含儿茶素和漆酶的反应液；3为含对乙酰氨基酚不含漆酶的反应液；4为第0小时含对乙酰氨基酚不含漆酶的反应液；5为含儿茶素、对乙酰氨基酚不含漆酶的反应液；6为儿茶素、对乙酰氨基酚和漆酶的反应液。比较a图和b图中的条带1和条带2，或a图和b图中的条带3和条带4，反应前后，单加一种物质(儿茶素或对乙酰氨基酚)，儿茶素或对乙酰氨基酚均可被漆酶催化。比较a图和b图中的条带5和条带6，儿茶素与对乙酰氨基酚混合，漆酶优先催化氧化儿茶素。

综上，含对乙酰氨基酚水溶液中加入儿茶素时，漆酶优先催化氧化儿茶素，保护对乙酰氨基酚不被漆酶催化氧化。

实施例2

在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素、0.05mol对乙酰氨基酚和10U双孢菇漆酶，置于30℃反应96小时。反应液经10000×g离心5分钟后，取上清。用TLC检测上清对乙酰氨基酚的氧化情况，结果表明反应液中对乙酰氨基酚未被氧化。

实施例3

在1000mL pH 7.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素、0.05mol对乙酰氨基酚和10U香菇漆酶，置于30℃反应96小时。反应液经10000×g离心5分钟后，取上清。用TLC检测上清对乙酰氨基酚的氧化情况，结果表明反应液中对乙酰氨基酚未被氧化。

实施例4

在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素、0.5mol对乙酰氨基酚和2000U平菇漆酶，置于30℃反应96小时。反应液经10000×g离心5分钟后，取上清。用TLC检测上清对乙酰氨基酚的氧化情况，结果表明反应液中对乙酰氨基酚未被氧化。

实施例5

在1000mL pH 7.0的0.05mol/L磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液中加入0.05mol儿茶素、0.5mol对乙酰氨基酚和2000U茶树菇漆酶，置于30℃反应96小时。反应液经10000×g离心5分钟后，取上清。用TLC检测上清对乙酰氨基酚的氧化情况，结果表明反应液中对乙酰氨基酚未被氧化。