一种植物甾醇的检测分析方法与流程

1.本发明涉及植物甾醇检测技术领域，尤其涉及一种植物甾醇的检测分析方法。


背景技术：

2.植物甾醇是以环戊烷全氢菲为骨架的一类物质，主要存在于植物的根、茎、叶、果实和种子中。近年来的研究表明，植物甾醇的营养价值高、生理活性强，具有降低血液胆固醇水平、防治冠状动脉粥样硬化、抗氧化、抗癌等药用和保健功能，在医学、食品、化妆品等领域引起广泛关注。
3.在植物甾醇制备而成后，需要对其进行检测分析，但是现有的检测分析方法，检测速率慢，且检测精度有待提高。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种植物甾醇的检测分析方法，旨在解决现有技术中的植物甾醇检测分析方法，检测速率慢，且检测精度有待提高的技术问题。
5.为实现上述目的，本发明采用的一种植物甾醇的检测分析方法，包括如下步骤：
6.选取样品并进行皂化处理；
7.之后加入混合品进行有机萃取，收集有机萃取层，然后经过预处理，得到试样；
8.配制标准溶液；
9.针对所述标准溶液中的每种待测植物甾醇，以该待测植物甾醇与所述混合品的峰面积比为横坐标，以该待测植物甾醇与所述混合品的浓度比为纵坐标，绘制标准曲线；
10.将所述试样注入气相色谱仪进行分析，获得待测液中各待测植物甾醇与混合品的峰面积比，并依据对应的所述标准曲线，计算得到样品中各待测植物甾醇的含量。
11.其中，所述皂化处理具体步骤为：
12.向所述样品中加入氢氧化钾溶液和95％乙醇，摇动使所述样品溶解，于80-90℃皂化2-3小时，得到皂化液。
13.其中，所述混合品由胆固醇和乙醚混合而成。
14.其中，然后经过预处理，得到试样的具体步骤为：
15.将所述有机萃取层蒸馏水洗涤至中性，然后用无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器蒸发至干，用正已烷分次将其转入容量瓶中定容，即得试样。
16.其中，所述配制标准溶液的步骤为：
17.将菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇标准品溶于丙酮中，制成标准溶液；
18.精确量取多种不同容积的混合标准溶液，并各自用丙酮定容至预设容积，制成多个不同浓度的标准溶液。
19.其中，将所述试样注入气相色谱仪进行分析的步骤中：
20.色谱柱选用毛细管色谱柱。
21.其中，所述毛细管色谱柱选用规格为30m
×
0.25mm
×
0.25μm的毛细管色谱柱
elite-1、规格为30m
×
0.32mm
×
0.25μm的毛细管色谱柱elite-5或规格为30m
×
0.25mm
×
0.25μm的毛细管色谱柱elite-35。
22.本发明的一种植物甾醇的检测分析方法，通过选取样品并进行皂化处理；之后加入混合品进行有机萃取，收集有机萃取层，然后经过预处理，得到试样；配制标准溶液；针对所述标准溶液中的每种待测植物甾醇，以该待测植物甾醇与所述混合品的峰面积比为横坐标，以该待测植物甾醇与所述混合品的浓度比为纵坐标，绘制标准曲线；将所述试样注入气相色谱仪进行分析，获得待测液中各待测植物甾醇与混合品的峰面积比，并依据对应的所述标准曲线，计算得到样品中各待测植物甾醇的含量。上述植物甾醇检测分析方法简单高效，加快了检测速率，并且灵敏度以及检测精度高。
附图说明
23.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
24.图1是本发明的植物甾醇的检测分析方法的步骤流程图。
具体实施方式
25.下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。此外，在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
26.请参阅图1，本发明提供了一种植物甾醇的检测分析方法，包括如下步骤：
27.s1：选取样品并进行皂化处理；
28.s2：之后加入混合品进行有机萃取，收集有机萃取层，然后经过预处理，得到试样；
29.s3：配制标准溶液；
30.s4：针对所述标准溶液中的每种待测植物甾醇，以该待测植物甾醇与所述混合品的峰面积比为横坐标，以该待测植物甾醇与所述混合品的浓度比为纵坐标，绘制标准曲线；
31.s5：将所述试样注入气相色谱仪进行分析，获得待测液中各待测植物甾醇与混合品的峰面积比，并依据对应的所述标准曲线，计算得到样品中各待测植物甾醇的含量。
32.在步骤s1中选取样品并进行皂化处理的步骤中：
33.向所述样品中加入氢氧化钾溶液和95％乙醇，摇动使所述样品溶解，于80-90℃皂化2-3小时，得到皂化液，其中氢氧化钾溶液加入一半后，然后加入95％乙醇，之后再加上剩下的一半氢氧化钾溶液，并且剩下一半氢氧化钾溶液加入过程中需要一边搅拌一边加入，并且在加入完毕后，需要摇动所述样品，使其所述样品快速溶解以及溶解更加彻底。
34.在步骤s2中加入混合品进行有机萃取，收集有机萃取层，然后经过预处理，得到试样的步骤中：
35.其中所述混合品由胆固醇和乙醚混合而成。具体的，加入胆固醇和乙醚至皂化处理后的物体中进行有机萃取，收集有机萃取层，然后将所述有机萃取层蒸馏水洗涤至中性，
然后用无水硫酸钠脱水后，用旋转蒸发器蒸发至干，用正已烷分次将其转入容量瓶中定容，即得试样。
36.在步骤s3中配制标准溶液的步骤中：
37.将菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇标准品溶于丙酮中，制成标准溶液；精确量取多种不同容积的混合标准溶液，并各自用丙酮定容至预设容积，制成多个不同浓度的标准溶液。
38.在步骤s4中针对所述标准溶液中的每种待测植物甾醇，以该待测植物甾醇与所述混合品的峰面积比为横坐标，以该待测植物甾醇与所述混合品的浓度比为纵坐标，绘制标准曲线；
39.在步骤s5中将所述试样注入气相色谱仪进行分析，获得待测液中各待测植物甾醇与混合品的峰面积比，并依据对应的所述标准曲线，计算得到样品中各待测植物甾醇的含量的步骤中：
40.色谱柱选用毛细管色谱柱。
41.所述毛细管色谱柱选用规格为30m
×
0.25mm
×
0.25μm的毛细管色谱柱elite-1、规格为30m
×
0.32mm
×
0.25μm的毛细管色谱柱elite-5或规格为30m
×
0.25mm
×
0.25μm的毛细管色谱柱elite-35。
42.另外将所述试样注入气相色谱仪进行分析的色谱条件为：
43.进样口温度：280-290℃；
44.柱温：200-300℃；
45.进样量：3μl；
46.分流比：30:1；
47.柱流量：1.0-1.5ml/min；
48.fid检测器温度：290-300℃；
49.载气为氮气；
50.氢气流速:50ml/min；
51.空气流速:430ml/min。
52.通过使用毛细管色谱柱进行气相色谱分析，其植物甾醇具有较好的分离效果；样品中的甾醇能够被灵敏检测，保证了甾醇的分离效果。此外该方法可同时检测样品中植物甾醇所含有的β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇的具体含量。通过对样品的处理方法，皂化条件、萃取剂及色谱柱的作用条件等进行优化，确立检测条件，建立检测方法。该方法简便、快速、准确，适合于推广应用。
53.综上所述，本发明提出的一种植物甾醇的检测分析方法，简单高效，加快了检测速率，并且灵敏度以及检测精度高。
54.以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。