针对新冠病毒的IgA中和抗体检测试剂盒及制备方法与流程

文档序号:31054021发布日期:2022-08-06 10:26阅读:76来源:国知局
针对新冠病毒的IgA中和抗体检测试剂盒及制备方法与流程
针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒及制备方法
技术领域
1.本发明属于生物医学检测技术领域,尤其涉及一种针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒及制备方法。


背景技术:

2.免疫球蛋白a(iga)是人体的黏膜防御系统的重要抗体,广泛分布于唾液、乳汁、以及胃肠道等黏膜分泌液中,能抑制病毒在呼吸道上皮附着,减缓病毒繁殖,有重要的免疫屏障作用,是防止病原体入侵的第一道防线。
3.新型冠状病毒(sars-cov-2),也就是新冠病毒,是一种经呼吸道感染的病毒,注射疫苗一般只能引起体内产生igm和igg抗体,这些抗体一般主要存在于血液中,能中和进入血液的病毒,能够阻止病毒在全身的播散,减少重症,但黏膜表面的细胞没有血液供应,这类抗体无法保护这些细胞不被病毒感染。吸入疫苗直接使黏膜的淋巴组织免疫,产生分泌型iga抗体,形成局部免疫,能够阻止病毒对黏膜的感染。通过对唾液中新冠病毒iga中和抗体的检测,能用于判断接种疫苗后是否获得了中和抗体免疫效果。对于个体疫苗的接种方案具有指导作用,从而判断是否需要对接种方案进行调整。
4.一般的iga检测方法是基于rbd-iga抗体-羊抗人iga抗体夹心法原理的侧向层析试纸条,其方法是利用胶体金标记rbd蛋白,nc膜上包被羊抗人iga抗体,利用形成标记rbd蛋白-iga抗体-包被羊抗人iga抗体来检测iga抗体,此种方法的灵敏度高,但是部分抗rbd蛋白抗体并非中和抗体,会导致检测特异性差。
5.此前,发明专利cn113433328b公开了一种通过在nc膜上设置rbd-ace2蛋白复合物,将靶向病毒rbd的血清igg非中和抗体捕获,保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性,但是这样在nc膜上设置rbd-ace2蛋白复合物常常会无法阻止在此之前靶向病毒rbd的血清igg非中和抗体与胶体金标记的rbd结合,这样使得检测中和抗体的特异性的灵敏度不高。


技术实现要素:

6.本发明的目的在于解决现有技术中针对新冠病毒iga中和抗体检测特异性差以及使用局限性的问题,提供一种简便、快速、特异性高,并可针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒及制备方法。本发明的技术方案如下:本发明的所述针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒,包括:层析试纸与盒体,所述层析试纸设于盒体内;所述层析试纸包括底板、样品垫一1、样品垫二2、结合垫3、nc膜4和吸水垫5,所述样品垫一1、样品垫二2、结合垫3、nc膜4和吸水垫5按从左到右的次序依次黏贴于底板一侧;所述样品垫二2上包被有rbd-ace2蛋白结合复合物;所述nc膜4上按从左到右的次序依次设有检测线6和质控线7,所述检测线6上包被有特异性抗人iga抗体;所述结合垫上设有标记载体标记的rbd蛋白标记物和鸡igy标记物。
45边壁上固联着若干旋片1-46,不锈钢条1-45距外壳1-2内表面更远的一头固联着螺伞盘二1-48,辊子1-4的边壁上固联着螺伞盘一1-47,螺伞盘一1-47与螺伞盘二1-48相咬合。
17.一种针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备方法,包括:步骤1-1:胶体金标记,即采用万分之一浓度的胶体金分别标记rbd蛋白和鸡igy,离心去上清,浓缩十倍得到rbd蛋白标记物和鸡igy标记物;步骤1-2:结合垫制备,即将步骤1-1得到的rbd蛋白标记物和鸡igy标记物按照重量比为2:1的比例混合后,再稀释3倍后均匀涂抹于玻璃纤维垫片上,在温点为40℃的条件下把玻璃纤维垫片烘干120分钟,然后采用斩切机,把玻璃纤维垫片切割成4mm宽的片状物,得到结合垫;步骤1-3:nc膜包被,即采用1x pbs+4%蔗糖作为溶剂,分别配制0.5mg/ml浓度的特异性抗人iga抗体的检测线包被液以及0.5mg/ml浓度的鸡igy蛋白质控线包被液,采用喷金划膜仪器将上述配制的包被液划在nc膜上,在温点为40℃的条件下对nc膜烘干12小时,包被nc膜;步骤1-4:样品垫一1制备,即采用缓冲体系处理样品垫,后均匀涂抹于玻璃纤维垫片上,在温点为40℃的条件下把玻璃纤维垫片烘干120分钟,然后采用斩切机,把玻璃纤维垫片切割成16mm宽的片状物,得到样品垫一1;步骤1-5:样品垫二2制备,即采用1x pbs+4%蔗糖作为溶剂,稀释rbd-ace2蛋白结合复合物至0.2mg/ml得到溶液,然后把该溶液均匀涂抹于玻璃纤维垫片上,在温点为40℃的条件下把玻璃纤维垫片烘干120分钟,然后采用斩切机,把玻璃纤维垫片切割成5mm宽的片状物,得到样品垫二2;步骤1-6:大板组装,即底板采用pvc材料底板,吸水垫为切割成25mm宽的吸水纸,将样品垫一1、样品垫二2、结合垫3、nc膜4和吸水垫5按从左到右的次序依次重叠,并用胶黏剂黏贴于底板一侧,得到大板;步骤1-7:组装以及封装,即把大板放置于所述壳体的内部完成组装,然后同干燥剂一起封装于铝箔袋内,再同配套的样本稀释液一起放置于铝箔袋内,完成针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备。
18.进一步的,所述步骤1-4中的样品垫的配方为0.02mol pb/l+0.1%tw-20。
19.进一步的,所述步骤1-3还能为:nc膜包被,即采用1x pbs+4%蔗糖作为溶剂,分别配制0.5mg/ml浓度的rbd-ace2蛋白结合复合物的非中和抗体检测线包被液、0.5mg/ml浓度的rbd蛋白的中和抗体检测线包被液以及0.5mg/ml浓度的抗rbd抗体质控线包被液,采用喷金划膜仪器将上述配制的包被液划在nc膜上,在温点为40℃的条件下对nc膜烘干12小时,包被nc膜。
20.进一步的,所述步骤1-1和步骤1-2中去除掉鸡igy。
21.通过采用上述技术方案,达到的技术效果如下:通过提前在样品垫上设置rbd-ace2蛋白复合物,提前将靶向病毒rbd的血清igg非中和抗体捕获,避免其与胶体金标记的rbd结合,保证特异性的前提下,进一步提高了灵敏度。
附图说明
22.图1为本发明的所述层析试纸的结构图。
23.图2为本发明的所述针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备方法的步骤1-1到步骤1-4的流程图。
24.图3为本发明的所述针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备方法的步骤1-5到步骤1-7的流程图。
25.图4为本发明的一种所述烘干机的纵向截面示意图。
26.图5为本发明的所述外壳里的架构示意图。
27.图6为本发明的所述牙盘的架构示意图。
28.图7为本发明的所述盘状件的部分连接示意图。
29.图8为本发明的另一种所述烘干机的纵向截面示意图。
30.图9为本发明的另一种所述外壳里的架构示意图。
31.图10为本发明的另一种所述升温室里的纵向截面示意图。
32.图11为本发明的烘干机的部分示意图。
具体实施方式
33.此前,发明专利cn113433328b公开了一种通过在nc膜上设置rbd-ace2蛋白复合物,将靶向病毒rbd的血清igg非中和抗体捕获,保证后续通过夹心法检测中和抗体的特异性,但是这样在nc膜上设置rbd-ace2蛋白复合物常常会无法阻止在此之前靶向病毒rbd的血清igg非中和抗体与胶体金标记的rbd结合,这样使得检测中和抗体的特异性的灵敏度不高。本发明在此基础上进一步改进,通过提前在样品垫上设置rbd-ace2蛋白复合物,提前将靶向病毒rbd的血清igg非中和抗体捕获,避免其与胶体金标记的rbd结合,保证特异性的前提下,进一步提高了灵敏度。
34.下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
35.以下是实验例一:一种针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒,包括:层析试纸与盒体,所述层析试纸设于盒体内;如图1-图11所示,所述层析试纸包括底板、样品垫一1、样品垫二2、结合垫3、nc膜4和吸水垫5,所述样品垫一1、样品垫二2、结合垫3、nc膜4和吸水垫5按从左到右的次序依次黏贴于底板一侧;所述样品垫二2上包被有rbd-ace2蛋白结合复合物;所述nc膜4上按从左到右的次序依次设有检测线6和质控线7,所述检测线6上包被有特异性抗人iga抗体;所述结合垫上设有标记载体标记的rbd蛋白标记物和鸡igy标记物。
36.所述标记载体为胶体金,所述质控线上包被有质控检测物,所述质控检测物为抗鸡igy。
37.这样,首先制备出新冠病毒受体结合蛋白(rbd)与人体细胞受体
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血管紧张素转化酶2(ace2)的蛋白结合物复合物,也就是rbd-ace2蛋白结合复合物。其中样品垫二2上放置rbd-ace2蛋白结合复合物;结合垫上分别放置红色乳胶微球或胶体金标记的rbd蛋白标记物和鸡igy标记物;检测线上包被有特异性抗人iga抗体;质控线上包被有抗igy抗体。
38.当样品最开始滴入样品垫一1中且其不含新冠病毒iga抗体时,检测线不显色;当样品中仅含有新冠病毒iga非中和抗体时,iga非中和抗体被rbd-ace2蛋白复合物捕获,因此不会与结合垫上红色乳胶微球或胶体金标记的rbd白标记物结合,检测线不显色;当样品中含有新冠病毒iga中和抗体以及非中和抗体时,iga非中和抗体被rbd-ace2蛋白复合物捕获,不会与结合垫上红色乳胶微球或胶体金标记的rbd白标记物结合,而iga中和抗体不会与rbd-ace2蛋白复合物结合,能进一步与结合垫上红色乳胶微球或胶体金标记的rbd白标记物结合合,检测线显色,提高了检测中和抗体的特异性的灵敏度。
39.使用时,收集待检测的血清并滴加15 ul在所述壳体的加样孔,然后向加样孔滴加稀释液70 ul,反应15分钟;通过观察窗直接观测非中和抗体检测线、中和抗体检测线和质控线的反应结果,并与配套使用的浓度显色卡进行比对,来判断sars-cov-2的中和抗体或非中和抗体含量。
40.另外,在针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备期间,往往要把玻璃纤维垫片和nc膜这样的烘干件送到烘干机内执行烘干,目前采取的烘干机,普遍运用电炉丝与马达,电炉丝升温腔体中的送入的风的温点,马达的转杆经由辊子牵引桶状件旋动,桶状件可牵引若干烘干件启动旋动升温,然而亦具有缺点:就像烘干件仅能伴着桶状件共同按辊子的中心线执行旋动,而在桶状件旋动的期间,烘干件接近电炉丝的边壁就会更高效的升温,然而烘干件的另外部位不能高效执行升温,不利于升温高效性与升温性能;经由电炉丝升温送入的风,接着升温后的送风就用层层传递的模式来执行升温,要更高的升温周期,耗损不少功率,亦不利于升温的功效。
41.经过改进,在针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备期间,要把玻璃纤维垫片和nc膜这样的烘干件送到烘干机内执行烘干,所述烘干机包含外壳1-2,外壳1-2内设置着旋动部件;烘干件能是玻璃纤维垫片和nc膜。
42.旋动部件具有透设且旋接于外壳1-2内表面的辊子1-4,辊子1-4的边壁上固联着盘状件1-5,盘状件1-5内表面对称旋接着若干棒状件1-6,各棒状件1-6的一头都固联着牙盘一1-9,辊子1-4的一头固联着牙盘二1-21,牙盘一的盘径低于牙盘二的盘径;牙盘二1-21边壁上固联着辊体1-23,辊体1-23的内表面上对称设置着若干电炉丝一1-24,若干牙盘一1-9都同牙盘二1-21相咬合,外壳1-2的内表面上固联着圈状通道1-8,圈状通道1-8内表面上对称设置着若干电炉丝二1-25,圈状通道1-8的内边壁上围绕着若干等距排列的牙口1-7,若干牙盘一1-9都同牙口1-7相咬合,各牙盘一1-9边壁上都固联着容器1-22。
43.所述外壳1-2的边壁上固联着曲柄,曲柄的一头固联着马达1-3,马达1-3的转杆与辊子1-4彼此间保持同一中心线而固联,外壳1-2的内表面上都敷设着岩棉,容器1-22的边壁能设成筛孔架构,利于送热,马达1-3的转杆牵引辊子1-4旋动。岩棉用于隔热。
44.所述外壳1-2内表面上对称设置着条状引导口1-26,条状引导口1-26中可移动相连着封盖1-27,封盖1-27边壁固联着扶把1-31,经由扶把1-31拖拽封盖1-27,让封盖1-27在条状引导口1-26中运行,以此执行封盖1-27的装配与启开。
45.所述封盖1-27的内边壁上设置着圈状口,圈状口中可移动相连着同容器1-22个数一样的中空盘1-28,毗邻的二中空盘1-28边壁上都固联着止位条,中空盘1-28内表面经由碟簧可伸缩相连着运行条1-30,各运行条1-30都可移动相连于相应的一容器1-22的内表面,运行条1-30边壁上设置着若干内丝口,中空盘1-28边壁上设置着卡口,卡口与一内丝口
中共同丝接丝杆一1-29,容器1-22中设有烘干件,运行条1-30距中空盘1-28更远的一头卡于相应的一容器1-22中,而运行条1-30经中空盘1-28中的移出的跨度能变动。
46.本发明内,实验人员把要执行升温而烘干的烘干件搁于各容器1-22中,接着把封盖1-27搁至条状引导口1-26中,变动运行条1-30经中空盘1-28中的移出的跨度,接着把卡口与一内丝口正对,经由丝杆一1-29对运行条1-30执行固联,加上变动各运行条1-30的中心线与相应的一容器1-22的中心线保持彼此吻合,接着经由扶把1-31牵引封盖1-27朝一边运行,以此封盖1-27上的若干运行条1-30都能移动相连于相应的容器1-22中,达到对烘干件的搁放与止位,容器1-22能在运行条1-30边壁上执行主动的旋动。
47.另外运行条1-30经中空盘1-28中的移出的跨度能变动,以此对不一样的烘干件执行接触式止位,克服了在容器1-22执行主动旋动同用辊子1-4的中心线当作中心线来执行旋动时,烘干件在容器1-22中亦会形成旋动,以此改善部温的功效。
48.启动马达1-3,马达1-3的转杆牵引辊子1-4旋动,以此辊子1-4牵引盘状件1-5旋动,盘状件1-5牵引若干棒状件1-6运行加上各棒状件1-6距盘状件1-5更远的一头都固联着牙盘一1-9,圈状通道1-8内边壁上固联着牙口1-7,辊子1-4的一头固联着牙盘二1-21,若干牙盘一1-9都同牙盘二1-21相咬合,若干牙盘一1-9都同牙口1-7相咬合,共同形成了咬合式联动,于是各牙盘一1-9把牵引相应的容器1-22用辊子1-4的中心线当作中心线执行旋动,加上牙盘一1-9亦会牵引相应的容器1-22执行己身的旋动,以此牵引烘干件一则主动旋动,二则牵引烘干件联动式旋动,同步的,电炉丝一1-24与电炉丝二1-25经外部的给电装置执行给电,让电炉丝一1-24与电炉丝二1-25经容器1-22的两边对它执行升温,让烘干件的升温而烘干的性能更佳更为平衡。
49.所述外壳1-2上表面固联着承载片1-35,承载片1-35内表面上透设且旋接着丝杆二1-36,丝杆二1-36边壁上固联着旋动盘一1-33,辊子1-4边壁上固联着旋动盘二1-32,旋动盘二1-32与旋动盘一1-33经由链板1-34相连,辊子1-4经由旋动盘二1-32、旋动盘一1-33和链板1-34牵引丝杆二1-36旋动。
50.所述外壳1-2上表面固联着升温室1-38,升温室1-38中封闭的可移动相连着移动片1-39,升温室1-38内表面上镶嵌着电炉丝三1-40,丝杆二1-36上丝接着丝母1-37,丝母1-37的边壁上对称固联着驱动条,二驱动条距丝母1-37更远的一头透设升温室1-38内表面后固联于移动片1-39上,丝杆二1-36旋动后,在驱动条的止位下,丝母1-37按照丝杆二1-36中心线方向来回运行。
51.所述圈状通道1-8内表面按照其圈向对称固联着若干排风通道一1-43,辊体1-23边壁沿周向对称固联着若干排风通道二1-44,升温室1-38内表面上对称透设固联着送风通道1-41与排风通路1-42,送风通道1-41与排风通路1-42上都设置着止回阀,排风通路1-42为彼此贯通的三接头架构,排风通路1-42经由塑料通道一与排风通道一1-43相通,排风通路1-42经由塑料通道二与排风通道二1-44相通,送风通道1-41距升温室1-38更远的一头同外壳1-2内表面相通,送风通道1-41上的止回阀仅可让外壳1-2中的风送至升温室1-38中,以此把外壳1-2中的风吸取至升温室1-38中执行升温,另外排风通路1-42上的止回阀仅可让升温后的送风抵进至排风通道一1-43与排风通道二1-44中射出。
52.本发明内,把外部的给电装置同电炉丝三1-40接通,辊子1-4经由旋动盘二1-32、旋动盘一1-33与链板1-34牵引丝杆二1-36旋动,丝接于丝杆二1-36边壁上的丝母1-37就会
牵引二驱动条横向来回运行,以此让二驱动条牵引移动片1-39在升温室1-38中横向来回封闭式运行,在移动片1-39在升温室1-38中朝一边封闭式运行之际,就会经由送风通道1-41把外壳1-2内的风吸取至升温室1-38中执行升温,在移动片1-39在升温室1-38中朝另一边封闭式运行时,经由排风通路1-42把升温后的送风送至排风通道一1-43与排风通道二1-44中射出,让排风通道一1-43与排风通道二1-44各自处在容器1-22两边射出升温后的风,结合容器1-22的主动旋动和联动,更能改善升温的高效性。
53.把升温部件设于升温室1-38中,经由移动片1-39在升温室1-38中来回封闭式运行,以此对外壳1-2中的温点低的风执行吸出而升温,还有就是把升温后的风送进至到排风通道一1-43与排风通道二1-44中射出,以此排风通道一1-43与排风通道二1-44在容器1-22的两边射出升温后的风,对烘干件执行接触式升温,改善了升温的性能。
54.所述外壳1-2下部的内表面按照纵向旋接着不锈钢条1-45,不锈钢条1-45边壁上固联着若干旋片1-46,不锈钢条1-45距外壳1-2内表面更远的一头固联着螺伞盘二1-48,辊子1-4的边壁上固联着螺伞盘一1-47,螺伞盘一1-47与螺伞盘二1-48相咬合。
55.本发明内,辊子1-4经由螺伞盘一1-47与螺伞盘二1-48牵引不锈钢条1-45旋动,以此不锈钢条1-45牵引旋片1-46旋动,旋片1-46把外壳1-2里的风执行旋动,以此对升温后的风执行旋动,让它在外壳1-2中分布更均衡,让外壳1-2中的温点排布均衡,以此结合对烘干件的升温。
56.一种针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备方法,包括:步骤1-1:胶体金标记,即采用万分之一浓度的胶体金分别标记rbd蛋白和鸡igy,离心去上清,浓缩十倍得到rbd蛋白标记物和鸡igy标记物;步骤1-2:结合垫制备,即将步骤1-1得到的rbd蛋白标记物和鸡igy标记物按照重量比为2:1的比例混合后,再稀释3倍后均匀涂抹于玻璃纤维垫片上,在温点为40℃的条件下把玻璃纤维垫片烘干120分钟,然后采用斩切机,把玻璃纤维垫片切割成4mm宽的片状物,得到结合垫;步骤1-3:nc膜包被,即采用1x pbs+4%蔗糖作为溶剂,分别配制0.5mg/ml浓度的特异性抗人iga抗体的检测线包被液以及0.5mg/ml浓度的鸡igy蛋白质控线包被液,采用喷金划膜仪器将上述配制的包被液划在nc膜上,在温点为40℃的条件下对nc膜烘干12小时,包被nc膜;步骤1-4:样品垫一1制备,即采用缓冲体系处理样品垫,后均匀涂抹于玻璃纤维垫片上,在温点为40℃的条件下把玻璃纤维垫片烘干120分钟,然后采用斩切机,把玻璃纤维垫片切割成16mm宽的片状物,得到样品垫一1;步骤1-5:样品垫二2制备,即采用1x pbs+4%蔗糖作为溶剂,稀释rbd-ace2蛋白结合复合物至0.2mg/ml得到溶液,然后把该溶液均匀涂抹于玻璃纤维垫片上,在温点为40℃的条件下把玻璃纤维垫片烘干120分钟,然后采用斩切机,把玻璃纤维垫片切割成5mm宽的片状物,得到样品垫二2;步骤1-6:大板组装,即底板采用pvc材料底板,吸水垫为切割成25mm宽的吸水纸,将样品垫一1、样品垫二2、结合垫3、nc膜4和吸水垫5按从左到右的次序依次重叠,并用胶黏剂黏贴于底板一侧,得到大板;步骤1-7:组装以及封装,即把大板放置于所述壳体的内部完成组装,然后同干燥
剂一起封装于铝箔袋内,再同配套的样本稀释液一起放置于铝箔袋内,完成针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒的制备。干燥剂为活性氧化铝。
57.所述步骤1-4中的样品垫的配方为0.02mol pb/l+0.1%tw-20。
58.使用时,收集作为样本的待检测的血清并滴加15 ul在所述壳体的加样孔(该加样孔正对样品垫一),然后向加样孔滴加稀释液70 ul,反应15分钟;通过所述壳体上的观察窗(观察窗正对着检测线和质控线)直接观测检测线和质控线的反应结果,并与配套使用的浓度显色卡进行比对,来判断sars-cov-2的iga中和抗体含量。
59.以下通过采用现有技术的对照例一和采用本发明的实验例一的针对新冠病毒的iga中和抗体检测试剂盒来进一步说明:对照例一:采用的是专利公开号为cn113433328b的现有技术中的sars-cov-2中和抗体的检测卡,即夹心法中和抗体检测卡,其包括层析试纸、壳体和样本稀释液,所述层析试纸包括底板、样品垫、结合垫、nc膜和吸水垫,所述样品垫、结合垫、nc膜和吸水垫依次黏贴与底板一侧;所述nc膜上依次设有检测线和质控线,所述检测线靠近结合垫,所述质控线靠近吸水垫,所述检测线包被有rbd蛋白,质控线包被液为0.5mg/ml的抗rbd单克隆抗体。所述结合垫设有rbd蛋白标记物,所述rbd蛋白标记物包括标记载体和结合于标记载体的rbd蛋白,所述标记载体胶体金。使用时,收集待检测的血清并滴加在所述壳体的加样孔,然后向加样孔滴加稀释液,反应15分钟;然后采用仪器读取检测线和质控线的反应结果,并通过检测线和质控线的比值判断sars-cov-2中和抗体含量。分别取接种过疫苗和未接种过疫苗的血清样本,委托中科院病毒研究所利用假病毒中和实验进行判定,同时分别用实施例一、对照例一的方法制备的检测卡测试,并用比色卡来判断显色结果,检测结果如表1所示:表1
由表1中数据可知,在接种过疫苗的样本中,“金标准”病毒中和试验方法判定的阴性的样本,对照例一判断的结果均为阳性,而实验例一检测线检测的中和抗体结果均为阴性,而在“金标准”病毒中和试验方法判定的弱阳的样本,对照例一判断的结果均为弱阳(+),而实验施例一检测线检测的中和抗体结果有两例为中阳性(++),一例为强阳性(+++),表明实验例一的特异性优于对照例一。因此,实施例一提供的方法在中和抗体的检测特异性上也优于夹心法。
60.另外,或者还能够是:所述检测线6包括按从左到右的次序而设的非中和抗体检测线和中和抗体检测线,所述非中和抗体检测线包被有rbd-ace2蛋白结合复合物,所述中和抗体检测线包被有rbd蛋白,所述标记载体为红色乳胶微球,所述结合垫上只设有标记载体标记的rbd蛋白标记物,所述质控检测物为抗rbd抗体。
61.所述步骤1-3还能为:nc膜包被,即采用1x pbs+4%蔗糖作为溶剂,分别配制0.5mg/ml浓度的rbd-ace2蛋白结合复合物的非中和抗体检测线包被液、0.5mg/ml浓度的rbd蛋白的中和抗体检测线包被液以及0.5mg/ml浓度的抗rbd抗体质控线包被液,采用喷金划膜仪器将上述配制的包被液划在nc膜上,在温点为40℃的条件下对nc膜烘干12小时,包被nc膜。
62.所述步骤1-1和步骤1-2中去除掉鸡igy。
63.以上所述仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书内容所作的简单修改或变换,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。以上实施例仅用以说明本发明而并非限制本发明所描述的技术方案;因此,尽管本说明书参照上述的实施例对本发明已进行了详细的说明,但是,本领域的普通技术人员应当理解,仍然能对本发明进行修改或等同替换;而一切不脱离本发明的精神和范围的技术方案及其改进,其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。
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