一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法和检测方法与流程

本发明属于食品安全检测，涉及一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法和检测方法。

背景技术：

1、随着食品工业的快速发展，食品添加剂违规添加现象屡禁不止。食品添加剂叔丁基对苯二酚具有抗氧化能力强、耐高温、抗菌、遇铁离子不着色等优点，被广泛用作油脂食品的抗氧化剂。根据卫生部发布的《食品添加剂使用标准》(gb2760—2011)规定，叔丁基对苯二酚被允许在脂肪、油和乳化脂肪制品，基本不含水的脂肪和油，熟制坚果与籽类，坚果与籽类罐头，油炸面制品，方便米面制品，饼干，腌腊肉制品，风干、烘干、压干等水产品和膨化食品中使用，各类食品中的最大使用量为0.2g/kg(以油脂中的含量计)。然而，在考察叔丁基对苯二酚对a549肺癌细胞和人脐静脉内皮细胞的潜在细胞毒性和遗传毒性的研究中发现，相对高剂量叔丁基对苯二酚作为食品添加剂会刺激细胞凋亡且具有致癌性。因此，检测食品中叔丁基对苯二酚的含量对监督食品安全和保障人体健康具有重要的意义。

2、我国对油脂及其制品中抗氧化剂的测定一直沿用薄层法、比色法、气相色谱法和极谱法。近年来，有采用高效液相色谱法同时测定油脂中多种抗氧化剂的报道。但上述方法样品前处理繁琐，耗时较长。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法和检测方法。本发明提供的前处理方法能够快速提取得到叔丁基对苯二酚，且步骤简单，可操作性强。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供了一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法，包括以下步骤：

3、采用乙腈饱和正己烷将待测样品溶解，得到待测样品溶解液；

4、采用正己烷饱和乙腈对所述待测样品溶解液进行提取，得到待测样品液。

5、优选地，所述乙腈饱和正己烷和待测样品的用量比为5～15ml：1g。

6、优选地，所述正己烷饱和乙腈和待测样品溶解液的体积比为2：1。

7、优选地，所述提取的方式为涡旋提取；所述涡旋提取的转速为2000～3000rpm，时间为2～3min。

8、优选地，所述待测样品包括油炸花生、油炸坚果或籽类中的一种或多种。

9、本发明还提供上述所述的前处理方法得到的待测样品液的检测方法，包括以下步骤：

10、采用高效液相色谱法对所述待测样品液进行检测，得到待测样品的色谱图；

11、将所述待测样品的色谱图与预定的标准谱图进行对比，采用外标法计算得到待测样品中叔丁基对苯二酚的含量；

12、所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相a和流动相b，所述流动相a为乙酸水溶液，所述流动相b为乙腈；所述流动相体系的流速为1.2ml/min；检测器为紫外检测器，检测波长为280nm；洗脱方式为梯度洗脱；

13、所述梯度洗脱的程序为：

14、0.0～5.0min：所述流动相a的体积百分含量为90％；

15、5.0～20.0min：所述流动相a的体积百分含量为90％匀速减少到5％；

16、20.0～24.0min：所述流动相a的体积百分含量为5％；

17、24.0～24.5min：所述流动相a的体积百分含量由5％匀速增加到70％。

18、优选地，所述高效液相色谱检测的色谱柱为c18色谱柱；柱温为40℃；进样量为5μl。

19、优选地，所述乙酸水溶液的体积浓度为1.5％。

20、本发明提供了一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法，包括以下步骤：采用乙腈饱和正己烷将待测样品溶解，得到待测样品溶解液；采用正己烷饱和乙腈对所述待测样品溶解液进行提取，得到待测样品液。本发明通过采用乙腈饱和正己烷对待测样品脱脂，然后采用正己烷饱和乙腈直接递提取叔丁基对苯二酚，步骤简单，耗时短，可操作性强。通过实施例表明，整个提取过程可以在30min内完成。

21、本发明还提供了上述技术方案所述的提取方法得到的待测样品液的检测方法，采用高效液相色谱法对所述待测样品液进行检测，得到待测样品的色谱图；将所述待测样品的色谱图与预定的标准谱图进行对比，采用外标法计算得到待测样品中叔丁基对苯二酚的含量；所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相a和流动相b，所述流动相a为乙酸水溶液，所述流动相b为乙腈；所述流动相体系的流速为1.2ml/min；检测波长为280nm；洗脱方式为梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序为：0～5min：所述流动相a的体积百分含量为90％；5～20min：所述流动相a的体积百分含量为90％匀速减少到5％；20～24min：所述流动相a的体积百分含量为5％；24～24.5min：所述流动相a的体积百分含量由5％匀速增加到70％。本发明通过对高效液相色谱检测条件的设定，实现了对叔丁基对苯二酚的准确检测，具有简便、快捷、灵敏度高的特点。

技术特征：

1.一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述乙腈饱和正己烷和待测样品的用量比为5～15ml：1g。

3.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述正己烷饱和乙腈和待测样品溶解液的体积比为2：1。

4.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述提取的方式为涡旋提取；所述涡旋提取的转速为2000～3000rpm，时间为2～3min。

5.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述待测样品包括油炸花生、油炸坚果和籽类中的一种或多种。

6.一种权利要求1～5任一项所述的前处理方法得到的待测样品液的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的色谱柱为c18色谱柱；柱温为40℃；进样量为5μl。

8.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述乙酸水溶液的体积浓度为1.5％。

技术总结
本发明属于食品安全检测技术领域，涉及一种含叔丁基对苯二酚样品的前处理方法和检测方法。本发明所述的前处理方法，包括以下步骤：采用乙腈饱和正己烷将待测样品溶解，得到待测样品溶解液；采用正己烷饱和乙腈对所述待测样品溶解液进行提取，得到待测样品液。本发明提供的前处理方法能够快速提取得到叔丁基对苯二酚，且步骤简单，快速、可操作性强。

技术研发人员：宋立里,鲁源,孙钦彩,崔韵升,徐子瑛,杨凤云,李晓龙
受保护的技术使用者：山东金胜粮油食品有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13