一种基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂、制备方法及应用与流程

文档序号:33469137发布日期:2023-03-15 07:45阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂,其特征在于,由以下试剂组成:试剂a:浓度为10mm、ph为8.3的碳酸氢铵溶液中加入质量浓度1~5%的sds配制而成;试剂b:由0.05~10单位/10μl糖胺酰酶、质量浓度10%的np-40和浓度为10mm、ph为8.3的碳酸氢铵溶液混合配制而成,混合溶液ph值为5~9;试剂c:由8-氨基芘-1,3,6-三磺酸溶于dmso中配制成浓度为0.02mm~1m有机物还原剂;试剂d:终止液。2.根据权利要求1所述的基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂,其特征在于,所述试剂a、试剂b与试剂c的体积比是1:1:1。3.根据权利要求2所述的基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂,其特征在于,所述试剂a、试剂b与试剂c的体积都为5μl。4.根据权利要求1所述的基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂,其特征在于,所述试剂d为超纯水。5.根据权利要求1所述的基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一寡糖链的制备在经过灭活处理的5μl血清样品中加入5μl试剂a,进行变性,冷却至室温后,加入5μl试剂b,37℃反应3h,然后进行干燥;步骤二寡糖链的标记在步骤一干燥后得到的样品中加入5μl试剂c,60℃反应1h后进行荧光标记,然后加入100μl试剂d终止标记反应;步骤三寡糖链分离分析取10μl寡糖链标记后的液体,用分析仪进行n-寡糖链分离检测,得到天然寡糖n-糖组图谱;步骤四数据处理分析n-糖组图谱的峰值量化:将每个峰的峰高值除以所有峰的高度的总和,计算得到每个峰的相对含量。6.一种组合物在制备寡糖链阿尔兹海默症检测试剂中的应用,其特征在于,所述组合物由血清中的g4s4、g3s3、g2s2、g2s2f、g2s1、g2s1f、g1f和g2f2组成,所述组合物通过(g2s2+g2s2f)/g2f2的值来检测阿尔兹海默症。7.根据权利要求6所述的一种组合物在制备寡糖链阿尔兹海默症检测试剂中的应用,其特征在于,所述g1f为同分异构体。

技术总结
本发明提供了一种基于寡糖链检测阿尔兹海默症的检测试剂及其制备方法和应用,检测试剂由以下试剂混合而成,试剂A:浓度为10mM、pH为8.3的碳酸氢铵溶液中加入质量浓度1~5%的SDS配制而成;试剂B:由0.05~10单位/10μl糖胺酰酶、质量浓度10%的NP-40和浓度为10mM、pH为8.3的碳酸氢铵溶液混合配制而成,混合溶液pH值为5~9;试剂C:由8-氨基芘-1,3,6-三磺酸溶于DMSO中配制成浓度为0.02mM~1M有机物还原剂;试剂D:终止液。本发明通过该试剂测定血清中的天然寡糖N-糖组图谱,再将峰值量化并进行统计学分析,从而提供一种阿尔兹海默症的血清天然寡糖N-糖组图谱模型的建立方法,通过测定生理病理状态下蛋白质的天然糖基化修饰的改变来检测阿尔兹海默症。改变来检测阿尔兹海默症。改变来检测阿尔兹海默症。


技术研发人员:陈翠英 李维泉 张军利 傅婷婷 徐蕾
受保护的技术使用者:江苏先思达生物科技有限公司
技术研发日:2022.11.11
技术公布日:2023/3/14
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