技术特征：
1.一种利用稳定同位素内标分析血浆样本中质子泵抑制剂雷贝拉唑浓度的方法，其包括如下步骤：向血浆样本中加入稳定同位素内标溶液和甲醇进行涡流，离心后收集上清液，上清液中加入甲醇和乙腈，涡流混匀得到预处理后的待测样品；采用液相色谱-串联质谱检测，将待测样品进行液相色谱分离，然后进行质谱检测，基于检测峰面积比绘制标准曲线获得回归方程，最终计算获得待测样品中的雷贝拉唑浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述稳定同位素内标溶液为雷贝拉唑-d4。3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述预处理的具体方法包括：向96孔板中加入50.0μl血浆样本，接着加入50.0μl的内标溶液和300μl的甲醇，涡流混匀后离心收集上清液，取50.0μl的上清液到另一干净96孔板中，接着加入300μl的乙腈:甲醇(1:3，v/v)，涡流混匀，得到待测样品；优选地，所述离心的时间为10min，离心温度为4℃，离心速度为3900rpm。4.根据权利要求1～3所述的方法，其中，所述内标溶液的浓度为50.0ng/ml。5.根据权利要求1所述的方法，其中，进行液相色谱分离所采用的色谱柱为：venusil mp-c18(2)色谱柱，5.0μm，4.6
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100mm；所采用的流动相为：a相：含0.2％甲酸和5mm醋酸铵的水溶液，b相：甲醇:乙腈(3:1，v/v)混合溶液。6.根据权利要求5所述的方法，其中，进行液相色谱分离洗脱条件为：等度洗脱：a相：b相＝20：80(v/v)；洗脱时间：3.00min；流速：0.6500ml/min；进样量：1.00μl；自动进样器温度：4℃；柱温：40℃。7.根据权利要求1所述的方法，其中，进行质谱检测的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源(esi)；喷射电压：4000v；喷雾气(gas1)：65psi；辅助气(gas2)：65psi；检测方式：正离子；离子源温度：500℃；碰撞诱导解离(cad)：10psi；气帘气(curtain gas)：40psi；驻留时间：150ms。8.根据权利要求1或6所述的方法，其中，进行质谱检测采用定量分析离子对，所述定量分析离子对为：雷贝拉唑m/z 360.2
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242.1，碰撞能量(ce)16ev，去簇电压(dp)80v；雷贝拉唑-d4 m/z 364.2
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242.1，碰撞能量(ce)18ev，去簇电压(dp)80v。9.根据权利要求1所述的方法，其中，标准曲线具体制作为：以待测样品理论浓度为横坐标，待测样品与内标物的峰面积比为纵坐标，进行回归分
析计算获得直线回归方程。10.权利要求1～9任一项所述的方法在分析血浆样本中雷贝拉唑浓度中的应用；所述雷贝拉唑用于治疗良性活动性胃溃疡、活动性十二指肠溃疡、反流性食管炎。
技术总结
本发明提供了一种利用稳定同位素内标分析血浆样本中质子泵抑制剂雷贝拉唑浓度的方法。其包括：向血浆样本中加入稳定同位素内标溶液和甲醇进行涡流，离心后收集上清液，上清液中加入甲醇和乙腈，涡流混匀得到预处理后的待测样品；采用液相色谱-串联质谱检测，将待测样品进行液相色谱分离，然后进行质谱检测，基于检测峰面积比绘制标准曲线获得回归方程，最终计算获得待测样品中的雷贝拉唑浓度。本发明具有预处理操作简便的特点，提取后样本易于保存，分析速度较快，适合大批量临床研究样品分析；此外灵敏度较高，雷贝拉唑定量下限为2.00ng/mL，同时满足低、高剂量下受试者血药浓度的测定；方法准确度好，精密度高，重现性好。重现性好。重现性好。
技术研发人员：崔如玉 钟勘 王贝贝 高妍 李航 林海霞
受保护的技术使用者：苏州海科医药技术有限公司
技术研发日：2022.12.28
技术公布日：2023/3/31