一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法

文档序号:36475666发布日期:2023-12-22 06:21阅读:55来源:国知局

本发明涉及一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,属于医用即时检测产品研发领域。


背景技术:

1、微流控即时检测芯片是一种基于微流控技术的检测平台,可以实现对样品的高灵敏度、高速度、高通量的检测。微流控技术利用微型通道、微型阀门、微型泵等微制造技术,将样品在微小的尺度下进行操控和处理,从而实现对微小流体样品的精确操纵和控制。

2、过滤棉和荧光探针是即时检测芯片中的重要组成部分,过滤棉内嵌于芯片的进样区,在基于全血的快速检测芯片内通常起到过滤血细胞的作用,在使用前一般需要通过处理液进行预处理,去除其表面污染物的同时增加过滤棉对荧光探针的附着性。荧光探针通常被附着于芯片内表面,由于其附着牢固性较差,在运输与使用的过程中会出现损耗与偏差,使芯片的可靠性与寿命降低。若附着的荧光探针出现较大范围的脱落,也会影响荧光探针与淀粉样蛋白的混合,影响检测的精度。本发明提供了一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,该方法能有效克服以上问题,增加芯片存储期,大大提高检测效率与检测精度。


技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的缺点,提供了一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法。

2、本发明的另一目的提供了一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法。

3、 本发明的目的通过以下技术方案来实现:一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,它的处理液包括以下原料:

4、乙醇:60%-80%,sds:0.2%-1%,去离子水

5、一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,它包括以下步骤:

6、s1.过滤棉净化:将过滤棉浸入足量60%-80%浓度乙醇中,浸泡10-20分钟,浸泡后取出用去离子水浸泡1.5h,浸泡过程中换水两次;

7、s2.一次干燥:浸泡后置于烘干箱中充分烘干;其中,所述烘干箱的烘干温度为30-50摄氏度的温度烘干2-4小时;

8、s3.表面活化:将表面活化剂(sds)加入去离子水中,浓度为0.2%-1%,搅拌均匀1-2分钟,将过滤棉浸入溶剂系统中,加热至50-60摄氏度,浸泡时间为30-60分钟;

9、s4.二次干燥:浸泡后置于烘干箱中充分烘干;其中,所述烘干箱的烘干温度为30-50摄氏度的温度烘干2-4小时;

10、s5.荧光探针包被:将硫黄素t溶解95%乙醇溶剂中配置成溶液,搅拌均匀后将干燥的过滤棉浸入其中30分钟;

11、s6.烘干:润湿后的过滤棉转移至烘箱,所述烘干箱的烘干温度为30-50摄氏度的温度烘干2-4小时;

12、s7.遮光保存:烘干后的过滤棉应置于遮光环境中保存;

13、本发明具有以下优点:提供了一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,该处理液能有效的改善过滤棉的一些物理或化学性质;本发明公开的处理方法方法与普通处理方式比较,附着荧光探针的过滤棉在以下方面有明显的提高:

14、1.加入全血血样后,过滤棉快速过滤血细胞的同时,荧光探针释放更加均匀迅速,且释放完全,无任何残留;

15、2.荧光探针与过滤棉结合的稳定性提高,预埋的均匀性、时效性和效率提高,提高了检测效果,增加了产品存放的稳定性。

16、实施方式

17、下面结合实施例对本发明做出进一步的描述,本发明的保护范围不局限于一下所述:

18、实施例1:一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,它包括以下步骤:

19、s1.过滤棉净化:将过滤棉浸入足量60%浓度乙醇中,浸泡10分钟,浸泡后取出用去离子水浸泡0.5h,浸泡过程中换水两次;

20、s2.一次干燥:浸泡后置于烘干箱中充分烘干;其中,所述烘干箱的烘干温度为30摄氏度的温度烘干4小时;

21、s3.表面活化:将表面活化剂(sds)加入去离子水中,浓度为0.2%,搅拌均匀1-2分钟,将过滤棉浸入溶剂系统中,加热至50摄氏度,浸泡时间为30分钟;

22、s4.二次干燥:浸泡后置于烘干箱中充分烘干;其中,所述烘干箱的烘干温度为30摄氏度的温度烘干2小时;

23、s5.荧光探针包被:将硫黄素t溶解95%乙醇溶剂中配置成溶液,搅拌均匀后将干燥的过滤棉浸入其中30分钟;

24、s6.烘干:润湿后的过滤棉转移至烘箱,所述烘干箱的烘干温度为40摄氏度的温度烘干3小时;

25、s7.遮光保存:烘干后的过滤棉应置于遮光环境中保存;

26、实施例3:一种基于全血快速检测芯片内荧光探针预埋方法,它包括以下步骤:

27、s1.过滤棉净化:将过滤棉浸入足量80%浓度乙醇中,浸泡30分钟,浸泡后取出用去离子水浸泡1.5h,浸泡过程中换水两次;

28、s2.一次干燥:浸泡后置于烘干箱中充分烘干;其中,所述烘干箱的烘干温度为60摄氏度的温度烘干4小时;

29、s3.表面活化:将表面活化剂(sds)加入去离子水中,浓度为1%,搅拌均匀1-2分钟,将过滤棉浸入溶剂系统中,加热至60摄氏度,浸泡时间为60分钟;

30、s4.二次干燥:浸泡后置于烘干箱中充分烘干;其中,所述烘干箱的烘干温度为50摄氏度的温度烘干4小时;

31、s5.荧光探针包被:将硫黄素t溶解95%乙醇溶剂中配置成溶液,搅拌均匀后将干燥的过滤棉浸入其中30分钟;

32、s6.烘干:润湿后的过滤棉转移至烘箱,所述烘干箱的烘干温度为50摄氏度的温度烘干4小时;

33、s7.遮光保存:烘干后的过滤棉应置于遮光环境中保存;

34、以下通过实验说明本发明的有益效果:

35、一、过滤棉的选择:

36、选用普通纯棉纤维,过滤棉规格为重量600-700g/m2、厚度1-2mm、吸附率1-2.5s/cm、 吸水性200-250mg/cm2。

37、二、过滤棉的处理:

38、1.将的过滤棉浸入足量70%的乙醇中20分钟,浸泡后取出用去离子水浸泡1h,浸泡过程中换水两次;

39、2.浸泡后取出置于烘干箱中40摄氏度的温度烘干3小时充分烘干;

40、3.配制预处理液:使用表面活化剂sds加入去离子水中配成浓度为0.5%的溶液搅拌均匀后备用。

41、 4.将过滤棉浸入溶剂系统中,加热到60摄氏度,浸泡时间为60分钟,浸泡后置于烘干箱中50摄氏度的温度烘干4小时充分烘干。

42、三、荧光探针溶解与吸附:

43、1.将0.16mg硫黄素t粉末加入100ml浓度为95%的乙醇中搅拌均匀;

44、2.将预处理后干燥的过滤棉浸入溶液中浸泡30分钟;

45、3.润湿后的过滤棉转移至烘箱,所述烘干箱的烘干温度为50摄氏度的温度烘干4小时。

46、四、观察荧光探针粒子附着情况:

47、1.取处理后和未进行处理的附着荧光探针粒子的过滤棉置于载玻片上。

48、 2.将载玻片放置于荧光显微镜中,选择合适的激发波长、分光镜和发射波长,以便激发tht粒子的荧光发射的波长范围。

49、 3.使用荧光显微镜进行tht荧光检测时,需要选择以下几个滤波片:

50、激发滤波片:选择在tht吸收光谱范围内的滤波片,通常使用的滤波片波长为450-490nm。

51、分光镜:在激发和发射波长之间选择一个合适的切除滤波片,以防止激发光波长的反射和混合。

52、发射滤波片:选择在tht荧光光谱范围内的滤波片,通常使用的滤波片波长为510-550nm。

53、需要根据实验条件和tht荧光光谱的特点来选择合适的滤波片,以确保能够获得清晰的荧光图像。

54、调整荧光显微镜的对焦、曝光时间等参数,以获得最佳的荧光图像。通过荧光显微镜观察样品的荧光信号,检测tht的荧光强度和分布情况。可以通过图像分析软件对荧光图像进行定量分析,评估tht荧光强度和聚集体的数量。

55、结论:通过以上过程的处理,观察到处理后的过滤棉荧光探针粒子附着率更高,且加样后过滤棉中荧光探针粒子剩余更少,制备的过滤棉性质稳定,加样本检测时,荧光探针粒子能快速并完全的释放,提高了产品的稳定性及检测效果。

56、以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都涵盖在本发明的保护范围之内。

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