一种检测谷物及油料中除草剂及其代谢物的方法

本发明涉及分析检测，具体涉及一种检测谷物及油料中除草剂及其代谢物的方法。

背景技术：

1、炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵等除草剂是芳氧苯氧基羧酸类和环己烷羧酸类除草剂，常用于稻田等大田作物中阔叶杂草的根除，但目前国标方法中尚未有针对性的标准化检测方法，仅有参考的检测技术标准，适用性十分有限。

2、这类除草剂作用于植物源性作物中后，代谢产物呈酸性，由于性质的不稳定，也造成在检测过程中一般前处理方法的不适用性。对于谷物和油料中除草剂农药残留的测定方法主要有高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱-串联质谱法等。例如，现有技术“张洋.油菜籽中高效氟吡甲禾灵及其代谢物的残留检测与膳食风险评估[j].湖南农业大学学报(自然科学版)，2021”，通过添加回收实验建立高效氟吡甲禾灵及其代谢物氟吡禾灵在油菜籽中的残留检测方法，使用乙腈超声提取，经弗罗里硅土层析柱净化，结合高效液相色谱检测油菜籽样品中高效氟吡甲禾灵，采用naoh–甲醇混合溶液提取，经n–丙基乙二胺净化，结合液相色谱质谱联用检测油菜籽样品中氟吡禾灵。然而上述方法使用的提取液复杂且能检测的化合物较少增加了实验的成本和时间。

3、目前，针对炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵六种除草剂及其代谢物的残留分析在谷物、油料中尚未有一个统一的检测方法，因此，开发一种能同时检出上述农药的检测方法是十分必要的。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种谷物、油料中除草剂及其代谢物的检测方法，采用本发明提供的方法能够快速、准确的实现谷物和油料中炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵六种除草剂及其代谢物残留量的同时定性与定量检测，灵敏度和精确度高。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供了一种检测谷物、油料中除草剂及其代谢物的方法，包括以下步骤：

3、将待测样品、甲酸水、酸性乙腈和无机盐混合，进行提取分离，得到提取液；

4、将所述提取液与固相萃取剂混合，进行分散固相萃取净化，得到待测样品液；

5、采用高效液相色谱-串联质谱法检测所述待测样品液中的除草剂及其代谢物；

6、所述除草剂包括炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵中的一种或几种；

7、所述高效液相色谱-串联质谱法包括高效液相色谱分离和质谱检测；

8、所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相a和流动相b；所述流动相a为乙腈，所述流动相b为甲酸-甲酸铵水溶液；洗脱方式为梯度洗脱；

9、所述梯度洗脱的程序为：0～1min，所述流动相a的体积分数为40％；1～6min，所述流动相a的体积分数由40％匀速增加到90％；6～7min，所述流动相a的体积分数由90％匀速降至40％；7～8min，所述流动相a的体积分数为40％；

10、所述质谱检测的条件包括：离子源温度为250℃；气帘气压力为35psi，碰撞气压力为8psi，喷雾气压力为50psi，辅助加热气压力为40psi，正、负离子扫描，多反应监测模式。

11、优选地，所述代谢物包括炔草酸、氰氟草酸、喹禾灵酸、抗倒酸和氟吡禾灵中的一种或几种。

12、优选地，所述高效液相色谱检测的色谱柱为bhe c18色谱柱；柱温为35℃；进样量为2μl；所述流动相体系的流速为0.3ml/min。

13、优选地，所述甲酸水中甲酸的体积分数为0.1％；所述酸性乙腈为甲酸-乙腈混合溶液，所述酸性乙腈中甲酸的体积分数为0.1％；

14、所述待测样品的质量和甲酸水的体积之比为1g：2ml；

15、所述待测样品的质量和酸性乙腈的体积之比为1g：3ml。

16、优选地，所述无机盐包括氯化钠和/或无水硫酸镁；

17、所述待测样品和无机盐的质量比为1：0.8～3。

18、优选地，所述提取分离包括：利用酸性乙腈对待测样品进行涡旋振荡提取，将所得提取体系与无机盐混合，进行离心分离，得到的上清液为提取液。

19、优选地，所述涡旋振荡提取的转速为2000～2500r/min，时间为5～10min；

20、所述离心分离的转速为4000～5000r/min，时间为5～10min。

21、优选地，所述固相萃取剂包括硫酸镁和弗罗里硅土，所述硫酸镁和弗罗里硅土的质量比为1：1；

22、所述提取液的体积与固相萃取剂的质量之比为1ml：25mg。

23、优选地，所述分散固相萃取净化包括依次进行涡旋混合和离心分离。

24、优选地，所述涡旋混合的转速为2000～2500r/min，时间为1～2min；

25、所述离心分离的转速为4000～5000r/min，时间为5～10min。

26、本发明提供了一种检测谷物、油料中除草剂及其代谢物的方法，包括以下步骤：将待测样品、酸性乙腈和无机盐混合，进行提取分离，得到提取液；将所述提取液与固相萃取剂混合，进行分散固相萃取净化，得到待测样品液；采用高效液相色谱-串联质谱法检测所述待测样品液中的除草剂及其代谢物；所述除草剂包括炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵中的一种或几种；所述高效液相色谱-串联质谱法包括高效液相色谱分离和质谱检测；所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相a和流动相b；所述流动相a为乙腈，所述流动相b为甲酸-甲酸铵水溶液；洗脱方式为梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序为：0～1min，所述流动相a的体积分数为40％；1～6min，所述流动相a的体积分数由40％匀速增加到90％；6～7min，所述流动相a的体积分数由90％匀速降至40％；7～8min，所述流动相a的体积分数为40％；所述质谱检测的条件包括：离子源温度为250℃；气帘气压力为35psi，碰撞气压力为8psi，喷雾气压力为50psi，辅助加热气压力为40psi。与现有技术相比，本发明的植物源性农产品中农药残留检测方法通过使用酸性乙腈和无机盐对待测样品进行提取分离，然后采用分散固相萃取(quechers)技术进行净化，可最大限度减少农药之外物质对检测结果的干扰，本发明采用的前处理方式简单快速、净化效果好、灵敏度高、重复性好，可满足国内外相关法律规范的要求，适合于谷物和油料中炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵及其代谢物的农药残留的定性分析和定量检测，而且本发明采用的高效相色谱-串联质谱(uplc-ms/ms)条件能够在8min内分析炔草酯、氰氟草酯、喹禾糠酯、抗倒酯、氟吡甲禾灵和高效氟吡甲禾灵及其代谢物，建立了谷物油料基质中六种除草剂及其代谢物的检测方法，弥补了除草剂及其代谢物检测目标物单一，部分目标物无相应检测方法的空白，且能满足国家标准gb 2763-2021中规定的较低残留限量0.1mg/kg残留限量的要求。如实施例测试结果所示，本发明提供的方法定量限为0.0005～0.01mg/kg，方法检出限为0.0001～0.008mg/kg，加标水平分别为0.01mg/kg、0.05mg/kg和0.2mg/kg时，加标回收率为89.4～112.6％，rsd为1.7～5.9％，说明，本发明提供的检测方法检测限低，检测准确度高，灵敏度高。