一种蔬菜和水果中四氯虫酰胺残留量的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种蔬菜和水果中四氯虫酰胺残留量的测定方法，更具体地说是采用 气相色谱-负化学离子源-质谱（GC-NCI-MS)定性定量测定蔬菜和水果中残留的四氯虫酰 胺含量的方法，属于农药残留量的测定技术领域。
【背景技术】
[0002] 双酰胺类杀虫剂是近年来全球热门的杀虫剂产品，可广泛应用于水稻、蔬菜、棉花 等作物的害虫控制，具有低毒、环境安全、高活性等优点，包括氯虫苯甲酰胺、氰虫酰胺、氟 虫双酰胺等品种，四氯虫酰胺（SYP-9080)是由中化集团下属沈阳化工研宄院研发、中化农 化有限公司经营的新产品，我国首个具有自主知识产权的双酰胺类杀虫剂，已获得国家农 业部的临时登记。
[0003] 四氯虫酰胺（SYP-9080)属于鱼尼丁受体激活剂类杀虫剂，其通过与害虫体内鱼 尼丁受体结合，打开钙离子通道，使储存在细胞内的钙离子持续释放到肌浆中，钙离子和肌 浆中基质蛋白结合，引起肌肉持续收缩。昆虫体症状表现为抽搐、拒食，最终死亡。四氯虫 酰胺为低毒、广谱杀虫剂，对鳞翅目害虫均具有很好的活性。防治对象包括稻纵卷叶螟、二 化螟、小菜蛾、甜菜夜蛾、玉米螟、甘蔗螟、小卷蛾、食心虫等。
[0004] 随着四氯虫酰胺的登记、推广和使用，有关四氯虫酰胺残留消解动态及最终残留 量等环境行为的研宄势必增加，同时，作为我国主要出口市场的欧盟、日本等国家规定若田 间使用农药没有在该国家登记，没有制定相应的残留限量标准时，出口至其国家的食品农 产品包括畜禽肉等动物源性食品中残留限量均实行0. 〇lmg/L的"一律标准"。
[0005] 迄今为止，未见国内外有关于食品农产品中四氯虫酰胺残留量检测方法的报道， 配备负化学电离源的气相色谱质谱（GC-NCI-MS)分析食品农产品中农药残留具有很大优 势，负化学离子源（NCI源）被称为质谱"软电离源"，对含电负性集团的分析物具有高选择 性和高灵敏度，由于其特征性强，利用其进行残留分析时，基质干扰很少，可很准确地对目 标物进行定性和定量分析。现各种检测机构和企业均购置了气相色谱-质谱仪（GC-MS)，一 般也都配备了负化学离子源（NCI)，现很多类农药均含有电负性基团，有机氯和拟除虫菊酯 类农药分子大都含有一F、一C1、一Br或一C00 -等强电负性基团；有机磷农药分子大都含 有=S、一 0R、一P、一 0 -、一C1、或一P= 0等电负性基团；而近年来开发的新型农药中大 多含有一F基团，因此，使用GC-NCI-MS可方便实现多种农药的多残留分析，与GC-NCI-MS 相比，能获得更好的抗干扰能力、更低的灵敏度和更好的选择性，四氯虫酰胺属电负性化合 物，因此，建立气相色谱-负化学离子源-质谱（GC-NCI-MS)定性和定量分析蔬菜和水果中 四氯虫酰胺残留量的检测方法具有重要意义。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种蔬菜和水果中四氯虫酰胺残留量的测定方法。
[0007] 为实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种蔬菜和水果中四氯虫酰胺残 留量的测定方法，包括如下步骤：
[0008] (1)提取 称取样品于具塞离心管中，加入乙腈或含1 %乙酸的乙腈溶液均质提取lmin，加入氯 化钠或乙酸钠中的一种和无水硫酸镁，振荡后离心。
[0009] ⑵净化 移取样品提取液上清液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取 一定量净化液氮气吹干后，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待 气相色谱-负化学离子源-质谱（GC-NCI-MS)检测。
[0010] (3)标准工作溶液的配制 将不含四氯虫酰胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理时，得样品提取净 化残渣，加入适量溶剂和混合标准溶液，涡旋混匀，配制成至少3个浓度的四氯虫酰胺系列 混合标准工作液。
[0011] (4)气相色谱-负化学离子源-质谱法（GC-NCI-MS)测定 将步骤（3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-NCI-MS测定，以标准工作液的色谱 峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤（2)中净化 后的样品液注入GC-NCI-MS进行测定，测得样品液中四氯虫酰胺的色谱峰面积，代入标准 曲线，得到样品液中四氯虫酰胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中 四氯虫酰胺残留量。
[0012] 步骤（1)中样品若为脱水蔬菜和水果，需降低称样量，并加适量水充分浸润。
[0013] 步骤⑴中米用乙腈提取时加入氯化钠盐析，米用含1 %乙酸的乙腈溶液提取时 加入乙酸钠盐析；含水量较少的样品盐析时需加入一定量的水。
[0014] 步骤（2)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸镁、C18和PSA组成，每体积提取液中 无水硫酸镁、C18和PSA加入量分别为150mg、50mg和25mg。
[0015] 步骤（4)中气相色谱条件为：色谱柱：HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径 0. 25mm，膜厚0. 25ym;进样口温度250°C;载气：He，不分流模式进样，进样量：1yL;恒流模 式，流速1.OmL/min;升温程序：初温60°C保持2min，以每分钟20°C的速度升至200°C，然后 以每分钟2°C的速度升至220°C，再以每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;传输线温 度：280°C。
[0016] 步骤⑷中质谱条件为：离子源温度150°C;四极杆温度150°C;电离模式：负化 学电离，即NCI模式，能量70eV;扫描方式：选择离子监测（SIM)模式，监测的离子为：332、 334、336。
[0017] 步骤（4)中测定样液和基质标准工作溶液时，若样液中农药色谱峰保留时间与标 准溶液中相应农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均 出现，而且离子丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在这种农药；若 上述两个条件不能同时满足，则判断不含该种农药。
[0018] 本发明的有益效果在于：
[0019] 本发明利用分散固相萃取技术，建立了简便、快速并能有效避免样品中基质干扰 的样品前处理方法，将此前处理方法结合GC-NCI-MS应用于蔬菜和水果中四氯虫酰胺定 性确证和定量检测，平均回收率为87. 1%?94. 6%，平均相对标准偏差（RSD)为4. 3%? 6. 6%，检出限低于4.75yg/kg，具有操作简便、快速、准确、灵敏度高及重复性好的优点。能 满足0.01mg/kg残留限量的"一律标准"技术要求，为保障我国人民食品安全、对外出口贸 易健康发展提供有力的技术支撑。
【附图说明】
[0020] 图1为浓度为100ng/mL的四氯虫酰胺标液的GC-NCI-MS选择离子色谱图。
[0021] 图2为不含四氯虫酰胺的苹果空白样品的GC-NCI-MS选择离子色谱图。
[0022] 图3为添加在空白苹果基质中的四氯虫酰胺的GC-NCI-MS选择离子色谱图。
[0023] 图4为以不含四氯虫酰胺的苹果空白样品为基质配制的四氯虫酰胺标准工作曲 线。
【具体实施方式】
[0024] 现以以下实施实例来说明本发明，但并不是限制本发明的范围。
[0025] 实施例中使用的仪器与试剂
[0026] T18Basic均质器（IKA，Germany) ;5810R离心机（Eppendorf，Germany) ;MS3 基 本型旋涡混合器（IKA，Germany) ;7890N气相色谱-5975C质谱仪（Agilent，USA);乙二 胺-N-丙基硅烷（PSA)吸附剂（40?60ym)、十八烷基硅烷键合相（C18)净化剂（40? 60ym)均购于美国安捷伦科技有限公司。