鸡蛋质谱检测特征序列组及检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明提供一种鸡蛋的检测方法，属于食品检测领域，具体地讲，涉及用质谱方法 来检测鸡蛋中特征序列组的技术。
【背景技术】
[0002] 食物过敏症是越来越被重视的健康问题，鸡蛋属于八大食物过敏原之一。鸡蛋诱 导的过敏性反应有所不同，有的是轻微的局部反应如口腔过敏综合征，有的是严重的全身 过敏性反应，有些甚至是致命和近乎致命的过敏反应。由于美国和欧洲鸡蛋消费量的不同， 导致对过敏原的感受度不同。在欧洲，鸡蛋过敏十分普遍。欧盟在2007/68/EC中要求的14 种必须标注的过敏原中包含鸡蛋，同样加拿大的CODEX STAN118-1979中同样对过敏原的标 注做出了明确的要求。为了满足监管的要求及过敏人群的需求，需要开发相应的检测方法。 目前鸡蛋的检测方法有酶联免疫法，但是鸡蛋过敏原和禅树前纤维蛋白有交叉反应的过敏 原，因此容易导致假阳性结果。
【发明内容】
[0003] 本发明需要解决的技术问题是提供用于质谱检测的鸡蛋特征序列。
[0004] 本发明是通过W下技术方案实现的： 1. 鸡蛋过敏原Ova化umin氨基酸序列 2. 特征序列的筛选；通过Pinpoint软件针对鸡蛋过敏原Ova化umin找到适合的氨基 酸序列作为检测标签。
[0005] 鸡蛋过敏原Ova化umin氨基酸序列Uniprot:P01012。
[0006] 经过筛选确认适合的鸡蛋质谱检测标签组为： 1. YPILPEYLQCVK 2. HIATNAVLFFGR 表1鸡蛋过敏蛋白特征性肤段及SRM离子对
【主权项】
1. 一种鸡蛋质谱检测特征序列组，其特征在于，其为用于通过质谱法检测鸡蛋过敏原 的检测标签组，含有以下特征序列 ： 特征序列 I :YPILPEYLQCVK 特征序列 2 :HIATNAVLFFGR。
2. 根据权利要求2所述的鸡蛋质谱检测特征序列组，所述试样可以是面包、蛋糕、冰激 淋、饼干含有鸡蛋的加工产品。
3. 权利要求1至2中所述的质谱检测特征序列组需要用鸡蛋成分检测试剂盒处理试 样，其特征在于包括： (1) 提取缓冲液 〇· 2M Tris-HCl pH8. 1 ?8. 3 ;和 (2) 胰酶IOng/μ 1，溶剂为50mM碳酸氢氨；和 (3) 质谱检测特征序列组的标肽。
4. 权利要求1至3中一种鸡蛋的检测方法，其中步骤包括：以试剂盒中的提取缓冲液 提取试样中的蛋白质，进行酶解，溶于溶解缓冲液，通过分离器分离肽段，在质谱仪上进行 离子化及检测，以峰面积及标签浓度进行线性回归处理，计算样品中的鸡蛋过敏原的有无 及浓度。
5. 根据权利要求4所述的鸡蛋质谱检测特征序列组的检测方法，其在所述步骤中，用 到的分离器可以是碳18柱，也可以是离子交换柱和碳18柱的串接或者离子交换柱和碳18 柱的二维一体柱。
6. 根据权利要求4所述的鸡蛋质谱检测特征序列组的检测器可以是三重四级杆，或复 合型电场轨道阱回旋共振质谱，或串联质谱。
7. -种检测结果的判断方法，其特征在于，如果同时出现鸡蛋质谱检测特征序列组的 阳性结果则试样中含有鸡蛋，如果出现鸡蛋质谱检测特征序列组阴性结果则试样中不含鸡 蛋成分。
8. -种检测结果的判断方法，其特征在于，通过线性回归的方法可以对试样中的鸡蛋 含量进行定量检测。
【专利摘要】本发明涉及一种鸡蛋质谱特征序列组和检测试剂盒，属于食品检验领域。本发明为一种鸡蛋质谱检测特征组，以及一种鸡蛋过敏原检测用试剂及鸡蛋过敏原检测方法。本发明灵敏度高、精确度好，适合于面包、雪糕等含有鸡蛋的加工产品中鸡蛋的检测，以及鸡蛋的真伪鉴别，便于在各检测机构推广应用。
【IPC分类】G01N27-62, G01N30-02
【公开号】CN104569124
【申请号】CN201410235231
【发明人】贺艳, 郑文杰, 张裕君, 赵璟源, 张霞, 陈其勇, 赵卫东, 许泓
【申请人】天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年5月29日