基于纳米金聚集的显色方法在免疫检测中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及化学检测技术领域，设及利用银离子或一价铜离子引起功能化纳米金 的聚集来作为显色反应，并将该一显色变化应用到免疫检测中。具体地说，是采用含有末端 诀基的有机分子对纳米金进行功能化处理，含有末端诀基的有机分子与银或一价铜离子反 应会引起功能化纳米金的聚集，溶液颜色发生变化，并将该一显色反应应用于免疫检测中。
【背景技术】
[0002] 纳米材料具有表面效应、量子尺寸效应、小尺寸效应等该几个特殊的性质。纳米金 的表面等离子共振会随着颗粒间的距离而改变，溶液中的纳米金从分散到聚集状态时会产 生明显的由红到藍的颜色变化，该种由聚集而导致的颜色变化应用非常广泛，可用于检测 金属离子、小分子、DNA、蛋白质及肿瘤细胞等，并通过裸眼观测检测结果。通过有机分子修 饰纳米金颗粒，获得的功能化纳米金由于功能化分子的不同而表现出不同的性质，可W对 不同的分子或离子有响应。
[0003] 目前，应用比较广泛的免疫检测技术主要有免疫巧光法、免疫层析法、酶联免疫法 等。该些免疫检测技术主要是利用了抗原抗体特异性结合的原理。就酶联免疫来说，酶联 免疫吸附实验是基于抗原抗体的特异性结合并引入酶标抗体，最终通过检测酶催化反应的 程度对抗原或抗体进行定量检测的方法。该方法的缺点是检测限比较高、耗时并且需要借 助仪器分析。更重要的是，在检测过程中使用酶标抗体，不仅储存不方便，而且酶的活性容 易受到外部条件的影响。酶催化反应对实验条件的苛刻要求限制了该种检测方法的广泛应 用。
[0004] 纳米金的消光系数极高，当浓度低至纳摩尔时其溶液的颜色依旧可W观察到。目 前，纳米金(又称胶体金）技术被逐渐用于免疫检测。该一检测技术主要是利用纳米金的红 色，通过抗体与纳米金结合(金标抗体)，当抗原浓度较高时，金标抗体浓度也比较高，聚集 产生红色代表阳性反应。由于该一检测技术本身的显色机理的原因，灵敏度较低，不适合用 于检测很低浓度待测物。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服W上不足，提出一种新的、基于纳米金聚集的显色方法并 将该一显色方法应用于免疫检测中。
[0006] 为实现上述目的，本发明采取了W下技术方案。
[0007] -种基于纳米金聚集的显色方法在免疫检测中的应用。
[0008] 进一步，所述显色方法为利用银离子或者一价铜离子引起功能化纳米金的聚集而 产生的显色反应，所述功能化纳米金的聚集会使溶液由红色变为藍色，该种颜色的变化是 裸眼能够观测的。
[0009] 进一步，所述功能化纳米金为利用含有末端诀基的有机分子对纳米金进行修饰后 的功能化的纳米金。
[0010] 进一步，将含有金属银或者铜的纳米颗粒与免疫检测中的反应物结合在一起，使 所述含有金属银或者铜的纳米颗粒作为反应物，通过化学反应产生银离子或者一价铜离 子，将所述功能化纳米金作为显色液，从而引起纳米金的聚集；不同浓度的银离子或者一价 铜离子引起功能化纳米金的聚集程度是不同的，其紫外可见吸收光谱也是有变化的，因此， 可通过紫外可见吸收光谱来表征纳米金的聚集程度，进而对待测物进行定量检测。
[0011] 本发明的积极效果是： (1)将末端诀化合物与银离子或一价铜离子的反应引入到显色反应中，显色迅速且稳 定。
[0012] (2)提供了一种银离子或一价铜离子调控纳米金聚集的显色方法，使功能化纳米 金溶液产生由红色到藍色的变化，该一聚集过程不仅能通过裸眼观察进行定性分析而且能 通过紫外可见吸收光谱的表征实现定量检测。
[0013](3)将基于纳米金聚集的显色方法应用于免疫检测，用裸眼观察纳米金溶液的颜 色变化过程，能用之替代传统免疫试验中的酶催化反应过程，既能实现裸眼检测抗原或抗 体，又能解决因酶催化反应对实验条件要求苛刻而产生的问题。
[0014](4)利用化学反应代替传统的酶催化过程并将上述显色反应引入生物检测，缩短 了反应时间，提高了体系的稳定性，降低了体系的成本，对将化学反应引入免疫检测体系有 积极的帮助。
【附图说明】
[0015] 附图1为本发明基于纳米金聚集的显色方法在免疫检测中的应用的流程说明图。
[0016] 图中的标号分别为： 1、酶标板； 2、抗体； 3、抗原； 4、银标抗体； 5、功能化纳米金。
【具体实施方式】
[0017]W下结合附图继续介绍本发明一种基于纳米金聚集的显色方法在免疫检测中的 应用的【具体实施方式】。本发明的实施W银标抗体为例，通过双氧水腐蚀产生银离子；W化合 物1为例，制备功能化纳米金；W甲胎蛋白为例进行免疫检测。但是应当指出，发明的实施， 还可用氧化银、氧化铜、铜等其它纳米颗粒标记抗体，通过酸腐蚀或其它方法产生银离子或 一价铜离子。另外，功能化纳米金也可W用其它含有末端诀基的化合物制备。因此，本发明 的实施不限于W下所述的实施方式。
[001引 实施例1 一、制备功能化纳米金 1、选择含有末端诀基的化合物，对纳米金进行修饰，本发明W化合物1为例，其结构式 为：
【主权项】
1. 一种基于纳米金聚集的显色方法在免疫检测中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的显色方法为利用银离子或者一价 铜离子引起功能化纳米金的聚集而产生的显色反应，所述功能化纳米金的聚集会使溶液由 红色变为蓝色，这种颜色的变化是裸眼能够观测的。
3. 根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述功能化纳米金为利用含有末端炔基 的有机分子对纳米金进行修饰后的功能化的纳米金。
4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，将含有金属银或者铜的纳米颗粒与免疫 检测中的反应物结合在一起，使所述含有金属银或者铜的纳米颗粒作为反应物，通过化学 反应产生银离子或者一价铜离子，将所述功能化纳米金作为显色液，从而引起纳米金的聚 集；不同浓度的银离子或者一价铜离子引起功能化纳米金的聚集程度是不同的，其紫外可 见吸收光谱也是有变化的，因此，可通过紫外可见吸收光谱来表征纳米金的聚集程度，进而 对待测物进行定量检测。
【专利摘要】本发明基于纳米金聚集的显色方法在免疫检测中的应用，是用含有末端炔基的化合物对纳米金进行修饰，修饰后的功能化纳米金对银离子或一价铜离子有积极的响应，再加入银离子或一价铜离子，使功能化纳米金因不同程度的聚集而产生显色反应：纳米金溶液由原本的红色变为蓝色；将功能化纳米金因不同程度的聚集而产生的显色反应应用于免疫检测，由于纳米金聚集程度的不同其紫外可见吸收的光谱是有变化的，因此，通过仪器能对变化的吸收光谱进行测量，实现免疫检测中的定量检测。本发明不仅能通过裸眼观察而且能通过仪器对显色反应的紫外可见吸收光谱进行表征，对化学检测，尤其是对做免疫检测有积极的帮助。
【IPC分类】G01N33-53, G01N21-78, G01N33-68
【公开号】CN104865247
【申请号】CN201510272184
【发明人】马巍, 于汝佳, 刘晓院, 彭茂潘, 韩焕兴, 龙亿涛
【申请人】华东理工大学
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2015年5月25日