一种基于量子点的同时检测两种肺癌标志物的光电免疫传感器的制造方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种基于量子点的同时检测两种肺癌标志物的光电免疫传感器，属于纳米功能材料、免疫分析、光电传感、丝网印刷技术领域。
【背景技术】
[0002]肺癌是我国恶性肿瘤中发病率高的肿瘤之一，据卫生部全国肿瘤防治办公室资料，自90年代以来肺癌死亡率居城市居民癌症死亡率之首位。20年中，肺癌发病率的增长速度为所有癌症之冠，严重威胁人们的健康。癌胚抗原(CEA)是最早用于肺癌诊断的肿瘤标志物之一，其诊断价值早已被肯定。近年来，新的肿瘤标志物细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)被认为是迄今为止所发现的用于诊断肺鳞癌和小细胞肺癌较灵敏的肿瘤标志物之一，但其单项检测仍有一定的局限性。因此发展快速、简便、灵敏的细胞角蛋白19片段和癌胚抗原检测手段显得十分必要。
[0003]本实用新型涉及一种基于量子点的同时检测两种肺癌标志物的光电免疫传感器，使用双通道丝网印刷电极制备的双通道电化学免疫传感器可同时检测细胞角蛋白19片段和癌胚抗原，与其它检测方法相比，具有灵敏度高，特异性好，成本低廉、快速方便和检测效率高等优势，可实现细胞角蛋白19片段和癌胚抗原的同时检测。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型的技术方案是:
[0005]一种基于量子点的同时检测两种肺癌标志物的光电免疫传感器，其特征在于，在玻璃基底上依次印刷导电银浆制成电极引线和电极触点；印刷导电碳油墨制成辅助电极；印刷混合60%硫化镉量子点的导电油墨制成两个工作电极；印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极；印刷绝缘油墨制成敏感池；印刷绝缘油墨覆盖中间导电部分制成绝缘层和在工作电极区域制成一个电解池凹槽，制得双通道丝网印刷电极；在上述的双通道丝网印刷电极的一个工作电极表面上，设有金纳米粒子层和细胞角蛋白19片段抗体层，在另外一个工作电极表面上设有金纳米粒子层和癌胚抗原抗体层，制得双通道电化学免疫传感器；在两个工作电极表面加入待测样品；引出线端与电化学工作站连接，在光照下完成检测。
[0006]本实用新型具备以下优势:
[0007](I)本实用新型采用金纳米粒子，可增大工作电极的表面积，提高细胞角蛋白19片段和癌胚抗原抗体固载量，增强电子传递，提高传感器的灵敏度。
[0008](2)本实用新型传感器利用抗原抗体的特异反应，特异性好。
[0009](3)本实用新型传感器检测方法简单、快速，易于推广。
[0010](4)本实用新型传感器与现有技术相比，具有制备简单、加工方便、成本低、易于商品化的优点。
[0011](5)本实用新型制备的双通道电化学免疫传感器，可实现对细胞角蛋白19片段和癌胚抗原的快速同时测定，显著提高了检测效率。
【附图说明】
[0012]图1为双通道丝网印刷电极结构图。1、电极引线，2、电极触点，3、辅助电极，4、工作电极，5、参比电极，6、敏感池，7、绝缘层，8、电解池凹槽。
【具体实施方式】
[0013]下面结合附图和实施例进一步说明本实用新型。
[0014]实施例1双通道丝网印刷电极的制备
[0015]结合图1，进行双通道丝网印刷电极的制备，整个印刷电极在厚度为2mm、长度为40mm、宽度为20mm的玻璃板。
[0016]制备步骤如下:
[0017](I)在玻璃基底上印刷导电银浆制成的电极引线I和电极触点2 ;
[0018](2)印刷导电碳油墨制成辅助电极3 ；
[0019](3)印刷混合60%硫化镉量子点的导电碳油墨制成工作电极4 ;
[0020](4)印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极5 ;
[0021](5)印刷绝缘油墨制成敏感池6、绝缘层7和电解池凹槽8，制得双通道丝网印刷电极。
[0022]实施例2光电免疫传感器的制备
[0023](I)取一片实施例1制备的双通道丝网印刷电极，用超纯水冲洗，去掉电极表面的其他物质，在每个工作电极表面分别设置金纳米粒子，制成金纳米粒子层，常温干燥；
[0024](2)在(I)制得的其中一个工作电极的巯基化金纳米粒子层上，设置一层细胞角蛋白19片段抗体，4°C条件下晾干，制成细胞角蛋白19片段抗体层；
[0025](3)在(I)制得的另一个工作电极的巯基化金纳米粒子层上，设置一层癌胚抗原抗体，4°C条件下晾干，制成癌胚抗原抗体层；
[0026](4)用BSA溶液封闭(2)和(3)中的工作电极上的非特异性活性位点，制得双通道电化学免疫传感器。
[0027]实施例3本实用新型传感器的应用
[0028](I)分别取6PL样品溶液滴涂于制得的双通道电化学免疫传感器的工作电极上，保持电极湿润2h ;
[0029](2)连接电化学工作站，在电解池凹槽内，加入10PL pH为7.4的含有抗坏血酸的PBS缓冲溶液，在光照下，对样品中细胞角蛋白19片段和癌胚抗原进行同时检测。
【主权项】
1.一种基于量子点的同时检测两种肺癌标志物的光电免疫传感器，其特征在于，在玻璃基底上依次印刷导电银浆制成电极引线(I)和电极触点(2);印刷导电碳油墨制成辅助电极(3);印刷导电油墨制成两个工作电极(4);印刷银/氯化银混合油墨制成参比电极(5);印刷绝缘油墨制成敏感池(6);印刷绝缘油墨覆盖中间导电部分制成绝缘层(7)和在工作电极区域制成一个电解池凹槽(8)，制得双通道丝网印刷电极；在上述的双通道丝网印刷电极的一个工作电极表面上，设有金纳米粒子层和细胞角蛋白19片段抗体层，在另外一个工作电极表面上设有金纳米粒子层和癌胚抗原抗体层，制得双通道电化学免疫传感器；在两个工作电极表面加入待测样品；引出线端与电化学工作站连接，在光照下完成检测。
【专利摘要】本实用新型涉及一种基于量子点的同时检测两种肺癌标志物的光电免疫传感器。在玻璃基板上依次印刷印刷引线、触电、辅助电极、两个工作电极、参比电极，制得双通道丝网印刷电极。然后在其工作电极上制备金纳米粒子层和抗体层，制得同时检测两种真菌毒素双通道丝网印刷免疫传感器。本传感器成本低、检测结果稳定、操作方便，适用于细胞角蛋白19片段和癌胚抗原的快速同时测定。
【IPC分类】G01N33/68, G01N33/574
【公开号】CN204855530
【申请号】CN201520447385
【发明人】杨磊, 魏琴, 马洪敏, 吴丹, 范大伟, 张勇, 杜斌
【申请人】济南大学
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年6月28日