[0018] 本发明采用适合各种样品中六溴环十二烧(包括α、β和γ-六溴环十二烧）和 四溴双酚A的净化，且适用于油脂、肉、蛋、奶等动物源性食品。采用本净化装置（即介孔二 氧化锆杂化柱）样品回收率达87. 5%-114. 4%，且至少可重复利用5次。
【附图说明】
[0019] 图 1 为 α、β、γ -HBCD 结构示意图：（a) a -HBCD ; (b) β -HBCD ; (c) γ -HBCD ;
[0020] 图2为TBBPA结构示意图；
[0021] 图3为本发明的结构示意图；其中1-介孔二氧化锆杂化柱；2-棉花；3-无水硫酸 钠层；4-介孔二氧化锆微球层；5-酸化硅胶层；
[0022] 图4为挪威鳟鱼样品中HB⑶异构体、TBBPA及同位素内标的色谱图；
[0023] 图5为Zr02/mSi02复合材料可重复性使用试验结果。
【具体实施方式】
[0024] 实施例1
[0025] 1材料与试剂：
[0026] 硅胶：硅胶（Silica Gel)60-200目。将硅胶装入玻璃色谱柱中依次用甲醇和二氯 甲烷淋洗一次，每次使用的溶剂体积约为硅胶体积的两倍。完成淋洗后将硅胶放置在铝箱 上于通风柜中自然风干，然后130°C下活化4h，完成后装入磨口试剂瓶中，干燥器中保存。
[0027] α、β、γ -六溴环十二烧标准溶液：纯度大于99%，均为50 μ g/mL，溶于甲醇中。
[0028] α、β、γ -13C12-六溴环十二烧标准溶液：纯度大于98%，均为50 μ g/mL，溶于甲醇 中。
[0029] 四溴双酚A标准溶液：纯度大于99%，50 μ g/mL，溶于甲醇中。
[0030] 13C12-四溴双酚A标准溶液：纯度大于99%，50 μ g/mL，溶于甲醇中。
[0031] 标准应用溶液：
[0032] 六溴环十二烷与四溴双酚A混合标准应用溶液A (各化合物浓度1 μ g/mL):分别 准确量取α-六溴环十二烷，β-六溴环十二烷，γ-六溴环十二烷和四溴双酚A标准溶液 各0. 20mL，转移至IOmL棕色容量瓶中，加甲醇定容至刻度，-4°C冰箱保存。
[0033] 六溴环十二烷与四溴双酚A混合标准应用溶液B (100ng/mL):准确量取六溴环 十二烷与四溴双酚A混合标准应用液A l.OOmL，转移至IOmL棕色容量瓶中，加甲醇定容至 刻度，_4°C冰箱保存。
[0034] 13C12-六溴环十二烷和13C 12-四溴双酚A混合标准应用溶液A(各化合物浓度1 μ g/ mL):分别准确量取13C12- α -六溴环十二烷，13C12- β -六溴环十二烷，13C12- γ -六溴环十二 烷和13C12-四溴双酚A标准溶液各0. 20mL，转移至IOmL棕色容量瓶中，加甲醇定容至刻 度，-4 °C冰箱保存。
[0035] 13C12-六溴环十二烷和13C 12-四溴双酚A混合标准应用溶液B (100ng/mL):准确量 取13C12-六溴环十二烷与13C12-四溴双酚A混合标准应用溶液A 1.00 mL，转移至IOmL棕 色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，_4°C冰箱保存。
[0036] 标准系列溶液：吸取0. 50mL、I. 00mL、5. OOmL六溴环十二烷与四溴双酚A混合标准 应用溶液B (100ng/mL)和2. 50mL、5. OOmL六溴环十二烷与四溴双酚A混合标准应用液A (1 μ g/mL)，分别置于IOmL容量瓶中，再各加入0. 5mL内标混合标准应用液A (1 μ g/mL)，用 甲醇稀释至刻度。标准系列溶液中六溴环十二烷异构体和四溴双酚A的浓度分别为5. 0、 10. 0、50. 0、250. 0、500. 0ng/mL，内标浓度为 50. 0ng/mL。
[0037] 2 方法
[0038] 应用稳定性同位素稀释技术，在试样中加入13C12标记的六溴环十二烷异构体和四 溴双酚A内标溶液，以正己烷和丙酮（1:1，v/v)为提取溶剂索氏提取18~24h，经介孔二氧 化锆杂化柱净化后，以超高效液相色谱-质谱/质谱进行测定，内标法定量。
[0039] 3分析步骤
[0040] 3. 1 样品提取
[0041] 鱼类样品：准备新鲜的鱼(淡水鱼或海鱼）可食部分经匀浆机匀浆后转移至培养 皿中，于-20°C冰箱中冷冻24h，转移至冷冻干燥机中干燥24h，将干燥后的固体样品切成小 块备用。准确称取3g左右（精确到0.001)冷冻干燥鱼肉样品，置于纤维素套筒中，加入13C12-六溴环十二烷和13C12-四溴双酚A混合标准应用溶液200 μ L (100 ng/mL)和适量无 水硫酸钠，正己烷：丙酮混合溶液（1:1，v/V)作为提取剂，在50-70°C的温度下，用索氏提 取装置提取18_24h，回流速度控制在4次~6次/h。提取液充分旋转蒸发后放置过夜测定 脂肪含量。用正己烷复溶，再次浓缩至2~3 mL备用。
[0042] 肉类样品：准备新肉样(猪肉、牛肉、鸡肉等畜禽肉类）经匀浆机匀浆后转移至培养 皿中，于-20°C冰箱中冷冻24h，转移至冷冻干燥机中干燥24h，称取冷冻干燥肉样品3g左右 (精确到0. 001)，将滤膜放入索氏抽提装置中，放入冷冻干燥肉样品的同时加入13C12-六溴 环十二烷和13C12-四溴双酚A混合标准应用溶液200 μ L (100 ng/mL)作为内标，同时加入 无水硫酸钠适量。用300mL正己烷和丙酮（1: 1，体积比)作为提取剂，在50-70°C的温度下， 用索氏提取装置提取18-24 h，回流速度控制在4次~6次/h。用旋转蒸发浓缩提取液至 尽干，放置过夜后测定脂肪含量。用正己烷复溶，再次浓缩至2~3mL备用。
[0043] 蛋类样品：取蛋清蛋黄混合液，转移至培养皿中，于-20°C冰箱中冷冻24h，转移至 冷冻干燥机中干燥24h，将干燥后的固体样品。称取冷冻干燥鸡蛋样品3g左右（精确到 〇. 0〇1)，置于纤维素套筒中，加入13C12-六溴环十二烷和13C 12-四溴双酚A混合标准应用溶液 200 μ L (100 ng/mL)和适量无水硫酸钠，正己烷：丙酮混合溶液（1:1，v/v)作为提取剂， 在50-70°C的温度下，用索氏提取装置提取18-24 h，回流速度控制在4次~6次/h。提取 液充分旋转蒸发后放置过夜测定脂肪含量。用正己烷复溶，再次浓缩至2~3 mL备用。
[0044] 奶类样品：牛奶50 mL，转移至培养皿中，于_80°C冰箱中冷冻4 h，转移至冷冻干 燥机中干燥24 h得牛奶固体。将滤膜放入索氏抽提装置中，同时将冷冻干燥后得到的牛奶 固体研碎并全部转移至玻璃纤维套筒中并加入13C12-六溴环十二烷和13C 12-四溴双酚A混合 标准应用溶液200 μ L (100 ng/mL)，用正己烷和丙酮（1: 1，体积比）在50-70°C的温度下， 索氏提取20h以上，将提取液旋转蒸发浓缩至尽干，放置过夜后测定脂肪含量，用4 mL正己 烧复溶样品。
[0045] 土壤样品：称取冷土壤样品5g (精确到0. 001)，将滤膜放入索氏抽提装置中，，加 入13C12-六溴环十二烷和13C12-四溴双酚A混合标准应用溶液200 μ L (100 ng/mL)和适量 无水硫酸钠，正己烷：丙酮混合溶液（I: I，v/V)作为提取剂，在50-70°C的温度下，用索氏提 取装置提取18-24 h，回流速度控制在4次~6次/h。提取液充分旋转浓缩到5 mL备用。
[0046] 3. 2样品净化
[0047] 将索氏提取后的溶液转移至圆底烧瓶中，旋蒸提取液至近干并静置过夜；用洗耳 球轻震管壁，正己烷倒入管内排除气泡后，用200mL正己烷活化介孔二氧化锆杂化柱。以 圆底烧瓶为恒重容器测定脂肪含量后，用2~4mL正己烷复溶样品，滴入活化好的介孔二氧 化锆杂化柱上部，如此重复清洗烧瓶3~4次；IOOmL正己烷淋洗去除多余杂质，IOOmL正己 烷：二氯甲烷混合溶液（1:1，v/V)洗脱，收集洗脱液并旋蒸至近干，再用正己烷复溶，每次 2~4mL，重复清洗烧瓶3~4次，转移至IOmL试管；氮气吹干后加入200 μ L甲醇，旋涡振荡 lmin，经0. 2 μ m有机滤膜过滤后上机测定。
[0048] 3. 3 测定
[0049] 3. 3. 1测定参数
[0050] 液相条件：色谱柱选用 Waters BEH C18柱（2.