专利名称：番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法
技术领域：
本发明涉及的是一种农作物品种的选育技术方法，具体地说是一种番茄品种的育种技术方法。
背景技术：
番茄营养丰富，适应性广，用途广泛，不仅可作为蔬菜水果，而且可作为各种加工制品，还有保健功能，防治多种疾病的作用。
因此番茄是世界上主要栽培蔬菜之一。在我国蔬菜供应中番茄也起着举足轻重的作用，在农村产业结构调整中占有重要的地位。随着日光温室发展，我国保护地蔬菜栽培面积不断扩大，达到136.9万公顷，保护地中番茄的栽种面积占40％左右。同时番茄又是我国发展外向型农业的主要出口产品，远销俄罗斯等国家。特别是中国加入WTO后，蔬菜的出口无论从成本上还是价格上有比较强的竞争优势。
目前，荷兰和以色列等国家的许多品种先后打入我国，这些品种植株生长势强，持续坐果能力好，果实均匀，果肉硬，畸形与裂果少，货架寿命长，抗多种病害，对我国的番茄市场产生了巨大的冲击。
我国番茄育种在过去20年，无论在育种技术上还是在品种选育上取得长足进步，尤其在抗病育种方面与国际先进水平差距明显缩小。但是我国番茄育种水平仍然很低。主要表现在，育种的定向程度较低，育成品种特性的随机性大，品种间相似系数较高。番茄的平均单产仍然低于世界水平。荷兰温室型番茄长季节栽培的平均产量是50kg/m2，最高是65kg/m2，我国缺乏耐贮运、耐逆境(耐低温弱光或耐热)适合温室栽培的番茄专用品种。我国外销的番茄品种种子，大多采用荷兰、以色列等国家的进口种子，价格昂贵，番茄每千克为8-10万元，是我国番茄种子价格200倍。因此选育适合温室长季节栽培，耐贮运、抗多种病害、耐低温弱光或耐热番茄新品种是当务之急，替代以色列、荷兰、法国等国家的品种是我们的目标。着重提高番茄的产量和果实耐贮运性和长货架期，同时提高外观品质，要求是无畸形果，无裂果，着色好，果脐细小，果实大小均匀、光滑圆整、商品性好、平均单果重160-200克。除了基础材料缺乏以外，其主要原因是在育种过程中缺乏科学的、规范的选择程序和有效的选择、评价方法和手段。如果这个问题不能解决，我国的番茄育种就难以适应21世纪蔬菜生产发展的需要。因此，开展番茄抗病、抗逆鉴定技术进行研究，建立有效可靠的选择程序和技术体系，不断提高我国番茄定向育种的水平。使之有能力培育出适应于各种栽培方式、各种消费需求的专用品种。
发明内容本发明的目的在于为培育抗病、抗逆、适合保护地及露地栽培番茄品种提供番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法。
本发明的目的是这样实现的包括对番茄进行抗多种病害鉴定技术和抗逆鉴定技术方法，其中抗多种病害鉴定包括分别进行(1)TMV、叶霉病、枯萎病苗期人工接种多抗性鉴定；(2)TMV、叶霉病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定，(3)叶霉病、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；(4)TMV、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性人工接种多抗性鉴定；(5)TMV、叶霉病、黄萎病苗期人工接种多抗性鉴定；(6)TMV、叶霉病、枯萎病、根结线虫苗期人工接种多抗性鉴定。
抗多种病害鉴定的各种病害病情调查分级标准为(1)叶霉病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状；1级接种叶出现褪绿至黄色病斑；3级接种叶病斑上产生少量白色菌丝，无孢子；5级接种叶病斑上产生菌丝和孢子；7级接种叶病斑上产生大量菌丝和大量孢子，并且菌丝发展到上部叶，但无孢子；9级接种叶病斑上产生有大量孢子，上部叶也出现孢子；群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为0高抗(HR)0＜病情指数＜5抗病(R)5＜病情指数＜15耐病(T)15＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30(2)根结线虫病情调查分级标准单株病情分级标准0级无根结线虫和卵块1级1-2个根结和卵块2级3-10个根结和卵块3级11-30个根结和卵块4级31-100个根结和卵块5级100个以上根结和卵块病情指数计算方法 群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为＝0。
高抗(HR)0＜病情指数＜1.0抗病(R)1.0＜病情指数＜2.0耐病(T)2.0＜病情指数＜3.0感病(S)3.0＜病情指数＜4.0高感(HS)病情指数＞4.0(3)黄萎病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状
1级1-2片真叶或两片子叶变黄，以致脱落。
2级1-2片真叶变黄或全株变黄，叶萎蔫下垂。
3级全株严重萎蔫，以致枯死。
群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为0。
高抗(HR)0＜病情指数＜10抗病(R)10＜病情指数＜30中抗(MR)30＜病情指数＜40耐病(T)40＜病情指数＜60感病(S)病情指数＞60(4)枯萎病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状1级一片真叶或两片子叶变黄，以致脱落。
2级1-2片真叶变黄或全株变黄，叶萎蔫下垂。
3级全株严重萎蔫，以致枯死。
群体抗病分级标准高抗(HR)0＜病情指数＜10抗病(R)10＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30TMV、CMV复合侵染的分类标准TMV、CMV复合侵染的单株分类标准0级无症状1级叶子不平展，轻花叶3级叶片严重皱缩，重花叶5级重花叶，叶片轻度变形，蕨叶7级重花叶，严重变形，线叶9级植株停止生长或近乎死亡(5)TMV、CMV群体抗病分级标准高抗(HR)0＜病情指数＜5抗病(R)5＜病情指数＜10耐病(T)10＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30抗逆鉴定技术方法包括耐弱光鉴定和耐低温鉴定。
其中耐弱光鉴定方法为选择已知耐弱光性较强和耐弱光性较差的品种对照，与待鉴定的材料同期在正常光照条件下用营养钵播种育苗，每个材料植株不少于30株，第一片真叶展开后，每个材料选择整齐、均匀的幼苗，分为两组，每组10株，一组仍然置于正常光照下，作为对照，另一组用黑色遮阳网进行遮光处理。对照和处理区的所有材料按完全随机排列，对照和处理应安排在同一设施内，以保证对照和处理的温度一致，在第一花序花蕾明显可见时，调查每株的株高和叶面积，根据调查的数据计算每个材料在遮光下叶面积、株高相对于正常光照下的相对变化量，计算公式相对变化量＝(遮光处理的数值-正常光照数值)×100％，将待鉴定材料的叶面积、株高的相对变化量与耐弱光的对照进行相对比较；耐弱光鉴定方法的苗期耐弱光理想回归方程为①y＝-0.7029x1-0.0550 x1相对株高茎粗比值②y＝-0.7173x2-0.0869 x2相对叶绿素b/a值③y＝-0.596x1-0.303x2-0.015y耐弱光指数开花坐果期耐弱光回归方程为④y＝-2.21x1+1.104 x1相对株高茎粗比值⑤y＝--0.524x2-0.1757 x2相对叶绿素b/a值y耐弱光指数耐低温鉴定方法为分别选耐寒性强和耐寒性弱的番茄为对照，与待鉴定的材料同期播种于塑料营养钵中，按常规管理，当番茄长到第4片真叶展开、5片真叶初现时，每份材料取20株移到2℃黑暗或弱光条件下，48小时后，调查冷害级别；分别选耐寒性强和弱的番茄为对照，与待鉴定的材料同期播种于塑料营养钵中育苗，定植在大棚或温室中，按常规进行管理，去掉第一花序，待第二花序的第一朵花完全开放时，取其花粉，在固体培养基上，于8-12℃低温下观察萌发情况，培养基的的制作将80ml/L硼酸、0.8％琼脂、10％蔗糖培养基煮开混匀后，加入一滴到凹形载玻片上制作成固体培养基，放入8-12℃的生长箱中，等温度平衡后，用毛发沾取新采集的花粉播在培养基表面，可播2-4行，每隔15分钟在显微镜下观察一次，用测微尺测量花粉管长度并统计花粉萌发率和测量花粉管的长度耐低温鉴定方法中(1)番茄种子萌发期的低温鉴定指标是15℃条件下种子发芽指数；(2)以抗冷指数和低温处理后幼苗的前两穗果的相对坐果率做抗冷的直接指标，同时进行相关分析，认为相对电导率，可溶性糖和可溶性蛋白可以作为耐低温性的间接指标y＝-0.6380x+2.6272 x相对电导率y＝0.3397x+1.5130x相对蛋白质含量(3)开花坐果期的鉴定指标为减数分裂期低温处理后的花粉生活力，苗期，芽期耐低温性一致，而花期不一致。
番茄冷害的分级0级植株叶片正常，未受冷害；1级仅少数叶片边缘有轻度的皱缩萎蔫；2级半数以下的叶片萎蔫死亡；3级半数以上的叶片萎蔫死亡；4级植株全部死亡。
根据调查的冷害级别，计算每个材料冷害指数和抗冷指数。
冷害指数＝∑xa/(n∑x)＝(X1a1+X2a2)/nT式中X1、X2、X3、......Xn表示各级冷害的番茄数，a1、a2、a3、......an表示各冷害等级，T为调查的总著述。抗冷指数为冷害指数的倒数。
本发明具体提出1.抗ToMV、叶霉病、枯萎病、根结线虫病、黄萎病等病害中三种以上病害苗期人工接种鉴定方法、接种浓度、接种苗龄、接种顺序，每种病害单株和群体分级标准。2.番茄耐弱光的鉴定方法。利用相对株高和茎粗比与相对叶绿素b/a值可以作为番茄苗期弱光性的鉴定指标，相对株高、茎粗比值与相对可溶性蛋白质含量可以用作开花座果期耐弱光材料的鉴定指标。3.耐低温鉴定方法，利用抗冷指标和低温处理后幼苗的前两穗果的相对座果率作为苗期抗冷的直接指标，相对电导率，可溶性糖和可溶性蛋白可以作为耐低温性的间接指标，减数分裂期低温处理后的花粉生活力强弱可作为开花座果期的鉴定标准。并提出番茄冷害的分级标准，计算冷害指数和抗冷指数公式以及低温下花粉萌发方法。通过本发明的方法可以选育出抗多种病害，耐低温弱光的优良番茄品种。
(四)具体实施方案下面举例对本发明做更详细地描述本发明包括对番茄进行抗多种病害(番茄ToMV、CMV、叶霉病、枯萎病、根结线虫病、黄萎病、早疫病等主要的病害中的三种以上病害)苗期人工接种鉴定技术和抗逆(耐低温弱光)鉴定技术方法。
1.番茄苗期多抗性鉴定方法(1)TMV、叶霉病、枯萎病苗期鉴定方法①接种顺序TMV→叶霉病→枯萎病②接种苗龄2片真叶→3片真叶→4片真叶③接种浓度TMV1克病叶加0.01Mph7.0的磷酸缓冲液或蒸馏水10ml，接种后第三天复接一次。
叶霉病106个孢子/ml枯萎病107个孢子/ml④接种方法TMV摩擦法叶霉病喷雾法枯萎病灌根法⑤调查日期TMV接种后20天叶霉病接种后18天枯萎病接种后21天(2)TMV、叶霉病、根结线虫病苗期鉴定方法①接种顺序根结线虫→TMV→叶霉病②接种苗龄2片真叶→3片真叶→4片真叶③接种浓度TMV1克病叶加0.01Mph7.0的磷酸缓冲液或蒸馏水10ml，接种后第三天复接一次。
叶霉病106个孢子/ml
根结线虫病5000条/株④接种方法TMV摩擦法叶霉病喷雾法根结线虫病灌根法⑤调查日期TMV接种后20天叶霉病接种后18天根结线虫病接种后45天(3)叶霉病、枯萎病、根结线虫病苗期鉴定方法①接种顺序根结线虫→叶霉病→枯萎病②接种苗龄2片真叶→3片真叶→4片真叶③接种浓度根结线虫病5000条/株叶霉病106个孢子/ml枯萎病107个孢子/ml④接种方法枯萎病灌根法叶霉病喷雾法根结线虫病灌根法⑤调查日期枯萎病接种后21天叶霉病接种后18天根结线虫病接种后45天(4)TMV、枯萎病、根结线虫病苗期鉴定方法①接种顺序根结线虫→TMV→枯萎病②接种苗龄2片真叶→3片真叶→4片真叶③接种浓度TMV1克病叶加0.01Mph7.0的磷酸缓冲液或蒸馏水10ml，接种后第三天复接一次根结线虫病5000条/株叶霉病106个孢子/ml枯萎病107个孢子/ml④接种方法TMV摩擦法根结线虫病灌根法枯萎病灌根法⑤调查日期枯萎病接种后21天TMV接种后20天根结线虫病接种后45天(5)TMV、叶霉病、黄萎病苗期鉴定方法①接种顺序TMV→叶霉病→黄萎病②接种苗龄2片真叶→3片真叶→4片真叶③接种浓度TMV1克病叶加0.01Mph7.0的磷酸缓冲液或蒸馏水10ml，接种后第三天复接一次。
叶霉病106个孢子/ml黄萎病107个孢子/ml④接种方法TMV摩擦法叶霉病喷雾法黄萎病灌根法⑤调查日期TMV接种后20天叶霉病接种后18天黄萎病接种后15天(6)TMV、叶霉病、枯萎病根结线虫苗期鉴定方法①接种顺序根结线虫病→TMV→叶霉病→枯萎病②接种苗龄2片真叶→3片真叶→4片真叶→5片真叶③接种浓度TMV1克病叶加0.01Mph7.0的磷酸缓冲液或蒸馏水10ml，接种后第三天复接一次。
叶霉病106个孢子/ml枯萎病107个孢子/ml根结线虫病5000条/株④接种方法TMV摩擦法叶霉病喷雾法枯萎病灌根法根结线虫病灌根法⑤调查日期TMV接种后20天叶霉病接种后18天枯萎病接种后21天根结线虫病接种后45天各种病害病情调查分级标准叶霉病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状1级接种叶出现褪绿至黄色病斑
3级接种叶病斑上产生少量白色菌丝，无孢子。
5级接种叶病斑上产生菌丝和孢子。
7级接种叶病斑上产生大量菌丝和大量孢子，并且菌丝发展到上部叶，但无孢子。
9级接种叶病斑上产生有大量孢子，上部叶也出现孢子。
群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为0。
高抗(HR)0＜病情指数＜5抗病(R)5＜病情指数＜15耐病(T)15＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30根结线虫病情调查分级标准单株病情分级标准0级无根结线虫和卵块1级1-2个根结和卵块2级3-10个根结和卵块3级11-30个根结和卵块4级31-100个根结和卵块5级100个以上根结和卵块病情指数计算方法 群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为＝0。
高抗(HR)0＜病情指数＜1.0抗病(R)1.0＜病情指数＜2.0耐病(T)2.0＜病情指数＜3.0感病(S)3.0＜病情指数＜4.0高感(HS)病情指数＞4.0黄萎病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状1级1-2片真叶或两片子叶变黄，以致脱落。
2级1-2片真叶变黄或全株变黄，叶萎蔫下垂。
3级全株严重萎蔫，以致枯死。
群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为0。
高抗(HR)0＜病情指数＜10抗病(R)10＜病情指数＜30
中抗(MR)30＜病情指数＜40耐病(T)40＜病情指数＜60感病(S)病情指数＞60枯萎病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状1级一片真叶或两片子叶变黄，以致脱落。
2级1-2片真叶变黄或全株变黄，叶萎蔫下垂。
3级全株严重萎蔫，以致枯死。
群体抗病分级标准高抗(HR)0＜病情指数＜10抗病(R)10＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30TMV、CMV复合侵染的分类标准TMV、CMV复合侵染的单株分类标准0级无症状1级叶子不平展，轻花叶3级叶片严重皱缩，重花叶5级重花叶，叶片轻度变形，蕨叶7级重花叶，严重变形，线叶9级植株停止生长或近乎死亡TMV、CMV群体抗病分级标准高抗(HR)0＜病情指数＜5抗病(R)5＜病情指数＜10耐病(T)10＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30三、番茄耐弱光鉴定方法1.鉴定方法(1)番茄苗期和开花座果期各自的耐弱光性并不相关，相对株高和茎粗比值与相对叶绿素b/a值可以作为番茄苗期耐弱光性的鉴定指标，相对株高、茎粗比值与相对可溶性蛋白含量可以用作开花座果期耐弱光材料的鉴定指标，并建立回归方程如下苗期耐弱光理想回归方程①y＝-0.7029x1-0.0550 x1相对株高茎粗比值②y＝-0.7173x2-0.0869 x2相对叶绿素b/a值③y＝-0.596x1-0.303x2-0.015 y耐弱光指数开花座果期耐弱光回归方程如下④y＝-2.21x1+1.104x1相对株高茎粗比值⑤y＝--0.524x2-0.1757 x2相对叶绿素b/a值y耐弱光指数
(2)选择已知耐弱光性较强(如caruso，中杂9，佳粉等)和耐弱光性较差(如中蔬6等)的品种对照，与待鉴定的材料同期在正常光照条件下用营养钵播种育苗。每个材料(包括对照材料)植株不少于30株。
第一片真叶展开后，每个材料选择整齐、均匀的幼苗，分为两组，每组10株。一组仍然置于正常光照下，作为对照，另一组用黑色遮阳网进行遮光处理.对照和处理区的所有材料按完全随机排列。对照和处理应安排在同一设施内，以保证对照和处理的温度一致。
在第一花序花蕾明显可见时，调查每株的株高和面积。根据调查的数据计算每个材料在遮光下叶面积、株高相对于正常光照下的相对变化量(％)。
计算公式相对变化量＝(遮光处理的数值-正常光照数值)×100(％)，将待鉴定材料的叶面积、株高的相对变化量与耐弱光的对照进行相对比较。
四、耐低温鉴定方法1.耐低温鉴定方法(1)番茄种子萌发期的低温鉴定指标是15℃条件下种子发芽指数。
(2)以抗冷指数和低温处理后幼苗的前两穗果的相对座果率做抗冷的直接指标，同时进行相关分析，认为相对电导率，可溶性糖和可溶性蛋白可以作为耐低温性的间接指标y＝-0.6380x+2.6272 x相对电导率y＝0.3397x+1.5130 x相对蛋白质含量(3)开花座果期的鉴定指标为减数分裂期低温处理后的花粉生活力，苗期，芽期耐低温性一致，而花期不一致。
2.苗期低温处理法分别选耐寒性强和弱的番茄为对照，与待鉴定的材料同期播种与塑料营养钵中，按常规管理。当番茄长到第4片真叶展开、5片真叶初现时，每份材料取20株移到2℃黑暗或弱光条件下。48小时后，调查冷害级别。冷害的分级可参考下面的标准。
番茄冷害的分级0级植株叶片正常，未受冷害；1级仅少数叶片边缘有轻度的皱缩萎蔫；2级半数以下的叶片萎蔫死亡；3级半数以上的叶片萎蔫死亡；4级植株全部死亡。
根据调查的冷害级别，计算每个材料冷害指数和抗冷指数。
冷害指数＝∑xa/(n∑x)＝(X1a1+X2a2)/nT式中X1、X2、X3、......Xn表示各级冷害的番茄数，a1、a2、a3、......an表示各冷害等级，T为调查的总著述。抗冷指数为冷害指数的倒数。将待鉴定的材料的抗冷指数与抗寒和不抗寒的对照进行比较，做出相应的评价。
3.低温下花粉萌发分别选耐寒性强和弱的番茄为对照，与待鉴定的材料同期播种与塑料营养钵中育苗，定植在棚或温室中，按常规进行管理。
去掉第一花序。待第二花序的第一朵花完全开放时，取其花粉。在固体培养基上，于8-12℃低温下观察萌发情况。培养基的的制作将80ml/L硼酸、0.8％琼脂、10％蔗糖培养基煮开混匀后，加入一滴到凹形载玻片上制作成固体培养基，放入8-12℃的生长箱中，等温度平衡后，用毛发沾取新采集的花粉播在培养基表面，可播2-4行。每隔15分钟在显微镜下观察一次，用测微尺测量花粉管长度并统计花粉萌发率和测量花粉管的长度。
权利要求
1.一种番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法，其特征是包括对番茄进行抗多种病害鉴定技术和抗逆鉴定技术方法，其中抗多种病害鉴定包括分别进行(1)TMV、叶霉病、枯萎病苗期人工接种多抗性鉴定；(2)TMV、叶霉病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；(3)叶霉病、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；(4)TMV、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；(5)TMV、叶霉病、黄萎病苗期人工接种多抗性鉴定；(6)TMV、叶霉病、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；抗逆鉴定技术方法包括耐弱光鉴定和耐低温鉴定，其中耐弱光鉴定方法为选择已知耐弱光性较强和较差的品种做对照，与待鉴定的材料同期在正常光照条件下用营养钵播种育苗，每个材料植株不少于30株，第一片真叶展开后，每个材料选择整齐、均匀的幼苗，分为两组，每组10株，一组仍然置于正常光照下，作为对照，另一组用黑色遮阳网进行遮光处理，对照和处理区的所有材料按完全随机排列，对照和处理应安排在同一设施内，以保证对照和处理的温度一致，在第一花序花蕾明显可见时，调查每株的株高和面积，根据调查的数据计算每个材料在遮光下叶面积、株高相对于正常光照下的相对变化量，计算公式相对变化量＝(遮光处理的数值-正常光照数值)×100％，将待鉴定材料的叶面积、株高的相对变化量与耐弱光的对照进行相对比较；耐低温鉴定方法为分别选耐寒性强和弱的番茄为对照，与待鉴定的材料同期播种与塑料营养钵中，按常规管理，当番茄长到第4片真叶展开、5片真叶初现时，每份材料取20株移到2℃黑暗或弱光条件下，48小时后，调查冷害级别；分别选耐寒性强和耐寒性弱的番茄为对照，与待鉴定的材料同期播种与塑料营养钵中育苗，定植在大棚或温室中，按常规进行管理，去掉第一花序，待第二花序的第一朵花完全开放时，取其花粉，在固体培养基上，于8-12℃低温下观察萌发情况，培养基的的制作将80ml/L硼酸、0.8％琼脂、10％蔗糖培养基煮开混匀后，加入一滴到凹形载玻片上制作成固体培养基，放入8-12℃的生长箱中，等温度平衡后，用毛发沾取新采集的花粉播在培养基表面，可播2-4行，每隔15分钟在显微镜下观察一次，用测微尺测量花粉管长度并统计花粉萌发率和测量花粉管的长度。
2.根据权利要求1所述的番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法，其特征是抗多种病害鉴定的各种病害病情调查分级标准为(1)叶霉病病情调查分级标准，单株病情分级标准0级无症状；1级接种叶出现褪绿至黄色病斑；3级接种叶病斑上产生少量白色菌丝，无孢子；5级接种叶病斑上产生菌丝和孢子；7级接种叶病斑上产生大量菌丝和大量孢子，并且菌丝发展到上部叶，但无孢子；9级接种叶病斑上产生有大量孢子，上部叶也出现孢子；群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为0高抗(HR)0＜病情指数＜5抗病(R)5＜病情指数＜15耐病(T)15＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30(2)根结线虫病情调查分级标准单株病情分级标准0级无根结线虫和卵块1级1-2个根结和卵块2级3-10个根结和卵块3级11-30个根结和卵块4级31-100个根结和卵块5级100个以上根结和卵块病情指数计算方法 群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为＝0，高抗(HR)0＜病情指数＜1.0抗病(R)1.0＜病情指数＜2.0耐病(T)2.0＜病情指数＜3.0感病(S)3.0＜病情指数＜4.0高感(HS)病情指数＞4.0(3)黄萎病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状1级1-2片真叶或两片子叶变黄，以致脱落，2级1-2片真叶变黄或全株变黄，叶萎蔫下垂，3级全株严重萎蔫，以致枯死，群体抗病分级标准免疫(I)不侵染，病情指数为0，高抗(HR)0＜病情指数＜10抗病(R)10＜病情指数＜30中抗(MR)30＜病情指数＜40耐病(T)40＜病情指数＜60感病(S)病情指数＞60(4)枯萎病病情调查分级标准单株病情分级标准0级无症状1级一片真叶或两片子叶变黄，以致脱落，2级1-2片真叶变黄或全株变黄，叶萎蔫下垂，3级全株严重萎蔫，以致枯死，群体抗病分级标准高抗(HR)0＜病情指数＜10抗病(R)10＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30TMV、CMV复合侵染的分类标准TMV、CMV复合侵染的单株分类标准0级无症状1级叶子不平展，轻花叶3级叶片严重皱缩，重花叶5级重花叶，叶片轻度变形，蕨叶7级重花叶，严重变形，线叶9级植株停止生长或近乎死亡(5)TMV、CMV群体抗病分级标准高抗(HR)0＜病情指数＜5抗病(R)5＜病情指数＜10耐病(T)10＜病情指数＜30感病(S)病情指数＞30
3.根据权利要求1或2所述的番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法，其特征是耐弱光鉴定方法的苗期耐弱光想回归方程为①y＝-0.7029x1-0.0550 x1相对株高茎粗比值②y＝-0.7173x2-0.0869 x2相对叶绿素b/a值③y＝-0.596x1-0.303x2-0.015 y耐弱光指数开花坐果期耐弱光回归方程为④y＝-2.21x1+1.104x1相对株高茎粗比值⑤y＝--0.524x2-0.1757 x2相对叶绿素b/a值y耐弱光指数
4.根据权利要求1或2所述的番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法，其特征是耐低温鉴定方法中(1)番茄种子萌发期的低温鉴定指标是15℃条件下种子发芽指数；(2)以抗冷指数和低温处理后幼苗的前两穗果的相对坐果率做抗冷的直接指标，同时进行相关分析，认为相对电导率，可溶性糖和可溶性蛋白可以作为耐低温性的间接指标y＝-0.6380x+2.6272 x相对电导率y＝0.3397x+1.5130 x相对蛋白质含量(3)开花坐果期的鉴定指标为减数分裂期低温处理后的花粉生活力，苗期、芽期耐低温性一致，而花期不一致，番茄冷害的分级0级植株叶片正常，未受冷害；1级仅少数叶片边缘有轻度的皱缩萎蔫；2级半数以下的叶片萎蔫死亡；3级半数以上的叶片萎蔫死亡；4级植株全部死亡，根据调查的冷害级别，计算每个材料冷害指数和抗冷指数，冷害指数＝∑xa/(n∑x)＝(X1a1+X2a2)/nT式中X1、X2、X3、......Xn表示各级冷害的番茄数，a1、a2、a3、......an表示各冷害等级，T为调查的总著述。抗冷指数为冷害指数的倒数。
5.根据权利要求3所述的番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法，其特征是耐低温鉴定方法中(1)番茄种子萌发期的低温鉴定指标是15℃条件下种子发芽指数；(2)以抗冷指数和低温处理后幼苗的前两穗果的相对坐果率做抗冷的直接指标，同时进行相关分析，认为相对电导率，可溶性糖和可溶性蛋白可以作为耐低温性的间接指标y＝-0.6380x+2.6272 x相对电导率y＝0.3397x+1.5130 x相对蛋白质含量(3)开花坐果期的鉴定指标为减数分裂期低温处理后的花粉生活力，苗期、芽期耐低温性一致，而花期不一致，番茄冷害的分级0级植株叶片正常，未受冷害；1级仅少数叶片边缘有轻度的皱缩萎蔫；2级半数以下的叶片萎蔫死亡；3级半数以上的叶片萎蔫死亡；4级植株全部死亡，根据调查的冷害级别，计算每个材料冷害指数和抗冷指数，冷害指数＝∑xa/(n∑x)＝(X1a1+X2a2)/nT式中X1、X2、X3、......Xn表示各级冷害的番茄数，a1、a2、a3、......an表示各冷害等级，T为调查的总著述，抗冷指数为冷害指数的倒数。
全文摘要
本发明提供的是一种番茄抗多种病害和抗逆育种鉴定技术方法。包括对番茄进行抗多种病害鉴定技术和抗逆鉴定技术方法。其中抗多种病害鉴定包括分别进行TMV、叶霉病、枯萎病苗期人工接种多抗性鉴定；TMV、叶霉病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；叶霉病、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；TMV、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；TMV、叶霉病、黄萎病苗期人工接种多抗性鉴定；TMV、叶霉病、枯萎病、根结线虫病苗期人工接种多抗性鉴定；抗逆鉴定技术方法包括耐弱光鉴定和耐低温鉴定。通过本发明的方法可以选育出抗多种病害，耐低温弱光的优良番茄品种。
文档编号A01H1/04GK1623371SQ200310107739
公开日2005年6月8日 申请日期2003年12月5日 优先权日2003年12月5日
发明者李景富, 杜永臣, 许向阳, 王富, 侯兴亮 申请人:东北农业大学