专利名称：：施用来自诺丽果的生物活性化合物的方法和组合物的制作方法
技术领域：
：熟知的方法通过含有二氧化硅和CH2Cl2-MeOH成分的气相色谱来完成。在本发明的某些实施方案中，对甲醇级份进一步分级以获得次级甲醇级份。在某些实施方案中，对己垸级份进一步分级以获得次级己烷级份。一种或多种叶提取物，包括初级叶提取物、己烷级份、甲醇级份或任何二级己垸或甲醇级份，可以与诺丽果植物果实的果汁合并，以获得叶浆(获得果汁的方法将在本文中进一步描述)。在某些实施方案中，叶浆被包装和冷冻以备运输；在其它实施方案中，它被进一步掺入到本文解释的营养药物中。诺丽果果实的加工本发明的某些实施方案包括含有诺丽果植物的果汁的组合物。由于诺丽果果实实际上是不可食的，果实必须被加工以使它对于人类消费来说变得可口并包含在本发明的组合物中。加工的诺丽果果汁可以通过将成熟的诺丽果果实的果汁和果肉与种子和果皮分开，从果汁过滤出果肉，并包装果汁来制备。或者，不包装果汁，而是将果汁作为成分立即包含在另一种产品中，冷冻或巴氏消毒。在本发明的某些实施方案中，果汁和果肉可以在匀浆混合器中捣成泥，与其它成分混合。其它方法包括将果实和果汁冷冻干燥。在生产最终的果汁产品期间，可以复溶果实和果汁。还有其它的方法可以包括在碾磨前将果实和果汁空气千燥。在目前优选的生产诺丽果果汁的方法中，果实用手摘取或用机械设备摘取。果实当直径至少为1英寸(2-3cm)到最多12英寸(24-36cm)时可以被收获。果实的颜色优选为暗绿色到黄绿色直到白色，以及中间的过渡颜色。果实在收集后和进行任何加工进行之前被彻底清洗。允许果实成熟或熟化0到14天，但优选为2到3天。通过将果实放置在设备上使得果实不与地面接触来成熟或熟化果实。在熟化过程中，果实优选被盖上布或网状材料，但是果实也可以不覆盖进行熟化。当准备好进一步加工时，果实颜色变浅，例如浅绿色、浅黄色、白色或半透明的颜色。检查腐败或过绿和过硬的果实。将腐败的和硬的绿色果实与合格的果实分开。成熟和熟化的果实优选放置在带有塑料衬里的容器中，用于进一步加工和运输。熟化的果实的容器可以放置0到30天，但优选果实容器在加工前放置7到14天。在进一步加工前容器可以任选储存在冷藏条件下。从储存容器中取出果实，通过手动或机械分离器进行加工。将种子和果皮与果汁和果肉分开。11果汁和果肉可以包装在容器中储存和运输。或者，果汁和果肉可以被立即加工成最终的果汁产品。容器可以储存在冷藏、冷冻或室温条件下。诺丽果果汁和果肉优选在匀浆混合器中混合，然后它们可以与其它成分混合，例如调味品、甜味剂、营养成分、植物性药材和着色剂。完成的果汁产品优选被加热并进行巴氏消毒，最低温度为1S1。F(83°C)或更高直到212°F(100°C)。另一种生产的产品是浓縮或稀释形式的诺丽果果泥和果泥汁。果泥基本上是与种子分开的果肉，与本文描述的果汁产品不同。将产品装在和密封在塑料、玻璃或其它能够经受加工温度的适合材料的最终容器中。将容器维持在装入温度下，或可以快速冷却，然后放置在运输容器中。运输容器优选用材料包裹，以维持或控制最终容器中的产品温度的方式。可以通过过滤设备将果肉与果汁分开来对果汁和果肉进行进一步加工。过滤设备优选由下述构成，但不限于此离心倾析器，大小从l微米到2000微米、更优选少于500微米的网式过滤器，压滤机，反渗透过滤装置和任何其它的标准商业化过滤装置。过滤器运行压力优选在0.1psig直到大约1000psig的范围内。流速优选在0.1g.p.m.直到1000g.p.m.的范围内，更优选在5到50g.p.m之间。湿的果肉被清洗和过滤至少一次和最多IO次，以从果肉中除去任何果汁。获得的果肉提取物通常具有重量的10%到40%的纤维含量。获得的果肉提取物优选在最低181°F(83°C)的温度下巴氏消毒，然后置于滚筒中进行进一步加工，或制成高纤维产品。诺丽果种子的加工本发明的某些诺丽果组合物含有来自诺丽果植物的种子。在本发明的某些实施方案中，诺丽果种子通过将它们在实验室磨机中粉碎成种子粉末来进行加工。在某些实施方案中，种子粉末不进行处理。在某些实施方案中，通过将粉末在己垸中浸泡和搅拌对种子粉末进一步脱脂，优选在室温下进行1小时(药物己垸-比率为1:10)。在某些实施方案中，然后将残余物在真空下过滤，再次脱脂(优选在同样的条件下进行30分钟)，然后再次在真空下过滤。粉末可以在通风柜中放置过夜以除去残余的己烷。此外，在本发明的某些实施方案中，对脱脂的和/或未处理的粉末进行抽提，优选使用50°/。乙醇(m/m)在室温进行24小时，药物溶剂比率为1:2。诺丽果油的加工本发明的某些实施方案可以包含从诺丽果植物提取的油。提取和加工油的方法描述在1999年8月27日提交的美国专利申请序号09/384,785中，并在2001年4月10日发表为专利No.6,214,351，在此引为参考。诺丽果油通常含有几种不同的脂肪酸的甘油三酯的混合物，例如棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸脂肪酸，以及以较低量存在的其它脂肪酸。此外，油优选含有抗氧化剂以抑制油的腐败。优选使用常规的食品级抗氧化剂。组合物及其应用本发明涉及通过给个体施用来自植物诺丽果的各种不同的生物活性化合物而提供各种健康益处的方法和组合物。本发明涉及使用下面的一种或多种诺丽叶提取物，诺丽叶汁，禾口/或烘烤的叶片，用于抑制HMG-CoA还原酶，磷酸二酯酶(3禾口4)PDE3禾口PDE4，5-脂氧合酶(LOX)禾卩15-LOX,黄嘌呤氧化酶(XO),7-氨基丁酸(GABA)和第二位最常见的人类皮肤癌细胞系的生长。更具体来说，本发明涉及施用下列的一种或多种焦脱镁叶绿酸a、脱镁叶绿酸a、Purpin7和/或脱镁叶绿酸叶绿醇酯，它们都可以来自于诺丽叶提取物、诺丽叶汁和/或烘烤的叶片。此外，上述制剂导致疼痛和炎症的缓解。本发明的组合物可以含有许多诺丽果组分中的任何组分，例如13叶提取物、叶汁、叶浆、果汁、果肉、果肉提取物、果泥、种子(脱脂的或未处理的)和油。本发明的组合物也可以包含各种其它成分。其它成分的例子包括但不限于人工调味品，其它的天然果汁或果汁浓縮物例如天然葡萄汁浓縮物或天然蓝莓汁浓縮物，载体成分，以及将在本文中进一步说明的其它成分。任何含有来自诺丽果叶片的叶提取物的组合物，可以含有下面的一种或多种原始叶提取物、己烷级份、甲醇级份、次级己烷和甲醇级份、叶浆或营养药物叶片产品。在本发明的某些实施方案中，诺丽果组分的活性成分或化合物可以使用本
技术领域：
通常了解的各种方法和工艺提取出来。例如，活性成分可以使用醇或基于醇的溶液例如甲醇、乙醇和乙酸乙酯以及其它基于醇的衍生物，使用本
技术领域：
已知的方法分离或提取出来。这些活性成分或化合物可以被分离并进一步分级或彼此分离成它们的组成部分。优选对化合物进行分离或分级，以鉴定或分离任何能够帮助预防疾病、增进健康或执行其它类似功能的活性成分。此外，可以将化合物分级或分离成它们的组成部分，以鉴定和分离任何能够提供刚刚提到的同样的健康益处功能的关键性或决定性的相互作用。诺丽果的任何组分和组合物都可以进一步惨入到营养药物产品中(同样，"营养药物"在本文中是指任何被设计用于改善活的生物体例如人类或哺乳动物的健康的药物或产品)。营养药物产品的例子可以包括但不限于静脉产品，局部皮肤产品，伤口愈合产品，皮肤护理产品，头发护理产品，美容和化妆产品(例如化妆品、化妆水等)，烧伤愈合和治疗产品，急救产品，抗细菌产品，嘴唇油膏和软膏，骨愈合和治疗产品，嫩肉产品、抗炎产品、滴眼液、除臭剂、抗真菌产品、关节炎治疗产品、肌肉松弛剂、牙膏，以及本文中可能进一步讨论的其它各种营养药物和其它产品。本发明的组合物可以配制成多种实施方案中的任何方式，包括口服组合物、局部皮肤溶液、静脉溶液以及其它的产品或组合物。口服组合物可以采用例如片剂、锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉末或颗粒、乳液、糖浆或酏剂的形式。打算口服使用的组合物可以按照本
技术领域：
中任何已知的方法来制备，这样的组合物可以含有一种或多种试剂，例如甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂。它们也可以含有一种或多种其它的成分例如维生素和矿物质等。可以制造片剂，以包含一种或多种诺丽果组分，与无毒、适合用于制造片剂的可药用赋形剂相混合。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂、成粒和崩解剂、粘合剂以及润滑剂。片剂可以是无包衣的，或者它们可以通过已知的技术包衣，以延缓在胃肠道中的崩解和吸收，从而在较长时期内提供持续的作用。例如，可以使用延时材料例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。可以制造水性悬浮液，以含有诺丽果组分，与适合用于制造水性悬浮液的赋形剂相混合。这样的赋形剂的例子包括但不限于悬浮剂例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂例如天然存在的磷酯例如卵磷脂，或环氧烷与脂肪酸的縮合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物例如十七烯基氧基鲸蜡醇，或环氧乙垸与从脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的縮合产物例如聚氧乙烯失水山梨糖醇(sorbitor)单油酸酯，或环氧乙垸与从脂肪酸和己糖醇酐衍生的部分酯的縮合产物例如聚乙烯山梨糖醇酐单硬脂酸酯。典型的甜味剂可以包括但不限于从玉米、甜菜、甘蔗、土豆、木薯或其它含有淀粉的、可以化学或酶法转化为结晶块、粉末和/或糖浆的来源衍生的天然糖。此外，甜味剂可以包括人工的或高强度甜味剂，其中某些可以包括阿斯巴甜、三氯半乳蔗糖、甜菊、糖精等。甜味剂的浓度可以为诺丽果组合物重量的0到50%之间，更优选在重量的大约1%到5%之间。典型的调味剂可以包括但不限于人工的或天然的对可口性有贡献的调味成分。调味料的浓度可以在例如诺丽果组合物重量的0到15%的范围内。着色剂可以包括食品级人工或天然着色剂，浓度在诺丽果组合物重量的0到10%的范围内。典型的营养成分可以包括维生素、矿物质、微量元素、草药、植物提取物、生物活性化学物质以及化合物，浓度为诺丽果组合物重量的0到10%。维生素的例子包括但不限于维生素A、^到Bi2、C、D、E、叶酸、泛酸、生物素等。矿物质和微量元素的例子包括但不限于钙、铬、铜、钴、硼、镁、铁、硒、锰、钼、钾、碘、锌、磷等。草药和植物提取物可以包括但不限于苜蓿草、蜜蜂花粉、小球藻粉末、当归粉末、紫锥菊根、银杏叶提取物、马尾草、巴戟天、香菇、螺旋藻、葡萄籽提取物等。典型的生物活性化学物质可以包括但不限于咖啡因、麻黄碱、L-肉毒碱、肌酸，番茄红素等。在局部皮肤产品中使用的成分可以包括任何吸收到哺乳动物体内安全的成分，可以以各种形式存在，例如凝胶、洗液、霜剂、软膏等，每种含有一种或多种载体剂。掺入到全身性(例如静脉)施用的组合物中的成分或载体剂也可以包含本
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中已知的任何成分或载体。在一个示例性实施方案中，本发明的诺丽果组合物含有一种或多种加工过的诺丽果组分，其存在量在重量的大约0.01到100重量％之间，优选在重量的大约0.01%到95%之间。制剂的几个实施方案包含在2001年4月lO日发布的专利No.6,214,351中。但是，这些组合物的目的仅仅是示例性的，因为本
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的普通专业人员将会认识到含有加工过的诺丽果产品的其它制剂或组合物。在另一个示例性的实施方案中，内服组合物含有的成分有存在量为重量的大约0.1-80%之间的加工过的诺丽果果汁或果泥汁，存在量为重量的大约0.1-20%之间的加工过的诺丽果油，以及存在量为重量的大约20-90°/。之间的载体介质。诺丽果果泥汁或果汁也可以与以同样浓度存在的加工过的诺丽果膳食纤维产品配制在一起。实施例下面的实施例说明了本发明的一些实施方案。这些实施例不是为了以任何方式进行限制，而仅仅是说明本发明的诺丽果组合物的某些实施方案的益处、优点和治疗效果。实施例1、诺丽果的叶汁在一个实施例中，研究了诺丽果的叶汁对5-LOX和15-LOX、HMG-CoA、PDE3和PDE4、XO和GABA的作用。诺丽果的叶汁以各种浓度的剂量给兔、大鼠、人和牛施用。在兔和人中分别观察到了对5-LOX禾n15-LOX的抑制。在大鼠中观察到了对HMG-CoA还原酶的抑制。在人类中观察到了对PDE的抑制。在牛中观察到了对黄嘌吟氧化酶的抑制，在大鼠中观察到了对GABA的抑制。下面的表对这些研究的结果进行了汇总。表1，实施例1试验动物样品数量抑制％标准偏差HMG-CoA还原酶大鼠210%2925%521%-3脂氧合酶15-LOX兔210%11125%10221%87脂氧合酶5-LOX人类210%10117<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表5<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>表6<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>实施例3在这个接下来的实施例中，诺丽果的叶汁和叶提取物显示出明显抑制第二位最常见类型的人类皮肤癌的生长。在本实施例中，基于活细胞引起阿尔玛蓝(alamarBlue)从无荧光的蓝色到还原的有荧光的红色形式的变化的能力，进行分析以检测细胞增殖的变化。使用从阿尔玛蓝反应获得的结果，可以对细胞增殖进行定量，并可以检测活细胞的代谢活性。测试化合物包括诺丽果的叶提取物、叶汁和烘烤过的叶片，测试了它们对人类表皮样癌细胞系A431增殖的影响，通过连续的10倍稀释液，分析浓度从0.01到100jug/ml或从0.0001%到1%。概括来说，发现了浓度在10到100pg/ml之间的叶提取物以及在0.1%至1」1%之间的叶汁，相对于介质处理的对照来说在肿瘤细胞系中引起了显著的生长抑制(小于生长的50%)，但烘烤过的叶片没有能够显示出明显的效果(0.01-100/xg/ml)。对于同时测试的标准参比药剂丝裂霉素来说，在<10p.M下也观察到了显著的抑制活性。因此，通过非线性回归分析计算了估算的LQo(50。/。抑制浓度)、TGI(总生长抑制)和LC5Q(50%致死浓度)的半定量测定值。下面描述在分析中使用的材料、设备和方法，以及汇总结果的表。测试物质和浓度。诺丽果的叶提取物、叶汁和烘烤的叶片由TahitianNoniInternational,Inc.提供，用于体外抗肿瘤研究。将诺丽果化合物溶解在无菌蒸馏水中，然后用无菌蒸馏水稀释以获得起始工作溶液，叶提取物和烘烤过的叶片为10000、1000、100、10和l/xg/mL叶汁为100、10、1、0.1和0.01%。在测试中，在培养基中进行100倍稀释，获得最终分析浓度，分别为100、10、1、0.1和0.01/xg/ml，以及l、0.1、0.01、0.001禾口0.0001%。细胞系和培养基。肿瘤细胞系A431(人类表皮样癌)从美国典型培养物保藏中心获得(ATCCCRL-1555)，在5%C02的空气气氛下在37°C下培养。使用的培养基含有90%的Dulbecco's修改的Eagle's培养基，10%胎牛血清，并添加1%的抗生素-抗真菌剂。化学物质。在分析中使用了下列化学物质阿尔玛蓝(Biosource,USA)，抗生素-抗真菌剂(GIBCOBRL，USA)，Dulbecco's修改的Eagle's培养基(GIBCOBRL,USA)，胎牛血清(HyClone,USA)，以及丝裂霉素(Kyowa,日本)。皿。在分析中使用了下列设备C02培养箱(FonnaScientificInc.,21USA)，离心机5810R(Eppendorf，德国)，血细胞计数器(HausserScientificHorsham,USA)，倒置显微镜CK-40(Olympus,日本)，系统显微镜E-400(Nikon,日本)，SpectrafiuorPlus(Tecan，澳大利亚)，以及垂直平行流工作台(TsaoHsin，R.O.C)。方法。评估了测试物质的抗增殖性。100pl细胞悬浮液(大约3x103个细胞/孔)的等份试样被放置在96孔微量滴定板中，在5%C02的气氛下在37。C培养。24小时后，分别在每个孔中加入100pl生长培养基和2pl测试溶液、丝裂霉素或介质(蒸馏水)，做两份平行样，继续培养72小时。两种测试化合物，叶提取物和烘烤过的叶片，在100、10、1、0.1和0.01pg/ml的浓度下评估。另一种化合物，叶汁，在l、0.1、0.01、0.001和0.0001%的浓度下评估。培养结束时，在每个孔中加入20pl卯％的阿尔玛蓝试剂，再温育6小时后通过荧光强度检测细胞存活性。使用SpectrafiuorPlus读板器测量荧光强度，激发波长530nm，发射波长590nm。然后测定ICso、TGI禾口LC5o值。IC50(50%抑制浓度)是从0时开始，处理的细胞的数量或质量到实验结束时的增加仅仅为载体对照中相应增加的50%时的测试化合物的浓度。TGI(总生长抑制)是在实验结束时处理的细胞的数量或质量与0时相等时的测试化合物的浓度。LC5。(50%致死浓度)是在实验结束时处理的细胞的数量或质量为0时的一半时的测试化合物的浓度。测量结果通过下面的公式进行计算PG(%)=100x(平均F湖,试-平均F0时)/(平均F对照—平均F0时)如果(平均F艱-平均F一)<0，那么PG(%)-100x(平均F测试-平均Fo吋)/(平均F。时-平均F空白)其中PG二生长百分率；平均F叶产就在细胞暴露于测试物质之前的时刻还原阿尔玛蓝两个测量的荧光强度平均值；平均F*1K=细胞暴露于测试物质72小时后阿尔玛蓝的两个测量的荧光强度平均值；平均F对,^没有测试物质的情况下温育72小时后阿尔玛蓝两个测量的荧光强度平均值；以及平均Fm-在不含细胞的培养基中温育72小时后阿尔玛蓝两个测量的荧光强度的平均值。相对于介质处理的对照来说荧光强度减少50%或以上(20%)表明了显著的细胞生长抑制、细胞抑制或细胞毒性活性，然后通过非线性回归使用GraphPadPrism(GraphPadSoftware,USA)确定半定量的IC50、TGI禾卩LC50。结果。下面的表总结了分析的结果。诺丽果测试物质对A43i皮肤肿瘤细胞生长的影响表7<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>表9测试物质分析名称空白0时介质生长百分率浓度(ttM)1010.10.010.001丝裂霉素皮肤-100010097土035±87士382士3101±5相对于介质处理的对照来说荧光强度减少50%或以上(20%)表明了显著的生长抑制、细胞抑制或细胞毒性活性。用在表7-10中，下面的术语意味着空白双份，在没有细胞的培养基中培养3天的时间后相对于d时的阿尔玛蓝平均荧光强度(被转化和记录为-100%)。0时双份，就在细胞暴露于测试物质之前培养基中阿尔玛蓝的平均荧光强度(转化和记录为0%)。介质双份，在含有细胞并加入介质的培养基中培养3天后相对于d时的阿尔玛蓝平均荧光强度(转化和记录为100%)。Mso(50%抑制浓度)从d时开始处理的细胞数量或质量的增加到实验结束时仅仅为介质对照中相应增加的50%时的测试化合物的浓度。TGI(总生长抑制)在实验结束时处理的细胞的数量或质量与d时相等时的测试化合物的浓度。LC5Q(50%致死浓度)在实验结束时处理的细胞的数量或质量为d时的一半时的测试化合物的浓度。24下面的图表是在用叶提取物、叶汁和烘烤的叶片处理的A431人类肿瘤细胞系中生长抑制的浓度反应曲线。诺丽果测试化合物的IC，TGI和LC竺值表10化合物分析名称aic50bTGIcl一，C叶提取物肿瘤，皮肤76〉100〉100叶汁肿瘤，皮肤0.20%0.36%0.65%烘烤的叶片肿瘤，皮肤〉100〉100〉100丝裂霉素肿瘤，皮肤0.0351.0通过非线性回归分析使用GraphPadPrism(GraphPadSoftware,USA)进行了ICso、TGI和LC5o的半定量确定。概括来说，本发明的某些实施方案提供了使用诺丽叶汁和诺丽叶提取物来抑制HMG-CoA还原酶、PDE3和PDE4、5-LOX和15-LOX、XO、GABA以及第二位最常见的人类皮肤癌细胞系的生长，目的在于缓解疼痛和炎症，治疗前列腺癌，降低胆固醇水平，对抗n型糖尿病，维持脑中细胞相互作用的最高可能性的完整性使得神经功能不被扰乱(即神经保护作用)，缓解哮喘和过敏的效应，提高能量，改善胰岛素的分泌，减少肾结石的积累，减轻痛风的效应，最小化与癫痫和其它抽搐性疾病有关的痉挛，以及为药物成瘾的人提供姑息作用。实施例4此外，来自诺丽果新鲜叶片的压榨汁液被用于通过对腺嘌呤A2A的生物学分析，鉴定了四种生物活性化合物，它们己经被分离并鉴定为具有显著的生物活性。它们的结构已经通过NMR技术和质谱确定，并被鉴定为焦脱镁叶绿酸a、脱镁叶绿酸a、Purpin7和脱镁叶绿酸叶绿醇酯(PheophorbidePhytolester)。上述的生物活性化合物的分离和定性为来自诺丽果植物、特别是植物的叶片的提取物的抗炎和止痛性25质提供了重要的解释。本发明可以体现为其它特定形式而不背离其基本特征的精神。所描述的实施方案在所有方面都应该被认为仅仅是说明性的而不是限制性的。因此，本发明的范围由所附的权利要求而不是前面的说明书指定。落入权利要求的等效性的意义和范围内的所有改变都将包含在其范围之内。2权利要求1.在哺乳动物中治疗炎症的方法，其包括获得诺丽果(Morindacitrifolia)的叶片；溶解并将叶片切成小片；将叶片放置在压碎装置中；压碎叶片；在醇溶液中渗滤叶片碎片；从醇叶浆液中收集醇和所有醇溶性成分；使醇蒸发；留下初级叶提取物；将叶提取物溶解在水中；以及给哺乳动物施用所述稀释的叶提取物，化合物含有有效量的加工过的诺丽果的叶提取物产品，其中所述化合物减轻或阻止炎症和/或疼痛。2.权利要求l的方法，其中所述叶提取物溶解在水中，以将溶液稀释成选自下列的量10，000毫克/毫升，1000毫克/毫升，100毫克/毫升，10毫克/毫升，l毫克/毫升，0.1毫克/毫升，0.001毫克/毫升和0.0001毫克/毫升。3.权利要求l的方法，其中初级叶提取物被巴氏消毒。4.权利要求l的方法，其中初级叶提取物被部分灭菌。5.权利要求l的方法，还包括将初级叶提取物放置在离心机中，以除去任何残留的叶汁和其它物质、包括叶绿素的步骤。6.权利要求l的方法，其中初级叶提取物被进一步分级成选自下列的级份-无水己烷级份；以及水性甲醇级份己烷。7.权利要求6的方法，其中次级级份利用含有二氧化硅的气相色谱产生。8.权利要求6的方法，还包括将次级甲醇级份分成更多的甲醇级份的步骤。9.权利要求6的方法，其中次级己垸级份被进一步分级成更多的己垸级份。10.权利要求1的方法，还包括将叶提取物与诺丽果植物果实的果汁合并以获得叶桨的步骤。11.权利要求2的方法，还包括将初级叶提取物与载体介质在施用前合并的步骤。12.权利要求1的方法，其中环加氧酶-2相对于环加氧酶-1也被选择性抑制。13.权利要求1的方法，其中实现了减轻或阻止炎症和/或疼痛，同时维持了胃粘膜的完整性。14.权利要求1的方法，还包括在施用前将溶解的提取物稀释100倍的步骤。15.促进健康的方法，包括下面的步骤在基于醇的溶液中加入加工过的诺丽果组分；从所述溶液中分离和提取所述加工过的诺丽果组分的活性成分以获得级份；将所述提取的活性成分引入所述哺乳动物，其中所述提取的活性成分减轻或阻止了炎症和/或疼痛。16.权利要求15的方法，其中所述基于醇的溶液主要选自甲醇、乙醇和乙酸乙酯，以及其它基于醇的衍生物。17.权利要求l的方法，其中所述活性成分选自焦脱镁叶绿酸a、脱镁叶绿酸a、Purpin7和脱镁叶绿酸叶绿醇酯。18.在哺乳动物中治疗炎症的方法，包括获得诺丽果叶片；溶解并将叶片切成小片；将叶片放置在压碎装置中；压碎叶片；在压碎时从叶片收集所有物质；将叶汁溶解在水中；以及将所述稀释的叶汁给哺乳动物施用，其中所述化合物减轻或阻止了炎症和/或疼痛。19.权利要求18的方法，其中叶提取物被溶解在水中，以将溶液稀释成选自下列的量毫克/毫升，1000毫克/毫升，100毫克/毫升，10毫克/毫升，l毫克/毫升，0.1毫克/毫升，0.001毫克/毫升和0.0001毫克/毫升。20.权利要求1S的方法，其中叶汁按照选自下面的方法进一步加工巴氏消毒，灭菌和部分灭菌。21.权利要求18的方法，其中叶汁被进一步分级成选自下面的级份4无水己垸级份；以及水性甲醇级份己垸。22.权利要求21的方法，还包括将次级甲醇级份分成更多的甲醇级份的步骤。23.权利要求21的方法，其中次级己垸级份被进一步分级成更多的己烷级份。24.权利要求18的方法，进一步包含将叶汁与诺丽果植物果实的果汁合并以获得叶桨的步骤。25.权利要求1S的方法，还包括将叶汁与载体介质在施用前合并的步骤。26.权利要求18的方法，其中环加氧酶-2相对于环加氧酶-1也被选择性抑制。27.权利要求18的方法，其中实现了减轻或阻止炎症和/或疼痛，同时维持了胃粘膜的完整性。28.权利要求18的方法，还包括在施用前将叶汁稀释100倍的步骤。全文摘要本发明涉及通过给个体施用来自植物诺丽果(Morindacirtrifolia)的各种生物活性化合物而提供各种健康益处的方法和组合物。本发明涉及了使用下面的一种或多种诺丽叶提取物，诺丽叶汁，和/或烘烤的叶片。更具体来说，本发明涉及施用下列一种或多种焦脱镁叶绿酸a、脱镁叶绿酸a、Purpin7和/或脱镁叶绿酸叶绿醇酯，它们都可以来自于诺丽叶提取物、诺丽叶汁和/或烘烤的叶片。此外，上述制剂导致疼痛和炎症的缓解。文档编号A01N65/00GK101489396SQ200780017244公开日2009年7月22日申请日期2007年5月11日优先权日2006年5月12日发明者克劳德·亚拉克·詹森,史蒂芬·斯托里,周炳南,布雷特·J·韦斯特,晨苏,邓世新,阿法·K·帕卢申请人:大溪地诺丽国际公司