专利名称：：一种环境中吡虫啉残留含量的检测方法
技术领域：
：本发明涉及一种环境中吡虫啉的4企测方法，特别是涉及一种通过高效液相色语仪对环境中吡虫啉残留含量的检测方法。
背景技术：
：p比虫啉，无色晶体，有微弱气味，熔点143.8°C(晶体形式l),熔点136.4°C(晶体形式2),是吡啶类超高效杀虫剂，是烟酸乙酰胆碱酯酶受体的作用体，具有广谱、高效、低毒、低残留，并有触杀、胃毒和内吸等多重作用，产品残留期长达25天左右。吡虫啉作为杀虫剂，在我国农作物害虫防治上发挥了重大作用。但随着吡虫啉在农作物上的大量应用，人们对其质量提出了更高的要求，对其在环境中和农产品上的残留问题也曰益重视，目前已开展了吡虫啉的环境行为及其在稻谷、蔬菜、水果、茶叶、烟草等农产品中残留量检测的研究。本发明主要是利用高效液相色谱仪对环境中的吡虫啉残留含量进行检测，简单易行，具有较好的准确度和较高的精确度。
发明内容本发明的目的是利用高效液相色谱仪检测环境样品中的吡虫啉残留含量。为实现上述目的，本发明采取以下设计方案主要分析步骤①标准曲线的绘制配置一系列吡虫啉的标准工作液，浓度依次为0.0、0.4、0.8、1.2、2.0ppm,将液相色谱仪调至以下色谱条件，进行高效液相色语仪分析。吡虫啉标准谱图见附录。检测时色谱条件如下a)色谱柱C18,250mmx4.6mm,粒径5umb)柱温40°Cc)流动相d)流j时间乙腈水0595152575209530595Oml/mine)波长258nmf)进样量20p1②制样取适量样品去除杂物风干，粉碎混匀后备用。振荡法-提取称耳又适量样品于250ml具塞三角^f瓦中，加入lmol/L盐酸3ml和100ml曱醇摇匀，浸泡2-3小时后机械振荡1小时，过滤于500ml分液漏斗，余下部分再加80ml曱醇振荡1小时，过滤。滤液中加入5%NaCl水溶液100ml、石油醚100ml，振摇后静置分层。下层水相力文入另一分液漏斗，石油醚相用50ml5%NaCl水溶液反萃取一次，弃去石油醚液，合并氷溶液，加入40，40,20ml二氯甲烷分三次萃fl,二氯曱烷液用无水石危酸钠脱水，过滤于250ml圆底烧瓶中，滤液在旋转蒸发器上减压浓缩至干。净化取SPE-C18柱，用10ml曱醇预淋脱活，顶干，再用20ml去离子水淋洗，顶干。样品用10ml石油醚和乙酸乙酯混合液(85:15V/V)分3次转入柱内，淋洗液弃去。再用15ml石油醚和乙酸乙酯混合液(30:70V/V)淋洗，收集淋洗液，浓缩至千，用甲醇定容至lml。在上述色谱条件下，吸取已净化的样品溶液20jal,进行高效液相色谱仪分析。③结果计算按以下公式计算试样中吡虫啉的含量<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>式中C样-试样中吡虫啉的含量，单位为毫克每千克Ug/kg);A样-试样中叶匕虫啉的峰面积；A标-标样中吡虫啉的峰面积；C标-标样中吡虫啉的含量，单位为微克每毫升(mg/ml);V-被测液体积，单位为毫升(mL);M-样品质量，单位为克(g)。本发明的优点是采用本发明的方法检测环境中吡虫啉的含量，准确方便、快速有效，相对标准偏差小于10%,4全出限为0.05mg/kg，能够准确的进行定量分析。由此可见，本发明的方法，为环境中吡虫啉含量的检测，提供了一种可靠的便于实施的依据，能够满足研究和生产需要。具体实施例方式实施例1.农作物秸杆中吡虫啉残留量的测定①配置一系列吡虫啉的标准工作液，浓度依次为0.0、0.4、0.8、1.2.2.Oppm,液相色谦仪的条件设定为检测时色谱条件如下a)色谱柱C18,250mmx4.6mm,粒径5umb)柱温40°Cc)流动相时间0152030d)流速1.Oml/min乙腈52555水95759595e)波长258腿f)进样量20m1对标准溶液进4亍高效液相色"i普仪分析，测4寻吡虫啉标准曲线的方程为Y-90296X+1851,线性相关系数R2〉0.999。②取适量风干后的农作物秸杆，去除杂物，粉碎混匀。称取待测样品10.Og置于250ml具塞三角瓶中，加入lmol/L盐酸溶液和100ml曱醇浸泡2-3小时后机械振荡1小时，过滤于500ml分液漏斗中，余下部分再加80ml甲醇振荡1小时，过滤。滤液中加入WNaCl水溶液100ml、石油醚100ml，振摇后静置分层。下层水相放入另一分液漏斗，石油醚用50ml5%NaCl水溶液反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入40,40,20ml二氯甲烷分三次萃取，二氯甲烷液用无7JC琉酸钠脱水，过滤于250ml圆底烧瓶中，滤液在旋转蒸发器上减压浓缩至干，取SPE-C18柱，用10ml曱醇预淋脱活，顶干，再用20ml去离子水淋洗，顶干。样品用10ml石油醚和乙酸乙酯混合液(85:15V/V)分3次转入柱内，林洗液弃去。再用石油醚和乙酸乙酯混合液(30:70V/V)15ml淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml。吸取已净化的样品溶液20ja1,进行高效液相色谱仪分析。以同样的处理方式得到六个平行样品，并对六个平行样品进行高效液相色谱仪分析并计算样品含量，分析结果见表l。由表1知，平行样的相对标准偏差(RSD)为3.27°/。。表1-1秸秆样品重复性测定样品123456平均值RSD%p比虫啉/ppm0.0980.0970.0990.1010.1020.1060.1013.27③方法准确度测定为了进一步验证该法的准确度，对六个平行样品进行0.2ppm的加标回收率的测定，4艮据实际加入量和实测结果，计算样品的加标回收率，试验结杲见表1-2。由表1-2可知，样品的加标回收率在90%-—101%之间。表1-2加标回收率的测定<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>实施例2.土壤中吡虫啉残留含量的测定①配置一系列吡虫啉的标准工作液，浓度依次为0.0、0.4、0.8、1.2、2.0ppm，液相色i脊仪的条件-没定为a)色谱柱C18,250mmx4.6mm，粒径5umb)柱温40°Cc)流动相:乙腈52555时间0152030d)流速1.Oml/mine)波长258nmf)进样量20jal对标准溶液进行高效液相色语仪分析，Y=90344X+1817.1,线性相关系数R2>0.999,水95759595测得吡虫啉标准曲线的方程为②采集后的土壤样品风干去杂物，研磨后过60目筛，充分混匀。称取土样20.Og于250ml具塞三角瓶中，力口入lmol/L盐酸3ml和100ml甲醇摇匀，浸泡2-3小时后机械振荡1小时，过滤于500ml分液漏斗，余下部分再加80ml甲醇振荡1小时，过滤。滤液中加入5。/。NaCl水溶液lOOml、石油醚100ml，振摇后静置分层。下层水相力欠入另一分液漏斗，石油醚相用50ml5%NaCl水溶液反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，力口入40,40,20ml二氯曱烷分三次萃:f又，二氯曱烷液用无水石克酸钠脱水，过滤于250ml圆底烧瓶中，滤液在旋转蒸发器上减压浓缩至干，取SPE-C18柱，用10ml甲醇预淋脱活，顶干，再用20ml去离子水淋洗，顶干。样品用10ml石油醚和乙酸乙酯混合液(85:15V/V)分3次转入柱内，淋洗液弃去。再用15ral石油醚和乙酸乙酯混合液(30:70V/V)淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至lml。吸取已净化的样品溶液20ju1,用高效液相色谦仪分析。以同样的处理方式得到六个平行样品，并对六个平行样品进4亍高效液相色语仪分析，分析结果见表2-1。由表2-l知，平行样的相对标准偏差(RSD)为3.33%。表2-1土壤样品重复性测定<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>③方法准确度测定为了进一步验证该法的准确度，对六个平行样品进行0.2卯m的加标回收率的测定，根据实际加入量和实测结果，计算样品的加标回收率，试-验结果见表2-2。由表2-2可知，^f品的加标回收率在91%-—画之间。表2-2加标回收率的测定样品样品测定值,ppm力口标后样品测定值，ppm力口入标准量,ppm回收率，％10.1590.3490,20095.020.1550.3400.20092.530.1580.3480.20095.040.1610.3430.20091.050.1510.3320.20090.560.1530.3530.200100.0显而易见，本领域的普通技术人员，可以用本发明的液相色镨法对环境样品中吡虫啉的残留含量进行检测。上述实施例仅供说明本发明之用，而并非是对本发明的限制，有关环境领域的普通技术人员，在不脱离本发明范围的情况下，还可以作出各种变化和变型，因此所有等同的技术方案也应属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由各权利要求限定。附图为吡虫啉标准图语。1权利要求1.一种环境中吡虫啉残留含量的检测方法，其特征在于，所述测定方法包括如下步骤①标准曲线的绘制配置一系列吡虫啉的标准工作液，浓度依次为0.0、0.4、0.8、1.2、2.0ppm，进行高效液相色谱仪分析。吡虫啉标准谱图见附录。检测时色谱条件如下a)色谱柱C18，250mm×4.6mm，粒径5umb)柱温40℃c)流动相时间乙腈水05951525752059530595d)流速1.0ml/mine)波长258nmf)进样量20μl②样品的处理与测定制样取适量样品去除杂物风干，粉碎混匀后备用。振荡法提取称取适量样品置于250ml具塞三角瓶中，加入1mol/L盐酸3ml和100ml甲醇摇匀，浸泡2-3小时后机械振荡1小时，过滤于500ml分液漏斗，余下部分再加80ml甲醇振荡1小时，过滤。滤液中加入浓度为5％的NaCl水溶液100ml、石油醚100ml，振摇后静置分层。下层水相放入另一分液漏斗，石油醚相用50ml浓度为5％的NaCl水溶液反萃取一次，弃去石油醚液，合并水溶液，加入40，40，20ml二氯甲烷分三次萃取，二氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，过滤于250ml圆底烧瓶中，滤液在旋转蒸发器上减压浓缩至干。净化取SPE-C18柱，用10ml甲醇预淋脱活，顶干，再用20ml去离子水淋洗，顶干。将减压浓缩后的样品用10ml石油醚和乙酸乙酯混合液(85∶15V/V)分3次转入柱内，淋洗液弃去。再用石油醚和乙酸乙酯混合液(30∶70V/V)15ml淋洗，收集淋洗液，浓缩至干，用甲醇定容至1ml。在上述色谱条件下，吸取已净化的样品溶液20μl，进行高效液相色谱仪分析。③结果计算按以下公式计算试样中吡虫啉的含量式中C样-试样中吡虫啉的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；A样-试样中吡虫啉的峰面积；A标-标样中吡虫啉的峰面积；C标-标样中吡虫啉的含量，单位为微克每毫升(μg/ml)；V-被测液体积，单位为毫升(mL)；M-样品质量，单位为克(g)。2.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于采用的溶剂为甲醇、石油醚、二氯曱烷、乙酸乙酯、乙腈，或者采用上述两种或多种溶剂的混合物。3.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于对样品进行浸泡的时间为2-3小时。4.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于样品浸泡后机械振荡1小时。5.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于检测器对吡虫啉的最大吸收波长为258nm。6.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于有机流动相的比例设定为5%--25%,无才几流动相的比例设定为75%—95%。7.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于流动相流速i殳定为1.Oml/min。8.根据权利要求1所述的一种环境中吡虫啉的检测方法，其特征在于色谱柱温度设定为40°C。全文摘要本发明涉及一种通过高效液相色谱仪对环境中的吡虫啉残留含量进行检测的方法。采用有机溶剂对待测样品进行提取，提取液经净化、浓缩、定容后用高效液相色谱仪/紫外检测器测定。采用本发明的方法检测环境中吡虫啉的残留含量，快速有效，测定的相对标准偏差小于10％，检出限为0.05mg/kg，由此可见，本发明的方法，为环境中吡虫啉残留量的检测，提供了一种可靠的便于实施的方法，能够满足研究和生产中的需要。文档编号A01N51/00GK101539547SQ20091007726公开日2009年9月23日申请日期2009年1月21日优先权日2009年1月21日发明者薇宋申请人:谱尼测试科技(北京)有限公司