Em原露及其生产方法

专利名称：Em原露及其生产方法
技术领域：
本发明涉及微生物制剂领域，尤其涉及一种用于农业生产、环保、水产等 领域的复合微生物制剂及其生产方法。
背景技术：
随着科学技术的进步和人们生活水平的提高，追求纯天然绿色无污染的健
康食品已成为一种时尚，但由于农药、化肥、抗生素、生长激素的大量使用， 使得农业生态环境恶化，严重影响农产品品质。EM是"有效微生物"(Efective Microorganisms)的英文縮写，是一种新型复合微生物制剂，通过使各种具有 不同性质和作用的厌氧菌和好氧菌等有益微生物(主要是乳酸菌类、光合细菌、 酵母菌类等)有机组合，以活性状态共存于一体，使得EM原露具有造就良性生 态的能力。具体表现为在种植业方面，促进植物叶片的光合作用，分解有机 质，改良土壤使之松软透气，抑制有害微生物生长繁殖，促进根系对养分的吸 收利用，提高农产品品质，增产增收；在畜牧养殖业方面，EM原露能有效提高 饲料转化率，促进动物生长发育，提高动物的免疫抗病能力。
目前，市场上的EM技术类产品，其生产工艺简单、粗放，生产效率低下， 易污染杂菌，使用的培养基营养成分不均衡，使得EM菌种无法正常均衡生长繁 殖，从而影响产品的质量及其使用效果。

发明内容
本发明的目的在于提供一种培养基营养成分全面、活菌数量高的EM原露。 本发明的另一 目的是提供该EM原露的生产方法。
本发明通过优化培养基，将好氧菌和兼性厌氧菌分别接入培养基进行好氧 发酵和兼性厌氧发酵后，再混合均匀后接入培养基进行厌氧发酵，使EM菌种均
4衡生产繁殖。
本发明的技术方案如下
本发明好氧菌种发酵的培养基包含以下重量配比的原料磷酸氢二钾0.1
—0.4份、磷酸二氢钾O. l—0.4份、糖蜜40—80份、麦根浸出液4一8份、硼 酸1一4份、钼酸铵0.03—0. l份、硫酸亚铁10—15份、硫酸锰0.8—1.8份、 硫酸铜0.2—0.8份，硫酸锌1.0—2.0份、水600—700份；
兼性厌氧菌种发酵的培养基包含以下重量配比的原料磷酸氢二钾0.1 — 0.4份、磷酸二氢钾O. l—0.4份、糖蜜40—80份、麦根浸出液4一8份、硼酸 l一4份、钼酸铵0.03—0. l份、硫酸亚铁10—15份、硫酸锰0.8 — 1.8份、硫 酸铜O. 2—0.8份，硫酸锌1.0—2.0份、水600—700份；
好氧菌种与兼性厌氧菌种混合后厌氧发酵的培养基包含以下重量配比的原 料麦根浸出液160—240份、黄腐酸液2—6份、糖蜜72—80份、过滤水3600 —4000份。
所述好氧菌种包括酵母菌群。
所述兼性厌氧菌种包括乳酸菌群(嗜酸乳杆菌、醋酸乳杆菌等)、光合菌群。 本发明的制备方法是
① 好氧发酵将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、糖蜜、麦根浸出液、硼酸、钼
酸铵、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜、硫酸锌和水装入发酵罐中，高温灭菌后，
将温度降到35。C以下，加入好氧菌种，混合搅拌30—40分钟；
将气体经过空气过滤系统后，从发酵罐底部均匀供气，使发酵液轻微流转， 将温度控制在30t—40。C，发酵33—40小时；
② 兼性厌氧发酵将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、糖蜜、麦根浸出液、硼酸、 钼酸铵、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜、硫酸锌和水装入发酵罐中，高温灭菌后， 将温度降到35。C以下，加入兼性厌氧菌种，混合搅拌30—40分钟，将温度控制在25nC — 35°C ，密闭发酵33 — 40小时；
③厌氧发酵将麦根浸出液、黄腐酸、糖蜜和过滤水装入发酵罐中，调节
糖度至8%—12%,再加入食用小苏打(NaHC03)调节PH值至7. 1—7. 5，搅拌均 匀后开始加热，将温度控制在85t—95t，维持28—35分钟，灭菌后将温度降 到40°C以下，用已灭菌的管道及泵体在无菌状态下泵入上述好氧发酵培养基、 兼性厌氧发酵培养基，再加入醋酸乳酸菌种，混合搅拌28—35分钟，温度控制 在35。C一42t，将发酵罐中大气压抽负压至0.1—0.2个大气压，厌氧发酵3—4 天后即得成品。
所述步骤③中醋酸乳酸菌种的重量配比是180—220份。 本发明的有益效果是 一、培养基养分全面，能满足EM菌生长过程中对养 分的需求；对发酵罐进行抽真空处理，达到严格厌氧发酵目的，加入麦根浸出 液作助酵剂，加入黄腐酸保护了好氧菌、兼性厌氧菌在严格厌氧条件下更好的 存活，成品中活菌总数量可以达到106数量级以上。二、成品中培养基残糖含量 在2%左右，PH值在3. 5左右，所有细菌处于自我抑制状态，产品保存期长达20 个月，没有"胀气"现象。
具体实施方式
实施例一
EM原露中好氧菌种发酵的培养基包含以下原料磷酸氢二钾250g、磷酸二 氢钾250g、糖蜜60kg、麦根浸出液6kg、硼酸2kg、钼酸铵50g、硫酸亚铁12kg、 硫酸锰1. 2kg、硫酸铜400g、硫酸锌500g和水600kg;
兼性厌氧菌种发酵的培养基包含以下原料磷酸氢二钾250g、磷酸二氢钾 250g、糖蜜60kg、麦根浸出液6kg、硼酸2kg、钼酸铵50g、硫酸亚铁12kg、硫 酸锰1. 2kg、硫酸铜400g、硫酸锌500g和水600kg;
好氧菌种与兼性厌氧菌种混合后厌氧发酵的培养基包含以下原料麦根浸出液200kg、黄腐酸4kg、糖蜜76kg、过滤水3800 kg。
① 将磷酸氢二钾250g、磷酸二氢钾250g、糖蜜60kg、麦根浸出液6kg、硼 酸2kg、钼酸铵50g、硫酸亚铁12kg、硫酸锰1. 2kg、硫酸铜400g、硫酸锌500g 和水600kg装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35。C以下，加入好氧菌种， 混合搅拌30分钟；
将气体经过空气过滤系统后，从发酵罐底部均匀供气，使发酵液轻微流转， 将温度控制在35t，发酵36小时；
② 将磷酸氢二钾250g、磷酸二氢钾250g、糖蜜60kg、麦根浸出液6kg、硼 酸2kg、钼酸铵50g、硫酸亚铁12kg、硫酸锰1. 2kg、硫酸铜400g、硫酸锌500g 和水600kg装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35flC以下，加入兼性厌氧 菌种，混合搅拌30分钟，将温度控制在30，密闭发酵36小时；
③ 将麦根浸出液200kg、黄腐酸4kg、糖蜜76kg、过滤水3800 kg装入发酵 罐中，调节糖度至10%，再加入食用小苏打(NaHC03)调节PH值至7.3，搅拌均 匀后开始加热，将温度控制在90°C，维持30分钟，灭菌后将温度降到40°C以下， 用已灭菌的管道及泵体在无菌状态下泵入上述好氧发酵培养基、兼性厌氧发酵 培养基，再加入醋酸乳酸菌种200kg，混合搅拌30分钟，温度控制在38t，将 发酵罐中大气压抽负压至0. 1个大气压，厌氧发酵3天后即得成品。
将实施例一所得成品交江西省饲料质量监督检验站检测，其检测结果如下
1、 PH检测结果为2.8; 2、嗜酸乳酸杆菌6X10e个/ml;
实施例二
EM原露中好氧菌种发酵的培养基包含以下原料磷酸氢二钾100g、磷酸二 氢钾100g、糖蜜40kg、麦根浸出液40kg、硼酸lkg、钼酸铵30g、硫酸亚铁10kg、 硫酸锰800g、硫酸铜200g，硫酸锌lkg和水600kg;
兼性厌氧菌种发酵的培养基包含以下原料磷酸氢二钾100g、磷酸二氢钾
7lOOg、糖蜜40kg、麦根浸出液40kg、硼酸lkg、钼酸铵30g、硫酸亚铁10kg、硫酸锰800g、硫酸铜200g，硫酸锌lkg和水600kg;
好氧菌种与兼性厌氧菌种混合后厌氧发酵的培养基包含以下重量配比的原料麦根浸出液160kg、黄腐酸液2kg、糖蜜72kg、过滤水3600kg。
① 将磷酸氢二钾100g、磷酸二氢钾100g、糖蜜40kg、麦根浸出液40kg、硼酸lkg、钼酸铵30g、硫酸亚铁10kg、硫酸锰800g、硫酸铜200g，硫酸锌lkg和水600kg装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35t以下，加入好氧菌种，混合搅拌30分钟；
将气体经过空气过滤系统后，从发酵罐底部均匀供气，使发酵液轻微流转，将温度控制在30t，发酵33小时；
② 磷酸氢二钾100g、磷酸二氢钾100g、糖蜜40kg、麦根浸出液40kg、硼酸lkg、钼酸铵30g、硫酸亚铁10kg、硫酸锰800g、硫酸铜200g，硫酸锌lkg和水600kg装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35t以下，加入兼性厌氧菌种，混合搅拌30分钟，将温度控制在25t，密闭发酵33小时；
③ 将麦根浸出液160kg、黄腐酸2kg、糖蜜72kg和过滤水3600kg装入发酵罐中，调节糖度至8%,再加入食用小苏打(NaHC03)调节PH值至7. 1，搅拌均匀后开始加热，将温度控制在S5。C，维持28分钟，灭菌后将温度降到40°C以下，用已灭菌的管道及泵体在无菌状态下泵入上述好氧发酵培养基、兼性厌氧发酵培养基，再加入醋酸乳酸菌种180kg，混合搅拌28分钟，温度控制在35°C，将发酵罐中大气压抽负压至0. 2个大气压，厌氧发酵3天后即得成品。
实施例三
EM原露中好氧菌种发酵的培养基包含以下原料磷酸氢二钾400g、磷酸二氢钾400g、糖蜜80kg、麦根浸出液8kg、硼酸4kg、钼酸铵100g、硫酸亚铁15kg、硫酸锰1.8kg、硫酸铜800g，硫酸锌2kg和水700kg;兼性厌氧菌种发酵的培养基包含以下原料磷酸氢二钾400g、磷酸二氢钾
400g、糖蜜80kg、麦根浸出液8kg、硼酸4kg、钼酸铵100g、硫酸亚铁15kg、硫酸锰1. 8kg、硫酸铜800g，硫酸锌2kg和水700kg;
好氧菌种与兼性厌氧菌种混合后厌氧发酵的培养基包含以下原料麦根浸
出液240kg、黄腐酸液6kg、糖蜜80kg、过滤水4000kg。
① 将磷酸氢二钾400g、磷酸二氢钾400g、糖蜜80kg、麦根浸出液8kg、硼酸4kg、钼酸铵100g、硫酸亚铁15kg、硫酸锰1. 8kg、硫酸铜800g，硫酸锌2kg和水700kg装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35"C以下，加入好氧菌种，混合搅拌40分钟；
将气体经过空气过滤系统后，从发酵罐底部均匀供气，使发酵液轻微流转，将温度控制在40。C，发酵40小时；
② 将磷酸氢二钾400g、磷酸二氢钾400g、糖蜜80kg、麦根浸出液8kg、硼酸4kg、钼酸铵100g、硫酸亚铁15kg、硫酸锰1.8kg、硫酸铜800g，硫酸锌2kg和水700kg装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35。C以下，加入兼性厌氧菌种，混合搅拌40分钟，将温度控制在35。C，密闭发酵40小时；
③ 将麦根浸出液240kg、黄腐酸6kg、糖蜜80kg、过滤水4000kg装入发酵罐中，调节糖度至12%，再加入食用小苏打(NaHC03)调节ra值至7.5，搅拌均匀后开始加热，将温度控制在95QC,维持35分钟，灭菌后将温度降到40°C以下，用己灭菌的管道及泵体在无菌状态下泵入上述好氧发酵培养基、兼性厌氧发酵培养基，再加入醋酸乳酸菌种220kg，混合搅拌35分钟，温度控制在42t，将发酵罐中大气压抽负压至0. 1个大气压，厌氧发酵4天后即得成品。
试验实施例一EM原露在肉鸡养殖上的使用方法及功效
一、使用方法概述
1、 EM原露发酵词料替代全价料的5X—15X。2 、 EM原露发酵液300—500倍饮水。
二、 具体全程使用发酵饲料的用法与用量
A、 l一20天肉鸡发酵饲料配料方法及使用方法
先用50%玉米+50%麸皮作为发酵基料，用EM原露100倍发酵。发酵成功后从肉鸡开始进食起，用发酵料代替全价料5%饲喂。发酵料可与全价料搅拌饲喂也可撒拌在全价料上饲喂。
B、 20天后肉鸡发酵饲料配料方法及使用方法
先用50%玉米+50%麸皮作为发酵基料，用EM原露500倍发酵。发酵成功后用发酵料代替全价料的10%饲喂，可增至15%。
C、 用药期间发酵料照常饲喂。
三、 EM发酵液饮水全程使用的用法与用量
A、 1一20天饮水流程
肉食鸡第一天建议300倍饮水一天，第二天一一第五天正常用兽药期间，用药前后相隔三小时可正常用EM发酵液300倍饮水.第六天后300倍全天饮水.发现病情正常用药，暂停EM饮水，发酵料不停.用药后三小时继续300倍饮水。
B、 20天后按500倍发酵液饮水，每天保证饮水8小时。
C、 EM原露发酵液饮水注意事项
不能与抗生素药同时饮水使用，如用抗生素药需前后相隔三个小时；如用其它药可与EM发酵液饮水同时使用，并且能增加药效。
D、 定期用100倍EM原露发酵液喷洒鸡舍(每次垫沙必须喷洒一遍)
四、 功效
在同种鸡苗，同种饲料，同样管理的情况下，用EM原露饲喂和不用EM原露饲喂的肉鸡对比如下1、 对比，用了EM原露五天后的鸡，鸡冠明显发红，皮毛明显光亮.蹄爪
红润.粪便为成形的青灰色，表面有少量白色尿酸盐，并且鸡舍氨气味明显下降。
2、 对比，全程用了 EM原露饲喂的肉鸡成活率上升8%以上，料肉比下降10-20%，并且每斤饲料可降低料价0.02--0.03元，可提前3天以上出栏。
3、对比，全程用了 EM原露饲喂的肉鸡肠胃道、呼吸道、球虫药的药费投入根据养殖户的管理水平差异可下降30%--80%，明显减少兽药的使用。试验实施例二 EM原露在羔羊腹泻中的应用效果在预防和治疗羔羊腹泻的试验和生产中采取了以下措施
(一)利用EM原露发酵料预防羔羊腹泻
1. 在冬季农闲的时间，建造水泥发酵窑或利用大水缸，制作EM原露发酵料。具体方法是按粗饲料量的0. 1%称取EM原露和红糖(EM原露与红糖等量)，配制EM原露和红糖各100倍的混合稀释液，然后将其洒于铡碎的粗饲料(长0. 5-1厘米)上，边喷边搅拌，待手捏拌料滴1-2滴水为止(最终含水量为30%-50%)，然后将拌料置于水泥窑或水缸中，踩压实，窑、缸口上用塑料薄膜密封，再覆以20厘米厚的泥土、压紧实，在厌氧的条件下发酵10-15天。当闻有酒曲
甜香味时启用。
2. 饲喂方法每天晚上收牧后与饲料混合喂于羊只；小羔羊可随时采食EM原露发酵料，促使小羔羊尽快建立起正常的肠道菌群，适应新的环境。成年母羊采食EM原露发酵料后，奶水充足，能充分保证哺乳之需，减少腹泻的发生。
(二)应用EM原露治疗羔羊腹泻
对发生腹泻的羔羊要单独隔离开，每日灌服EM原露2次，每次10毫升，连用4天；对腹泻特别严重的需配合灌服口服补液盐，补充体液。
据我们的实际应用结果，只要饲喂EM原露发酵料或灌服EM原露，很少发生腹泻或很快止住腹泻，羔羊因腹泻所致的死亡率大幅度降低。试验实施例三EM原露在水稻上应用效果试验1材料与方法
l.l供试材料EM原露；水稻品种辽粳9号、辽优7号。
1.2试验处理利用EM原露对辽粳9、辽优7进行种子浸种、苗期泼洒、本田喷雾处理。处理面积每个品种各0. 2 hm2，另设空白对照，两品种面积与处理相同。大区试验,未设重复。
1. 3配方及使用方法EM原露必须配成稀释液方可使用，配方为EM原露+食用红糖，比例为1: 1，然后用10倍清水稀释,放置20 24 h。发酵后，在使用时兑水100倍，泼洒在苗床上，本田插秧前后泼撒于田间，分蘖盛期后喷雾于叶片上。
1.4试验方法
种子处理:每千克种子用5 g原露+5 g红糖配成原液，兌水1 000 g，浸种8 d。
苗期至插前处理:在秧苗2. 5叶期用125 gEM原液兑水100倍，将稀释液泼撒在一床(22. 5 m2)面上;秧苗4叶期时再处理1次。耙地后插秧前用700 g/667m2EM原露兑水70 kg/667 m2泼撒田间。
本田处理:在同一田块内，同一水稻品种分别在6月15日、6月22日、7月27日和8月28日进行4次处理;每次各用100 gEM原液兑水lOkg，喷雾于水稻叶面上，处理区未用其他药剂防病虫。对照区用稻丰灵、DT、稻瘟灵、敌敌畏+氧化乐果防治病虫害。
施肥处理:EM原露处理底施复合肥20 kg/667 m2;追施尿素20 kg/667 m2、硫铵5 kg/667 m2。对照底施复合肥25 kg/667 m2;追施尿素25 kg/667 m2、硫铵6 kg/667 m2。其它管理相同。
2调査与考种
苗期于5月20日(插前1 d)每个处理各取有代表性的4点混合，调査共计400株，得平均值。本田每个处理各定4点，每点定10穴，每5 d调査1次分蘖增长情况。9月末在田间每点调查10株的株高、穗数后，每点取平均一株进行考种，计算产量结果。3结果与分析
(1) 由试验数据可以看出用EM原露处理种子和秧苗，使苗高、根长，苗鲜重、苗干重比对照都有所增加，尤其是百株干重，比对照增加1. 05 g，提高了秧苗素质，达到了壮秧标准。
(2) 由试验数据可以看出本田应用EM原露，使水稻返青快,始蘖期提前，分蘖速度加快，分蘖茎数明显增加，增强了水稻的分蘖能力。且使水稻出穗期提前2d，成熟期提前2 3 d，生育期縮短2 4 d。
(3) 由试验数据可以看出:应用EM原露使水稻株高有所降低，茎秆粗壮，增加了抗倒性能。虽比对照减少20%化肥施用量，但穗数并没有减少，分蘖能力的提高,保证了单位面积有效穗数。穗长、穗粒数接近或相等，千粒重增加0. 3 0. 7 g，出糙率增加,腹白率减少，提高了稻米的质量。
(4) 使用EM原露处理，辽粳9比对照增产3. 36%，辽优7比对照增产2. 66%。提高了水稻产量，且使纯效益有所增加。
(5) 经田间调查，EM原露处理田地虽然没有使用防病虫药剂，但仍没有病虫害现象发生。说明使用EM处理使水稻增强了抗病虫能力。
4结论实践证明:EM原露应用于水稻能提高产量，增强水稻抗性，减少化肥、农药的污染，提高稻米的米质。逐年减少化肥、农药的使用，从长远看能使土壤有机质和活性菌类等微生物增加，改善土壤肥力，尽快达到绿色用地标准，是一种很有前途的农用生物制剂。
1权利要求
1、EM原露，其特征在于好氧菌种发酵的培养基包含以下重量配比的原料磷酸氢二钾0.1-0.4份、磷酸二氢钾0.1-0.4份、糖蜜40-80份、麦根浸出液4-8份、硼酸1-4份、钼酸铵0.03-0.1份、硫酸亚铁10-15份、硫酸锰0.8-1.8份、硫酸铜0.2-0.8份，硫酸锌1.0-2.0份、水600-700份；兼性厌氧菌种发酵的培养基包含以下重量配比的原料磷酸氢二钾0.1-0.4份、磷酸二氢钾0.1-0.4份、糖蜜40-80份、麦根浸出液4-8份、硼酸1-4份、钼酸铵0.03-0.1份、硫酸亚铁10-15份、硫酸锰0.8-1.8份、硫酸铜0.2-0.8份，硫酸锌1.0-2.0份、水600-700份；好氧菌种与兼性厌氧菌种混合后厌氧发酵的培养基包含以下重量配比的原料麦根浸出液160-240份、黄腐酸液2-6份、糖蜜72-80份、过滤水3600-4000份。
2、 根据权利要求1所述的EM原露，其特征在于所述好氧菌种包括酵母 菌群。
3、 根据权利要求1所述的EM原露，其特征在于所述兼性厌氧菌种包括 乳酸菌群、光合菌群。
4、 根据权利要求1所述的EM原露的制备方法其特征在于① 好氧发酵将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、糖蜜、麦根浸出液、硼酸、钼 酸铵、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜、硫酸锌和水装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35。C以下，加入好氧菌种，混合搅拌30—40分钟；将气体经过空气过滤系统后，从发酵罐底部均匀供气，使发酵液轻微流转，将温度控制在30°C—40°C，发酵33—40小时；② 兼性厌氧发酵将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、糖蜜、麦根浸出液、硼酸、钼酸铵、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸铜、硫酸锌和水装入发酵罐中，高温灭菌后，将温度降到35t以下，加入兼性厌氧菌种，混合搅拌30—40分钟，将温度控制 在25。C一35。C，密闭发酵33—40小时；③厌氧发酵将麦根浸出液、黄腐酸、糖蜜和过滤水装入发酵罐中，调节 糖度至8%—12%，再加入食用小苏打(NaHC03)调节PH值至7. 1—7. 5，搅拌均 匀后开始加热，将温度控制在85°C—95flC，维持28—35分钟，灭菌后将温度降 到40QC以下，用已灭菌的管道及泵体在无菌状态下泵入上述好氧发酵培养基、 兼性厌氧发酵培养基，再加入醋酸乳酸菌种，混合搅拌28—35分钟，温度控制 在35。C一42。C，将发酵罐中大气压抽负压至0. l—O. 2个大气压，厌氧发酵3—4 天后即得成品。
5、根据权利要求1所述的EM原露的制备方法，其特征在于所述步骤③ 中醋酸乳酸菌种的重量配比是180 — 220份。
全文摘要
EM原露及其生产方法，属于微生物制剂领域，本发明通过优化培养基，将好氧菌和兼性厌氧菌分别接入培养基进行好氧发酵和兼性厌氧发酵后，再混合均匀后接入培养基进行厌氧发酵，使EM菌种均衡生产繁殖。本发明的有益效果是培养基养分全面，成品中活菌总数量可以达到10⁶数量级以上；成品中所有细菌处于自我抑制状态，产品保存期长达20个月，没有“胀气”现象。
文档编号A01N63/02GK101591631SQ200910115498
公开日2009年12月2日 申请日期2009年6月8日 优先权日2009年6月8日
发明者刘晓宇 申请人:江西省天意生物技术开发有限公司