专利名称：一种节能减排的九孔鲍育苗方法
技术领域：
本发明属于水产养殖贝类育苗方法领域，特别涉及一种能够促进九孔鲍(Haliotis diversicolor aquatilis)鲍苗生长的新型、节水节能、绿色环保的育苗方法。
背景技术：
鲍为我国的八大海珍之一，具有很高的经济和药用价值。我国的鲍养殖于20世 纪70年代开始起步，到80年代中期已形成规模化生产，此后更是发展迅猛，沿海各地的 养鲍业都形成了较大的规模。然而随着环境污染的加剧、养殖规模的扩大和集约化程度 的提高，鲍苗的病害也相继发生，并且有逐年加重的趋势，已经对我国养鲍业的发展构 成严重威胁。尤其是九孔鲍鲍苗，从2000年开始，各养殖场相继出现九孔鲍苗大规模掉 板的现象，病害问题频繁，严重影响了鲍养殖生产，致使许多养殖户放弃养殖九孔鲍。病原体感染是引起九孔鲍掉板的主要原因，人工养殖条件下主要是细菌性疾病 和病毒性疾病。常见的细菌性病原体有副溶血弧菌、河流弧菌、副溶藻弧菌等。副溶 血弧菌主要导致鲍鱼肌肉萎缩病，死亡率可达50%左右，而河流弧菌和副溶藻弧菌引发 的感染可造成60 70%的死亡率。目前常规的防治鲍鱼掉板的方法主要是定期施用抗 生素，抗生素的优点是药物直接入水、浓度高、吸收快、疗效好；缺点是可能会对鲍鱼 产生刺激性、引发新病症。如果长期大量使用抗生素不仅会使致病菌抗药性增强，也会 使一些鲍病例变得难以治愈。此外鲍体内抗生素残留会影响鲍鱼品质，不利于销售，进 而造成养殖者的经济损失。中草药防治鲍鱼掉板也是一种常见的办法，虽具有无药物残 留、经济效益高的优点，但也有见效慢的缺点，因而寻求一种更高效、经济的育苗方法 显得极为迫切。蛭弧菌是寄生于其他细菌，并能导致宿主细菌裂解的一类细菌；比一般细菌 小，能通过细菌滤器，有类似噬菌体的作用；革兰氏染色呈阴性，可以裂解包括副溶血 弧菌、溶藻弧菌等引发鲍病害的潜在致病菌。用蛭弧菌游泳体和蛭质体的混合制剂作为 九孔鲍育苗的微生物制剂，兼具游泳体起效快，活力强和蛭质体制备、保存容易，杀菌 作用时间更久和环境耐受力更强的优点。这些特性使得蛭弧菌混合制剂适合作为一种微 生物制剂，以应用于九孔鲍的育苗过程中。另外，本发明中育苗技术采用的是周期换 水，如此不仅减少养殖用水量和废水排放，更是减少能耗，降低了养殖成本。因此，该 方法是一种便利可行、绿色、低碳、节能环保的育苗方法。已有的研究表明，作为一种有益微生物制剂，无论是在食品工业还是在(海洋) 水产养殖等领域，蛭弧菌的应用均是安全的。例如在国外，Lenz and Hespell(1978) 研究发现，蛭弧菌及对动物及人的细胞不具侵染性[Lenz R.W., Hespell R.B.Attempts to grow bedellovibrios micurgically-injected into animal cells.Archives of Microbiology, 1978, 119(3) 245-248]。在国内，林茂等(2006)研究了蛭弧菌对鱼类细胞的作用，发现它对 鱼类细菌没有侵染作用[林茂，杨先乐，薛晖，曹海鹏，邱军强。蛭弧菌BDH2102对鱼 类细胞及病原菌的作用。微生物学通报，2006，33(1) 7-11]。
发明内容
为克服上述现有育苗技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种节能减排 的九孔鲍育苗方法。本发明的目的通过下述技术方案来实现一种节能减排的九孔鲍育苗方法，包 括以下操作步骤(1)培藻采苗前30 45天开始在培藻池中进行培藻；培藻过程中控制光照强 度在2000 50001ux，控制水温在15 28°C ；(2)加营养盐培藻期间，按照3 5g/m3养殖水体，2 4天添加一次的方式 添加营养盐；(3)采苗布卵将培藻池换掉池水，加入蛭弧菌混合制剂，使池水中的蛭弧菌 混合制剂的起始浓度达10 IO7PfuAnL;下苗时每池布九孔鲍受精卵4 5万粒，并按照 曝气量10 60L/h/m3进行曝气，光照控制在200 30001ux，水温控制在15 28°C ；(4)换水每隔5 30天换水一次，每次换水后加入蛭弧菌混合制剂，使池水 中的蛭弧菌混合制剂浓度达到10 107pfu/mL ；(5)剥离采收下苗30 50天，稚鲍壳长达到3.0 7.0mm后进行剥离采收。步骤(1)所述培藻池洗刷干净后采用高锰酸钾溶液进行消毒，然后注入经过砂 滤和沉淀处理的海水；培藻池在注入海水之前，在池进水管口包扎一过滤袋，防止细沙 入池。步骤(1)所述藻为底栖硅藻；所述底栖硅藻优选为月形藻、菱形藻、舟形藻和 卵形藻。步骤⑴所述培藻以无色透明聚乙烯薄膜为附着基。步骤(2)所述营养盐含有质量比为5 1 1 1的N元素、P元素、Si元素 禾口 Fe元素。步骤(3)和⑷所述蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05,所述蛭弧菌于 2009年8月7日保藏于湖北省武汉市珞珈山武汉大学内的中国典型培养物保藏中心，保藏 编号为 CCTCC NO: M 209172。所述蛭弧菌BDFM05进行负染后于电子显微镜下进行形态观察BDFM05呈 单细胞，椭圆形，大小为1.43X0.53um，端生鞭毛，鞭毛长度至少2um ；所述蛭弧菌 BDFM05以双层平板法于28°C培养三天可形成直径2 3mm的透明圆形噬菌斑；步骤(3)和(4)所述蛭弧菌混合制剂为蛭弧菌游泳体菌液和蛭弧菌蛭质体菌液按 细菌个数1 1混合而成。所述蛭弧菌蛭质体菌液按照以下方法制备得到接种宿主于营养肉汤液体培养 基中，在35°C和200rpm摇床培养12h，培养液经4°C，5000 8000rpm离心10 20min 后，沉淀加入至DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，在温度25 35°C下，以 150 300rpm摇床培养36 48h，得到含蛭弧菌蛭质体和蛭弧菌游泳体的培养液，培养 液在4°C温度下以6000 8000rpm离心15 20min后，去除含蛭弧菌游泳体的上清， 得到的沉淀即为蛭弧菌蛭质体；将蛭弧菌蛭质体用DNB液体培养基、水、生理盐水或 0.2mol/L pH值为7.2 7.6的磷酸盐缓冲液悬浮，得到浓度为IO6 109pfo/mL的蛭弧菌蛭质体菌液；所述蛭弧菌游泳体菌液按照以下方法制备得到将蛭弧菌蛭质体制备方法中的 含蛭弧菌游泳体的上清经16000 18000rpm离心15 20min后，沉淀用DNB液体培养 基、水、生理盐水或0.2mol/LpH值为7.2 7.6的磷酸盐缓冲液悬浮，得到浓度为IO6 109pfU/mL的蛭弧菌游泳体菌液。所述宿主为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)；所述DNB液体培养基是将 营养肉汤0.8g、酪蛋白酸水解物0.5g和酵母精提物O.lg溶于IOOOmL蒸馏水中，调节pH 值至7.2 7.6。本发明相对于现有技术，具有如下的优点及效果(1)本发明的蛭弧菌混合制剂对水产致病或潜在致病菌有强的裂解力，而且蛭弧 菌混合制剂本身能改善养殖生物肠道环境，促进生长，提高鲍苗免疫力。因此，与其他 的微生物制剂相比，本发明中的蛭弧菌混合制剂具有提高鲍苗自身的免疫力，提高其存 活率，加快鲍苗的生长速度等特点。(2)蛭弧菌混合制剂包括蛭弧菌蛭质体，而蛭弧菌蛭质体还具有潜在的灭活疫苗 功能。在蛭质体发育期间，蛭弧菌并不改变宿主细胞的表面结构，使原宿主仍具有免疫 原性，可刺激生物体，产生免疫应答反应。因此，可有效预防九孔鲍鲍苗的细菌性疾病 的发生，提高育苗成活率。(3)现有的九孔鲍育苗技术采用的是流水的方式，不仅耗费了大量的人力、物 力、财力，还会对环境造成一定的污染。而利用该蛭弧菌混合制剂的九孔鲍育苗方法可 以减少了供水量的需求，很大程度上节约了生产成本，而且不会对环境造成不良影响， 对鲍业及其他水产品养殖的可持续发展有着重要的意义。
图1为各组的细菌感染实验的检测结果图。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于 此。对于未特别注明的工艺参数，可参照常规技术进行。本发明实施地为福建某鲍鱼养殖场。养殖池建在养殖大棚内，每个水池规格为 2X2X0.75m,水深为0.40m。各池均用高锰酸钾溶液消毒，反复冲洗干净。水池上方 盖上遮光度为80%的遮光布，避免光照过强。光照强度一般控制在(200 5000)lux。实施例1(1)用于九孔鲍(Haliotisdiversicoloraquatilis)育苗的蛭弧菌混合制剂的制备蛭弧菌蛭质体菌液的制备在一个装有IOOmL营养肉汤液体培养基(蛋白胨 IOg,牛肉膏粉3g，氯化钠5g，pH 7.4士0.2)的锥形瓶中接种0.5mL107cfo/mL嗜水气单 胞菌(Aeromonas hydrophila，菌种编号GIM 1.172，来源于广东省微生物菌种保藏中 心)，200rpm、35°C摇床培养12小时，培养液于4°C、5000rpm离心15min，弃上清。 用5mL生理盐水悬浮沉淀菌体，之后加入到一个装有IOOmL DNB液体培养基(营养肉 汤0.8g,酪蛋白酸水解物0.5g，酵母精提物O.lg，溶于IOOOmL蒸馏水中，pH值为7.2 7.6)的锥形瓶中，再接入ImL含103pfu/mL的的蛭弧菌BDFM05 (CCTCC M209172)。恒 温摇床250rpm、28°C培养36h。培养液于4°C 6000rpm离心20min，去除含蛭弧菌游泳体 的上清，保留沉淀(即蛭弧菌蛭质体)，加入IOmL DNB液体培养基重新悬浮蛭弧菌蛭质 体，即得到浓度为109pfu/mL的蛭弧菌BDFM05蛭质体菌液；蛭弧菌游泳体菌液的制备将上述蛭弧菌蛭质体菌液制备方法中的含蛭弧菌游 泳体的上清经16000rpm离心20min后，得到的沉淀即是蛭弧菌游泳体，加入IOmL DNB 液体培养基悬浮蛭弧菌游泳体即，得到浓度为109pfU/mL的蛭弧菌BDFM05游泳体菌液。蛭弧菌混合制剂由蛭弧菌BDFM05游泳体菌液和蛭弧菌BDFM05蛭质体菌液按 细菌数11混合组成；(2)蛭弧菌混合制剂在九孔鲍育苗中的应用本发明一共可以分为两个阶段。第一阶段是培藻，培藻时间为35天，该阶段不 添加蛭弧菌混合制剂；第二阶段是育苗阶段，本发明的内容主要在此阶段展开。育苗时 间为40天，这一阶段实验组在每次换掉全池的水后立即添加蛭弧菌混合制剂。以不同的 换水周期，分别向养殖水体投不同浓度的蛭弧菌混合制剂。换水周期分别为5、10、 15、20、25、30天，每次换水量为一个量程。所有实验池所处环境条件，包括温度、光 照、pH值、盐度等相同。所有试验池共分25组，为A、B-U B-2、B_3、B_4，C_l、 C-2、C-3、C-4, D-I、D-2、D_3、D_4，E_l、E_2、E_3、E_4，F_l、F_2、F_3、 F-4，G-U G-2、G-3、G_4，每组2个平行。各组的换水周期及加菌浓度如下下面具体对本实施步骤进行描述A组正常流水，日换水量为池水量的3倍，每天早上7:00用高压水冲洗池 子，期间不加蛭弧菌混合制剂，为工厂生产方式；Bii (B-UB-2、B-3、B-4)5天换(全池)水一.次；
Cii (C-UC-2、C-3、C-4)10天换(全池)水--次
Dla (D-uD-2、D-3、D-4)15天换(全池)水一次
Eg1 (E-UE-2、E-3、E-4)20天换(全池)水--次;
Fi1 (F-UF-2、F-3、F-4)25天换(全池)水一次；
G 组(G-1、G-2、G-3、G-4)30天换(全池)水一次B-U C-U D-U E-U F-U G_1组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌混 合制剂，使水体中蛭弧菌混合制剂菌体浓度达到lOpfo/mL。B-2、C-2、D-2、E_2、F_2、G_2组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌混 合制剂，使水体中蛭弧菌混合制剂菌体浓度达到103pfU/mL。B-3、C-3、D-3、E_3、F_3、G_3组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌混 合制剂，使水体中蛭弧菌混合制剂菌体浓度达到105pfU/mL。B-4、C-4、D-4，E_4、F_4、G_4组为每次换水后立即往水池中泼洒蛭弧菌混 合制剂，使水体中蛭弧菌混合制剂菌体浓度达到107pfU/mL。在第一阶段培藻过程中，每池布附着基膜20张，接藻种(当地海水中自然 生的)，控制光照强度在2000 50001ux，水温在15 25°C;根据藻生长状况，按 照5g/m3水体，4天添加一次的方式添加营养盐，施加比例为N P Si Fe =5:1:1: l(ppm)，10天后，可以观察到整张薄膜上呈淡绿和金黄半透明色，其为附 着一薄层藻，取少量在显微镜下镜检，所见藻类主要有大型舟形藻、小型舟形藻、菱形 藻和卵形藻等，比例不一。在第二阶段育苗过程中，也需要合理调节光照，光照一般控制在200-20001UX之 间，为藻提供比较适度的条件，以防止藻生长过快加速老化或生长速度过慢而被鲍苗消耗。在藻培起来后，把九孔鲍的受精卵泼洒到水池里。每池泼洒(也叫布卵)5万 个。布卵水温控制在17-22°C左右，布卵3天内，可以观察到水体中浮游很多担轮幼虫， 这一时期换水需要用200目滤网过滤，以防止幼虫流失。七天后，幼虫开始变态，在附 着基上可以看到附着有微小的匍匐幼体，小心刮取显微镜下镜检，观察其活力。从培藻到收苗，时间为75天，稚鲍体长至3.0 7.0mm，附着基上的单细胞藻 类部分老化，少数附着基上的藻已被吃光，所有水池没有发现白板或脱板现象，每张膜 上的附苗量为300 700粒不等，最多的一张板上可以到达1100粒左右，具体育苗指标 与测量方法如下1)九孔鲍鲍苗生长及存活情况a鲍苗初始量，每池5万苗。b收苗平均壳长，随机抽取100粒鲍苗，测量壳长，取平均值。c壳长平均日增长量，收苗平均壳长，取40天的平均值。d鲍苗平均个体重量，随机取100粒鲍苗，称其总重后取平均值。e收苗量，称取IOg鲍苗，计算其粒数，将收集的鲍苗称其总重后估算鲍苗的粒 数。f成活率，某阶段结束时鲍苗量占该阶段投苗量的百分率。2)鲍苗免疫指标测定试验结束每组取样100个，20个/管放于5个分别盛有ImL Hank，s缓冲液(pH =7.8)的Eppendoff管中，贮于_80°C以备抗免疫指标的测定。测定时取出样品，使其在 冰上融化。进行勻浆，然后eOOOr/min，4°C离心5min，取上清用于免疫指标的测定。参 照 Bradford 方 法(文 献 Bradford M.A rapid and sensitive method for thequantification of microgram quantities of protein[J].Analytical Biochemistry, 1976, 72 248-254)测定样品蛋白含量，以小牛血清蛋白为标准蛋白，建立标准曲线，以考马斯亮 蓝为显色剂，于96孔酶标板中反应lOmin，用酶标仪测量各反应体系中的OD595nm值。a、超氧化物歧化酶(SOD)活力的测定连苯三酚自氧化速率的测定，在25°C下，于4.5mL 50mmol/L，Ph = 8.30的 K2HPO4-KH2PO4缓冲液中加入10 μ L 50mmol/L连苯三酚，迅速摇勻，倒入光径Icm的 比色杯内，在325nm波长下每隔30s测A值一次，要求自氧化速率在0.0700D/min左右。 酶活性测定，在加入连苯三酚前，加入待测SOD样，测得数据，按下式计算酶活性酶活性=(0.070-A325nm) /minX 100 % X反应液总体积X样液稀释倍数/ (0.070X50% X样液体积)酶活单位定义每毫升反应液中，每分钟抑制连苯三酚自氧化速率达50%的酶 量定义为一个酶活单位(U/mL)。
b、溶菌酶活力测定以溶壁微球菌冻干粉为底物。用O.lmol/L，pH = 6.4的磷酸盐缓冲液配成底物 悬液(OD57tlnnMU)，取3.0mL该悬液于试管内置冰浴中，再加入50 μ L待测样，混合， 测Atl值。然后将试液移入37°C温浴中置30min，取出后再置于冰浴中lOmin，以终止反 应，测其A值。溶菌活力队按(AcrA) /A式计算。3)细菌感染实验感染试验于预先消毒的盛有5L砂滤海水的水池中进行。从对照组(A组)和各 个实验组(B-G组)分别随机抽取100只鲍苗，壳长4.5 6.0mm。向各组水体中添加嗜 水气单胞菌菌液，使水体中嗜水气单胞菌菌体浓度达到108Cfu/mL。实验期间不流水养 殖，正常投饵，以5L/h/m3连续曝气，水温为20°C，pH控制在7.2。人工感染后，连续 观察5天，最终计算成活率，采用相对存活率(Relative Percent Survival，RPS)计算式RPS(% ) = (1-免疫组死亡率/对照组死亡率)X 100%实验结果由表1和表2所示。表1指不同的育苗方法对九孔鲍苗生长情况的影 响。可见，比起对照组(A组)，所有实验组更显著地提高鲍苗的存活率，并促进鲍苗的 生长。在相同的换水周期下，随着添加的蛭弧菌混合制剂浓度的升高，鲍苗的成活率和 壳长也逐渐呈上升趋势。表2指不同育苗方式对九孔鲍苗免疫力的影响。数据表明，比起对照组(A 组)，所有实验组的SOD活力和溶菌酶活力都有明显的提高；在相同的换水周期下，随 着添加的蛭弧菌混合制剂浓度的升高，鲍苗免疫力也有一定的增强。细菌感染实验结果由图1所示。结果表明，采用工厂流水式养殖的对照组(A 组)，其鲍苗的相对存活率为O ；其他实验组中，无论采用何种换水周期，随着蛭弧菌混 合制剂在水体中浓度的升高，鲍苗的相对存活率也会逐渐上升。另外，采用添加蛭弧菌 混合制剂的实验组，每组鲍苗的相对存活率都达到90%以上。这说明蛭弧菌混合制剂中 的蛭弧菌蛭质体能够发挥一个潜在疫苗的作用，增强九孔鲍苗的免疫力。水质方面，氨态氮用次溴酸纳氧化法测定(GB12763.4-91)；亚硝酸盐氮用重 氮-偶氮光度法测定(GB12763.4-91)。经过测定，A组水池中的各项水质测定值均 高于试验组(B-G组)。其中，A组氨态氮和亚硝酸盐氮的检测结果分别为0.084mg/ L和O.Ollmg/L，而试验组(B-G组)中，氨态氮和亚硝酸盐氮的检测结果分别为 0.075-0.081mg/L和0.006-0.009mg/L。另外，细菌总数和弧菌总数检测方面，分别采用 涂布营养肉汤平板法和TCBS平板法检测。结果显示，A组水体中的细菌总数和弧菌总 数分别达到IO5和IO3的数量级(cfu/mL)，添加蛭弧菌混合制剂的实验组的细菌总数和弧 菌总数分别为IO2 IO3和IO1 IO2的数量级(cfu/mL)，比对照组低。说明蛭弧菌混合 制剂能有效控制水体的细菌数量，改善水质。综合各方面结果，添加蛭弧菌混合制剂，能明显的提高鲍苗的生长速度，提高 成活率，增强免疫力，而且能够改善水质，达到节水节能的良好效果。表1不同的育苗方法对九孔鲍苗生长情况的影响
权利要求
1.一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于包括以下操作步骤(1)培藻采苗前30 45天开始在培藻池中进行培藻；培藻过程中控制光照强度在 2000 50001ux，控制水温在15 ；(2)加营养盐培藻期间，按照3 相/m3养殖水体，2 4天添加一次的方式添加营养盐；(3)采苗布卵将培藻池换掉池水，加入蛭弧菌混合制剂，使池水中的蛭弧菌混合 制剂的起始浓度达10 l(fpfu/mL下苗时每池布九孔鲍受精卵4 5万粒，并按照曝气 量10 60L/h/m3进行曝气，光照控制在200 30001ux，水温控制在15 ；(4)换水每隔5 30天换水一次，每次换水后加入蛭弧菌混合制剂，使池水中的 蛭弧菌混合制剂浓度达到10 107pfu/mL ；(5)剥离采收下苗30 50天，稚鲍壳长达到3.0 7.0mm后进行剥离采收。
2.根据权利要求1所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于步骤(1) 所述培藻池洗刷干净后采用高锰酸钾溶液进行消毒，然后注入经过砂滤和沉淀处理的海 水；培藻池在注入海水之前，在池进水管口包扎一过滤袋，防止细沙入池。
3.根据权利要求1所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于步骤(1)所 述藻为底栖硅藻。
4.根据权利要求3所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于所述底栖 硅藻为月形藻、菱形藻、舟形藻和卵形藻。
5.根据权利要求1所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于步骤(1)所 述培藻以无色透明聚乙烯薄膜为附着基。
6.根据权利要求1所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于步骤(2)所 述营养盐含有质量比为5 :1:1: 1的N元素、P元素、Si元素和Fe元素。
7.根据权利要求1所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于步骤⑶和 (4)所述蛭弧菌为蛭弧菌(Bdellovibrio sp.)BDFM05，所述蛭弧菌于2009年8月7日保藏 于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO M 209172。
8.根据权利要求1所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于步骤⑶和 (4)所述蛭弧菌混合制剂为蛭弧菌游泳体菌液和蛭弧菌蛭质体菌液按细菌个数1 1混合 而成。
9.根据权利要求8所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于所述蛭弧 菌蛭质体菌液按照以下方法制备得到接种宿主于营养肉汤液体培养基中，在35°C和 200rpm摇床培养12h，培养液经4°C，5000 8000rpm离心10 20min后，沉淀加入至 DNB液体培养基中，接入蛭弧菌BDFM05，在温度25 下，以150 300rpm摇床 培养36 48h，得到含蛭弧菌蛭质体和蛭弧菌游泳体的培养液，培养液在4°C温度下以 6000 8000rpm离心15 20η ι后，去除含蛭弧菌游泳体的上清，得到的沉淀即为蛭弧 菌蛭质体；将蛭弧菌蛭质体用DNB液体培养基、水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2 7.6的磷酸盐缓冲液悬浮，得到浓度为IO6 109pfo/mL的蛭弧菌蛭质体菌液；所述蛭弧菌游泳体菌液按照以下方法制备得到将蛭弧菌蛭质体制备方法中的含蛭 弧菌游泳体的上清经16000 18000rpm离心15 20η ι后，沉淀用DNB液体培养基、 水、生理盐水或0.2mol/L pH值为7.2 7.6的磷酸盐缓冲液悬浮，得到浓度为IO6 109pfu/mL的蛭弧菌游泳体菌液。
10.根据权利要求9所述的一种节能减排的九孔鲍育苗方法，其特征在于所述宿主 为嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)；所述DNB液体培养基是将营养肉汤0.8g、酪蛋 白酸水解物0.5g和酵母精提物O.lg溶于IOOOmL蒸馏水中，调节pH值至7.2 7.6。
全文摘要
本发明公开了一种节能减排的九孔鲍育苗方法。该方法包括步骤(1)培藻；(2)加营养盐；(3)采苗布卵将培藻池换掉水后，加入蛭弧菌混合制剂，使池水中的蛭弧菌混合制剂起始浓度达10～107pfu/mL；下苗时每池布九孔鲍受精卵4～5万粒；(4)换水每隔5～30天换掉池水一次，每次换水后加入蛭弧菌混合制剂，使池水中的蛭弧菌菌液浓度达到10～107pfu/mL；(5)剥离采收。本发明育苗方法对九孔鲍鲍苗的生长有了明显的促进作用，并且极大地提高了九孔鲍鲍苗的存活率，同时改善了养殖环境的水质。由于蛭弧菌对鲍鱼无毒副作用，因此适合于鲍鱼大规模工厂化养殖，为促进九孔鲍育苗及生长提供了一种新的养殖技术。
文档编号A01K61/00GK102017906SQ20101027100
公开日2011年4月20日 申请日期2010年8月31日 优先权日2010年8月31日
发明者蔡俊鹏, 陈小红 申请人:华南理工大学